rhM-CSF对化疗小鼠抗白念珠菌感染的实验研究

人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)是一种能刺激巨噬细胞系细胞生长、增殖、分化的生长因子,其抗真菌活性越来越受到重视.利用小鼠化疗损伤模型研究家蚕表达的重组人巨噬细胞集落刺激因子(rhM-CSF)单独或与氟康唑联合应用时对白念珠菌感染的防治作用.一次性腹腔注射环磷酰胺200mg/kg,导致小鼠免疫功能下降.当小鼠外周血白细胞数降至最低时尾静脉注射白念珠菌.rhM-CSF治疗组分别采用每天10、50、250、500μg/kg4种剂量连续6d氟康唑每天300μg/kg,连续5d.记录各组小鼠的死亡天数和只数,计算平均存活天数和存活率.结果:rhM-CSF及rhM-CSF和氟康唑联合治疗组的小鼠存活率较空白组显著提高.250μg/kgrhM-CSF和氟康唑联合治疗组效果最好,小鼠存活率由空白组的14.3％提高至50.0％,存活小鼠肾脏白念珠菌菌落数也明显降低.表明家蚕表达的rhM-CSF对化疗损伤小鼠白念菌感染有明显的防治作用.为临床免疫功能低下病人感染白念珠菌的治疗提供了一种有效的新药.

MTT比色法和ELISA方法检测重组人rhM-CSF的活性

应用家蚕幼虫表达的重组人巨噬细胞集落刺激因子 (rhM CSF)为材料 ,探索了MTT比色法和ELISA方法测定rhM CSF活性的最佳实验条件 ,并将这两种方法测定rhM CSF精品、粗品和原料的结果与软琼脂集落刺激法所得结果进行了比较 .结果表明 :MTT比色法灵敏度较高 ,结果稳定可靠 ,周期较短 ,可用于批量检测和精确定量 .ELISA方法简便快捷 ,特异性高 ,适用于大批量检测 .可根据不同检测要求选择不同的检测方法 ,为rhM CSF的质量检控和临床分析研究提供了较为切实可行的检测手段 .

细胞因子对K562/ADM耐药细胞株耐药性的逆转作用

目的探讨细胞因子和抗Pgp单抗mAb对K562/ADM耐药细胞株耐药性的逆转作用。方法利用K562细胞的耐阿霉素细胞株K562/ADM采用免疫细胞化学染色法和流式细胞术分别检测mAbMRK-16及rhGM-CSF、rhM-CSF或TNF-α对其Pgp表达的影响。结果将TNF-α100kU/L、rhGM-CSF10μg/L或rhM-CSF10μg/L分别单独与K562/ADM细胞孵育48hPgp表达细胞的阳性率分别为72.19%、80.04%和70.30%与未经任何作用的K562/ADM细胞Pgp表达的阳性率77.02%相比较无明显差异P>0.05。mAbMRK-1610mg/L以及mAbMRK-16分别与TNF-α或rhGM-CSF共同作用于K562/ADM细胞后Pgp表达的阳性率分别为67.49%、67.14%和70.56%与K562/ADM细胞的表达率77.02%相比较Pgp的表达率虽有降低但差别不明显P>0.05只有rhM-CSF与mAbMRK-16共同作用Pgp表达的阳性率为64.29%,可明显抑制K562/ADM细胞上Pgp的表达P<0.05。结论rhM-CSF加mAbMRK-16联合应用,具有逆转K562/ADM细胞MDR的作用。