基于细胞代谢组学的柴胡皂苷b2对皮质酮诱导PC12细胞损伤的保护作用研究

目的研究柴胡皂苷b2(SSb2)对皮质酮(CORT)诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制。方法①将细胞分为细胞对照组(RPMI-1640培养基培养24 h),CORT(100~800μmol·L^(-1)孵育24 h)组和SSb2(1.5625,3.125,6.25,12.5,25,50和100μmol·L^(-1)孵育24 h)组,MTT法检测细胞存活率。②将细胞分为细胞对照组(RPMI-1640培养基培养24 h),模型组(CORT 400μmol·L^(-1)孵育24 h)和模型+SSb2组(SSb21.5625,3.125,6.25,12.5和25μmol·L^(-1)预处理3 h,去上清,然后加入CORT 400μmol·L^(-1)及对应浓度SSb2共孵育24 h)。MTT法检测细胞存活率,微板法检测PC12细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率。③将细胞分为细胞对照组、模型组和模型+SSb212.5μmol·L^(-1)组,采用AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡;基于超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)的代谢组学技术检测PC12细胞代谢轮廓变化;比色法检测谷氨酸含量和谷氨酰胺酶活性。结果①与细胞对照组相比,当CORT浓度为400μmol·L^(-1)时,细胞存活率降低至(55±6)%(P<0.01);SSb2浓度>50μmol·L^(-1)时,对PC12细胞有显著的细胞毒性(P<0.01)。②与细胞对照组相比,模型组细胞存活率显著降低(P<0.01),LDH释放率显著升高(P<0.01);与模型组相比,模型+SSb2各浓度组细胞存活率显著升高(P<0.05,P<0.01),LDH释放率显著降低(P<0.01)。③与细胞对照组相比,模型组细胞凋亡率显著升高(P<0.01);与模型组相比,模型+SSb2组细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。代谢组学结果表明,SSb2能显著回调谷氨酸、肌酸、N-乙酰天冬氨酸、L-酪氨酸、柠檬酸、L-异亮氨酸、乳酸、谷氨酰胺和胆碱9个差异代谢物。对SSb2调控的关键代谢物进一步富集分析表明,SSb2主要影响5条代谢通路,即D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,酪氨酸代谢和精氨酸生物合成。与细胞对照组相比,模型组谷氨酸含量和谷氨酰胺酶活性显著降低(P<0.01);与模型组相比,模型+SSb2组细胞谷氨酸含量(P<0.01)和谷氨酰胺酶活性显著升高(P<0.05)。结论SSb2对CORT诱导的PC12细胞损伤具有神经保护作用,其机制与抑制细胞凋亡和调节代谢紊乱有关。

HPLC-MS/MS法测定柴葛解肌汤中柴胡皂苷a、b2的含量

目的建立测定柴葛解肌汤中I型柴胡皂苷a与Ⅱ型柴胡皂苷b2的HPLC—MS／MS方法。方法采用Hypersil GOLDaQ色谱柱（150mm×2．1mm，3txm），乙腈-0．1％甲酸溶液为流动相，流速为300μL.min^-1，柱温：25℃，以液相色谱分离、电喷雾离子化串联进行检测。结果柴胡皂苷a、b2分别在44．8-672ng·mL～、47．2～708ng·mL。线性关系良好（r=0．9992、r=0．9993），平均回收率分别为98．53％和99．47％，RSD分别为2．01％和2．08％（n=6）。结论该方法快速简便、准确、灵敏度高，可用于柴葛解肌汤中柴胡皂苷a、b2的含量测定。

柴胡皂苷B2对LPS诱导的脓毒症肺损伤氧化应激和炎性反应的影响研究

目的探讨柴胡皂苷B2对脂多糖(LPS)诱导的脓毒症肺损伤氧化应激和炎性反应的影响。方法将50只SD大鼠分为空白对照组、模型组和柴胡皂苷B2低、中、高剂量组。空白对照组大鼠腹腔内注射等体积生理盐水;模型组大鼠腹腔注射10 mg/kg的LPS;柴胡皂苷B2低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠腹腔注射10 mg/kg的LPS后,分别注射5、10、20 mg/kg的柴胡皂苷。末次给药24 h后,麻醉处死大鼠,检测肺组织湿干比;TUNEL染色检测肺组织细胞凋亡;Western blotting检测肺组织B淋巴细胞瘤(Bcl-2)、Bcl-2同源二聚体X蛋白(Bax)、p53蛋白表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清内超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)含量。结果与空白对照组相比,模型组内肺组织湿干比、细胞凋亡率、Bax、p53蛋白表达、MDA含量、TNF-α、IL1β、IL-6含量明显升高,Bcl-2蛋白表达、SOD活性、GSH-Px活性明显降低。与模型组相比,低剂量组、中剂量组、高剂量组内肺组织湿干比、细胞凋亡率、Bax、p53蛋白、MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6明显降低,Bcl-2蛋白、SOD活性、GSH-Px活性明显升高。结论柴胡皂苷B2能减轻LPS诱导的脓毒症急性肺损伤大鼠氧化应激和炎性反应,并减少细胞的凋亡。

UPLC法测定加味逍遥提取物及制剂中柴胡皂苷b2含量研究

目的:建立加味逍遥提取物及制剂中柴胡皂苷b2的含量测定方法。方法:采用UPLC法,ACQUITY UPLC?BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相:乙腈(A)-水(B);流速:0.3 mL/min;检测波长:254 nm;柱温:30℃。结果:柴胡皂苷b2线性范围为2.902~87.06μg(R2=0.9999),加味逍遥提取物及制剂中柴胡皂苷b2平均加样回收率为100.65%、102.05%,RSD分别为1.35%、2.61%,不同批次提取物至制剂柴胡皂苷b2转移率均在95%~110%。结论:该方法简便、稳定、快速、重现性好,可用于加味逍遥提取物及制剂中柴胡皂苷b2的含量测定,且方法准确可靠,可表征工艺稳定性,为完善加味逍遥片的质量评价体系提供依据。

柴胡皂苷-b2抑制内质网应激信号通路减轻四氯化碳致小鼠急性肝损伤

目的探讨柴胡皂苷-b2(SS-b2)对四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用及其对内质网应激通路的影响。方法 60只雄性BALB/c小鼠分为正常对照组、模型组、SS-b2(5,10和20 mg·kg-1)组和阳性药(水飞蓟宾10 mg·kg-1)组。各组小鼠连续7 d每天ig给予不同剂量的SS-b2、水飞蓟宾或生理盐水;末次给药后2 h,除正常对照组外,各组分别一次性ip给予5%CCl4建立小鼠急性肝损伤模型。比色法检测血清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;HE染色检测肝组织病理变化,免疫组织化学和Western蛋白印迹法检测小鼠肝组织中内质网应激通路蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、磷酸化真核起始因子2α(p-eIF2α)、转录激活因子4(ATF4)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的蛋白表达水平。结果与正常对照组相比,模型组小鼠血清中GPT和GOT的活性及MDA的含量明显升高(P<0.05,P<0.01),SOD活性明显降低(P<0.01),同时,肝组织内质网应激通路相关蛋白PERK,p-eIF2α,ATF4,GRP78和CHOP表达水平显著增高(P<0.01)。与模型组相比,不同浓度SS-b2组小鼠血清中GPT和GOT的活性及MDA的含量明显降低(P<0.05,P<0.01),SOD的活性明显升高(P<0.01);肝组织上述内质网应激通路相关蛋白的表达水平均明显降低(P<0.05,P<0.01)。HE染色结果显示,不同浓度的SS-b2明显改善CCl4引起的小鼠肝细胞肿胀、肝小叶周围胞核溶解和肝索排列紊乱,使细胞形态明显好转。结论 SS-b2对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤具有保护作用,其机制可能与改善氧化应激损伤,抑制内质网应激通路的激活有关。

柴胡皂苷b2通过调控沉默信息调节因子6介导的糖代谢通路减轻二乙基亚硝胺诱导的小鼠原发性肝癌

目的探讨柴胡皂苷b2(SSb2)对二乙基亚硝胺(DEN)诱导的原发性肝癌小鼠的肝癌抑制作用及对沉默信息调节因子6(SIRT6)介导的糖代谢通路的影响。方法BALB/c小鼠随机分为正常对照组、肝癌模型组(DEN 50 mg·kg^(-1))、模型+SSb21.5,3.0和6.0 mg·kg^(-1)组及模型+多柔比星(DOX)1 mg·kg^(-1)组。除正常对照组外,其余组小鼠ip给予DEN 50 mg·kg^(-1),每周2次;第5周开始DEN给药减为每周1次,同时按分组给予SSb2和DOX,正常对照组在建模期间给予等体积生理盐水,给药持续19周。第19周末,收集小鼠血清和肝。计算肝指数,采用HE染色观察肝组织病理变化,试剂盒检测血清中谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)、乳酸脱氢酶(LDH)和甲胎蛋白(AFP)水平;Western印迹法检测肝组织中SIRT6、低氧诱导因子1α(HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、丙酮酸脱氢酶激酶同工酶1(PDK1)和乳酸脱氢酶A(LDHA)蛋白表达水平。结果与正常对照组相比,模型组小鼠肝指数明显升高(P<0.01);与模型组相比,模型+SSb2各剂量组和模型+DOX组小鼠肝指数显著降低(P<0.01)。HE染色结果显示,模型组肝细胞异形性明显,癌巢组织多发,模型+SSb26.0 mg·kg^(-1)组和模型+DOX组细胞坏死增多,异形核及癌巢减少。血清指标结果显示,与正常对照组相比,模型组血清中GOT,GPT,LDH和AFP水平均显著升高(P<0.01);与模型组相比,模型+SSb23.0和6.0 mg·kg^(-1)组及模型+DOX组小鼠血清中GOT,GPT,LDH和AFP水平均显著降低(P<0.01),模型+SSb21.5 mg·kg^(-1)组GOT,LDH和AFP水平显著降低(P<0.01)。Western印迹结果显示,与正常对照组相比,模型组肝组织中SIRT6蛋白的表达显著降低(P<0.01),HIF-1α,GLUT1,PDK1和LDHA蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与模型组相比,模型+SSb2各剂量组和模型+DOX组肝组织SIRT6蛋白的表达显著升高(P<0.01),而模型+SSb23.0和6.0 mg·kg^(-1)组及模型+DOX组肝组织HIF-1α,GLUT1,PDK1和LDHA蛋白表达水平均显著降低(P<0.01),模型+SSb21.5 mg·kg^(-1)组HIF-1α,GLUT1和LDHA蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论SSb2对DEN诱导的原发性肝癌小鼠的肝癌发展有抑制作用,其作用与其调控SIRT6介导的糖代谢通路有关。

柴胡皂苷b2通过抑制线粒体凋亡通路减轻过氧化氢诱导的L-02细胞损伤

目的探讨柴胡皂苷b2(SS-b2)对过氧化氢(H2O_2)诱导的L-02细胞损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法将L-02细胞分为正常对照组、模型组(H2O_2100μmol·L^(-1)孵育12 h)和SS-b2组(SS-b212.5,25,50和100 mg·L^(-1)孵育24 h后,再加入H2O_2继续孵育12 h)。MTT法检测L-02细胞存活率;罗丹明123染色检测L-02细胞线粒体膜电位变化;Hoechst33258荧光染色法和流式细胞术检测L-02细胞凋亡;Western蛋白印迹法检测线粒体凋亡通路蛋白Bcl-2、Bax、细胞色素c(Cyt-c)、胱天蛋白酶9和3表达水平。结果与正常对照组相比,模型组细胞存活率显著降低(P<0.01);细胞线粒体膜电位水平降低(P<0.01)且细胞凋亡率显著增加(P<0.01);Bax(P<0.01)、Cyt-c(P<0.01)、胱天蛋白酶9(P<0.05)和3(P<0.05)蛋白表达水平显著升高,而Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.01)。与模型组相比,SS-b2各浓度组细胞存活率显著升高(P<0.05,P<0.01),且呈浓度依赖性(r=0.9804,P<0.05);线粒体膜电位水平升高(P<0.01);Hoechst染色和流式细胞检测结果均显示,细胞凋亡率明显降低(P<0.05,P<0.01);Bax、Cyt-c、胱天蛋白酶9和3蛋白水平显著下调(P<0.01),且Bcl-2蛋白水平上调(P<0.01)。结论 SS-b2可减轻H2O_2诱导的L-02细胞损伤,其机制与抑制线粒体凋亡有关。

柴胡皂苷-b2对HepG2细胞迁移及血管生成相关蛋白表达的影响

目的研究柴胡皂苷b2(SS-b2)对HepG2细胞迁移的影响,并探讨其潜在的分子机制。方法用MTT法检测SS-b2对HepG2细胞存活的影响,并根据结果将细胞分为细胞对照组、SS-b2治疗组(15,30和60 mg·L-1)和阳性对照组〔多柔比星(DOX)2 mg·L-1〕;利用划痕实验观察SS-b2对HepG2细胞迁移的影响;采用Western印迹法检测HepG2细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9的表达和细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)的磷酸化水平。结果SS-b215,30和60 mg·L-1处理HepG2细胞48 h后,划痕愈合率分别为74.71%,72.50%和66.82%,随着SS-b2浓度的增加,划痕愈合率明显减小。与细胞对照组相比,SS-b230和60 mg·L-1组的划痕愈合率显著降低(P<0.05);SS-b215,30和60 mg·L-1可显著降低HepG2细胞中VEGF和HIF-1α的表达(P<0.05,P<0.01),而SS-b260 mg·L-1可显著降低MMP-2和MMP-9蛋白的表达以及ERK1/2的磷酸化(P<0.05,P<0.01);阳性对照组可显著降低上述4种蛋白的表达以及ERK1/2的磷酸化(P<0.05,P<0.01)。与阳性对照组相比,SS-b260 mg·L-1下调VEGF和MMP-2的表达更显著(P<0.05,P<0.01),SS-b215,30和60 mg·L-1对HIF-1α的表达与阳性对照组无显著性差异,对MMP-9蛋白表达的下调不如阳性对照组效果显著(P<0.01),SS-b260 mg·L-1与阳性对照组的ERK1/2磷酸化程度无显著性差异。结论SS-b2可以抑制HepG2细胞的迁移,该作用可能与其抑制血管生成通路相关蛋白的表达有关。

HPLC-ELSD同时测定北柴胡中柴胡皂苷A、C、D、B1、B2及山奈苷含量

目的用HPLC-ELSD同时测定北柴胡中柴胡皂苷A、C、D、B1、B2及山奈苷6种苷类成分的含量。方法 Phenomenex C18(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱,流动相:乙腈(A)-0.2%醋酸溶液(B),梯度洗脱(0~8 min, 8%A;8~15 min, 8%~20%A;15~30 min, 20%~35%A;30~40 min, 35%~45%A;40~60 min, 45%~75%A),柱温30℃,流速1.0 mL·min^(-1),载气为氮气,体积流量2.3 L·min^(-1),漂移管温度70℃,增益2。结果柴胡皂苷C、柴胡皂苷A、柴胡皂苷D、柴胡皂苷B2、柴胡皂苷B1、山奈苷在5.48~109.6 mg·L^(-1)(r=0.999 4)、9.76~195.2 mg·L^(-1)(r=0.999 6)、11.98~239.6 mg·L^(-1)(r=0.999 9)、0.532~10.64 mg·L^(-1)(r=0.999 7)、0.35~7.0μg·mL^(-1)(r=0.999 5)、0.254~5.08μg·mL^(-1)(r=0.999 6)范围内的线性关系良好。平均回收率分别为99.1%、99.4%、97.2%、100.4%、100.7%、98.6%。21批北柴胡样品含量范围:柴胡皂苷C 0.093 2%~0.243%、柴胡皂苷A 0.103 8%~0.889 6%、柴胡皂苷D 0.288%~1.084 3%、柴胡皂苷B2 0~0.032 6%、柴胡皂苷B1 0~0.031 26%、山奈苷0~0.010 33%。结论该方法测定北柴胡中柴胡皂苷A、C、D、B1、B2及山奈苷6种苷类成分含量灵敏、准确,分离效果较好,无干扰,可作为完善北柴胡中苷类成分的质量标准评价提供依据。

柴胡皂苷b2对大鼠体内柴胡皂苷a肝组织分布的影响

研究柴胡皂苷b2对柴胡皂苷a在大鼠肝脏组织中分布的影响。将Wistar大鼠随机分为两组,分别灌胃给药柴胡皂苷a(25mg/kg)和柴胡皂苷a+柴胡皂苷b2(25+3.125mg/kg)混合药液,然后于0.25、0.5、1、2、4h收集肝脏,肝组织匀浆经液液萃取处理后通过LC-MS/MS法测定肝组织中柴胡皂苷a的含量。给药后0.5h,柴胡皂苷a在肝组织中分布量最大,并随时间延长其含量迅速下降。柴胡皂苷b2显著增加0.5h时柴胡皂苷a在肝组织的累积量,而对其他时间点柴胡皂苷a在肝组织的累积量无显著性影响。本研究表明柴胡皂苷b2增加了柴胡皂苷a在大鼠肝脏的分布,可能对药效产生影响。

柴胡醋制前后柴胡皂苷a、b_2、c、d的LC-MS/MS法测定及比较

采用LC-MS/MS法对醋制前后柴胡中的Ⅰ型柴胡皂苷a、c、d与Ⅱ型柴胡皂苷b2进行含量测定,色谱柱为KinetexTMC18(50 mm×4.6 mm,2.6μm),流动相为水-乙腈-甲醇三元梯度洗脱;检测系统为电喷雾离子源(ESI)-三重四级杆质谱仪,ESI负离子模式检测,待测成分与内标均采用负离子加合物作为选择性反应监测(SRM)的前体离子,以[M+HCOO]-/[M-H]-作为SRM检测离子对。方法学验证结果显示,所建立的方法灵敏度高、专属性好,可作为柴胡生品及醋炙品的质量控制方法。含量测定结果表明,醋制过程引发了由Ⅰ型柴胡皂苷向Ⅱ型的转化,醋制后柴胡皂苷b2的含量明显增加,对柴胡醋炙品的质量控制应同时考虑对Ⅰ、Ⅱ型柴胡皂苷柴胡皂苷进行测定。

UPLC-QTof-MS测定不同提取条件下柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的转化规律

使用UPLC-QTof-MS研究了不同提取条件下柴胡皂苷a、d的转化规律。色谱柱为Acquity UPLC BEH C18（2.1 mm×50 mm,1.7μm）;流动相为乙腈-0.01%甲酸水溶液;流速为0.45 mL/min。以四极杆串联飞行时间质谱（Q-Tof）为检测器,使用负离子检测模式,对经过12种不同提取方法提取的柴胡样品（1~12）进行检测。得到柴胡皂苷a、d不同提取方法下的转化规律：酸性常温条件下水解生成柴胡皂苷b1、b2,酸性加热情况下糖苷键水解生成皂苷元;中性、碱性条件下均较稳定。实验结果对柴胡皂苷a、d的提取、分离、分析提供了参考依据。

特异的柴胡皂苷糖苷酶的分离纯化

研究了微生物Aspergillus oryzaec42菌株产特异的柴胡皂苷糖苷酶的分离纯化及其酶学性质.结果表明,该酶能够水解柴胡皂苷A或柴胡皂苷B2侧链的3-O-β-(1→3)-Glc和3-O-β-Fuc,其分子量约为58000.柴胡皂苷糖苷酶首先水解柴胡皂苷A或B2侧链的3-O-β-(1→3)-Glc生成3-O-β-Fuc-柴胡皂苷元A或B2,然后进一步水解3-O-β-Fuc-柴胡皂苷元A或B2的3-O-β-Fuc生成柴胡皂苷元A或B2.柴胡皂苷糖苷酶的最适反应温度为4℃,最适pH值为5.0;Na+和K+对酶活力的影响不明显;Cu2+,Hg2+和Ag+对酶活力有显著的抑制作用;Ca2+和Mg2+对酶活力有轻微的激活作用.

HPLC-ELSD法同时测定四逆散不同配伍中柴胡皂苷a、b_2、c的含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法同时测定四逆散不同配伍中柴胡皂苷a,b_2,c的含量。方法:采用Hypersil BDS C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱;流速:1.0 ml·min^(-1),ELSD检测器,漂移管温度:100℃,气体:空气,气体流速:2.0 L·min^(-1),柱温:室温。结果:柴胡皂苷a,b_2,c分别在7.74~129.00,7.86~131.00,5.12~85.30μg的范围内线性关系良好(r分别为0.999 2,0.999 2,0.999 3);平均回收率分别为98.6%,99.3%,100.7%,RSD分别为2.5%,1.8%,2.7%(n=6)。结论:白芍中的成分可降低柴胡皂苷a、c的煎出量;枳实中的成分可提高柴胡皂苷a、b_2、c的煎出量;与单味柴胡药材相比,配伍组合中柴胡皂苷b_2的含量均显著增加。

HPLC法测定小柴胡颗粒中柴胡皂苷b_2的含量

目的建立小柴胡颗粒中柴胡皂苷b2含量的测定方法。方法采用HPLC法，phenomenexLuna色谱柱，以乙腈-0．2％二乙胺（35：65）为流动相，流速为1．0mL·min-1，柱温30℃，检测波长254nm。结果柴胡皂苷b2线性范围0．3632～3．6320μg，R2=1．00；平均加样回收率为102．2％，RSD为2．5％。结论该方法准确、稳定，重现性好，可用于小柴胡颗粒的质量控制。

柴胡皂苷b_2降解产物结构研究

目的研究柴胡皂苷b2降解产物的结构。方法采用各种分离技术和光谱技术对柴胡皂苷b2降解产物的结构进行分离和结构鉴定。结果柴胡皂苷b2在保存过程中形成的降解产物的结构为Saikogenin D。结论为进一步研究其降解的过程动力学过程,进而更好地保存柴胡皂苷b2奠定基础。

柴胡配方颗粒的质量标准研究

目的建立合理的定性和定量检测方法,以便更准确、有效地评价柴胡配方颗粒的质量。方法收集7个厂家19批柴胡配方颗粒样品,研究建立特征图谱;用TLC法进行定性鉴别;用热浸法测定浸出物含量;建立高效液相色谱法-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)双波长法同时测定2种柴胡皂苷的含量,并对19批样品中柴胡皂苷a和柴胡皂苷b 2的含量进行测定。结果TLC斑点清晰,专属性强;浸出物含量在19.90%~38.41%;建立了19批样品的高效液相色谱法-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)特征图谱,共标记10个共有峰;柴胡皂苷a和柴胡皂苷b 2的含量测定方法学考察结果良好,分别在0.08008~9.60960和0.06868~8.24160μg范围内线性关系良好(r值均为0.9999),平均回收率分别为96.90%(RSD=1.61%)和98.85%(RSD=1.94%)。对研究过程中发现的相关问题进行讨论,探讨了生产工艺对柴胡配方颗粒质量的影响。结论所建立的方法简便、准确,指标成分科学有效,为该品种的质量评价与控制提供了有力的技术支持,同时对其他配方颗粒质量标准研究也具有参考意义。

柴胡配方颗粒的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱研究

目的采用高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光检测器(HPLC-DAD-ELSD)联用技术,建立柴胡配方颗粒的指纹图谱。方法使用Venusil XBP-C18(L)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃,进样量20μL,DAD检测器采集波长为210 nm和254 nm;ELSD检测器漂移管温度105℃,载气流量2.5 L·min^-1。结果通过19批柴胡配方颗粒样品建立了指纹图谱的共有模式,其中HPLC-DAD(210 nm)指纹图谱共有峰14个,HPLCDAD(254 nm)指纹图谱共有峰9个;HPLC-ELSD指纹图谱共有峰10个。确认了柴胡皂苷a、柴胡皂苷b1、柴胡皂苷b2及柴胡皂苷c。结论本研究所建立的方法简便准确,为该品种的质量评价与控制提供了有力的技术支持,同时对其他配方颗粒质量标准研究也具有一定的参考意义。

柴胡皂苷类化合物的药理作用研究进展

柴胡皂苷是一类五环三萜类化合物,是传统中药柴胡的主要活性成分。目前已从柴胡中分离出多种皂苷类成分,其中对柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2、柴胡皂苷c、柴胡皂苷d的研究较为深入。笔者等阐述柴胡皂苷类化合物抗病毒、抗炎、抗肿瘤、抗纤维化等方面的药理作用,为柴胡皂苷的进一步研究提供参考。

一测多评法同时测定消癥微丸中4种柴胡皂苷

目的建立一测多评法同时测定消癥微丸(柴胡、香附、大黄等)中4种柴胡皂苷的含有量。方法该药物5%氨水-甲醇提取液的分析采用Waters Xbridge C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-水为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;检测波长210、254 nm。以柴胡皂苷a为内标,计算柴胡皂苷b1、b2、c的相对校正因子,再测定其含有量。结果 4种柴胡皂苷在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 5),平均加样回收率98.08%~102.94%,RSD 0.85%~1.82%,一测多评法所得结果与外标法接近。结论该方法简单、精确、可行,可用于消癥微丸的质量控制。