iNOS抑制剂对兔关节软骨修复组织胶原表达的影响

目的观察诱导型一氧化氮合酶抑制剂对关节软骨修复组织胶原表达的影响。方法24只新西兰大白兔双侧股骨髁间关节面造成全层软骨缺损。随机抽签均分为对照组、骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)组和一氧化氮合酶抑制剂S-甲基异硫脲组(S-methylisothiourea,SMT)组。术后1年处死动物。应用苦味酸-天狼猩红染色检测胶原的分布情况,图像分析技术定量胶原的表达及进行修复组织软骨厚度的测量。应用免疫组织化学技术检测型胶原的表达和分布。结果图像分析显示,1年后SMT组型胶原表达量为65.9%,明显少于BMP组88.5%和对照组94.6%的表达量,型胶原30.7%的表达量明显多于BMP组10.8%和对照组4.5%的表达量。1年后SMT组软骨厚度(1.85±0.56)mm明显高于BMP组(0.67±0.31)mm和对照组(0.24±0.10)mm。SMT组缺损区型胶原含量明显高于BMP组和对照组。结论iNOS抑制剂SMT的应用能明显增加型胶原表达和软骨厚度,对于维持软骨表型有积极意义。

S-甲基异硫脲对阿霉素致大鼠心肌脂质过氧化的影响

目的 研究S 甲基异硫脲 (SMT)对阿霉素 (ADM )所致大鼠心肌脂质过氧化的影响。方法 32只Wistar大鼠随机分成 4组 :对照组 ;SMT组 (SMT 5 0mg·kg-1,iv ,1次 ) ;ADM组 (ADM 5 0mg·kg-1,ip ,1次 ) ;ADM +SMT组(ADM、SMT的剂量及用法分别同ADM组、SMT组 )。于给药后 2 4h处死所有大鼠。分别用TBA法、硝酸还原酶法、DTNB法、邻苯三酚自氧化法、血红蛋白氧化法测定心肌的脂质过氧化物 (LPO)含量、一氧化氮 (NO)含量、谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx)活性、超氧化物歧化酶 (SOD)活性、一氧化氮合酶活性 ;用免疫组织化学法检测心肌的硝基酪氨酸(NT)水平。结果 SMT干预ADM处理的大鼠后 ,降低心肌的LPO及NO含量、诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)活性、NT水平 (P <0 0 1) ,增加心肌的SOD及GPx活性 (P <0 0 1)。SMT、ADM对心肌的结构型一氧化氮合酶活性无影响 (P >0 0 5 )。结论 SMT抑制ADM导致心肌脂质过氧化。其机制可能与SMT选择性地抑制ADM所诱导心肌的iNOS活性使心肌产生NO减少而减少心肌生成过氧亚硝基阴离子、保护心肌的SOD及GPx活性有关。

S-甲基异硫脲对阿霉素致大鼠心肌线粒体腺苷三磷酸合酶活性改变的影响

目的研究S-甲基异硫脲(SMT)对阿霉素(ADR)所致大鼠心肌线粒体腺苷三磷酸合酶(ATPS)活性改变的影响。方法大鼠腹腔注射ADR(5.0 mg.kg-1)1次,给ADR处理的大鼠静脉注射不同剂量的SMT1次进行干预。分别用寡霉素—无机磷法、血红蛋白氧化法测定心肌线粒体的ATPS活性、一氧化氮合酶活性;分别用荧光素酶法、硝酸还原酶法测定心肌线粒体的腺苷三磷酸(ATP)含量、一氧化氮(NO)含量;用逆转录-聚合酶链反应方法检测心肌线粒体的ATPS6 mRNA、ATPS8 mRNA表达。结果SMT(5.0,10.0,20.0 mg.kg-1)拮抗ADR所致心肌线粒体的ATPS活性降低、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性增加(P<0.01);拮抗ADR所致心肌线粒体的ATP含量降低、NO含量增加(P<0.01);拮抗ADR所致心肌线粒体的ATPS6 mRNA、ATPS8 mRNA表达水平降低(P<0.01)。结论SMT拮抗ADR导致心肌线粒体的ATPS6 mRNA、ATPS8 mRNA表达水平降低而拮抗ADR导致ATPS活性降低,从而改善心肌线粒体供能;SMT拮抗ADR导致心肌线粒体的ATPS6 mRNA、ATPS8 mRNA表达水平降低可能与其选择性地抑制ADR所诱导心肌线粒体的iNOS活性使NO产生减少,从而减少NO抑制心肌线粒体的ATPS6 mRNA、ATPS8 mRNA表达有关。

S-甲基异硫脲对阿霉素致大鼠心肌组织超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性改变的影响

目的:探讨S-甲基异硫脲(SMT)对阿霉素(ADM)所致大鼠心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性改变的影响。方法:给大鼠腹腔注射ADM(10.0 mg.kg-1)1次,给ADM处理的大鼠静脉注射不同剂量的SMT(每天1次,共3次)进行干预。用分光光度法测定心肌组织丙二醛(MDA)含量、NO2-/NO3-含量、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)活性、铜-锌超氧化物歧化酶(Cu-ZnSOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性、一氧化氮合酶活性;用酶的速率法测定血清肌酸激酶(CK)的同功酶CK-MB活性;用逆转录-聚合酶链反应方法检测心肌组织MnSOD mRNA、Cu-ZnSOD mRNA、GPx mRNA、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mR-NA表达。结果:SMT(5.0,10.0,20.0 mg.kg-1)3个干预组心肌组织MDA含量、NO2-/NO3-含量、iNOS活性及血清CK-MB活性明显低于ADM组(P<0.01),而其心肌组织MnSOD mRNA、Cu-ZnSOD mRNA、GPx mRNA表达水平及其酶活性明显高于ADM组(P<0.01)。结论:SMT拮抗ADM抑制心肌组织MnSOD mRNA、Cu-ZnSODmRNA、GPx mRNA表达而拮抗ADM抑制这些酶的活性。

诱导型一氧化氮合酶抑制剂S-甲基异硫脲在大鼠颈椎间盘退变中的作用

目的:研究诱导型一氧化氮合酶抑制剂S-甲基异硫脲(S-methylisothiourea,SMT)在大鼠颈椎间盘退变中的作用。方法:选取8月龄雌性SD大鼠45只,随机分为实验组、实验对照组和正常对照组,实验组和实验对照组分别造颈椎静动力平衡失调模型,实验组腹腔注射SMT。3个月后光镜下观察椎间盘形态,测定蛋白多糖含量及椎间盘细胞凋亡率,并比较。结果:实验对照组的椎间盘细胞凋亡率和蛋白多糖减少量高于实验组和正常对照组,差异显著;实验组凋亡率和蛋白多糖减少量高于正常对照组,差异有显著性。结论:SMT在延缓椎间盘细胞的退变过程中有一定作用。

甲基磺酰氯的合成研究

以工业硫脲、硫酸二甲酯为原料，经过Ｓ－甲基化和氯氧化两步反应合成甲基磺酰氯，反应总收率由约６５％提高到８５％（以硫脲计）。

双膦酸盐药物与一氧化氮合酶抑制剂治疗骨质疏松大鼠的实验研究

目的实验研究阿仑膦酸钠(ALN)与S-甲基异硫脲(SMT)治疗骨质疏松大鼠的效果。方法将50只雌性SD大鼠(6月龄)分为5组,每组10只,分别为假手术组(Sham组),卵巢切除术后(OVX)的OVX组,ALN单独用药组,SMT单独用药组,ALN+SMT联合用药组。其中Sham组和OVX组腹腔注射生理盐水。药物治疗4周,麻醉后取血,脱颈处死。取胫骨、股骨,去净软组织。分别行血生化骨代谢指标检测、MicroCT扫描、骨组织计量学测量。结果单独给予ALN或SMT,各项检测结果接近或好于Sham组,差异无统计学意义。结论 3组药物治疗骨质疏松大鼠的疗效肯定,单独用药疗效好,且2种药物间差异无统计学意义;联合用药的疗效无累加效果。

一氧化氮合酶抑制剂在实验性兔关节软骨修复中的作用

目的 探讨一氧化氮合酶 (iNOS)抑制剂S 甲基异硫脲在实验性关节软骨修复中的作用。方法 2 0只新西兰兔随机分为对照组和实验组 ,在双侧股骨髁间滑车关节面作全层软骨缺损。对照组应用纤维蛋白凝胶BMP复合物充填缺损 ;实验组同样充填缺损后 ,并皮下注射iNOS抑制剂S 甲基异硫脲。术后 16周处死动物 ,作修复组织质量评价 ;天狼猩红 苦味酸染色检测Ⅰ型和Ⅱ型胶原分布 ;反转录 多聚酶链反应 (RT PCR)检测iNOS和MMP 9mRNA基因表达 ,BrdU检测软骨细胞增生情况 ,并利用图像仪进行分析。结果 形态学观察证实 ,术后 16周 ,实验组关节软骨缺损修复在评分方面优于对照组 (P <0 0 5 ) ;天狼猩红 苦味酸染色显示实验组Ⅰ型胶原明显少于对照组 ,Ⅱ型胶原多于对照组 ;术后 16周RT PCR在对照组检测到iNOSmRNA和MMP 9mRNA表达 ,实验组仅检测到少量MMP 9mRNA表达。实验组BrdU阳性细胞 8 5个 /m2 明显多于对照组 3 2个 /m2 。结论 iNOS抑制剂S

一氧化氮合酶抑制剂对软骨修复组织胶原表达的影响

目的探讨应用苦味酸-天狼猩红染色观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂对关节软骨修复组织胶原表达的影响及胶原定量表达的新方法。方法24只新西兰大白兔双侧股骨髁间关节面造成全层软骨缺损,随机均分为对照组、骨形态发生蛋白(BMP)组和iNOS抑制剂S-甲基异硫脲(SMT)组。术后16周及1年各组分别处死4只动物。应用苦味酸-天狼猩红染色检测胶原的分布情况,图像分析技术定量胶原的表达及进行修复组织软骨厚度的测量。结果图像分析结果经GLM-GeneralFactorialANOVA作均数的显著性检验,显示术后16周SMT组Ⅰ型胶原表达量为61.8%,明显少于BMP组的83.6%,和对照组的89.4%相比,差异有统计学意义(F=23.562);术后1年SMT组Ⅰ型胶原表达量为65.9%,明显少于BMP组88.5%和对照组94.6%,差异有统计学意义(F=36.747)。术后16周SMT组Ⅱ型胶原表达量为36.5%,明显多于BMP组12.6%和对照组8.2%,差异有统计学意义(F=68.326);术后1年SMT组Ⅱ型胶原30.7%的表达量多于BMP组的10.8%和对照组的4.5%,差异有统计学意义(F=83.876)。术后16周及1年后SMT组软骨厚度(2.08±0.6,1.85±0.56),与BMP组(1.56±0.38,0.67±0.31)和对照组(0.64±0.43,0.24±0.10)相比,差异有统计学意义(F值分别为57.836,45.087)。结论iNOS抑制剂SMT的应用能明显增加Ⅱ型胶原表达和软骨厚度,对于维持软骨表型有积极意义。而苦味酸-天狼猩红染色是一种观察软骨修复组织中胶原表达的理想方法。