植物发酵剂对育肥羔羊消化性能和瘤胃菌群结构的影响

试验旨在研究饮水中添加植物发酵剂对育肥羔羊消化性能和瘤胃菌群结构的影响。选择90只3月龄小尾寒羊,随机分为3组,每组5个重复,每个重复6只羔羊。按照不同植物发酵剂∶饮用水的比例,设低剂量组(1∶1 000,T1组)和高剂量组(1∶500,T2组),另设不添加发酵剂的对照组(C组)。试验期120 d。结果显示,与C组相比,T2组羔羊的平均日增重显著增加(P<0.05),料重比显著降低(P<0.05);T1组和T2组羔羊对粗蛋白、粗脂肪和中性洗涤纤维的表观消化率极显著升高(P<0.01),T2组羔羊的瘤胃纤维素酶、脂肪酶和α-淀粉酶活性显著升高(P<0.05)。与C组相比,植物发酵剂组瘤胃OTU数目,PD_whole_tree指数和Shannon指数均有提高趋势;T2组瘤胃厚壁菌门的相对丰度明显增加,拟杆菌门的相对丰度明显降低;T1组的优势菌理研菌科RC9肠道群的相对丰度明显升高,T2组非优势菌鼠李属的相对丰度明显增加。研究表明,饮水中添加植物发酵剂(1∶500)有效改善了羔羊的消化性能和瘤胃微生物结构。

UPLC-MS/MS代谢组学评价归芪益母口服液对产后奶牛瘤胃的调节作用

【背景】在当前饲料禁抗的背景下,利用低残留、无毒副作用的中草药制剂进行奶牛围产期保健已备受广大养殖企业的青睐。前期研究发现,归芪益母口服液能够减轻产后奶牛炎性反应、增强免疫力和缓解能量负平衡,但其详细的作用机制尚不清楚。【目的】通过超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)代谢组学技术评价归芪益母口服液对产后奶牛瘤胃代谢的调节作用,以期从新的视角揭示该配方的作用机制。【方法】试验选择18头体况相近、2-3胎次健康待产荷斯坦奶牛,随机分为对照组和试验组,每组各9头。试验组和对照组分别在产后0 d灌服归芪益母口服液和饮用水,连续灌服6 d。产后0 d未灌服前和产后7 d晨饲前采集瘤胃液,预处理后采用UPLC-MS/MS技术对瘤胃代谢物进行定性和定量分析。两组瘤胃液代谢物数据导入MetaboAnanlyst 5.0软件进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA),考察两组奶牛瘤胃液代谢轮廓的变化,筛选差异代谢物进行聚类分析和通路富集分析。【结果】产后7 d,试验组瘤胃代谢轮廓较对照组发生明显改变,43种瘤胃代谢物含量发生了显著变化(VIP>1,P<0.05),其中8种代谢物含量显著上调(P<0.05),分别是9-氧代-10E,12Z-十八碳二烯酸、石榴酸、6-二甲基氨基嘌呤、L-脯氨酸、马来酸、N-乙酰基5-羟色胺、泛酰醇、刺芒柄花素,35种代谢物含量显著下调(P<0.05),包括有机酸及其衍生物、核苷酸及其代谢物、碳水化合物及其代谢物等;聚类分析结果显示差异代谢物能明显区分对照组与试验组奶牛瘤胃液;代谢通路富集分析显示归芪益母口服液明显改变了奶牛瘤胃内组氨酸代谢、戊糖和葡萄糖醛酸相互转化、精氨酸和脯氨酸代谢、色氨酸代谢、嘧啶代谢和嘌呤代谢通路。【结论】归芪益母口服液能促进产后奶牛瘤胃菌群代谢机能,是其缓解产后奶牛能量负平衡、增强免疫、抗炎和维持肠道稳态的机制之一。

日粮中无机钴添加量对山羊瘤胃液及血清中VB_(12)含量的影响

选３ 只健康白山羊，手术安装瘤胃瘘管后，在日粮中添加不同量的硫酸钴，研究钴的不同添加量对山羊瘤胃微生物ＶＢ１２ 合成量的影响。试验共分４ 期：对照期（ 饲喂基础日粮）；试验１ 期（ 基础日粮＋ 钴０ ．３ ｍｇ／ｋｇ） ；试验２ 期（ 基础日粮＋ 钴０ ．５ ｍｇ／ｋｇ） ；试验３ 期（ 基础日粮＋ 钴０ ．８ ｍｇ／ｋｇ）。每期定时采取瘤胃内容物和血液样品，测定瘤胃液和血清中ＶＢ１２ 的含量。试验结果为：各期瘤胃液中ＶＢ１２ 平均含量（ｎｇ／ｍｌ） 分别为：７ ．４６，１４ ．８５，５２．８６ ，２６ ．１４ ；各期血清中ＶＢ１２ 平均含量（ｎｇ／ｍｌ）分别为：１ ．６６ ，３ ．５９ ，３．９２，４．１８。试验结果表明：在本试验条件下，随着日粮中钴量的增加，血清中ＶＢ１２ 含量随之上升，试验各期与对照期差异极显著（ Ｐ＜ ０．０１） 。证实了日粮中一定范围内的钴添加量与瘤胃液和血清中ＶＢ１２

离子排斥色谱法测定瘤胃液中乳酸和挥发性脂肪酸的含量

为了研究反刍动物瘤胃液内各有机酸含量水平,建立同时测定瘤胃液中乳酸和6种挥发性脂肪酸的高效液相色谱分析方法,试验采用离子排斥色谱模式,采用Sepax Carbomix H-NP 5(300×7.8 mm ID,5μm,8%交联度)色谱柱,配同系保护柱,柱温55℃,流动相采用2.5 mmol/L H2SO4水溶液,流速0.50 m L/min,示差折光检测器温度30℃,响应时间6 s。结果表明:乳酸和6种挥发性脂肪酸30 min内基线分离无干扰,在5.0~200.0 mg/L浓度范围内呈现良好的线性关系,各组分方法检测限在0.24~0.46 mg/L之间。说明该方法样品前处理简便,重现性好,结果准确。

饲料添加尿素对羊瘤胃液pH、CH4、VFA和产气量的影响

模拟羊瘤胃内环境条件,采用瘤胃液体外发酵技术,在发酵底物中添加不同质量分数的尿素,测定发酵过程pH、甲烷(CH4)、挥发性脂肪酸(VFA)体积分数和产气量。结果表明:瘤胃发酵液pH随饲料添加尿素质量分数的增加而增加;甲烷体积分数随尿素质量分数增加呈降低趋势;尿素质量分数可明显影响瘤胃发酵液的产气量和VFA体积分数;20和30g/kg的尿素添加水平可提高发酵液的产气量和VFA产量,40和50g/kg的尿素添加水平抑制产气量和VFA的产量。可见,适宜的尿素添加量可促进瘤胃微生物的发酵过程。

卡拉库尔羊瘤胃液对几种秸秆饲料体外降解率的研究

在厌氧环境、适宜温度、恒定pH值条件下,模拟卡拉库尔羊瘤胃环境,对3种农作物秸秆(棉花秸秆、稻草、玉米秸秆)进行离体消化试验。采用批次培养法,在培养后4、8、12、24、48h分别测定干物质(DM)、中性洗涤可溶物(NDS)、半纤维素(HC)、纤维素(CEL)体外降解率。结果表明:①“玉米秸秆+4%尿素”组比玉米秸秆组DM、NDS、HC、CEL体外降解率分别降低3.12、6.29、4.74和0.2个百分点,这说明添加尿素能引起瘤胃液对粗饲料体外降解的抑制。②棉叶、棉花秸秆上1/3细茎、棉桃壳组48h干物质降解率(DMD48)分别为65.47%、36.66%和31.32%,这说明棉叶组的体外降解率高于棉桃壳组及棉花秸秆上1/3细茎组的体外降解率。

体外产气法在评定草食家畜饲料营养价值上的应用

本文从体外产气法的原理、影响体外产气量的因素、体外产气试验的可靠性以及体外产气法的应用和改进等几个方面作了评述。

人工唾液对绵羊瘤胃液相平衡、瘤胃发酵和微生物氮合成的影响

进行两个试验,研究灌注人工唾液对绵(?)平衡,瘤胃发酵和微生物蛋白质合成的影响。用尿液嘌呤衍生物总量作为供给宿主动物微生物氮的指标。试验1内,4只绵羊每天饲喂1kg以侧短干草为基础的配合日粮,采用4×4拉丁方(?),别向瘤胃中灌注0,1.5,3和4L/d单倍浓度的人工唾液(AS)。试验2内,3(?)每天饲喂与试验1成分相同的颗粒日粮1kg,采用3×4不完全拉丁方设计,分别(?)瘤胃中灌注0,4和8L/d单倍浓度和4L/d双倍浓度的人工唾液(DAS)。试验1发现,灌注人工唾液对瘤胃液体积、瘤胃液稀释率、发酵类型及微生物氮合成没有影响试验又发现,灌注8L/d AS和4L/d DAS显著提高瘤胃液稀释率和微生物氮的今成(P<0.05):但对瘤胃液体积没有显著影响(P<0.05)。4个处理的微生物氮合(?)效率分别为8.50,11.20,13.10和13.97g/kg可消化有机物(DOM)(S.E=(?) 95)。微生物氮合成效率与瘤胃液稀释率有相关关系。

不同饲养条件下内蒙古绒山羊瘤胃甲烷菌组成的研究

为了解天然放牧和舍饲条件下内蒙古绒山羊瘤胃中甲烷菌的种群组成。选取甲烷菌mcrA基因的特异性引物序列,利用PCR技术对从瘤胃液中抽提的细菌总DNA进行扩增,并建立了甲烷菌特异性的mcrA基因文库。用限制性内切酶Taq I对该文库特异性片段进行了限制性酶切片断长度多态性分析(Restriction fragment lengthpolymor-phism,RFLP)。放牧和舍饲内蒙古绒山羊瘤胃中甲烷菌的mcrA基因片段被分成6个不同的RFLP类型,并由此建立了DNA指纹图谱;系统发育树分析表明,其属于甲烷杆菌目和甲烷微菌目,且绒山羊瘤胃中的甲烷菌大部分属于甲烷短杆菌。放牧绒山羊瘤胃内甲烷菌种类比舍饲绒山羊更加丰富,6种甲烷菌所占比例均较高,而舍饲绒山羊只有两种优势菌比例较高,其他几种所占比例极低。

PEG和CrEDTA作为绵羊瘤胃液相标记物的比较研究

对4只4×4拉丁方设计中的绵羊，分别用PEG（聚乙二醇）和CrEDTA（乙二胺四乙酸铬）两种液相标记物同时测定了瘤胃液稀释率和瘤胃液体积。结果表明，两种方法测得的瘤胃液稀释率之间或瘤胃液体积之间存在极显著（P＜0．01）或显著（P＜0.05）相关关系。但用两种方法测得的瘤胃液稀释率或瘤胃液体积之间差异极显著（P＜0．01）或显著（P＜0．05）。用PEG法测得的两指标均高于用CrEDTA法测得的结果。

羊瘤胃液对几种荒漠植物体外降解的试验研究

模拟羊瘤胃环境,对盐穗木、盐爪爪、骆驼刺、灰绿藜、苣荬菜、大蓟6种荒漠植物进行离体消化试验。在培养后设定时间段测定DM、NDF和ADF的降解率。结果表明:苣荬菜和骆驼刺DM、NDF和ADF全期降解率较好,盐穗木、盐爪爪居中,灰绿藜、大蓟较差。

瘤胃投注N-乙酰-DL-蛋氨酸对新疆美利奴羯羊表观消失率及瘤胃液稀释率的影响

选取4只体重约40 kg装置永久性瘤胃瘘管和十二指肠瘘管的新疆美利奴羯羊为试验动物,采用4×4拉丁方设计,每只羊经瘤胃瘘管分别投注N-乙酰-DL-蛋氨酸(NAM)0、4、6、8 g/d,研究NAM在瘤胃内的稳定性以及对瘤胃液稀释率的影响。结果表明,添加6～8 g/d NAM可显著降低瘤胃液稀释率,瘤胃投注后12 h和24 h在前胃的平均消失率分别为67.0%～73.8%和82.1%～86.5%。以上结果表明NAM在瘤胃内不稳定,或者被前胃吸收。

稀释率对新型固液气分流式瘤胃模拟系统发酵效果的影响

本试验旨在研究稀释率对新型固液气分流式瘤胃模拟系统发酵效果的影响。采用单因子完全随机试验设计,共设4个处理,各处理稀释率分别为6%/h、8%/h、10%/h、12%/h,每个处理3个重复,每个重复1个发酵罐。试验期10 d。结果表明:随着稀释率的提高,发酵液pH极显著提高(P<0.01),而氨态氮(NH3-N)浓度则极显著降低(P<0.01)。稀释率由6%/h上升到10%/h,总挥发性脂肪酸(TVFA)及戊酸浓度极显著下降(P<0.01)。稀释率从6%/h提高到8%/h时,原虫数量极显著提高了6.91%(P<0.01),但当稀释率从8%/h提高到12%/h时,原虫数量却极显著下降了5.18%(P<0.01)。随着稀释率从6%/h增加到10%/h,木聚糖酶活性(P<0.01)及微生物蛋白质(MCP)产量(P<0.05)显著或极显著降低,粗蛋白质体外消失率极显著升高(P<0.01)。稀释率为10%/h和12%/h的2个处理,中性洗涤纤维体外消失率显著高于另外2个处理(P<0.05)。结果提示,稀释率能够影响新型固液气分流式瘤胃模拟系统的发酵情况,稀释率为8%/h时,原虫数量以及纤维素类酶活性、各瘤胃发酵参数更加有利于发酵,因此可推荐作为本系统最优运行条件。

反相高效液相色谱法测定瘤胃内容物中挥发性脂肪酸的方法研究

本实验以山羊瘤胃液为样品,建立了反相高效液相色谱(RP-HPLC)测定乙酸、丙酸和丁酸等挥发性脂肪酸含量的方法。结果表明:甲醇与0.01 mol/L磷酸二氢钠缓冲液(pH=2.6)比例为28∶72时可很好地分离乙酸、丙酸和丁酸,回收率均大于83%,相对标准偏差(RSD)均小于0.67%。

反相高效液相色谱法测定瘤胃液中的生物胺

本文旨在应用反相高效液相色谱法建立瘤胃液中生物胺的测定方法。样品经0.5 mol/L盐酸提取后,用丹磺酰氯柱前衍生,流动相为乙腈和0.1 mol/L乙酸铵溶液;采用梯度洗脱,流速为1.0 mL/min;紫外检测器波长254 nm,柱温30℃。应用该方法,研究高精料和低精料饲粮条件下瘤胃液中5种生物胺浓度的差异。结果表明:采用该方法,色胺、腐胺、甲胺、组胺和酪胺5种生物胺能在40 min内得到良好地分离,回收率为88.46%～98.49%,相对标准偏差小于10%。在高精料饲粮条件下,饲喂前山羊瘤胃液中的酪胺和甲胺浓度显著高于低精料饲粮(P<0.05),但组胺、色胺和腐胺浓度无显著性差异(P>0.05)。结果提示,该方法可用于瘤胃液中的生物胺的分析,饲喂前山羊瘤胃液中的酪胺和甲胺浓度受饲粮精粗比的影响。

过食黄豆对奶山羊瘤胃液理化性状的影响

20只装置永久性瘤胃瘘管的假定健康奶山羊进行了过食黄豆的研究。瘤胃液性状的研究结果为,pH值先降低而后上升,乳酸浓度先上升而后下降,氨持续上升,纤毛虫活力降低、数量减少,纤维素消化能力减弱。结果表明,过食黄豆导致瘤胃液出现了先酸性物质占优势后碱性物质占优势的结果,这是本病的重要特征,也是诊断本病的重要依据。

黄牛实验性急性食盐中毒诊断的研究

对３０头健康黄牛、１０头实验性急性食盐中毒黄牛、１０头给盐而未中毒黄牛的血液、尿液及瘤胃液的氯做了检查。结果：健康黄牛尿氯为０．１１３６～０．３９９４克／１００毫升，瘤胃液氮为０．０８２８～０．１４８９克／１００毫升、血清氯４８７．２２～５２４．０毫克％；中毒黄牛尿氯为０．６５３５～０．９９４９克／１００毫升、瘤胃液氯为０．３４８４～０．４７５６克／１００毫升、血清氯为７０３．９～７１３．７毫克％。根据实验可将上述三项定为黄牛急性食盐中毒的指标。血、尿及瘤胃液便于采集，中毒后氯含量又剧烈增加，故可做为诊断食盐中毒的简便方法。

奶牛瘤胃内容物液相稀释率及外流速度的测定

选择3头体况良好、体重550kg左右并安装永久性瘤胃瘘管的荷斯坦奶牛进行试验。采用一次性灌注液相标记物Co-EDTA法测定奶牛瘤胃液相稀释率及外流速度,测定结果表明:奶牛瘤胃液相稀释率为15.01±0.56(%/h),瘤胃液相外流速度为7.9±0.75(L/h)。

高效液相色谱法测定过瘤胃赖氨酸盐酸盐的含量

本研究建立了高效液相色谱法测定过瘤胃赖氨酸盐酸盐含量的方法。色谱柱:Agela Technologies,Venusil MP C18(4.6×150mm,5μm);流动相:乙腈∶0.017mol/L庚烷磺酸钠溶液=15∶85,进样量20μL,检测波长195nm;流速1mL/min。结果发现:过瘤胃赖氨酸盐酸盐在0.025~1.25mg/mL的检测浓度范围内呈良好线性关系(r=0.9997),最低定量限为2.5μg。说明该方法操作简便、灵敏、准确,适用于过瘤胃赖氨酸盐酸盐的质量控制。

复方健胃散对广西本地黄牛瘤胃生理指标的影响

为了探讨复方健胃散对广西本地黄牛瘤胃生理指标的影响,实验采取前后自身对照的方法,第一阶段为对照期,第二阶段饲喂健胃散。与第一阶段相比,瘤胃液中瘤胃纤毛虫活性与微生物活性在第二阶段显著增强;挥发性脂肪酸(VFA)含量在第一阶段中为51.5±2.17a,在第二阶段提高到63.9±4.19b,差异极显著(P<0.01);原虫蛋白含量在第一阶段中为0.177±0.0051c,在第二阶段提高到0.228±0.0133d,差异极显著(P<0.01);细菌蛋白含量在第一阶段中为0.175±0.0071e,在第二阶段提高到0.228±0.0119f,差异极显著(P<0.01);pH在整个过程中没有显著变化。而反刍动物瘤胃内VFA是一项很重要的发酵生理指标。VFA来源于微生物对饲料中营养物质的消化分解,生长与繁殖,也给动物提供能量。