Isolation and Identification of Root Rot Fungus of Astragalus membranaceus

The perennial root of Astragalus membranaceus is used as a medicine, while root rot is a main factor causing reduction of quality and commodity value of A. membranaceus . The screening and research of the pathogenic species and their characteristics could provide theoretical and practical basis for the control of this disease. A pathogenic strain was isolated and purified from the root part of four-year-old A. membranaceus , and identified by morphological and molecular biological methods as Fusarium oxysporum . This study will provide a theoretical basis for the research of the biological characteristics and control of F. oxysporum .

Research Advances of Root Rot in Medicago sativa L.

As the most famous perennial leguminous forage in the world, Medicago sativa L. ranks the first in both yield and nutritional value, and can be used for many years once planted in field production. However, root rot has become a very important reason for yield decrease and plant de-cline of alfalfa due to long service life. According to the research progress at home and abroad, the main pathogen distribution, harms and control methods of root rot in M. sativa at home and abroad were systematically expounded, in order to provide a theoretical basis for further research of the disease.

湖南烟草镰刀菌根腐病病原鉴定及防治药剂筛选

为明确湖南郴州和永州地区烟草根腐病的病原种类,针对主要病原菌筛选有效的防治药剂,分别利用组织分离法和平板稀释法对两地主要烟区采集的烟草根腐病病样和根际土壤进行病原分离,通过形态学观察、翻译延伸因子1A(EF-1α)序列进化分析以及致病性测定确定病原种类,采用生长速率法测定供试杀菌剂对主要病原菌菌丝生长的抑制效果,并通过活体盆栽防效试验验证候选杀菌剂对主要病原菌的防治效果。共分离到真菌128株,其中镰刀菌87株,包括共享镰刀菌Fusarium commune、甜瓜镰刀菌Fusarium incarnatum、藤仓镰刀菌Fusarium fujikuroi、茄镰刀菌Fusarium solani、层出镰刀菌Fusarium proliferatum、Fusarium falciforme、Fusarium humuli共7个种。其中,F.commune占比最高,为39.08%,其次为F.solani和F.incarnatum,占比均为14.94%。致病力测定结果表明,这些菌株都能引起烟草发病,明确其为烟草根腐病的病原物。F.commune对40%咪鲜胺EW、43 g/L戊唑醇SC和15%氰烯菌酯SC高度敏感,EC50分别为0.026、0.079和0.169μg/mL。盆栽试验结果表明,40%咪鲜胺EW的防治效果最为显著,相对防效达到94.43%±2.79%,其次为43 g/L戊唑醇SC和15%氰烯菌酯SC,相对防效为88.63%±1.68%和83.07%±2.55%。本研究表明,湖南郴州和永州地区烟草镰刀菌根腐病病原真菌以共享镰刀为主,供试药剂中,40%咪鲜胺EW对该病原菌的抑菌效果最好。

镰孢菌引发的大豆根腐病及其生物防治研究进展

大豆是我国主要粮食和经济作物之一,但其产量和品质极易受病害影响。大豆根腐病是世界范围内较为常见的大豆病害类型。镰孢菌(Fusarium)是大豆根腐病的主要致病菌之一。本文综述了由镰孢菌引发的大豆根腐病的发生条件、发病症状及病害影响,并分析了镰孢菌引发大豆根腐病的致病性与发病机理。通过尖孢镰孢菌(F.oxysporum)和禾谷镰孢菌(F.graminearum)的致病性研究发现,镰孢菌属菌株可以通过破坏宿主植物免疫应答系统或分泌真菌毒素破坏植物细胞等方式引发大豆根腐病。同时不同病原菌之间还存在协同互作机制,可通过分泌促侵染关键物质协同逃脱宿主植物防御。本文总结了镰孢菌引发的大豆根腐病的生物防治研究进展。生物防治手段集合多个作用靶点于一体,通过转录组学技术能够揭示生物防治的作用机理,而生防微生物固有的活体属性所带来的应用局限性则可通过与农业田间管理、化学防治相结合等方式加以攻破。本文还对关于大豆根腐病乃至各类农业生产病害的生物防治未来研究方向进行了展望。

贝莱斯芽孢杆菌BQ对党参根腐病病原菌抑制效应初探

将贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)BQ作为最新发现的潜力生防菌。通过平板对峙、孢子萌发、生防机制和离体防治试验检测该菌株对党参根腐病的防治效果。平板对峙试验表明,贝莱斯芽孢杆菌BQ可明显抑制党参根腐病病原菌尖孢镰孢菌DS的生长,菌丝生长抑制率达50.55%,对峙区菌丝发生明显形变;孢子萌发结果表示,贝莱斯芽孢杆菌BQ的代谢产物能有效抑制病原菌DS的孢子萌发;对贝莱斯芽孢杆菌的生防机制进行初探,贝莱斯芽孢杆菌BQ的代谢产物能引起病原菌DS的细胞膜通透性增加,从而导致核酸内容物释放量增加,细胞破裂至死亡。离体防治结果显示,贝莱斯芽孢杆菌BQ对党参根腐病的治疗效果达到46.13%,预防效果达到了63.62%。可见,贝莱斯芽孢杆菌BQ有防治党参根腐病的潜力,可作为生物防治剂进行开发。

浅析黑龙江省大豆根腐病研究现状

大豆根腐病为大豆主要病害之一,具有发病范围广、卵孢子存活时间长、危害重等特点,严重制约黑龙江省大豆产业发展。为提高黑龙江省大豆根腐病防控技术水平,文章综述黑龙江省大豆根腐病致病菌种类及分布、发病症状及特点、抗病品种鉴定及防治措施,以期为黑龙江省大豆根腐病防治及研究提供理论依据,助力黑龙江省大豆产业振兴。

大豆根腐病致病病原菌及其抗性研究进展

文章综述大豆根腐病病原菌鉴定与分布、抗病性鉴定与抗病基因挖掘研究现状,从栽培措施、化学防治、定向育种、生物防治方面总结根腐病防治方法,展望未来研究方向,旨在为提高大豆产量提供科学依据。

新型苜蓿镰刀菌根腐病病原菌FIESC分离及菌株生物学特性测定

为明确北京市顺义区苜蓿(Medicago sativa L.)镰刀菌根腐病的病原菌种类,本研究采用常规组织分离法对发病苜蓿样品进行病原菌分离纯化;利用形态学特征观察结合多基因序列分析(rDNA-ITS,EF-1α和RPB2)的系统发育树对病原菌进行鉴定,并按照柯赫法则测定菌株致病性;采用菌丝生长速率法,测定强致病镰刀菌的生物学特性及杀菌剂的抑制作用。结果表明,本研究共分离获得26株菌株,7株鉴定为镰刀菌,分别属于Fusarium incarnatum-equiseti species complex(FIESC)中的F.ipomoeae,F.compactum和F.flagelliforme以及锐顶镰刀菌F.acuminatum和腐皮镰刀菌F.solani,其中MsF1(F.ipomoeae)的致病力最强,接种苜蓿幼苗发病的病情指数为64.33。生物学特性测定表明,MsF1在温度30℃、pH值为6~10、低氮条件下最适合生长,可耐受150 g·L^(-1)的NaCl胁迫;异菌脲对其抑制效果不明显,供试浓度下抑制率低于10%,而咯菌腈对其半数效应浓度(Median effect concentration,EC 50)为0.142μg·m·L^(-1)。本研究首次报道FIESC可侵染紫花苜蓿引起镰刀菌根腐病,为苜蓿根腐病的多样性研究和田间有效防治提供科学依据和理论支撑。

温郁金根茎腐烂病的病原鉴定

在浙江省瑞安市陶山镇温郁金主产区,部分田块温郁金发生大规模倒伏、地下根茎严重腐烂。为明确引起该病害的病原物,利用LB培养基和TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)培养基从温郁金腐烂根茎中分离获得细菌菌株JF1,采用灌根法、芽侵染法和根茎侵染法确定该菌株对温郁金的致病性。通过形态学特征观察、生理生化测定、多基因序列(16S rDNA、rpoB、gyrB)系统发育分析,明确引起田间温郁金根茎腐烂的病原菌为桑肠杆菌(Enterobacter mori)。

一种新发大豆根腐病的病原鉴定及防治药剂筛选

为明确在广东新发现的一种大豆根腐病的病原菌种类,了解其生物学特性,筛选防治该病的有效杀菌剂,采用组织分离法对罹病大豆植株的根部和茎基部的病原真菌进行分离,并通过形态学和3个基因(rDNA-ITS,TEF-1α,RPB2)的联合系统发育分析对病原真菌进行鉴定,再将该病原真菌接种到原发病大豆品种桂夏2号的根部和茎基部,测定其致病性和不同培养基、温度、碳氮源、pH、光照、杀菌剂对菌丝生长的影响以及病原菌分生孢子的致死温度。结果显示,分离到2株具有不同特征的真菌,分别鉴定为新孢镰刀菌(Fusarium neocos-mosporiellum)和镰状镰刀菌(F.falciforme),后者是在我国广东大豆上的首次报道;接种试验显示,这2株真菌单独或混合接种均可引起与田间自然发生的大豆根腐病相似的症状;新孢镰刀菌(F.neocosmosporiellum)在28℃、pH 7条件下生长最快,可以有效利用多种碳氮源,乳糖和蛋白胨为最佳碳氮源,分生孢子致死温度为51℃(水浴10 min);镰状镰刀菌(F.falciforme)在25℃、pH 7条件下生长最快,碳氮源利用能力强,以乳糖、蔗糖和麦芽糖为最佳碳源,最佳氮源为蛋白胨,孢子致死温度为54℃(水浴10 min);不同光照处理对2个菌株的菌丝生长无影响;杀菌剂咪鲜胺对2个菌株的抑制作用最强。综上,引起广东新发大豆根腐病的病原真菌为新孢镰刀菌(F.neocosmosporiellum)和镰状镰刀菌(F.falciforme),而这2种真菌适应环境的能力强,对咪鲜胺敏感,该药剂可作为防治新发大豆根腐病的首选药剂。

枸杞根腐病病原鉴定及拮抗菌筛选

枸杞根腐病是发生于枸杞栽植区的一种常见土传病害,由多种致病菌复合侵染引起,目前主要用化学手段进行防控。该研究旨在明确宁夏地区枸杞根腐病的主要致病菌,筛选优良拮抗菌株。以宁夏银川植物园枸杞种植园宁杞1号枸杞患病植株根部和患病植株根际土为材料,用组织分离法分离纯化致病菌及拮抗根际微生物;采用离体回接试验与针刺接种试验研究病原菌对枸杞根腐病的致病作用;采用对峙法测定拮抗菌对分离得到的致病菌的抑制作用;根据菌落形态特征及rDNA-ITS序列对致病菌和拮抗真菌进行鉴定。结果表明,枸杞发病根部组织中分离出的菌株主要为尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)、茄腐皮镰孢菌(Fusarium solani)、单隔镰孢菌(Fusarium dimerum)、木贼镰孢菌(Fusarium equiseti)、嗜石油腐皮镰孢(Fusarium petroliphilum)和高山被孢霉(Mortierella alpina),分离频率分别为29.5%、16.8%、13.7%、 8.9%、8.9%和7.4%;尖孢镰孢菌(F.oxysporum)、茄腐皮镰孢菌(F.solani)、单隔镰孢菌(F.dimerum)、木贼镰孢菌(F.equiseti)等具有较强致病性。根际土分离到的根际微生物中土曲霉(Aspergillus terreus)和长枝木霉(T.longibrachiatum)对主要致病菌有明显抑制作用,抑制率均在37%以上。

番茄疫霉根腐病病原菌鉴定及药剂敏感性分析

[目的]番茄是内蒙古自治区重要的优势特色蔬菜,近年来因连年重茬、种植品种单一,土传病害发生率增加,制约着番茄产业的健康发展。2021年8月在内蒙古呼和浩特地区番茄苗期出现了一种茎基部变黑、溢缩,纵切维管束褐变的症状,疑似根腐病,为了明确病原菌的种类并为科学防治提供依据,开展了病原菌鉴定及7种药剂的室内敏感性试验。[方法]通过采集20株发病植株,开展了组织分离及病原菌培养、形态学观察、分子生物学鉴定、生理小种鉴定,柯赫氏法则验证以及防治药剂筛选。[结果]从20份发病植株样本中分离得到10个分离株,菌落白色短绒毛状、光照诱导条件下可产生孢子囊,利用ITS测序并构建系统发育树确定其为辣椒疫霉菌;分离株能够侵染苗期番茄植株,产生疫霉根腐病的典型症状,与田间发病症状一致,验证了柯赫氏法则,说明其为番茄疫霉根腐病的病原菌,并且病原菌中2号生理小种占70%,其余为3号生理小种。此外,室内培养条件下7种常用杀菌剂对辣椒疫霉菌的菌丝生长均有抑制作用,其中烯酰吗啉、甲霜灵和嘧菌酯的抑制效果最好。[结论]侵染内蒙古呼和浩特地区番茄植株的辣椒疫霉菌以2号生理小种为主,2号生理小种的化学防治推荐使用烯酰吗啉、甲霜灵和嘧菌酯,使用药剂防治时注意轮换用药以延缓抗药性的产生。

鄂西北烟草根腐病病原菌的分离及鉴定

镰刀菌属引起的根腐病是烟草的重要病害,根腐病危害严重可导致烟草产品质量和产量出现重大损失。为明确鄂西北烟草根腐病病原,从湖北十堰烟区采集典型症状标本分离病原菌,对其进行了形态学和分子生物学鉴定,结合基因系统发育学分析和致病性验证,确定鄂西北烟草根腐病的病原为尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌、木贼镰刀菌和接骨木镰刀菌。

当归根腐病主要病原菌生物学特性及室内毒力测定

为探究当归(Angelica sinensis)根腐病的病原菌种类、生物学特性并筛选其防治药剂。采用常规组织法分离培养病原菌,利用柯赫氏法则验证其致病性,通过形态学和分子生物学相结合的方法进行病原菌的鉴定、生物学特性分析;采用菌丝生长速率法对病原菌进行室内毒力测定。结果表明,当归根腐病菌菌落毛毡状,在三种培养基上大型分生孢子呈镰刀形,大小为(27.5~47.5)μm×(3.8~7.5)μm(n=50),隔膜数1~5;小型分生孢子在PDA和SNA培养基上呈椭圆形、肾型、纺锤形,在CLA培养基上肾型,(3.8~15.0)μm×(2.5~7.5)μm(n=50),隔膜数0~3;厚垣孢子在CLA培养基上呈串生,PDA培养基上呈不规则形,SNA培养基上厚垣孢子着生方式多样,串生、圆形、不规则形,大小为(2.5~3.8)μm×(2.5~5.0)μm(n=50)。EF-1α、RPB1和RPB2联合序列系统发育树表明,该菌为锐顶镰刀菌(Fusarium acuminatum),其最适生长温度为25℃,最适生长初始pH为9,光照对其生长无显著影响。室内毒力测定显示10%苯醚甲环唑(WG)对其抑制效果最好,EC50值为83.71 mg/L。本研究可为当归根腐病病原鉴定及田间药剂防治提供参考。

古樟树根腐病病原分离鉴定及室内防治药剂筛选

【目的】分离并鉴定粤北地区古樟树根腐病的病原菌,筛选出适宜的防治药剂,为樟树根腐病的识别和诊断以及病害防治提供理论依据。【方法】采用组织块分离法对采集自粤北地区的古樟树根部病部组织进行病原菌分离,依据柯赫氏法则确定致病菌,通过形态学和分子生物学相结合的方法鉴定病原菌种类,进一步采用菌丝生长速率法测定不同杀菌剂对病原菌的室内抑制效果。【结果】从古樟树根部病部组织中共分离出3株真菌,分别标记为SG0122-1、SG0122-2和SG0122-3,通过柯赫氏法则验证,确定菌株SG0122-1和SG0122-3是引起古樟树根腐病的病原菌;结合形态学观察和系统发育进化树分析,将菌株SG0122-1和SG0122-3分别鉴定为无量山射脉革菌(Phlebia wuliangshanensis)和少脉灵芝(Ganodermasubamboinense)。药剂筛选结果表明,不同供试杀菌剂对菌株SG0122-1和SG0122-3的菌丝生长抑制效果存在一定差异,其中氯氟醚·吡唑酯BAS 75104F对菌株SG0122-1的抑制效果最强,在最低供试浓度下(3.91μg/mL)能完全抑制其菌丝生长;其次是98%溴菌腈和96.8%苯醚甲环唑,抑制中浓度(EC_(50))分别为7.48和10.63μg/mL;98%嘧菌酯和96.8%苯醚甲环唑对菌株SG0122-3菌丝生长有较好的抑制作用,其EC_(50)分别为2.13和3.11μg/mL,其次是97%吡唑醚菌酯和98%福美双,EC_(50)分别为58.83和59.72μg/mL。【结论】粤北地区古樟树根腐病病原为无量山射脉革菌和少脉灵芝。氯氟醚·吡唑酯BAS 75104F、98%溴菌腈和96.8%苯醚甲环唑为防治无量山射脉革菌的有效药剂,98%嘧菌酯和96.8%苯醚甲环唑为防治少脉灵芝的有效药剂,其中96.8%苯醚甲环唑对2株病原菌均具有较好的抑制效果,以上药剂均可作为生产上防治樟树根腐病的候选药剂。

基于根表真菌群落与病原菌鉴定探究‘宁杞5号’枸杞根腐病的发生机制

【目的】比较两种植区易感病品种‘宁杞5号’枸杞健康株和患病株的根表真菌群落组成和分离到的腐根真菌,明确‘宁杞5号’根腐病的病原菌,探究两种植区‘宁杞5号’根腐病的发生原因。【方法】采用高通量测序技术研究枸杞根表真菌群落的组成特征,采用组织分离法从两种植区枸杞腐根中分离腐根真菌,基于形态学和ITS、EF-1α基因序列对腐根真菌进行分类学鉴定,依据科赫法则进行致病性研究。【结果】两种植区‘宁杞5号’枸杞健康株和患病株之间的根表真菌群落组成均表现出明显差异,主要体现在患病后镰刀菌属(Fusarium)相对丰度升高,被孢霉属(Mortierella)相对丰度降低,伴随着Fusicolla和Pseudogymnoascus等未知类群丰度增加,而两种植区健康株根表真菌群落结构趋于一致。自QXBZ腐根分离到36株真菌,分别鉴定为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、腐皮镰刀菌(F.solani)、红贝俄式孔菌(Earliella scabrosa)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)和Penicillium pimiteouiense,自QTBZ腐根分离29株真菌,分别鉴定为尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌、红贝俄式孔菌、粉红黏帚菌(Clonostachys rosea)、P.pimiteouiense、新知镰刀菌(F.andiyazi)、桃色顶孢霉(Acremonium persicinum),其中腐皮镰刀菌的分离频率在两种植区均为最高,尖孢镰刀菌次之。回接实验确定腐皮镰刀菌、尖孢镰刀菌、新知镰刀菌和立枯丝核菌是‘宁杞5号’枸杞根腐病的病原菌,其中新知镰刀菌为新发现的枸杞根腐病病原菌。【结论】‘宁杞5号’根腐病发生主要与根表真菌群落结构改变以及病原菌种类密切相关,与种植区关系不大,F.solani、F.oxysporum、F.andiyazi和R.solani是‘宁杞5号’根腐病的病原菌。

内蒙古自治区紫花苜蓿根腐病病原菌鉴定

为明确内蒙古自治区紫花苜蓿根腐病的主要病原菌种类,从内蒙古自治区5市12个样点采集紫花苜蓿根腐病病样,采用常规组织分离法对病原菌进行分离与纯化,利用形态学结合ITS和EF-1α基因序列鉴定分离物种类,按照柯赫氏法则测定其致病性。结果显示,5市12个样点共分离出425株真菌,按照菌株的菌落和分生孢子形态,结合基因序列鉴定为5属17种,分别为锐顶镰刀菌(Fusarium acuminatum)、茄病镰刀菌(F. solani)、木贼镰刀菌(F.equiseti)、变红镰刀菌(F. incarnatum)、尖孢镰刀菌(F. oxysporum)、燕麦镰刀菌(F. avenaceum)、轮枝镰刀菌(F.verticillioides)、层出镰刀菌(F. proliferatum)、F. falciforme、F. neocosmosporiellum、三线镰刀菌(F. tricinctum)、F.virguliforme、芬芳镰刀菌(F.redolens)、立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)、织球壳枯萎菌(Plectosphaerella cucumerina)、茎点霉(Phoma medicaginis)和根异茎点霉(Paraphoma radicina),其中轮枝镰刀菌、F. falciforme、F.neocosmosporiellum和F. virguliforme引发苜蓿根腐病在世界范围内首次报道。致病性测定表明,17种真菌均能够引起紫花苜蓿根腐病。紫花苜蓿根腐病可由单一病原菌或2~4种病原菌复合侵染引起,且不同地区的致病种群结构不同,但优势致病种均为锐顶镰刀菌。

药用植物根腐病研究进展

根腐病可导致药用植物出现根部腐烂,叶片变黄脱落等现象,严重影响药用植物质量和产量,是制约中药产业发展的重要因素之一。根据近年来药用植物根腐病的研究成果,从根腐病的发病特征、病原菌种类、形态及生物学特性、发病机制、防治等多方面进行综述,以期为进一步解决药用植物根腐病问题提供参考。

草莓红中柱根腐病病原菌的鉴定和生长特性

随着草莓种植面积逐年扩大,红中柱根腐病的危害程度逐渐加重,该病害病原菌种类多样,是一种难以控制的土传病害,对草莓生产造成严重损失。2023年3月,笔者在天津市西青区辛口镇草莓种植基地发现大面积植株萎蔫枯死,根部横切后,主根截面木质部呈红褐色腐烂状。本研究采用组织分离法,从6株草莓病株的根组织分离出5株形态一致的菌株,菌落圆形、白色,背面呈暗粉红色,边缘为淡粉红色。大型分生孢子呈镰刀形,小型分生孢子呈卵圆形。致病性检测结果表明,菌株TN97接种草莓植株后,茎基部和根部出现相同的发病症状。通过提取致病菌株TN97的基因组DNA,扩增和测序rDNA-ITS和EF-1α基因,经NCBI的BLASTn比对分析表明,2个基因(PP257645和PP297566)与层出镰孢菌(Fusarium.proliferatum)的相似性均为100%,系统发育分析也与F.proliferatum聚于同一分支。致病菌株TN97生长的最佳碳源和氮源分别是蔗糖和硝酸钾,最适生长温度是25℃,最适生长pH值范围为8~10。综上,本研究首次明确了天津地区草莓红中柱根腐病病原菌为层出镰孢菌,为该病害的诊断和防治提供科学依据。

不同生物药剂对辣椒主要病原菌的抑菌效果研究

为筛选可兼防辣椒疫病、根腐病及枯萎病的高效生物杀菌剂,采用室内抑菌试验,测定哈茨木霉、枯草芽孢杆菌、荧光假单胞杆菌及医植酵素等4种生物杀菌剂和化学药剂多菌灵分别在高、中、低3种浓度下对辣椒疫病、根腐病与枯萎病病原菌的抑制效果。结果表明,荧光假单胞杆菌与哈茨木霉可兼防辣椒疫病、根腐病及枯萎病;在药剂推荐浓度下,荧光假单胞杆菌对辣椒疫病、根腐病、枯萎病抑菌率分别为83.11%、89.81%、78.80%,哈茨木霉分别为88.39%、74.63%、89.68%,这两种药剂可作为推荐用药。