基于F3RP61的嵌入式EPIC SIOC应用研究与实现

在加速器控制系统中,PLC大量应用于慢控制和联锁控制。随着工业控制技术的发展,PLC通常采用基于以太网通信方式与上层计算机进行数据交换。采用日本横河公司的FA-M3 PLC和新型CPU模块F3RP61,搭建了一套PLC与EPICS通讯的样机即基于F3RP61的嵌入式IOC。在F3RP61上运行嵌入式EPICS IOC核,使安装了F3RP61模块的FA-M3 PLC成为一种新型的嵌入式IOC,从而将FA-M3 PLC中的I/O数据直接纳入EPICS系统中,简化了系统的结构,降低了开发成本。

长链非编码RNA RP5-919F19对胃癌细胞增殖和侵袭迁移的影响

目的探讨长链非编码RNA RP5-919F19对胃癌细胞增殖和侵袭迁移的影响。方法采用实时定量PCR(qPCR)检测RP5-919F19在胃癌细胞(MGC-803、SGC-7901和BGC-823)以及人正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)中的表达情况;构建干扰RP5-919F19表达的小干扰RNA序列(siRNA-1~3)并采用脂质体法转染胃癌细胞,根据转染情况分为转染干扰效率最高siRNA序列的干扰组、转染阴性对照(si-NC)序列的NC组和不行任何转染的空白对照(Blank)组,采用qPCR、MTT比色法、划痕实验和Transwell小室实验检测RP5-919F19水平、增殖活力、划痕愈合率和穿膜细胞数,qPCR和Western blotting检测基质金属蛋白酶(MMP)-2/9水平。结果胃癌细胞的RP5-919F19水平均高于GES-1细胞,其中SGC-7901细胞的水平最高(P<0.05);与转染si-NC序列的SGC-7901细胞相比,转染siRNA-1~3序列的RP5-919F19水平均降低,其中序列siRNA-2对应的RP5-919F19水平最低(P<0.05);选取SGC-7901细胞和siRNA-2序列进行后续分组实验。与Blank组和NC组相比,干扰组的RP5-919F19水平降低且处理48~72 h后细胞增殖活力减弱(P<0.05)。干扰组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(18.971±3.869)%和(69.573±9.601)个,均低于Blank组的(61.887±4.421)%和(152.707±23.176)个及NC组的(59.216±4.557)%和(161.820±15.442)%(P<0.05)。与Blank组和NC组相比,干扰组MMP-2和MMP-9的mRNA和蛋白水平均降低(P<0.05)。Blank组和NC组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。结论RP5-919F19在胃癌细胞中高表达且发挥促癌作用,通过外源siRNA手段下调其表达可抑制SGC-7901细胞的增殖和迁移侵袭能力,可能与抑制MMP-2和MMP-9表达有关,是胃癌潜在的治疗靶点。

3-O-C12-HSL通过PPARγ拮抗树突状细胞表达RP11-367F23.2

目的 研究N-3-氧代十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(3-O-C 12 -HSL)是否抑制单核细胞来源树突状细胞(Mo-DCs)表达RP11-367F23.2,该抑制作用是否通过过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)介导。方法 采用密度梯度离心法分离单核细胞来源的Mo-DCs;将Mo-DCs细胞分为4组:脂多糖(LPS)组、3-O-C 12 -HSL组、GW9662组和PBS组,18 h后收集细胞;荧光定量PCR检测4组中RP11-367F23.2表达情况。结果 Mo- DCs经3-O-C 12 -HSL刺激后,RP11-367F23.2表达量降低,3-O-C 12 -HSL组和LPS组RP11-367F23.2表达量比较,差异有统计学意义( P <0.05);Mo-DCs经GW9662处理后,细胞中的RP11-367F23.2表达量升高,3-O-C 12 -HSL组和GW9662组RP11-367F23.2表达量比较,差异有统计学意义( P <0.05)。结论 3-O-C 12 -HSL通过PPARγ拮抗Mo-DCs表达RP11-367F23.2。

长链非编码RNA RP11-214F16.8促进乳腺癌细胞增殖

长链非编码RNAs(long non-coding RNAs,lncRNAs)在乳腺癌发生发展中的作用备受瞩目。本研究通过大数据分析发现,lncRNA RP11-214F16.8在乳腺癌组织中的表达量显著高于正常组织,且其表达量与乳腺癌患者预后负相关。因此,本文采用qRT-PCR技术,在收集的临床样本中验证RP11-214F16.8的表达,证实其在乳腺癌组织中相对表达量为5.65±0.72,其在癌旁组织中表达量为2.63±0.35,且RP11-214F16.8的表达量与乳腺癌瘤体大小和临床TNM分期相关。此外发现,RP11-214F16.8在乳腺癌细胞中的表达量高于正常乳腺上皮细胞。在乳腺癌MCF-7细胞中,过表达RP11-214F16.8后,MCF-7细胞的增殖能力显著增强。而在MDA-MB-231细胞中,敲低RP11-214F16.8的表达,获得相反的结果。进一步研究发现,RP11-214F16.8可上调细胞周期蛋白D3、CDK4的表达,而下调p18蛋白表达量,进而加速细胞增殖。总之,RP11-214F16.8在乳腺癌中高表达,且促进乳腺癌细胞增殖,进而推动乳腺癌进程。这一研究发现,将为乳腺癌发生发展的网络机制研究提供新的理论依据。

PTBP1介导长链非编码RNA RP11-879F14.2发挥抑制心肌纤维化的作用

【目的】研究长链非编码RNA(lncRNA)RP11-879F14.2调控心肌成纤维细胞纤维化表型的作用及机制。【方法】对心衰患者及健康对照者心肌组织进行Masson染色检测心肌胶原水平。lncRNA表达谱芯片检测心衰患者及健康对照者心肌中lncRNAs的表达变化,实时定量荧光PCR(RT-qPCR)验证RP11-879F14.2在心衰患者心肌中的表达。利用重组RP11-879F14.2腺病毒(rAd-RP11-879F14.2)感染人心房肌成纤维细胞(HAFs),检测纤维化相关基因Col1a1,Col3a1和Acta2表达。RT-qPCR检测HAFs的核/质组分中RP11-879F14.2的水平。基于生物信息学预测和双荧光素酶报告基因实验鉴定RP11-879F14.2与多聚嘧啶区结合蛋白(PTBP1)的结合作用。检测敲低HAFs中PTBP1表达对RP11-879F14.2调控心肌纤维化相关基因表达的影响。【结果】Masson染色结果显示,心衰病人心肌组织发生明显纤维化。RT-qPCR结果证实RP11-879F14.2在心衰患者心肌组织中表达增加(P<0.01)。过表达RP11-879F14.2可在RNA及蛋白水平显著抑制心肌纤维化相关基因表达。核质分离及RT-qPCR检测结果证实RP11-879F14.2主要分布于细胞核中。RP11-879F14.2可与PTBP1结合,并促进HAFs中PTBP1表达,而敲低PTBP1可逆转RP11-879F14.2抑制HAFs中纤维化相关基因表达的作用。【结论】PTBP1可介导RP11-879F14.2发挥抑制心肌纤维化的作用。

薄钢管-防火涂料-CFRP修复受损钢筋混凝土柱的抗火性能试验研究

为研究完全破坏的钢筋混凝土柱子修复和增强其防火性能,利用高温燃烧炉对四面受火的试件高温下性能探究分析,将所得到的结果与钢筋混凝土柱子的计算承载力进行比较。使用薄钢管-防火涂料-CFRP共同加固完全破坏的钢筋混凝土柱子,得到了钢筋混凝土柱子的力学加固方法和抗火加固方法。得到结论:试件的耐火时间为3 h,证明这种加固方法不仅提高了试件常温的承载能力而且还使得试件具有优越的抗火性能。

RP-HPLC测定藏木香中土木香内酯和异土木香内酯含量

目的建立了反相高效液相色谱法同时测定藏木香中土木香内酯和异土木香内酯的方法。方法采用Phenomenex Kromasil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5.0μm);流动相为乙腈-0.04%磷酸溶液(50∶50);检测波长:194nm;流速:1.0mL.min-1。结果异构体土木香内酯和异土木香内酯达到基线分离,含量测定的线性良好,线性范围和相关系数分别为0.07～4.80μg.L-1(r=0.9998),0.07～4.85μg.L-1(r=0.9998);回收率分别为97.5%和102.1%;方法精密度良好,RSD分别为1.56%和1.87%(n=5);方法重现性良好,RSD分别为1.67%和0.92%(n=5)。结论所建立的方法简便、快捷、准确,重现性好,可用于藏木香药材及其制剂的质量控制。

RP-HPLC法测定白花丹参中丹参酮Ⅱ_A和隐丹参酮的含量

目的:建立测定白花丹参中丹参酮Ⅱ_A 和隐丹参酮含量的方法。方法:高效液相色谱法,采用 Diamonsil C_(18)色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(85:15),流速0.8mL·min^(-1),柱温35℃,检测波长为269nm。结果:丹参酮Ⅱ_A 在0.07～0.75μg范围内线性关系良好(r=0.9998),平均同收率为98.5%,RSD 为2.0%(n=5);隐丹参酮在0.04～0.43μg范围内线性关系良好(r=0.9994),平均回收率为102.1%,RSD 为1.7%(n=5)。结论:本法简便、可靠、准确。为白花丹参的质量评价提供了依据。

RP-HPLC法测定长期盐胁迫下盐爪爪和盐穗木中的甜菜碱(英文)

通过对影响甜菜碱提取和测定的各种因素进行研究,建立了一种准确、快速的测定长期盐胁迫下盐爪爪和盐穗木中甜菜碱的HPLC方法.样品采用超声波甲醇提取,并依次通过强阴阳离子交换树脂（Dowex 50×8和Dowex 50×2）进行纯化,得到的样品采用反相C18柱进行分离,色谱条件：流动相为50 mmol/L、pH 4.5的KH2PO4溶液;波长200 nm下紫外测定,流速0.7 mL/min;此方法的检出限为0.02μg/mL,平均回收率为97.2%.通过对0～500 mmol/L NaCl胁迫下的盐爪爪和盐穗木中甜菜碱进行测定,甜菜碱的含量均呈现先增加后减少的趋势,盐爪爪在NaCl浓度为200 mmol/L时达到最大,而盐穗木在NaCl浓度为300 mmol/L时达到最大.

RP-HPLC法测定麦冬中麦冬皂苷D’的含量

目的：建立RP-HPLC 法测定麦冬中麦冬皂苷D’的含量，方法：采用DiamonsilTM C18色谱柱（200 mm ×4.6 mm ，5μm），柱温为33℃，流动相为水-乙腈（体积比52∶48），流速0.80 mL·min^-1，检测波长208nm ．结果：麦冬皂苷D’的质量浓度在0.018～0.180 mg · mL^-1与峰面积呈良好的线性关系（r ＝0.9999），平均回收率为99.5％（RSD＝0.96％，n＝9），结论：本方法简便，准确，可用于麦冬药材的质量控制。

RP-HPLC法测定酸枣仁中黄酮碳苷的含量

目的 建立测定酸枣仁中黄酮碳苷含量的新方法。方法 RP- HPL C法 ,采用 Hypersil- C1 8柱为分析柱 ,乙腈 -水 (17∶ 83)为流动相 ,检测波长为 334 nm,,流速为 0 .8m L/ min。结果 黄酮碳苷在 5 .2 80～ 14.0 8μg/ m L范围内与峰面积呈良好的线性关系 (r=0 .9997,n=6 ) ,平均回收率为 95 .8%。结论 该法简便、快速、重现性好 ,适用于酸枣仁中黄酮碳苷的定量分析。

用RP-HPLC指纹图谱控制复方丹参滴丸中低波长紫外吸收指纹成分

目的采用双定性双定量相似度作为评价指标,建立了复方丹参滴丸(CDDP)中低波长紫外吸收指纹成分的控制方法。方法采用RP-HPLC法以Century SIL C18BDS柱(200 mm×4.6 mm,5μm);以色谱指纹图谱指数F为目标函数优化选择指纹图谱检测条件,确定流动相为水-乙腈低压梯度洗脱,紫外检测波长:203 nm,柱温:(30.00±0.15)℃,进样量:10μL。以双定性双定量相似度法对10批CDDP进行质量评价。结果以人参皂苷Rg1为参照物峰,确定18个共有指纹峰,建立了CDDP低波长紫外吸收指纹成分的HPLC指纹图谱。评价出10批CDDP的双定性双定量相似度均合格,表明此10批样品的低波长紫外吸收指纹成分的数量、分布比例和含量特征是十分相似的,表现出很好的质量均一性。结论本试验证明双定性双定量相似度法可有效控制CDDP中低波长紫外吸收指纹成分。

RP-HPLC法测定美味猕猴桃茎与根中熊果酸的含量

目的:建立美味猕猴桃根与茎中熊果酸的含量测定方法。方法:采用HPLC法,色谱柱为Thermo Hypersil BDS C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为甲醇-0.2%醋酸铵(85:15);流速为0.8ml/min;柱温为25℃;检测波长为210nm。结果:熊果酸在0.204～2.04μg范围内,峰面积与进样量呈良好的线性关系,r=0.9998;平均加样回收率为101.88%,RSD为1.90%(n=6)。结论:该方法简便可行,重复性好,结果准确,可作为美味猕猴桃中熊果酸的含量测定方法。

Bioleaching of soluble phosphorus from rock phosphate containing pyrite with DES-induced Acidithiobacillus ferrooxidans

The effects of Acidithiobacillus ferrooxidans(At. f) mutated with diethyl sulfate(DES) as a mutagen on the bioleaching of soluble phosphorus(P) from rock phosphate(RP) were investigated. The results show that the oxidative activity of At. f is greatly improved by 1.0%(volume fraction) of DES. Correspondingly,the highest leaching rate of soluble P is also obtained to be 14.9% by the At. f mutated,which is 85.8% higher than that of the adapted At. f without mutation. In addition,the SEM images are significantly performed that the corrosion of RP residue surfaces leached by 1.0% DES-induced At.f is much worse than that of leached by the adapted At. f. All the above indicate that the leaching efficiency of soluble P from RP with pyrite can be greatly improved by using DES-induced At. f to a certain extent.

LncRNA RP5-919F19在胃癌组织中的表达及其与胃癌侵袭转移的相关性

目的研究长非编码RNA(long non-coding RNA,Lnc RNA)RP5-919F19在胃癌组织中的表达及与胃癌侵袭转移的相关性。方法收集临沂市中心医院2020年1月到2022年1月手术取下的非肿瘤胃黏膜(距癌组织3 cm以上)和胃腺癌组织。应用TRIzol试剂盒提取细胞和组织总RNA,应用反转录试剂盒将RNA反转录为cDNA,应用实时定量PCR试剂盒进行定量分析。应用SGC-7901和AGS人胃癌细胞,构建RP5-919F19敲减和过表达模型,应用CCK-8实验确认细胞增殖能力,应用Transwell侵袭实验确认胃癌细胞的侵袭能力。结果对79例胃癌组织和癌旁正常组织中RP5-919F19表达检测,发现RP5-919F19在胃癌组织中的相对表达量为1.51±0.05,明显高于癌旁正常组织的0.82±0.04(P<0.05)。对不同病理情况患者的RP5-919F19水平进行对比分析,分析结果显示患者不同TNM分期、是否出现远处转移、淋巴结转移和不同浸润深度患者的RP5-919F19表达差异存在统计学意义(P<0.05),不同肿瘤大小、年龄和性别患者RP5-919F19表达差异无统计学意义(P>0.05)。对AGS胃癌细胞转染RP5-919F19过表达和对照质粒,对细胞RP5-919F19效率进行检测,检测结果发现,过表达组细胞的RP5-919F19表达水平为1.83±0.14,相对对照组的0.82±0.05高(P<0.05),对SGC-7901胃癌细胞转染RP5-919F19敲除和对照载体,对细胞RP5-919F19效率进行检测,检测结果发现,敲除组细胞的RP5-919F19表达水平为0.42±0.07,相对对照组的0.89±0.08低(P<0.05)。应用CCK-8对胃癌细胞增殖能力进行检测,研究结果显示,RP5-919F19过表达组AGS细胞在培养24 h和48 h的增殖能力均相对对照组有明显提高(P<0.05),而RP5-919F19敲除组SGC-7901细胞在培养24 h和48 h的增殖能力均相对对照组低(P<0.05)。Transwell侵袭实验示RP5-919F19过表达组AGS细胞的侵袭和迁移能力均相对对照高(P<0.05),RP5-919F19敲除组SGC-7901细胞的侵袭和迁移能力均相对对照组低(P<0.05)。Western blot结果显示,相对于对照组细胞,下调Lnc RNA RP5-919F19 SGC-7901细胞的信号转导蛋白亚基7A(signal transduction protein subunit 7A,COPS7A)蛋白表达降低。结论LncRNA RP5-919F19在胃癌组织中表达异常增高,RP5-919F19表达增高会促进胃癌细胞增殖转移。

3种结核分枝杆菌复活促进因子基因的克隆、原核表达与纯化鉴定

目的构建结核分枝杆菌复活促进因子B(rpfB)、D(rpfD)、E(rpfE)的原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达和纯化。方法采用聚合酶链反应(PCR)以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板扩增出rpfB(1089bp),rpfD(465bp)和rpfE片段(519bp),并连接在pET32a(+)载体上,重组质粒用酶切和DNA测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达了rpfB,rpfD和rpfE3种蛋白;利用Western-blot鉴定重组蛋白后,纯化目的蛋白。结果双酶切鉴定所切下的片段大小与预计相符,测序结果与文献报道一致。经SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定均发现分别在61kDa、39kDa、41kDa处有特异性蛋白条带。结论成功构建了3种重组表达质粒pET32a(+)-rpfBv、pET32a(+)-rpfDv、pET32a(+)-rpfEv,并获得了3种高纯度的重组蛋白,为以后的深入研究奠定了基础。

反相高效液相法测定八角茴香果实中的莽草酸

用反相高效液相法在Waters Symmetry C18柱(5μm,4.6 mm×150 mm i.d)上测定八角茴香果实中的莽草酸.工作参数为:流速0.5 mL/min;进样体积2μL;检测波长220 nm;柱温30℃±1℃;流动相0.01 mol/L K2HPO4磷酸盐缓冲液(pH值为3,用磷酸调配)和体积分数3%甲醇.平均回收率为97.76%,RSD为1.937%(n=5).

长链非编码RNA RP11-367F23.2在脂多糖诱导炎症反应中的表达

目的研究长链非编码RNA RP11-367F23.2是否与脂多糖(LPS)诱导的炎症反应相关,揭示RP11-367F23.2在炎症应答反应中的作用。方法采用密度梯度离心法分离单核细胞源性树突状细胞(Mo-DCs);LPS组加入0.1μg/m L的LPS,磷酸缓冲盐溶液(PBS)组加入等体积的含有0.1%二甲基亚砜(DMSO)的PBS;18 h后收集上清和细胞,上清用于检测细胞因子白细胞介素-6(IL-6),细胞用于在m RNA水平检测RP11-367F23.2以及白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-12(IL-12)、CD40和CD80。结果 LPS处理细胞18 h后,LPS组中长链非编码RNA RP11-367F23.2及各细胞因子IL-6、IL-10、IL-12、CD40和CD80表达量较PBS组均显著升高(P<0.05)。结论 RP11-367F23.2可能参与了LPS诱导的炎症反应。

不同产地蒙药材大栀子中栀子苷的含量测定

目的：测定并比较不同产地蒙药材大栀子中栀子苷的含量,为大栀子的质量控制提供依据。方法：采用高效液相色谱法,色谱柱：C-18柱,流动相为：乙腈-水（15∶85）,流速1.0 m L/min,检测波长238nm。结果：10个不同产地的蒙药材大栀子中栀子苷含量在4.6%-8.6%,其中贵州所产的一个批次中栀子苷含量最高（8.6%）。结论：不同产地及不同采收时间的蒙药材大栀子中栀子苷的含量差异显著。

反相高效液相色谱法测定不同产地虎刺中齐墩果酸和熊果酸的含量

目的:建立反相高效液相色谱法测定不同产地虎刺中齐墩果酸和熊果酸的含量。方法:虎刺样品以95%乙醇溶液超声提取,分析柱选用Kromasil C18色谱柱,以甲醇-2.0%磷酸水溶液(90∶10,v/v)进行洗脱,柱温:25℃,流速:0.8 mL/min,检测波长:210 nm。结果:齐墩果酸在0.124～1.24μg范围内,与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9997),平均回收率为97.6%(RSD=2.2%);熊果酸在0.192～1.92μg范围内,与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为102.4%(RSD=1.9%)。结论:该二种成分均以湖北产虎刺中含量最高,方法操作简便,精密度高,可为虎刺的质量控制和开发利用提供实验依据。