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Comprehensive analysis of clinical and biological value of ING family genes in liver cancer
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作者 Shi-Cai Liu 《World Journal of Gastrointestinal Oncology》 SCIE 2024年第6期2592-2609,共18页
BACKGROUND Liver cancer(LIHC)is a malignant tumor that occurs in the liver and has a high mortality in cancer.The ING family genes were identified as tumor suppressor genes.Dysregulated expression of these genes can l... BACKGROUND Liver cancer(LIHC)is a malignant tumor that occurs in the liver and has a high mortality in cancer.The ING family genes were identified as tumor suppressor genes.Dysregulated expression of these genes can lead to cell cycle arrest,senescence and/or apoptosis.ING family genes are promising targets for anticancer therapy.However,their role in LIHC is still not well understood.AIM To have a better understanding of the important roles of ING family members in LIHC.METHODS A series of bioinformatics approaches(including gene expression analysis,genetic alteration analysis,survival analysis,immune infiltration analysis,prediction of upstream microRNAs(miRNAs)and long noncoding RNAs(lncRNAs)of ING1,and ING1-related gene functional enrichment analysis)was applied to study the expression profile,clinical relationship,prognostic significance and immune infiltration of ING in LIHC.The relationship between ING family genes expression and tumor associated immune checkpoints was investigated in LIHC.The molecular mechanism of ING1 mediated hepatocarcinogenesis was preliminarily discussed.RESULTS mRNA/protein expression of different ING family genes in LIHC was analyzed in different databases,showing that ING family genes were highly expressed in LIHC.In 47 samples from 366 LIHC patients,the ING family genes were altered at a rate of 13%.By comprehensively analyzing the expression,clinical pathological parameters and prognostic value of ING family genes,ING1/5 was identified.ING1/5 was related to poor prognosis of LIHC,suggesting that they may play key roles in LIHC tumorigenesis and progression.One of the target miRNAs of ING1 was identified as hsa-miR-214-3p.Two upstream lncRNAs of hsa-miR-214-3p,U91328.1,and HCG17,were identified.At the same time,we found that the expression of ING family genes was correlated with immune cell infiltration and immune checkpoint genes.CONCLUSION This study lays a foundation for further research on the potential mechanism and clinical value of ING family genes in the treatment and prognosis of LIHC. 展开更多
关键词 Liver cancer ing family genes Noncoding RNAs Immune cell infiltration PROGNOSIS
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RE而意用ECO-WORKING“环乐同创”
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作者 灰原 《中国自行车》 2024年第4期90-93,共4页
2024年5月1日至6月2日,RE而意与小布(BROMPTON)、FREITAG、抱朴再生BOTTLOOP合作,在上海张园呈现了一场精彩纷呈的展览。本次展览的主题为“ECO-WORKING!环乐同创”。展览以“倡导时尚、环保、可持续的生活方式”为主导,展现一系列具有... 2024年5月1日至6月2日,RE而意与小布(BROMPTON)、FREITAG、抱朴再生BOTTLOOP合作,在上海张园呈现了一场精彩纷呈的展览。本次展览的主题为“ECO-WORKING!环乐同创”。展览以“倡导时尚、环保、可持续的生活方式”为主导,展现一系列具有长效设计、实用、可循环利用且令人愉悦的时尚单品。 展开更多
关键词 可循环利用 ing ECO 可持续的
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the Roll’ING进京 网红品牌如何才能长红
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作者 郭缤璐 张天元 《中国食品》 2024年第7期123-125,共3页
动排队数小时的网红瑞士卷进京,是真需求还是饥饿营销的话题也再次引发热议。近日,上海网红瑞土卷烘培品牌the Roll'ING手作瑞士卷专门店在朝阳大悦城开出北京首店,并迅速在社交平台上走红,不乏出现排队时间长、出餐效率低、黄牛加... 动排队数小时的网红瑞士卷进京,是真需求还是饥饿营销的话题也再次引发热议。近日,上海网红瑞土卷烘培品牌the Roll'ING手作瑞士卷专门店在朝阳大悦城开出北京首店,并迅速在社交平台上走红,不乏出现排队时间长、出餐效率低、黄牛加价乱象等吐槽,不少消费者直呼是“饥饿营销”。值得注意的是,这家品牌同样出自于网红烘培品牌KUMOKUMO创始人姜浩文之手,此前上海首店开业时也受到“口碑危机”。 展开更多
关键词 饥饿营销 社交平台 烘培 大悦城 ing 网红 品牌 排队时间
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A Machine Learning-Based Web Application for Heart Disease Prediction
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作者 Jesse Gabriel 《Intelligent Control and Automation》 2024年第1期9-27,共19页
This work leveraged predictive modeling techniques in machine learning (ML) to predict heart disease using a dataset sourced from the Center for Disease Control and Prevention in the US. The dataset was preprocessed a... This work leveraged predictive modeling techniques in machine learning (ML) to predict heart disease using a dataset sourced from the Center for Disease Control and Prevention in the US. The dataset was preprocessed and used to train five machine learning models: random forest, support vector machine, logistic regression, extreme gradient boosting and light gradient boosting. The goal was to use the best performing model to develop a web application capable of reliably predicting heart disease based on user-provided data. The extreme gradient boosting classifier provided the most reliable results with precision, recall and F1-score of 97%, 72%, and 83% respectively for Class 0 (no heart disease) and 21% (precision), 81% (recall) and 34% (F1-score) for Class 1 (heart disease). The model was further deployed as a web application. 展开更多
关键词 Heart Disease US Center for Disease Control and Prevention Machine Learn-ing Imbalanced Data Web Application
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p33ING1b和p53在银屑病和基底细胞癌中的表达及临床意义 被引量:6
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作者 贺琪 岳青 +3 位作者 皮先明 石全 陈宏翔 李家文 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第9期1391-1394,共4页
目的:探讨肿瘤抑制因子p53和生长抑制因子p33ING1b在人类银屑病和基底细胞癌(basal cell carcinoma,BCC)中的表达情况及临床意义。方法 :采用免疫组织化学Envision方法检测p53和p33ING1b在36例寻常型银屑病皮损(银屑病组)、28例BCC皮损(... 目的:探讨肿瘤抑制因子p53和生长抑制因子p33ING1b在人类银屑病和基底细胞癌(basal cell carcinoma,BCC)中的表达情况及临床意义。方法 :采用免疫组织化学Envision方法检测p53和p33ING1b在36例寻常型银屑病皮损(银屑病组)、28例BCC皮损(BCC组)和14例正常表皮(正常对照组)中的蛋白表达。结果:p53在正常对照组、银屑病组和BCC组中表达递增,p33ING1b在3组中表达递减,组间比较差异均有显著性(均P<0.05)。银屑病组和BCC组中,p53与p33ING1b之间均存在显著正相关(均P<0.05)。结论:p53和p33ING1b协同作用于增生性皮肤病的局部皮损,是细胞异常增殖的重要机制之一。 展开更多
关键词 P53 P33ing1B 银屑病 基底细胞癌 ing1
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ING5基因表达对胃癌细胞生长抑制作用的研究 被引量:6
6
作者 杨雪峰 勾文峰 +4 位作者 赵爽 申道福 吴亚州 李君君 郑华川 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期577-582,共6页
目的探讨ING5基因表达对胃癌生长抑制作用。方法构建p EGFP-N1-ING5重组质粒,获得ING5高表达SGC-7901细胞株,分别通过CCK-8、流式细胞术、划痕、transwell、real-time PCR、Western blot、裸鼠成瘤实验、免疫组化检测并比较SGC-7901细... 目的探讨ING5基因表达对胃癌生长抑制作用。方法构建p EGFP-N1-ING5重组质粒,获得ING5高表达SGC-7901细胞株,分别通过CCK-8、流式细胞术、划痕、transwell、real-time PCR、Western blot、裸鼠成瘤实验、免疫组化检测并比较SGC-7901细胞与克隆细胞增殖率、周期与凋亡、迁移与侵袭、m RNA、裸鼠成瘤大小以及相关蛋白表达。结果与SGC-7901组及Mock组比较,转染p EGFP-N1-ING5后,胃癌SGC-7901细胞增殖显著抑制(P<0.05),凋亡减少(P<0.05),G1期比例增加,G2期比例下降(P<0.05),迁移与侵袭能力减弱(P<0.05),NF-κB、PI3K、p-Akt1/2/3、Bcl-2、XIAP、β-catenin、c-myc m RNA及蛋白表达水平均升高(P<0.05);Akt1/2/3、MMP9 m RNA及蛋白表达降低(P<0.05)。结论 ING5基因表达降低胃癌SGC-7901细胞株增殖、减少凋亡、发生G1期阻滞、抑制其迁移与侵袭、有效调控增殖、周期、黏附相关基因与蛋白的表达,从而抑制胃癌的演进与发展。 展开更多
关键词 胃癌 ing5 肿瘤发生 基因治疗
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Ad-ING4对人前列腺癌细胞PC-3体内外抑癌效应的研究 被引量:13
7
作者 杨慧翠 盛伟华 +3 位作者 谢宇锋 缪竞诚 魏文祥 杨吉成 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1149-1157,共9页
背景与目的:腺病毒作为载体已被广泛用于肿瘤的基因治疗。ING4是生长抑制因子家族中的一个成员,是一种潜在的抑癌基因。本研究旨在探讨腺病毒介导的人ING4基因(Ad-ING4)对人前列腺癌细胞PC-3的体内外抑癌效应及其分子机制。方法:将扩增... 背景与目的:腺病毒作为载体已被广泛用于肿瘤的基因治疗。ING4是生长抑制因子家族中的一个成员,是一种潜在的抑癌基因。本研究旨在探讨腺病毒介导的人ING4基因(Ad-ING4)对人前列腺癌细胞PC-3的体内外抑癌效应及其分子机制。方法:将扩增的Ad-ING4重组腺病毒感染PC-3细胞,用RT-PCR法检测ING4在PC-3细胞中的转录;MTT法检测ING4基因对PC-3细胞增殖的影响;流式细胞术和Hoechst33258染色法检测细胞凋亡的变化;半定量RT-PCR法检测ING4基因的表达对PC-3细胞中的bcl-2、bax、p53和caspase-3凋亡相关基因表达的影响。用Ad-ING4重组腺病毒在裸鼠PC-3移植瘤的瘤体内注射治疗,观察肿瘤生长变化,15d后处死裸鼠,摘除瘤体,称瘤重;用免疫组化法检测瘤组织中Bcl-2、Bax、Caspase-3和CD34蛋白的表达。结果:腺病毒介导的人ING4基因在PC-3细胞中成功转录,明显抑制PC-3细胞增殖,上调p53、bax、caspase-3基因表达和下调bcl-2基因表达,并诱导细胞凋亡。Ad-ING4重组腺病毒能显著抑制裸鼠PC-3移植瘤的生长,瘤重的抑制率达37%,与空病毒载体Ad-GFP组和细胞对照PBS组比较差异有统计学意义(P<0.05);免疫组化结果显示Ad-ING4重组腺病毒能明显上调Bax和Caspase-3蛋白的表达水平,下调Bcl-2和CD34蛋白的表达水平。结论:腺病毒介导的ING4基因在体内外均可明显抑制人前列腺癌细胞PC-3的生长,诱导其凋亡,其机制可能是上调P53、Bax、Caspase-3蛋白和下调Bcl-2蛋白表达水平。 展开更多
关键词 ing4基因 腺病毒载体 PC-3细胞 前列腺癌 肿瘤抑制
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C-myc、PTEN、p33/ING1和P-gp/MDR1在食管鳞状细胞癌中的表达和意义 被引量:3
8
作者 冷雪芹 贾慧琼 +3 位作者 陈文霞 李慧娥 曹春莉 苏秉忠 《现代消化及介入诊疗》 2015年第3期179-184,共6页
目的研究C-myc、PTEN、p33/ING1和P-gp/MDR1在食管鳞癌中的表达与临床病理特点的关系。方法采用荧光定量PCR法检测60例食管鳞癌患者的食管鳞癌组织、癌旁组织和正常食管组织中c-myc、PTEN、p33/ING1和P-gp/MDR1的表达水平。分析它们在... 目的研究C-myc、PTEN、p33/ING1和P-gp/MDR1在食管鳞癌中的表达与临床病理特点的关系。方法采用荧光定量PCR法检测60例食管鳞癌患者的食管鳞癌组织、癌旁组织和正常食管组织中c-myc、PTEN、p33/ING1和P-gp/MDR1的表达水平。分析它们在食管鳞癌浸润、分化、转移时表达的差异性及其相关性。结果 C-myc和P-gp/MDR1在正常食管组织、癌旁组织、食管鳞癌组织中的表达逐渐升高(P<0.05)。PTEN和p33/ING1在正常食管组织、癌旁组织、食管鳞癌组织中的表达逐渐降低(P<0.05)。C-myc在有淋巴结转移、低分化、浸润深的食管鳞癌组织中的表达高,差异有统计学意义(P<0.05)。PTEN和p33/ING1在有淋巴结转移、低分化、浸润深的食管鳞癌组织中的表达低,差异有统计学意义(P<0.05)。P-gp/MDR1的阳性表达与食管鳞癌组织的分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移差异无统计学意义(P>0.05)。结论 C-myc和PTEN的协同作用共同参与了食管鳞癌的发展、浸润和转移。联合检测癌基因c-myc、抑癌基因PTEN,p33/ING1和P-gp/MDR1基因在食管鳞癌组织中的表达可能为临床诊断病情发展程度、化疗治疗疗效、预后等提供指导意义。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 C-MYC PTEN P33/ing1 P-gp/MDR1
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ING4基因对人胃癌细胞SGC-7901生物行为的影响 被引量:8
9
作者 黄俊琼 孙万邦 +1 位作者 张海峰 杨吉成 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期612-614,617,共4页
目的:研究人ING4对人胃癌细胞SGC-7901的影响,探讨其作用机制。方法:将重组腺病毒质粒pAd-ING4用PacI线性化,经脂质体转染QBI-293A细胞,获得重组病毒Ad-ING4。Ad-ING4感染人SGC-7901细胞,RT-PCR及Western blot分析ING4和p21表达,MTT法检... 目的:研究人ING4对人胃癌细胞SGC-7901的影响,探讨其作用机制。方法:将重组腺病毒质粒pAd-ING4用PacI线性化,经脂质体转染QBI-293A细胞,获得重组病毒Ad-ING4。Ad-ING4感染人SGC-7901细胞,RT-PCR及Western blot分析ING4和p21表达,MTT法检测Ad-ING4对细胞生长的影响,激光共聚焦显微镜检测细胞凋亡。结果:Ad-ING4感染后,SGC-7901细胞中有ING4 mRNA和蛋白质表达,细胞生长受到明显抑制,与野生型SGC-7901细胞相比,p21表达水平增高,细胞凋亡率明显增高,P<0.05。结论:ING4可通过上调p21表达发挥抑制SGC-7901细胞生长、诱导细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 ing4 AD-ing4 人SGC-7901细胞 P21
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重组人源化ING4基因的构建及其对肺癌NCI-H460细胞生长抑制作用 被引量:3
10
作者 段光军 韩志强 +5 位作者 林云霞 杨鹏 胡华成 盛伟华 王金志 杨吉成 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期942-945,共4页
目的:构建重组人源化hING4基因并探究其对肺癌细胞的生长抑制效应。方法:以pcDNA3.0-mING4重组质粒为模板,通过定点突变技术构建带有绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒Ad-hING4基因。用荧光显微镜和RT-PCR法检测hING4在肺癌细胞中的表达;We... 目的:构建重组人源化hING4基因并探究其对肺癌细胞的生长抑制效应。方法:以pcDNA3.0-mING4重组质粒为模板,通过定点突变技术构建带有绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒Ad-hING4基因。用荧光显微镜和RT-PCR法检测hING4在肺癌细胞中的表达;Western印迹法检测hING4对肺癌细胞中Bax、Bcl-2表达的影响;集落形成试验和FCM法检测hING4对肺癌细胞增殖和凋亡影响。结果:基因测序和PCR结果提示成功构建人源化Ad-hING4基因;并能在肺癌细胞中表达,对肺癌细胞有细胞毒作用;Western印迹法检测结果提示基因在上调Bax表达同时下调Bcl-2的表达;集落形成试验、FCM检测结果提示hING4基因可抑制肺癌细胞增殖并诱导凋亡。结论:成功构建了Ad-hING4基因,并能在体外抑制肺癌细胞生长。 展开更多
关键词 肺肿瘤 ing4蛋白 诱变 突点 基因 肿瘤抑制
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腺病毒载体介导的ING4基因对MG-63人骨肉瘤细胞的抑制作用 被引量:8
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作者 井莹莹 杨吉成 +6 位作者 缪竞诚 盛伟华 胡志清 单云波 刘铁连 韩亚丽 包婉蓉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期234-239,共6页
目的:用人源化改造的鼠肿瘤生长抑制因子(mING4)基因构建的腺病毒表达载体(Ad-ING4)研究对MG-63人骨肉瘤细胞的抑制作用。方法:以pcDNA3.0-mING-4重组质粒为模板,通过基因定点突变技术对mING4基因进行人源化改造,采用腺病毒载体的基因... 目的:用人源化改造的鼠肿瘤生长抑制因子(mING4)基因构建的腺病毒表达载体(Ad-ING4)研究对MG-63人骨肉瘤细胞的抑制作用。方法:以pcDNA3.0-mING-4重组质粒为模板,通过基因定点突变技术对mING4基因进行人源化改造,采用腺病毒载体的基因重组和体外包装技术获得表达与人ING-4氨基酸序列相同的重组腺病毒子(Ad-ING4),感染MG-63细胞,用荧光显微镜、RT-PCR法检测ING4在MG-63细胞中的转录和表达;MTT法和流式细胞技术检测ING4基因表达对MG-63细胞的生长抑制和凋亡效应;荧光共聚焦显微镜观察MG-63细胞凋亡的形态学变化;半定量RT-PCR法检测ING4基因表达对MG-63细胞中的Bax、Bcl-2基因表达的影响。结果:基因测序和PCR分析结果显示,人源化改造的小鼠ING4分子氨基酸序列与人ING4分子完全相同,成功构建了Ad-ING4腺病毒表达载体,在MG-63细胞中ING4基因的表达对MG-63细胞增殖有明显抑制作用,并可诱导细胞凋亡,出现典型细胞凋亡形态学变化,ING4基因表达可通过上调细胞中Bax和下调Bcl-2基因表达诱导细胞凋亡。结论:转染ING4基因可明显抑制MG-63人骨肉瘤细胞的生长,诱导细胞凋亡,该现象可能是通过改变Bax,Bcl-2表达水平来发挥抗肿瘤作用的。 展开更多
关键词 ing4基因 腺病毒载体 MG-63人骨肉瘤细胞 凋亡
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大肠癌中抑癌基因p33/ING1 mRNA的表达及意义 被引量:3
12
作者 王自强 蔡志民 余佩武 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期349-351,共3页
目的 了解p33/ING1表达与大肠癌临床病理特征的关系及其可能作用机制。方法 采用逆转录PCR检测 5 2例散发性大肠癌癌组织及正常大肠粘膜中ING1的表达。结果 在大肠癌组织中p33/ING1mRNA表达较正常粘膜明显减弱 ( 30 /5 2 ,5 7.7% ) ,... 目的 了解p33/ING1表达与大肠癌临床病理特征的关系及其可能作用机制。方法 采用逆转录PCR检测 5 2例散发性大肠癌癌组织及正常大肠粘膜中ING1的表达。结果 在大肠癌组织中p33/ING1mRNA表达较正常粘膜明显减弱 ( 30 /5 2 ,5 7.7% ) ,p33/ING1的低表达与肿瘤的Duke’s分期及淋巴结转移显著相关。 展开更多
关键词 结直肠癌 抑癌基因 ing1 RT-PCR 大肠癌 P33/ing1 MRNA
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ING4基因真核表达载体的构建及其功能 被引量:12
13
作者 王金志 缪竞诚 +1 位作者 盛伟华 杨吉成 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期383-386,F0002,共5页
目的:构建真核表达载体pcDNA3.0-ING4,观察ING4基因对人肝癌SMMC7721细胞周期及凋亡的影响。方法:小鼠肝组织经RT-PCR扩增,构建真核表达载体pcDNA3.0-ING4,分别用双酶切、PCR、基因测序进行鉴定,将其转导进入人肝癌SMMC7721细胞,检测ING... 目的:构建真核表达载体pcDNA3.0-ING4,观察ING4基因对人肝癌SMMC7721细胞周期及凋亡的影响。方法:小鼠肝组织经RT-PCR扩增,构建真核表达载体pcDNA3.0-ING4,分别用双酶切、PCR、基因测序进行鉴定,将其转导进入人肝癌SMMC7721细胞,检测ING4基因的表达情况及其对细胞周期的影响,应用荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜观察细胞凋亡情况。结果:RT-PCR产物为约750 bp的条带,基因测序正确,转导进入人肝癌细胞株SMMC7721后可延长G2期,其凋亡率(23.66%)明显高于对照组(13.75%)。结论:成功分离得到了小鼠ING4基因并成功构建真核表达载体pcDNA3.0-ING4,该质粒转染人肝癌SMMC7721细胞后可延长G2期并可促使细胞凋亡。 展开更多
关键词 ing4基因 真核表达载体 基因构建 基因功能 细胞凋亡 肝癌
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食管癌中候选抑癌基因ING1突变的研究 被引量:7
14
作者 陈利生 高枫 +2 位作者 韦建宝 松原长秀 田中纪章 《西部医学》 2004年第2期101-104,共4页
目的 探讨候选抑癌基因ING1在食管癌发生、发展的作用。方法 用逆转录PCR (RT PCR)和免疫组织化学技术分别检测 3 1例食管鳞状细胞癌 (ESCC)中ING1mRNA和蛋白的表达情况 ;直接测序法检测RT PCR产物的基因变异 ;将染色体 13 q末端的微... 目的 探讨候选抑癌基因ING1在食管癌发生、发展的作用。方法 用逆转录PCR (RT PCR)和免疫组织化学技术分别检测 3 1例食管鳞状细胞癌 (ESCC)中ING1mRNA和蛋白的表达情况 ;直接测序法检测RT PCR产物的基因变异 ;将染色体 13 q末端的微卫星位点作杂合性缺失 (LOH)分析。 结果  ( 1)几乎所有的肿瘤组织和相应的正常组织都有ING1mRNA表达 ,肿瘤组织中 ,一些表达ING1a少些 ,一些表达ING1b少些 ,但两亚型之间没有明显差别。( 2 )ING1蛋白的表达在肿瘤组织中均为阴性 ,而相应的正常组织中均为阳性。 ( 3 )在 3 1例中发现 4例为体细胞错义突变 ,2例为隐匿突变。 ( 4 ) 3 1例中有 17例 ( 5 5 % )出现LOH ,每一个位置的LOH的发生频率 >3 9%。结论 食管癌中ING1基因的突变和杂合性缺失可能影响它的转录和表达 ,它的表达减少与食管癌的发生、发展有关。 展开更多
关键词 食管癌 基因ing1 突变 杂合性缺失
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ING直销银行金融服务营销中的价值主张与价值共同创造研究 被引量:2
15
作者 王桂琴 曾勇 《管理学报》 CSSCI 北大核心 2015年第5期765-771,共7页
选取ING Direct Canada和ING Direct USA两家直销银行1997~2007年在北美的发展历程,分析ING Direct秉持的营销理念和价值主张,重点分析ING Direct金融服务营销的价值创造逻辑、要点以及优势在其金融服务活动中的体现,探讨了案例企业服... 选取ING Direct Canada和ING Direct USA两家直销银行1997~2007年在北美的发展历程,分析ING Direct秉持的营销理念和价值主张,重点分析ING Direct金融服务营销的价值创造逻辑、要点以及优势在其金融服务活动中的体现,探讨了案例企业服务营销对社会理财观念和行为的影响,为我国金融业服务营销理念和经营模式的变革提供思路和参考。 展开更多
关键词 金融服务营销 价值主张 价值共同创造 ing DIRECT
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mING基因的腺病毒载体的构建与表达 被引量:4
16
作者 章春花 张海峰 +4 位作者 盛伟华 王金志 叶震敏 杨吉成 缪竞诚 《苏州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第4期547-549,567,共4页
目的构建鼠ING4(肿瘤生长抑制因子4)的腺病毒载体,获得鼠ING4(mING4)重组腺病毒子,为ING4进行肿瘤的基因治疗奠定基础。方法以pcDNA3.0-mING4重组质粒为模板,PCR扩增mING4,酶切连接到带有GFP标记的pAdTrack-CMV质粒上,PmeI线性化重组质... 目的构建鼠ING4(肿瘤生长抑制因子4)的腺病毒载体,获得鼠ING4(mING4)重组腺病毒子,为ING4进行肿瘤的基因治疗奠定基础。方法以pcDNA3.0-mING4重组质粒为模板,PCR扩增mING4,酶切连接到带有GFP标记的pAdTrack-CMV质粒上,PmeI线性化重组质粒pAdTrack-CMV-mING4,与腺病毒质粒pAdeasy-1共转化BJ5183细菌,获得重组腺病毒表达载体pAdeasy-1-pAdTrack-CMV-mING4,经PacI线性化后转染293细胞,收获腺病毒重组病毒子,RT-PCR鉴定,并用MTT法检测mING4对肝癌细胞SMMC7721的作用。结果成功构建mING4的重组腺病毒表达载体pAdeasy-1-pAdTrack-CMV-mING4,获得了mING4重组病毒子。结论mING4的重组腺病毒表达载体可抑制SMMC7721细胞的生长。 展开更多
关键词 ing4 腺病毒载体 构建 鉴定
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散发性结直肠癌组织p33ING1b启动子甲基化情况及其意义 被引量:3
17
作者 张磊昌 何纯钢 +5 位作者 曹云飞 钟武 钟世彪 龙军先 黄永红 陈利生 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第14期1617-1620,共4页
目的检测散发性结直肠癌组织p33ING1b启动子甲基化情况,探讨p33ING1b在散发性结直肠癌中转录抑制的可能机制。方法选择2008年10月—2012年3月在广西医科大学第一附属医院结直肠肛门外科住院的散发性结直肠癌患者63例,收集其癌组织及相... 目的检测散发性结直肠癌组织p33ING1b启动子甲基化情况,探讨p33ING1b在散发性结直肠癌中转录抑制的可能机制。方法选择2008年10月—2012年3月在广西医科大学第一附属医院结直肠肛门外科住院的散发性结直肠癌患者63例,收集其癌组织及相应癌旁组织切除标本;同时选择在我院行吻合器痔上黏膜环切术(PPH)患者13例,收集其术后痔上黏膜组织。采用巢式-甲基化特异性PCR(nMSP法)检测p33ING1b启动子甲基化情况,RT-PCR检测癌组织p33ING1b mRNA表达水平;采用5-氮-2-脱氧胞苷(5-aza-dC)对人结直肠癌细胞株DLD-1、Caco-2进行去甲基化干预实验。结果癌组织p33ING1b启动子甲基化阳性率为82.5%(52/63),癌旁组织为34.2%(27/63),痔上黏膜组织未检测出p33ING1b启动子甲基化,癌组织p33ING1b启动子甲基化阳性率高于癌旁组织和痔上黏膜组织(χ2=21.21,P<0.001;χ2=33.98,P<0.001)。不同性别、年龄、肿瘤位置、分化程度及有无淋巴结转移、远处转移患者癌组织p33ING1b启动子甲基化阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);不同Dukes分期患者癌组织p33ING1b启动子甲基化阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。p33ING1b启动子甲基化癌组织p33ING1b mRNA相对表达量为(0.62±0.15),低于p33ING1b启动子非甲基化癌组织的(0.75±0.17)(t=2.553,P<0.05)。5-aza-dC干预后,人结直肠癌细胞株DLD-1、Caco-2的p33ING1b启动子甲基化均被逆转,且p33ING1b mRNA相对表达量较干预前升高(P<0.05)。结论 p33ING1b启动子甲基化与散发性结直肠癌存在关联,并可能通过抑制p33ING1b mRNA的表达参与结直肠癌的发生和发展。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 P33ing1B 甲基化 脱氧胞苷
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腺病毒介导的人ING4基因诱导C6鼠胶质瘤细胞凋亡 被引量:4
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作者 赵耀东 缪竞诚 +4 位作者 张海峰 苗莉 盛伟华 谢宇峰 杨吉成 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期33-39,共7页
目的:研究肿瘤抑制基因人ING4(inhibitor of growth family,member4)对C6鼠胶质瘤细胞的促凋亡作用。方法:将携有绿色荧光蛋白(GFP)腺病毒空载体Ad及重组腺病毒Ad-hING4-His(由本科室构建)分别感染C6细胞,RT-PCR法检测hING4的转录,Weste... 目的:研究肿瘤抑制基因人ING4(inhibitor of growth family,member4)对C6鼠胶质瘤细胞的促凋亡作用。方法:将携有绿色荧光蛋白(GFP)腺病毒空载体Ad及重组腺病毒Ad-hING4-His(由本科室构建)分别感染C6细胞,RT-PCR法检测hING4的转录,Western-blotting法检测目的蛋白的表达。并观测hING4基因表达对C6胶质瘤细胞的作用,用MTT法绘制生长曲线,计算抑瘤率。再取重组腺病毒Ad-hING4-His及空腺病毒Ad作用后的C6细胞分别行激光共聚焦显微镜观察凋亡小体、透射电镜观察亚细胞结构的变化,抽提基因组DNA行琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪检测。结果:Ad-hING4-His感染C6细胞后,RT-PCR及Western-blotting结果提示有目的基因的转录和表达。hING4基因表达可以显著抑制C6细胞生长。激光共聚焦观察可见明显核断裂、透射电镜可见实验组细胞呈凋亡表现、基因组DNA电泳呈现梯形条带,流式细胞仪检测有明显AP峰,凋亡率达18.1%。结论:hING4可以通过促进细胞凋亡作用而显著抑制C6细胞的增殖和生长。 展开更多
关键词 ing4 腺病毒载体 C6鼠胶质瘤细胞 凋亡
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ING4基因的克隆及其诱导HeLa细胞凋亡的实验研究 被引量:2
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作者 王金志 缪竞诚 +1 位作者 盛伟华 杨吉成 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期127-131,共5页
目的:分离小鼠ING4基因并构建真核表达载体pcDNA3.0-ING4,观察ING4基因转染人宫颈癌HeLa细胞后对细胞凋亡的影响。方法:应用RT-PCR技术从小鼠肝组织中扩增得到ING4cDNA。利用DNA重组技术构建真核表达载体pcDNA3.0-ING4并用双酶切、PCR... 目的:分离小鼠ING4基因并构建真核表达载体pcDNA3.0-ING4,观察ING4基因转染人宫颈癌HeLa细胞后对细胞凋亡的影响。方法:应用RT-PCR技术从小鼠肝组织中扩增得到ING4cDNA。利用DNA重组技术构建真核表达载体pcDNA3.0-ING4并用双酶切、PCR、基因测序进行鉴定,然后利用阳离子脂质体lipo-fectamine将其转染HeLa细胞,用RT-PCR检测ING4基因的表达情况,应用荧光显微镜(Hoechst33258染色)、激光扫描共聚焦显微镜和流式细胞仪观察细胞凋亡情况。结果:RT-PCR产物为约750bp的条带,构建的真核表达载体pcDNA3.0-ING4经双酶切、PCR鉴定均出现750bp大小的条带,基因测序正确,Hoechst33258染色发现pcDNA3.0-ING4转染HeLa细胞的凋亡率(21.25%)明显高于对照组pcDNA3.0转染HeLa细胞的凋亡率(8.91%,P<0.01)。共聚焦显微镜也观察到了典型的细胞凋亡。细胞周期检测显示S期细胞所占百分数pcD-NA3.0-ING4转染组高于pcDNA3.0转染组。结论:分离得到了小鼠ING4基因并成功构建真核表达载体pcD-NA3.0-ING4,初步研究发现该基因转染HeLa细胞后可促使细胞凋亡。 展开更多
关键词 基因 ing4 细胞转染 HELA细胞
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ING4及IL-24双基因共表达腺病毒载体对MG-63人骨肉瘤细胞体外抑癌增效作用研究 被引量:8
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作者 王家融 韩亚丽 +2 位作者 缪竞诚 盛伟华 杨吉成 《北华大学学报(自然科学版)》 CAS 2013年第3期294-298,共5页
目的用人肿瘤生长抑制因子(mING4)及人白介素24(IL-24)基因构建腺病毒双基因共表达载体(Ad-ING4-IL-24),并设Ad-ING4和Ad-IL-24单基因对照,研究双基因共表达载体对MG-63人骨肉瘤细胞体外抑癌增效作用.方法首先将已构建成功的Ad-ING4-IL-... 目的用人肿瘤生长抑制因子(mING4)及人白介素24(IL-24)基因构建腺病毒双基因共表达载体(Ad-ING4-IL-24),并设Ad-ING4和Ad-IL-24单基因对照,研究双基因共表达载体对MG-63人骨肉瘤细胞体外抑癌增效作用.方法首先将已构建成功的Ad-ING4-IL-24,Ad-ING4及Ad-IL-24腺病毒感染QBI-293A细胞,经多轮扩增后获得高滴度的病毒子,测病毒效价后分别以100 MOI剂量感染MG-63细胞,用荧光显微镜、RT-PCR法检测ING-4及IL-24在MG-63细胞中的转录和表达;MTT法检测ING-4及IL-24基因表达对MG-63细胞的生长抑制效应;半定量RT-PCR法检测ING4及IL-24基因表达对MG-63细胞中的Bcl-2,Bax,Caspase3,p21,CD34等相关基因表达的影响.结果获得了高滴度的重组腺病毒Ad-ING4-IL-24,Ad-ING4,Ad-IL-24和Ad-GFP;治疗后MG-63细胞中ING-4及IL-24双基因表达对MG-63细胞增殖有明显抑制作用,ING-4及IL-24基因表达可通过上调细胞中Bax,Caspase3,p21和下调Bcl-2,CD34基因表达诱导细胞凋亡.在病毒子剂量为100 MOI时,Ad-ING4-IL-24对MG-63人骨肉瘤细胞抑制作用比对Ad-ING4和Ad-IL-24抑制效果更为显著.结论腺病毒介导的ING4或/和IL-24基因可明显抑制MG-63人骨肉瘤细胞的生长,且Ad-ING4-IL-24双基因比Ad-ING4和Ad-IL-24单基因的抑制效果更为显著,该现象可能是通过改变Bcl-2,Bax,Caspase3,p21,CD34基因表达水平来发挥抗肿瘤作用的. 展开更多
关键词 ing4基因 IL-24基因 腺病毒载体 MG-63人骨肉瘤细胞 肿瘤抑制
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