清远市售虎杖饮片质量评价

目的:评价清远地区市售虎杖饮片质量,为合理用药提供依据。方法:收集10批次不同连锁药店或医疗机构售卖的虎杖饮片,分别采用烘干法测定水分含量,冷浸法测定醇溶性浸出物,高效液相色谱法测定虎杖苷和大黄素含量。结果:10批次虎杖饮片水分为9.15%~10.61%,醇溶性浸出物为9.61%~20.54%,虎杖苷含量为1.24%~2.17%,大黄素含量为0.30%~0.90%。结论:清远地区市售虎杖饮片质量符合药典要求,但指标成分含量差异比较大。

大黄素逆转非小细胞肺癌EGFR-TKI耐药的机制研究

目的探讨大黄素逆转非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)耐药的作用机制。方法应用持续诱导的方法构建NSCLC EGFR-TKI耐药细胞株HCC827/GR;应用MTS法检测大黄素(30μmol/L)、吉非替尼(1μmol/L)及两药联合处理HCC827和HCC827/GR细胞48h后细胞增殖能力的变化;应用Western blotting法检测HCC827和HCC827/GR细胞中p-EGFR、p-AKT、p-ERK1/2及p-MET蛋白表达水平的变化。结果 MTS法检测结果显示,经单药吉非替尼或大黄素处理后,HCC827/GR细胞增殖能力未减弱,而两药联合处理组的细胞增殖能力明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting检测结果显示,HCC827、HCC827/GR细胞中p-EGFR、p-ERK1/2明显表达,而p-AKT表达微弱;HCC827/GR中p-MET表达水平较HCC827明显上调。经单药吉非替尼处理后,HCC827细胞株p-EGFR、p-ERK1/2表达水平下调,HCC827/GR细胞株p-EGFR表达明显下调;大黄素可显著下调HCC827/GR细胞株p-MET表达,但对p-EGFR、pERK1/2的表达无影响;而大黄素与吉非替尼两药联用可明显抑制HCC827/GR细胞株p-EGFR、p-ERK1/2以及p-MET的表达。结论大黄素可以逆转NSCLC EGFR-TKI耐药,可能是通过抑制c-Met的活化来实现。

薄层扫描法测定大黄膏中大黄素含量

目的 :探讨临床用药情况 ,为临床合理用药提供依据。方法 :采用TLC法测定大黄膏中大黄素含量。结果 :大黄膏中大黄素的百分含量为 0 .15 5 %～ 0 .15 8%。结论 :本法结果可靠、简单易行 ,可作为本品质量控制标准。

大黄素对非酒精性脂肪性肝炎模型大鼠作用及对脂联素、脂联素受体的影响

目的探讨大黄素对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)模型大鼠的治疗作用及对脂联素、脂联素受体的影响。方法雄性SD大鼠40只,随机分为空白组,模型组,大黄素高(40 mg·kg^-1)、低剂量(20 mg·kg^-1)组。空白组予普通饲料,其余各组予高脂饲料建模,时间共10周。造模后,处死动物,取材。观察各组大鼠体质量、肝湿重、肝指数,化学发光法检测大黄素对NASH模型大鼠谷丙转氨酶(glutamic pyruvic transaminase,ALT)、谷草转氨酶(millet straw transaminase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、谷氨酰转肽酶(glutamyl transpeptidase,GGT)、甘油三酯(triglycerides,TG)、胆固醇(cholesterol,TC)的影响,制作石蜡切片行苏木素-伊红染色(HE),油红O染色检测大黄素对NASH大鼠肝组织炎症损伤、脂肪变的影响,Western-blot检测各组大鼠肝脏内脂联素(adiponectin,ADPN)、脂联素受体2(adiponectin receptor-2,AdipoR2)蛋白表达,荧光定量PCR检测各组大鼠肝脏内ADPN,AdipoR2 mRNA表达。结果与模型组相比,大黄素能有效改善NASH模型大鼠肝脏脂质沉积,减轻炎症细胞浸润,减轻大鼠体质量,肝指数;大黄素高剂量组ALT、AST、ALP、GGT、TG、TC均有不同程度下降(P<0.05);相对模型组,大黄素高剂量组大鼠肝组织ADPN,AdipoR2蛋白,mRNA水平升高(P<0.05)。结论大黄素能通过上调NASH模型大鼠ADPN,AdipoR2表达,有效改善肝功能、血脂,改善NASH大鼠肝组织脂肪变程度,减轻肝脏炎症。

复方夜灵胶囊中大黄素的含量测定

目的:建立复方夜灵胶囊中大黄素的含量测定方法。方法:采用酸水解和氯仿回流提取的方法制备供试液,HPLC法测定复方夜灵胶囊中大黄素的含量,色谱条件为流动相:甲醇-0.2 mol·L^(-1)磷酸二氢钠溶液(80:20,磷酸调节至 pH=3.0),检测波长444nm,流速为1.0 ml·min^(-1)。结果:大黄素的回归方程为 A=-5181.36+55503.53 C,(r=0.999 6),线性范围为0.046～0.152μg,本法的平均回收率为98.25%,RSD 为2.66%。结论:采用本法测定复方夜灵胶囊中大黄素含量操作简便,结果准确、可靠,可作为本品的质量控制标准之一。

不同产地首乌藤的大黄素含量比较

目的建立首乌藤中大黄素含量测定方法,并比较不同产地首乌藤的大黄素含量。方法采用酸水解和氯仿回流提取方法制备供试品溶液,用高效液相色谱(HPLC)法测定首乌藤药材的大黄素含量。流动相为甲醇-0.2mol/L磷酸二氢钠溶液(80∶20,用磷酸调pH值至3.0),检测波长为444nm,灵敏度为1.0AUFS。结果大黄素进样量在0.046～0.152μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9996),加样回收率为98.94%,RSD=0.93%(n=6)。江苏(两批次)、贵州、河南、湖北产首乌藤药材的大黄素含量分别为0.0756%,0.0504%,0.1721%,0.0184%,0.055%。结论不同产地的首乌藤药材的大黄素含量差异显著。

大黄游离蒽醌的制备与纯化

从中药大黄中提取总蒽醌 (结合和游离 2类 ) ,经水解后用化学试剂或大孔树脂制备总游离蒽醌 (含大黄素、大黄酸、芦荟大黄素、大黄酚和大黄素甲醚 ) ,进一步纯化得大黄酸和大黄素。

星点设计-效应面法优选消疮凝胶剂的提取工艺

目的:采用星点设计-效应面法优选消疮凝胶剂的提取工艺。方法:以乙醇倍量、乙醇浓度和提取时间为主要影响因素,以大黄素、大黄酚的含量和浸膏得率为评价指标,用星点设计-效应面法优选消疮凝胶剂的提取工艺。结果:最佳提取工艺为:加入10倍量60%乙醇溶液,提取2次,每次2h。结论:采用星点设计-效应面法优选消疮凝胶剂的提取工艺方法简便,预测性好。

胶束电动毛细管色谱法分离和测定几种大黄含量

建立了胶束电动毛细管色谱法分离和测定几种大黄中大黄素、芦荟大黄素、大黄酸含量的测定方法。缓冲液为含０．０２５ｍｏｌ·Ｌ－１十二烷基磺酸钠（简称ＳＤＳ）的０．０２５ｍｏｌ，Ｌ－１３－环己氨基－１－丙烷磺酸（简称ＣＡＰＳ）－乙腈（１００：１０），ｐＨ０．９６。线性范围：芦荟大黄素为０．００２５～０．０１７５ｍｇ·ｍｌ－１（ｒ＝０．９９９９），大黄素为０．００５～０．０５ｍｇ·ｍｌ－１（ｒ＝０．９９９９），大黄酸为０．００５～０．０３５ｍｇ·ｍｌ－１（ｒ＝０．９９９６）。回收率：芦荟大黄素为９８．２％～１０１．８％，大黄素９９．９％～１０１．９％，大黄酸９９．２／～１０１．２％。此法简便、快速、重现性好。

HPLC法测定蒙药消肿九味散中大黄酸、大黄素、大黄酚含量

目的：测定蒙药消肿九味散中大黄酸、大黄素、大黄酚3种活性成分的含量。方法：采用高效液相色谱（HPLC）法,Dimaonsil-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱;以甲醇-0.1%磷酸溶液（85∶15）为流动相;流速：1.0 mL·min-1;检测波长：254 nm,柱温为25℃。结果：大黄酸、大黄素、大黄酚3种成分分别在0.101 8~0.508 8μg、0.117 0~0.585 0μg、0.256 0~1.280 0μg范围内与其峰面积呈良好的线性关系,相关系数均大于0.9997;且样品中3种成分的平均加样回收率（n=6）分别为98.98%、99.54%、97.36%,RSD均小于1.32%。结论：建立的含量测定方法简便、快速、灵敏、准确,可以从该制剂中原料药材君药的角度用于该制剂的质量控制。

大黄素及番泻甙和大黄多糖对培养大鼠肝细胞内游离钙浓度的影响

应用钙荧光指示剂乙酰羟甲酯研究大黄素（ＥＭＤ）、番泻甙（ＳＥＮ）和大黄多糖（ＲＰＰ）对大鼠肝细胞内游离钙（［Ｃａ２＋］ｉ）浓度的影响。结果表明，在静息状态下肝细胞内［Ｃａ２＋］ｉ为１３１．６０±３７．７９ｎｍｏｌ／Ｌ。依次加入ＣａＣｌ２（２ｍｍｏｌ／Ｌ）和ＫＣｌ（１２０ｍｍｏｌ／Ｌ）后，肝细胞内［Ｃａ２＋］ｉ较静息时显著增加（Ｐ＜０．０１）。预先经ＥＭＤ（０．０３７ｍｍｏｌ／Ｌ）作用的肝细胞，在静息状态或加入同上剂量的ＣａＣｌ２和ＫＣｌ后，细胞内［Ｃａ２＋］ｉ均较去离子水对照组明显增加（Ｐ＜０．０１）；相反，ＳＥＮ和ＲＰＰ使肝细胞内［Ｃａ２＋］ｉ明显降低（Ｐ＜０．０１），且抑制效应与剂量呈负相关。从大黄不同有效成分ＥＭＤ、ＳＥＮ和ＲＰＰ对细胞内游离钙水平的不同影响提示，大黄对肝细胞功能具有多种调节作用。

青海栽培和野生唐古特大黄蒽醌类成分的HPLC对比分析

采用HPLC法测定青海栽培唐古特大黄中的5种蒽醌含量,并和野生唐古特大黄药材进行了比较。结果表明,二、三、四年龄栽培唐古特大黄中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚5种蒽醌总量分别为1.21%,2.01%,1.62%,其中三、四年龄栽培唐古特大黄已达到《药典》规定的药用标准;野生大黄的总蒽醌含量远高于栽培大黄为3.64%。

环糊精修饰混合胶束电动色谱法测定大黄中6种有效成分

目的 分离、测定大黄样品中 6种有效成分。方法 用 2 0mmol·L- 1 硼砂缓冲溶液 (含 2 0mmol·L- 1 脱氧胆酸钠、2 0mmol·L- 1 牛磺胆酸钠和 15mmol·L- 1 β 环糊精 ) ,通过环糊精修饰的混合胶束电动色谱内标定量法测定。 结果 在 2 5min内分离出芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、土大黄苷、大黄素甲醚和大黄酚 ,对缓冲溶液pH、脱氧胆酸钠、牛磺胆酸钠和 β 环糊精浓度等分离条件进行了优化。考察了方法的线性行为、精密度和回收率 ,并对生大黄和蒙古大黄样品进行了测定。结论 本法可作为鉴别大黄优劣的有效方法之一。

HPLC测定枝穗大黄中大黄素和大黄酚的含量

目的 测定枝穗大黄中大黄素和大黄酚的含量。方法 采用HPLC测定。结果 枝穗大黄中大黄素和大黄酚的平均含量分别为 0 0 4 %和 0 2 3% ;加样回收率大黄素为 99 2 % ,大黄酚为 10 0 7%。结论 所用方法快速、灵敏、准确 。

不同生长期限和栽培方法对掌叶大黄中大黄素和大黄酚含量的影响

目的测定不同生长期限和不同栽培方法的掌叶大黄中大黄素和大黄酚的含量,为大黄的GAP规范化种植提供参考依据。方法以采用《中国药典》的RP-HPLC法,ODS柱,流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液(85∶15),流速1.0ml·min-1,检测波长254nm,柱温30℃。结果生长时间越久,其成分含量越高。3年生大黄质量可以达到药典要求;播种时间不同和移栽会对成分含量产生影响;在生长期限相同时,经过特殊管理的大黄有效成分含量最高,普通栽培方法的其次,自然条件生长的最低。结论通过选择适宜的栽培方法和地点可以有效提高大黄的质量。

大黄、何首乌中大黄素和大黄酚的提取与含量测定

目的确定大黄、何首乌中大黄素与大黄酚的含量。方法甲醇回流方法提取大黄素与大黄酚,高效液相色谱方法测定大黄素与大黄酚含量。结果大黄中大黄酚的含量是何首乌的83倍,何首乌中大黄素的含量是大黄的3倍。结论这为大黄与何首乌药材的质量控制,制药企业的合理选料及研究大黄素、大黄酚在不同植物中的分布提供技术参数和理论指导。

大黄素的分光光度测定及其应用

报道了用分光光度法测定大黄中大黄素含量的方法 .实验发现 ,微量的大黄素与 Na OH呈显色反应 ,当 p H大于 12 .0 0时 ,在 5 30 nm处有最大吸收峰 ,且大黄素在 1～ 2 0 0 μg范围内与吸光度呈良好的线性关系 ,回归方程为 :Y=0 .0 2 9X+ 0 .0 0 2 ,r=0 .9994 ,检出限为 0 .5 μg.测定了在Tween80 - (NH4) 2 SO4液固萃取体系萃取大黄中大黄素的含量 。

高速逆流色谱分离制备大黄化学成分

采用pH-区带精制逆流色谱(pH-ZRCCC)与常规高速逆流色谱(HSCCC)结合技术分离制备大黄粗提物中的化学成分。首先采用pH-ZRCCC分离大黄粗提物,溶剂体系为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(3:7:4:6,V/V),上相加TFA(10 mmol/L)作为固定相,下相加Na OH(15 mmol/L)作为流动相。从1.3 g粗提物中得到140 mg桂皮酸(纯度为96.1%)、130 mg大黄酸(纯度为92.5%)和560 mg尾吹物。称取260 mg该尾吹物采用常规HSCCC的方法进一步分离,溶剂体系为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(7:3:7:4,V/V),得到约98 mg大黄素(纯度为96.5%)和60 mg芦荟大黄素(纯度为94.6%)。用HPLC检测纯度,用ESI-MS和1HNMR鉴定结构。研究结果表明pH-ZRCCC与HSCCC结合是分离大黄中化合物的一种有效方法。

HPLC法同时测定荜茇-大黄中6种成分的含量

目的建立HPLC法同时测定荜茇-大黄药对中胡椒碱、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量。方法采用Thermo Hypersil BDS C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇(A)-0.1%磷酸(B)为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 ml/min;检测波长254 nm;柱温30℃。结果各成分色谱峰分离度良好,胡椒碱、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的质量浓度分别在6.02~240.72μg/ml(r=0.9996)、1.85~74.18μg/ml(r=0.9993)、1.79~71.78μg/ml(r=0.9996)、1.59~63.55μg/ml(r=0.9995)、5.42~216.72μg/ml(r=0.9992)、1.62~64.64μg/ml(r=0.9997)内呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.61%(RSD=1.50%)、99.48%(RSD=1.11%)、99.10%(RSD=1.31%)、99.72%(RSD=1.29%)、99.88%(RSD=1.25%)、99.06%(RSD=0.97%)。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于荜茇-大黄药对的质量控制。

HPLC同时测定唐古特大黄地上部分6种化学成分含量

目的建立HPLC同时测定唐古特大黄地上部分中大黄酚、大黄素、大黄素甲醚、芦荟大黄素、番泻苷A和番泻苷B共6种成分含量的方法。方法采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇(A)-0.1%磷酸水溶液(B),梯度洗脱(0 min,70%B;5 min,65%B;8~16 min,60%B;18~23 min,55%B;25~30 min,45%B;32~39 min,35%B;49~57 min,24%B;65~72 min,20%B);流速1.0 m L/min,检测波长254 nm,柱温为室温,按外标法定量分析。结果大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、芦荟大黄素、番泻苷A、番泻苷B在一定范围内与峰面积积分值线性关系良好(r≥0.999 5),方法的精密度RSD为0.75%~1.17%,重复性RSD为0.99%~2.06%,稳定性RSD为0.97~1.76%,平均加样回收率为99.7%~100.4%。唐古特大黄根和地上部分6种化学成分含量存在差异。结论所建立的方法能同时测定唐古特大黄地上部分6种成分的含量,可作为大黄地上部分化学成分含量测定的参考方法。