基于量子点标记技术的鸡新城疫病毒sFLISA检测技术研究

本研究建立了基于量子点的鸡新城疫病毒(NDV)sFLISA检测方法。该方法以抗NDV多克隆抗体为捕捉抗体、以生物素标记抗NDV单克隆抗体为检测抗体、以量子点标记的链霉亲和素为荧光探针。该方法与其它有关禽类病毒(产蛋下降综合征病毒、鸡传染性法氏囊病病毒、禽白血病病毒)无交叉反应,比血凝试验灵敏,为临床早期快速检测NDV提供了行之有效的方法。

基于量子点的赭曲霉毒素AsFLISA检测技术研究

建立了基于量子点标记技术的赭曲霉毒素A（Ochratoxin A，OTA）双抗夹心荧光免疫检测（sand-wich fluorescence -linked immunosorbent assay ，sFLISA）体系，包含多克隆包被抗体、生物素标记的多克隆检测抗体、量子点标记的链霉亲和素等，获得了sFLISA的最佳操作参数：包被抗体浓度2．5μg/mL，检测抗体稀释500倍，量子点标记链霉亲和素稀释100倍。该方法在OTA浓度3．125～125μg/L之间时，相对荧光强度和OTA浓度呈线性关系，回归方程为y＝0．0206x＋0．2018，R2＝0．9924；加标回收率在90．1％～110．0％之间，变异系数均小于10％，能较好地进行赭曲霉毒素A的定量检测。

双抗夹心荧光免疫吸附测定法(sFLISA)定量检测转基因玉米中Bt蛋白

将量子点（Quantum Dots，QDs）应用于标记羊抗兔多克隆抗体，并利用Bt杀虫晶体蛋白作为标准蛋白和免疫抗原，通过抗体-抗原-抗体-量子点标记抗体反应，建立了双抗夹心荧光免疫吸附测定法（sFLISA），以定量检测转基因玉米中的Bt表达蛋白。研究结果表明，该方法的最低检测限为3pg／mL，线性检测范围为6-200pg／mL，回收率在90.0％-105.9％，变异系数在3.0％-12.6％。