基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术结合多元统计分析比较不同品种牛膝药材化学成分的差异

目的建立超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(ultra performance liquid chromatography quadrupole time of flight mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS/MS)结合多元统计分析技术的分析方法,比较不同品种牛膝的化学成分差异。方法基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对怀牛膝Achyranthes bidentata、川牛膝Cyathula officinalis、红牛膝Cyathula capitata和土牛膝Achyranthes aspera的化学成分进行分析与鉴别,并运用多元统计分析筛选不同品种牛膝的差异性成分。结果共初步指认出230种化学成分,其中皂苷类81种、生物碱类26种、甾酮类12种、有机酸类75种、木脂素类19种和黄酮类17种。根据变量重要性投影(variable importance in projection,VIP)值>1,t检验(P<0.05)从4种牛膝中共筛选出25个化学标志物。其中,竹节参皂苷、牛膝皂苷在怀牛膝中占比居多;竹节参皂苷IVa在红牛膝中的占比最高;甾醇、黄酮醇、有机酸和糖苷类成分在川牛膝中的占比最高;齐墩果烷型皂苷和酪胺类生物碱类成分则在安徽土牛膝中占比最多。结论该方法快速、全面地对牛膝植物资源的成分进行系统分析,为牛膝的品种分类鉴别和资源开发利用提供了基础。

石刁柏真伪的红外快速鉴别与总皂苷、总酚酸含量测定及抗氧化活性分析

使用傅里叶红外光谱法对石刁柏样品进行定性研究,并对石刁柏进行总皂苷、总酚酸、DPPH+清除率及抗氧化活性测定。结果显示14批石刁柏样品的红外图谱峰型一致,相似度系数均在98.7%以上,可断定均为正品石刁柏;证明红外光谱技术可快速鉴别石刁柏的真伪。14批石刁柏样品的总皂苷、总多酚含量稳定,最高分别为6.340 mg·g^(-1)、2.0450 mg·g^(-1);各批次石刁柏对DPPH+均有清除作用,最佳IC50为4.57mg·mL^(-1),代表石刁柏总抗氧化能力的Vc浓度最大为2.4110 mg·mL^(-1);对测定结果进行pearson相关性分析和聚类分析,可将14批石刁柏分为5类;总皂苷、总酚酸与石刁柏的总抗氧化能力密切相关,相关系数值具有非常显著的正相关性,石刁柏具有较好的抗氧化能力。本研究为控制石刁柏药材质量、保证其安全使用和后期开发利用提供理论支持。

芦笋中甾体皂苷结构和功能特性的研究进展

对其药用功效有显著贡献的甾体皂苷类物质的提取方法、分离纯化方法、结构鉴定方法以及国内外对芦笋中甾体皂苷的结构鉴定方面的研究报道进行综述。重点归纳已报道的27种芦笋甾体皂苷的结构和功能特性,并分析和讨论今后的主要研究方向。

芦笋茎皮化学成分的研究

从芦笋茎皮中分得７个化合物，经理化常数测定和光谱分析，分别鉴定为：十六烷酸 （Ⅰ），二十四烷酸（Ⅱ），β－谷甾醇（Ⅲ），胡萝卜苷（Ⅳ），亚莫皂苷元－３－Ｏ－Ｌ－鼠李吡喃糖（１→４）β－Ｄ－ 葡萄吡喃糖苷（Ⅴ），ａｓｐａｒａｓａｐｏｎｉｎｌ（Ⅵ），ａｓｐａｒａｓａＰｏｎｉｎＩ（ Ⅵ）。 Ⅴ为首次从该属植物中分得的螺 旋皂苷。

超声波辅助提取芦笋总皂苷的工艺

采用Box-Behnken设计和响应面分析法,对芦笋总皂苷的超声辅助提取工艺进行优化。以提取温度、提取时间及超声功率为自变量,芦笋总皂苷得率为响应值,研究各自变量及其交互作用对超声波辅助提取法提取芦笋总皂苷得率的影响。结果表明:最佳工艺条件为乙醇体积分数95%、提取温度71℃、提取时间23min、超声功率70W、提取次数2次,在此条件下获得总皂苷的提取率为23.96mg/g。

芦笋下脚料皂苷超声提取工艺

采用超声强化技术对芦笋下脚料中的皂苷成分进行提取,通过两轮均匀试验对提取工艺进行优化。结果得到的最优提取工艺为液料比1:1、温度30℃、占空比0.4:1.6、功率200W、提取时间30min、pH5.05、酒精体积分数70%,该工艺条件下单次提取得率为7.5%(干基);两次提取累积回收率达到93.37%,3次提取累积回收率达到98.40%。在2L循环超声提取装置中的放大实验表明,两次提取累积回收率达到97.49%,3次可提取完全。表明超声强化方法适用于芦笋下脚料中皂苷的提取。

地榆药材中总皂苷及地榆皂苷-Ⅰ的含量测定

目的建立地榆药材总皂苷及地榆皂苷-I含量的测定方法，并对不同批次地榆药材中总皂苷和地榆皂苷-I的含量进行测定。方法采用优化条件的紫外-可见分光光度法建立了地榆药材中总皂苷的含量测定方法，采用HPLC—ELSD法测定地榆药材中地榆皂苷-I的含量。结果优选出总皂苷含量测定的显色体系为香草醛-冰醋酸-高氯酸，反应条件为15％香草醛，1．0mL高氯酸，80℃反应15min，经测定，地榆药材中总皂苷含量为7．25％～8．41％；HPLC—ELSD法9n4得地榆药材中地榆皂苷-I的含量为5．21％～6．18％。结论香草醛-冰醋酸-高氯酸法以及HPLC—ELSD法快速、简便、准确、重现性良好，分别适用于测定地榆药材中总皂苷和地榆皂苷-I的含量。

响应面法优化超声提取芦笋总皂苷

利用响应面法对超声提取芦笋总皂苷的工艺进行优化。实验研究了超声条件下影响芦笋总皂苷得率的因素,包括乙醇浓度、料液比、超声时间、超声温度,并通过响应面法优化提取工艺。根据中心组合设计原理采用三因素三水平的响应面分析法,得出了超声提取芦笋总皂苷的最佳工艺条件为:料液比1∶15(W/V),乙醇浓度74%,超声时间54min,超声温度50℃,此时芦笋总皂苷得率为13.06%,接近于模型预测值13.18%。

黄花草木犀总皂苷体外抗肿瘤作用研究

目的以MCF-7、PC3M、ACC、A549、SW620几种肿瘤细胞株为研究对象,体外加入黄花草木犀总皂苷,研究黄花草木犀总皂苷对几种肿瘤细胞株的增殖抑制作用。方法 CCK-8法检测黄花草木犀总皂苷对5种肿瘤细胞株的增殖抑制作用。结果黄花草木犀总皂苷对MCF-7、PC3M、ACC、A549、SW620肿瘤细胞株均有细胞毒作用,但对正常细胞株的毒性作用则明显较低,对MCF-7、PC3M、ACC、A549、SW620作用72 h时的IC50分别为0.45、0.73、1.05、1.17、1.19 mg/m L。结论黄花草木犀总皂苷能有效抑制5种肿瘤细胞株增殖,且对正常细胞株毒性较小,筛选出对黄花草木犀总皂苷最敏感的肿瘤细胞株为MCF-7、PC3M肿瘤细胞,值得进一步开展基础及临床研究。

金盏菊总皂苷提取及其抗氧化、降血脂作用研究

通过对金盏菊总皂苷的实验室提取工艺及其抗氧化、降血脂作用研究,结果表明:金盏菊总皂苷较为理想的实验室提取工艺为:提取温度75℃,提取时间55 min,乙醇浓度75%,料液比1∶35。在此条件下,总皂苷的提取率为2.01%,总固物中总皂苷含量达到35.4%。金盏菊总皂苷对O2.、.OH皆表现出较好的清除效果,清除率分别达到47.29%和88.42%;小鼠血清中的TC、TG、LDL-C与模型组相比,均有一定程度的下降。

芦笋总皂苷对人乳腺肿瘤细胞MCF-7体外增殖的影响

为了研究芦笋总皂苷对人乳腺肿瘤细胞MCF-7体外增殖的影响,利用超声波辅助法提取芦笋总皂苷,MTT法检测芦笋总皂苷对人乳腺肿瘤细胞MCF-7的药物敏感性.结果表明,质量浓度为150,350 mg/L的芦笋总皂苷对乳腺肿瘤细胞的增殖具有促进作用;质量浓度750mg/L时,具有抑制作用,抑制率为19.46%,之后抑制率随质量浓度增加而增加;质量浓度1 550mg/L,抑制作用最大,抑制率为54.14%.说明低质量浓度的芦笋总皂苷对人乳腺肿瘤细胞MCF-7的体外增殖具有促进作用,高质量浓度具有抑制作用并呈剂量依赖性.

唐山地区3种豆科牧草种子破除硬实方法的研究

[目的]比较苜蓿、草木樨、沙打旺种子硬实破除的方法,为生产实践中破除3种牧草种子硬实提供参考。[方法]对3种牧草的种子进行浓硫酸、氢氧化钠、硝酸钾3种处理,并对发芽率和一些生理指标进行研究。[结果]各种处理都不同程度提高了种子的出苗率。[结论]最适宜于苜蓿、草木樨、沙打旺破除硬实的方法是0.10 mol/L硝酸钾溶液浸种12 h,0.05 mol/L硝酸钾溶液浸种12 h,0.40 mol/L氢氧化钠溶液浸种2 h。

正交试验优选超声提取芦笋总皂苷的工艺

目的:优选超声提取芦笋总皂苷的最佳工艺。方法:以高氯酸作为显色剂,用紫外分光光度法测定芦笋中总皂苷的含量,并以提取率为评价指标,采用单因素实验和正交试验优选最佳提取工艺。结果:芦笋总皂苷超声提取的最佳工艺为乙醇浓度70%,料液比1:15(W/V),超声时间50 min,超声温度40℃。结论:该提取工艺可行,为芦笋总皂苷的进一步研究提供了依据。

黄花草木樨MoSOS1基因克隆及表达分析

植物质膜Na+/H+逆向转运蛋白基因SOS1是植物耐盐性必需的基因之一,在抵御盐胁迫过程中发挥十分重要的作用。以黄花草木樨叶片总RNA为模板,通过RT-PCR结合RACE方法克隆得到黄花草木樨MoSOS1基因全长序列,命名为MoSOS1。序列分析表明该基因全长为3 931 bp,开放阅读框(ORF)为2 874 bp,编码957个氨基酸,分子量为112.8 k D,等电点为5.31。TMHAM软件跨膜区的预测分析表明,黄花草木樨MoSOS1蛋白具有8个跨膜结构区域,N端和C端都位于细胞外。氨基酸序列分析表明,MoSOS1蛋白含有1个Na+/H+Exchanger superfamily和一个c NMP(Cyclic nucleotide-monophosphate)结合位点以及1个CAP_ED(Catabolite gene activator protein-effector domain)superfamily结构域。生物信息预测显示,MoSOS1的编码蛋白为不稳定酸性蛋白,不存在信号肽,二级结构多为α-螺旋和无规则卷曲。荧光实时定量RT-PCR分析表明:随着Na Cl浓度的增加,黄花草木樨地上部和根中MoSOS1基因表达水平呈增加趋势,根中表达量大于地上部,表明MoSOS1基因的表达受盐胁迫诱导和调节。

黄花草木樨总皂苷提取工艺优化研究

研究黄花草木樨叶中总皂苷的最佳提取工艺。以黄花草木樨中总皂苷的含量为标准,采用超声提取工艺,用正交实验设计对黄花草木樨总皂苷提取工艺中的温度、溶剂、提取时间、料质比4个因素进行筛选,选定最佳工艺条件。黄花草木樨总皂苷最佳提取工艺为乙醇浓度75%、料液比1∶25、提取时间45min、提取温度70℃。所选工艺方法简单、稳定,提取效果好。

氢氧化钠水解地榆总皂苷制备地榆皂苷化合物Ⅳ的工艺优选

目的:优化地榆总皂苷的碱水解工艺,提高水解产物地榆皂苷化合物Ⅳ的含量。方法:采用正交试验设计,考察水解时间、氢氧化钠体积分数、料液比、水解温度对地榆总皂苷水解过程的影响。结果:影响水解的主次因素依次是料液比>氢氧化钠体积分数>水解温度>水解时间,优选的最佳工艺为料液比1∶80;氢氧化钠体积分数20%,水解时间3.5 h,水解温度82℃。结论:采用优化后的水解条件能够得到含量较高的地榆皂苷化合物Ⅳ,适合工业化生产。

草木犀翻压配施化肥对烤烟土壤酶活性的影响

当前的农业栽培高度依赖化肥,致使土壤的微生态环境不断恶化,为了改善土壤的生物学特性,培肥地力,通过田间试验研究了草木犀(一年生)作为绿肥或配施化肥对烤烟土壤蔗糖酶、脲酶、磷酸酶、过氧化氢酶活性的影响。结果显示,草木犀翻压能够显著提高4种酶的活性,并且土壤酶活性随着绿肥翻压量的提高而增加,与空白对照(CK2)相比,草木犀第3批(9月18日翻压,生物量为32 180 kg/hm2)翻压的酶活性增加最大,最大增量分别为:蔗糖酶6月48. 4%,脲酶4月91. 5%,磷酸酶8月72. 4%,过氧化氢酶10月51. 6%;绿肥与化肥配施的处理中,从整体上看,绿肥+化肥的处理均高于对照(CK1,仅施化肥),第3批翻压绿肥+常规施肥的处理土壤酶活性的提升效果均好于绿肥+减氮30%的处理,第1批(8月3日翻压,生物量为19 350 kg/hm2)和第2批(8月18日,生物量为22 930kg/hm2)翻压,绿肥+常规施肥与绿肥+减氮30%的处理土壤酶活性多数差异不显著,脲酶和磷酸酶表现尤为突出;烟株的不同生育期内酶的动态变化特征表现为:翻压绿肥和绿肥与化肥配施的各处理土壤蔗糖酶、脲酶、磷酸酶均在旺长期(6月)出现峰值,过氧化氢酶在烟叶采收前期(8月)出现峰值。以上结果说明,翻压草木犀后土壤代谢活跃,有利于土壤的营养转化,为烤烟正常生长提供所需的营养。

金盏菊花提取物粉喷雾干燥工艺条件研究

目的采用喷雾干燥法制备金盏菊提取物粉。方法以粉体中总皂苷含量为指标,采用正交试验法,对影响粉体总皂苷含量的进风温度、进料流量、固形物含量、β-环糊精添加量进行研究,并将喷雾干燥工艺和热风干燥、冷冻干燥工艺进行比较。结果喷雾干燥最佳工艺条件为:进风温度200℃、进料流量28 mL·min^(-1)、可溶性固形物含量18%、β-环糊精量6%。该条件下制备的粉体中总皂苷含量为(34.91±0.12)%。同时,喷雾干燥的粉体中总皂苷含量较热风干燥高,喷雾干燥的干燥时间远小于冷冻干燥的时间。结论喷雾干燥是适宜的金盏菊提取物粉制备方法。

芦笋老茎皂苷对小鼠实验性高脂血症的预防作用

探究了芦笋老茎皂苷(saponins from Asparagus officinalis L.by-products,SAO)对小鼠实验性高脂血症的预防作用.小鼠先饲喂基础饲料同时预防性地给予SAO 14 d,15 d时再改以高脂饲料诱发高脂血症并继续灌胃相应剂量SAO 42 d.结果显示,和高脂对照组相比,预防性给予40,80 mg/kg和160 mg/kg的SAO都能明显降低小鼠血清总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇,但不存在明显的剂量依赖关系.SAO还能显著提高小鼠肝脏肝酯酶活性,提示通过提高肝酯酶活性来加强胆固醇清除可能是SAO调节脂代谢的途径之一;此外,SAO还能提高小鼠肝脏超氧化物歧化酶和总抗氧化能力,降低血清天冬氨酸氨基转移酶和丙氨酸氨基转移酶水平,说明SAO可能通过提高机体的抗氧化能力,缓解氧自由基对肝脏的损伤,改善肝脏的功能,从而加快脂质的代谢和清除.

芦笋食用与废弃部分皂苷含量的比较研究

目的优化芦笋皂苷提取工艺,比较芦笋食用部分和废弃部分的皂苷含量。方法采用超声提取法,以芦笋中皂苷的提取率为指标,采用单因素实验和正交实验考察乙醇浓度、料液比、提取时间和提取温度对超声法提取芦笋两部分中总皂苷的影响,并用紫外分光光度法测定皂苷在两部分中的含量。结果芦笋食用部分总皂苷最佳提取条件为提取温度为70℃,提取时间为2h,料液比为1∶15,乙醇浓度为10%,提取率为179.83mg·g-1;芦笋废弃部分总皂苷最佳提取条件为提取温度为40℃,提取时间为2.5h,料液比为1∶15,乙醇浓度为30%,提取率为117.81mg·g-1。结论经SPSS软件进行独立样本T检验,得知芦笋食用与废弃部分粗提物中皂苷的含量差异较大,需待进一步进行研究。