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Distribution of micropeptide-coding sORFs in transcripts 被引量:1
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作者 Xinqiang Yin Jialiang Hu Hanmei Xu 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2018年第7期1029-1032,共4页
Small open reading frames(sORFs) are distributed over a wide variety of transcripts. sORFs encoding functional peptides have been identified in various configurations within apparently long noncoding RNAs. Many transl... Small open reading frames(sORFs) are distributed over a wide variety of transcripts. sORFs encoding functional peptides have been identified in various configurations within apparently long noncoding RNAs. Many translated sORFs have been identified across mRNAs, including 5’-upstream, coding domain, and 3’-downstream. sORFs have also been found in circular RNAs, pri-miRNAs, and ribosomal RNAs. Here, we present an overview of the wide distribution of the sORFs in transcripts and their functional roles in organisms. 展开更多
关键词 Micropeptide sorfs uORFs NCRNA circRNAs Pri-miRNAs
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功能性微肽通量发现和功能验证的研究进展
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作者 吕雪 李帮洁 徐寒梅 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期478-490,共13页
随着计算生物学和深度测序技术的飞速发展,愈来愈多的研究表明大量之前未被注释、隐藏在非编码RNA中的非经典开放阅读框(open reading frame,ORF)具有编码功能性微肽(micropeptide)的能力。本文对微肽的基因来源、生物性质、预测方法和... 随着计算生物学和深度测序技术的飞速发展,愈来愈多的研究表明大量之前未被注释、隐藏在非编码RNA中的非经典开放阅读框(open reading frame,ORF)具有编码功能性微肽(micropeptide)的能力。本文对微肽的基因来源、生物性质、预测方法和功能验证的研究现状和技术策略展开综述,以期为后续开展微肽发现、研究调控机制以及新靶点、生物标志物的开发等提供理论基础和参考依据。 展开更多
关键词 非编码RNA sorfs 功能性微肽
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火鸡疱疹病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量:1
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作者 刘杉杉 孙伟 +4 位作者 闫敏鑫 黄秀芬 姜良 何诚 李永清 《动物医学进展》 北大核心 2015年第2期16-20,共5页
针对火鸡疱疹病毒(HVT)特异性的sorf1区基因序列设计引物,建立检测HVT的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,并对其特异性、敏感性和重复性进行检测。结果表明,建立的实时荧光定量PCR方法标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好线性关... 针对火鸡疱疹病毒(HVT)特异性的sorf1区基因序列设计引物,建立检测HVT的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,并对其特异性、敏感性和重复性进行检测。结果表明,建立的实时荧光定量PCR方法标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好线性关系(r2=0.99),熔解曲线分析显示该PCR扩增具有良好的特异性、敏感性和重复性,试验表明该方法最低检测浓度为7×101拷贝/μL。利用该方法对野生型HVT和rHVT-pmpD-N在体内和体外的复制特性进行检测,结果表明重组后的HVT与野生型HVT的增殖速度基本一致。本试验建立的检测方法能够快速检测HVT,准确率高,特异性好,具有较高的灵敏度和稳定性,为监测HVT体内和体外的病毒含量和复制情况提供了一种有效的手段。 展开更多
关键词 火鸡疱疹病毒 SYBR GreenⅠ 实时荧光定量PCR sorf1
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鸭肠炎病毒SORF3基因的原核表达及其多克隆抗体的制备 被引量:1
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作者 母晓宇 董井泉 +3 位作者 孟祥莉 张雪莲 马波 王君伟 《中国家禽》 北大核心 2012年第23期14-17,共4页
以鸭肠炎病毒(DEV)C-KCE株基因组DNA为模板,PCR扩增获得SORF3(S3)基因,在pET-32a(+)/Rosetta(DE3)pLys系统中原核表达。S3重组蛋白经IPTG诱导,SDS-PAGE分析显示外源基因以包涵体形式表达为主,分子质量约为52ku。重组蛋白经Ni-NTA纯化后... 以鸭肠炎病毒(DEV)C-KCE株基因组DNA为模板,PCR扩增获得SORF3(S3)基因,在pET-32a(+)/Rosetta(DE3)pLys系统中原核表达。S3重组蛋白经IPTG诱导,SDS-PAGE分析显示外源基因以包涵体形式表达为主,分子质量约为52ku。重组蛋白经Ni-NTA纯化后免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,琼脂扩散法测得抗体效价为1:4。经Western blotting分析制备的多克隆抗体具有较高的特异性,间接免疫荧光试验证实制备的多克隆抗体与DEV的SORF3编码产物反应性良好,为进一步研究DEVSORF3结构与功能特性奠定了基础。 展开更多
关键词 鸭肠炎病毒 SORF3基因 原核表达
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鸭肠炎病毒SORF3基因的克隆及表达载体的构建
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作者 刘存霞 吴静 +5 位作者 田雪 赵巧雅 路晓 王林 李玉峰 宋敏训 《家禽科学》 2018年第11期34-37,共4页
克隆鸭病毒性肠炎病毒(Duck Enteritis Virus,DEV)SORF3基因并进行原核表达,为研究SORF3基因功能奠定基础。以DEV基因组为模板,PCR扩增SOFR3基因克隆至表达载体pET32a,构建重组表达质粒pET32a-SORF3,将重组质粒转化至感受态细胞BL21中,I... 克隆鸭病毒性肠炎病毒(Duck Enteritis Virus,DEV)SORF3基因并进行原核表达,为研究SORF3基因功能奠定基础。以DEV基因组为模板,PCR扩增SOFR3基因克隆至表达载体pET32a,构建重组表达质粒pET32a-SORF3,将重组质粒转化至感受态细胞BL21中,IPTG诱导表达并进行SDS-PAGE及Werstern-blot鉴定。结果构建的原核表达质粒pET32aSORF3转化BL21后经IPTG诱导4h,可表达分子量约50kDa融合蛋白,Western blot显示重组蛋白可以被Anti-His标签抗体识别,表明成功构建了pET32a-SORF3原核表达质粒,并能在大肠杆菌中表达具有免疫反应性的SORF3,为SORF3基因的功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 鸭肠炎病毒 SORF3 原核表达
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火鸡疱疹病毒荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用
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作者 白银荣 张志飞 +6 位作者 李雪松 刘芹防 陈鸿军 杨健美 李泽君 滕巧泱 张七斤 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第1期8-12,共5页
本研究针对火鸡疱疹病毒(Herpesvirus of turkey,HVT)FC-126毒株sorf1基因序列,设计特异性的扩增引物和探针,建立了检测HVT的TaqMan荧光定量PCR方法,并对其特异性、敏感性和重复性进行检测。结果表明,建立的荧光定量PCR方法灵敏度高,最... 本研究针对火鸡疱疹病毒(Herpesvirus of turkey,HVT)FC-126毒株sorf1基因序列,设计特异性的扩增引物和探针,建立了检测HVT的TaqMan荧光定量PCR方法,并对其特异性、敏感性和重复性进行检测。结果表明,建立的荧光定量PCR方法灵敏度高,最低可检测到1×10~2 copies/μL,比普通PCR灵敏10倍;对鸭瘟病毒、传染性喉气管炎病毒、鹅细小病毒、4型禽腺病毒和8型禽腺病毒均无特异性扩增,具有较好的特异性;组间和组内变异系数均小于1%,表明该方法重复性好。用建立的荧光定量PCR方法对82份HVT样品进行检测,结果43份为阳性,普通PCR只检测出30份阳性样品。结果表明本研究建立的HVT TaqMan荧光定量PCR检测方法特异性好,灵敏度高,重要性好,为监测HVT的病毒含量提供了一种有效的手段。 展开更多
关键词 火鸡疱疹病毒 荧光定量PCR sorf1基因
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抗Ⅰ型马立克氏病毒sorf2蛋白的多克隆抗体制备及其特异性鉴定 被引量:3
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作者 崔宁 苏帅 +4 位作者 李久庆 赵鹏 李延鹏 丁家波 崔治中 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期284-292,共9页
【目的】制备高效价鼠和兔抗Ⅰ型马立克氏病毒(Marek's disease virus,MDV)sorf2蛋白的多克隆抗体并对其特异性进行鉴定。【方法】以Ⅰ型MDV GX0101为模板,利用PCR扩增sorf2基因,分别克隆进原核表达载体pET-28a(+)和pET-32a(+)中,... 【目的】制备高效价鼠和兔抗Ⅰ型马立克氏病毒(Marek's disease virus,MDV)sorf2蛋白的多克隆抗体并对其特异性进行鉴定。【方法】以Ⅰ型MDV GX0101为模板,利用PCR扩增sorf2基因,分别克隆进原核表达载体pET-28a(+)和pET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(Rosetta),经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导后进行融合蛋白的表达和纯化。用纯化的融合目的蛋白常规免疫6-8周龄Balb/c小鼠和成年新西兰大白兔,制备抗sorf2蛋白的多克隆抗体。用Western blot和间接免疫荧光试验鉴定多克隆抗体的特异性。【结果】Ⅰ型MDV的sorf2基因在原核表达载体中能够正确表达,免疫小鼠和兔后能获得与sorf2蛋白发生特异性反应的高效价的多克隆抗体。【结论】制备的抗sorf2蛋白的多克隆抗体能够特异的鉴定MDV sorf2基因缺失株,有效的区分MDV疫苗株HVT(FC-126)与Ⅰ型MDV毒株,用于临床MDV野毒的分离鉴定。 展开更多
关键词 Ⅰ型马立克氏病毒 sorf2基因 多克隆抗体 WESTERNBLOT 间接免疫荧光
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微生物小开放阅读框:小蛋白及翻译调控研究进展
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作者 杨婕 张安琪 +2 位作者 冯家勋 赵帅 赵心清 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期1-14,共14页
小开放阅读框(small open reading frame,sORF)广泛存在于不同生物基因组中,由于其序列短,以及编码的产物小蛋白(small protein,或称微蛋白;microprotein或迷你蛋白miniprotein)检测困难等原因,小开放阅读框长期未得到充分注释和研究。... 小开放阅读框(small open reading frame,sORF)广泛存在于不同生物基因组中,由于其序列短,以及编码的产物小蛋白(small protein,或称微蛋白;microprotein或迷你蛋白miniprotein)检测困难等原因,小开放阅读框长期未得到充分注释和研究。近年来,随着高通量测序、翻译组和质谱分析等技术的不断发展,在不同生物中发现大量新的小开放阅读框,其编码的小蛋白及介导的翻译调控已应用于药物开发及植物抗病机理等研究。但是,目前对微生物的小开放阅读框相关研究和应用还相对有限。本文综述了小开放阅读框编码产物小蛋白的发现和鉴定,以及上游开放阅读框(upstream open reading frame,uORF)对mRNA翻译调控等最新研究进展,重点介绍了微生物基因组中小开放阅读框的鉴定和功能研究进展,为深入认识微生物中小开放阅读框的功能和作用机制,以及植物和动物等高等其他生物的小蛋白和翻译调控相关研究提供参考。 展开更多
关键词 小开放阅读框(sORF) 小蛋白 上游开放阅读框(uORF) 翻译调控 微生物基因组
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Micropeptides: origins, identification, and potential role in metabolism-related diseases
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作者 Yirui LU Yutong RAN +5 位作者 Hong LI Jiao WEN Xiaodong CUI Xiaoyun ZHANG Xiumei GUAN Min CHENG 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2023年第12期1106-1122,共17页
With the development of modern sequencing techniques and bioinformatics, genomes that were once thought to be noncoding have been found to encode abundant functional micropeptides(miPs), a kind of small polypeptides. ... With the development of modern sequencing techniques and bioinformatics, genomes that were once thought to be noncoding have been found to encode abundant functional micropeptides(miPs), a kind of small polypeptides. Although miPs are difficult to analyze and identify, a number of studies have begun to focus on them. More and more miPs have been revealed as essential for energy metabolism homeostasis, immune regulation, and tumor growth and development. Many reports have shown that miPs are especially essential for regulating glucose and lipid metabolism and regulating mitochondrial function.MiPs are also involved in the progression of related diseases. This paper reviews the sources and identification of miPs, as well as the functional significance of miPs for metabolism-related diseases, with the aim of revealing their potential clinical applications. 展开更多
关键词 Energy metabolism Micropeptides MITOCHONDRIA Noncoding RNA(ncRNA) Small open reading frame(sORF)
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