油茶总皂苷的抗氧化及清除自由基能力初步研究

本文对所提取的油茶总皂苷进行定性分析并测定其含量,研究了对由亚铁离子引发的卵磷脂脂质过氧化的抑制作用、清除Fenton反应生成的羟自由基的能力、清除超氧阴离子自由基的能力、对脱氧核糖氧化损伤的抑制作用,实验结果显示油茶总皂苷具有显著的抗氧化性和对脱氧核糖氧化损伤的抑制作用,对化学反应生成的的活性氧自由基具有显著的清除作用。

NO介导的油茶皂苷对在体大鼠产生的药理性预适应保护作用

目的 研究油茶皂苷 (SQS)预适应保护作用及 NO的关系。方法 以 ISO诱发大鼠心肌缺血损伤为模型 ,使用特异性 NO合成抑制剂 Methylene blue(MET)测定大鼠 ECG及 CPK活性 ,FFA和腺苷含量。结果 预适应iv SQS能有效地保护 ISO所致大鼠心肌损伤 ;先 iv MET后再给予 SQS,则 SQS对心肌损伤的保护作用明显减弱。结论 SQS对 ISO所致心肌缺血大鼠可产生药理性预适应保护作用 ,该作用由

油茶皂苷抗心肌缺血大鼠氧自由基和脂质过氧化作用

目的 以皮下注射异丙肾上腺素 (ISO)诱发大鼠心肌损伤为模型 ,观察油茶皂苷 (SQS)对心肌线粒体MDA含量、SOD、GSH Px活性的影响。方法 实验分生理盐水组 (NS组 )、ISO诱发损伤组 (I/R组 )、SQSⅠ组 (I/R +SQS 0 1mg·kg-1)和SQSⅡ组 (I/R +SQS 0 2mg·kg-1)。从阴茎静脉注射各被试药物或NS ,每天 1次 ,连续 3d。末次给药后取心肌组织行上述指标的测定。结果 I/R组MDA含量明显升高、SOD及GSH Px活性显著降低 ;SQS能对抗ISO所致上述指标的改变 ,且呈剂量依赖关系。

油茶皂苷对缺氧-复氧诱导的内皮细胞损伤及中性粒细胞黏附的影响

目的研究油茶皂苷(SQS)对缺氧-复氧诱导的内皮细胞损伤及中性粒细胞黏附的作用及可能的机制。方法建立人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺氧-复氧损伤模型,取培养细胞上清液测定LDH活性,分别测定HU-VEC存活率,中性粒细胞黏附率、线粒体丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。同法检测中性粒细胞黏附。结果缺氧-复氧可导致HUVEC损伤及中性粒细胞黏附的增加,表现为LDH活性、MDA水平及中性粒细胞黏附率显著升高,而SOD和GSH-Px活性显著下降;SQS呈浓度依赖性地对抗上述改变。结论SQS对缺氧-复氧诱导的HUVEC损伤有保护作用,其机制可能与其抗脂质过氧化和抑制白细胞黏附有关。

油茶皂甙对缺血大鼠心肌线粒体Na^+、Ca^(2+)、Mg^(2+)含量及ATPase活性的影响

目的观察大鼠心肌缺血时心肌线粒体Na +、Ca2 +、Mg2 +含量、ATPase活性的变化及油茶皂甙(SQS)对它们的影响。方法以皮下多点注射异丙肾上腺素(ISO4mg·kg-1)诱导心肌缺血损伤为模型 ,测定Na +、Ca2 +、Mg2 +含量及ATPase活性。结果心肌缺血时线粒体Mg2 + 含量明显减少 ,Na+ 、Ca2 + 含量显著增多 ;Na+ _K + _ATPase、Ca2 + _Mg2 +_ATPase活性显著下降。SQS(0 2mg·kg-1,iv)能显著对抗缺血心肌线粒体Na +、Ca2 +、Mg2 + 含量及Na+ _K + _ATPase、Ca2 + _Mg2 + _ATPase活性的上述改变。结论SQS具有抗钠钙超载的心肌细胞保护作用。

油茶皂苷对缺氧复氧所致大鼠心脏损伤的保护作用及其机制探讨

目的 :通过大鼠离体心脏 L angendoff灌流 ,观察油茶皂苷 (sasanquqsaponin,SQS)对缺氧复氧 (anoxia/reoxygenation,A/ R)损伤的保护作用及其机制。方法 :A/ R为缺氧 40 m in再给氧 30 min;SQS0 .5 mg/ L 或Gliberclam ide30 μmol/ L + SQS0 .5 mg/ L 于缺氧复氧前 15 min灌流 15 m in,分别记录心功能及测量酶活性。结果 :与 A/ R组相比 ,SQS组能增加心肌的收缩功能 ,使氧自由基清除剂超氧化物歧化酶 (SOD) ,谷胱苷肽转移酶(GSH- Px)活性增强 ,脂质过氧化产物丙二醛 (MDA )生成减少 ,降低心肌组织钙含量 ,使肌酸激酶 (CK )生成减少 ,所以 SQS对心肌 A/ R损伤具有保护作用。在加入 KATP通道阻断剂 Gliberclam ide与 SQS同时灌注时 ,发现 SQS的上述作用消失。结论 :SQS的心肌保护与 KATP通道的开放有关。

油茶粕中油茶皂苷提取纯化工艺研究

本研究探讨了油茶粕中油茶皂苷提取工艺,经过单因素和正交试验,得到油茶皂苷最佳提取工艺:提取温度60℃,时间2h,乙醇浓度65%,料液比1:20。在此条件下油茶皂苷的提取率为10.79%,经SephadexLH20纯化后,油茶皂苷的纯度可达到95.58%。

陶瓷膜微滤油茶皂苷粗提液

通过陶瓷膜微滤去除油茶籽饼粗提液中的杂质，以提高油茶籽饼中主要活性成分油茶皂苷的得率与纯度．实验结果表明，以55％乙醇超声提取油茶皂苷，抽滤后，以30g／mL的油茶皂苷进行0．5μm微滤，压力控制在0．1～0．15MPa，温度控制在40℃左右，油茶总皂苷的转移率约达89．25％，除杂率约14．5％，纯度相对较好；过滤后的透过液清澈，黄亮．作为前处理微滤，应用于工业化，具有一定的可行性．

油茶皂素大孔树脂纯化工艺优化及LC/TOF-MS分析

以市售低纯度茶皂素粗品为原料,采用AB-8大孔树脂进行纯化,得到最佳纯化工艺为30g/L粗皂素溶液上样,30%乙醇洗脱除去多数色素和部分蛋白等杂质,70%乙醇溶液主要洗脱出茶皂素,油茶皂素的得率为5 5.5%,纯度提高1.8 6倍。大孔树脂重复利用8次后,吸附和洗脱效果基本不变,放大试验证明其适合工业化生产。LC/TOF-MS分析表明油茶皂素的分子质量主要集中在1170～1304D之间,并确定了一种油茶皂素的分子式为C5 8H8 9O2 6,同时推测了其结构式。

油茶皂苷对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞ICAM-1表达的抑制作用

目的观察油茶皂苷(SQS)对脂多糖(LPS)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)ICAM-1表达的作用并探讨其作用机制。方法建立HUVECs LPS应激模型,以油茶皂苷(10.0,1.0,0.1μmol.L-1)和ERK1/2抑制剂PD98059(10.0μg.L-1)预处理细胞8h,取培养细胞上清液测定LDH活性,HUVECs分别用于测定细胞存活率及ICAM-1 mRNA和蛋白的表达。结果LPS可显著升高LDH活性,上调ICAM-1 mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。SQS呈浓度依赖性地对抗上述改变,其作用与PD98059的作用相似。结论SQS可抑制LPS诱导的HUVECs ICAM-1表达的上调,其机制可能与MAPK-ERK1/2(MEK1/2)信号转导通路有关。

热应激诱导内皮细胞与白细胞黏附及油茶皂苷的拮抗作用

目的探讨热应激时内皮细胞与白细胞黏附的改变及油茶皂苷对此影响。方法建立人脐静脉内皮细胞(HU-VECs)热应激损伤模型,以油茶皂苷(10.0,1.0,0.1μmol.L-1)预处理细胞5 h,取培养细胞上清液测定LDH活性,HUVECs分别用于测定细胞存活率,白细胞黏附率及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达。结果热应激可引起LDH活性升高,白细胞黏附率及ICAM-1表达的增加,与对照组比较,差异具有显著性(P<0.01),但细胞存活率无明显下降。油茶皂苷呈浓度依赖性地对抗上述改变,但对细胞存活率无明显影响。结论油茶皂苷可抑制热应激诱导内皮细胞与白细胞黏附的增加,其机制可能是下调ICAM-1的表达。

油茶皂苷对照品制备及高效液相色谱定量法的研究

使用大孔吸附树脂法结合重结晶制备油茶皂苷对照品,并对制备的对照品进行了不同方法的定性纯度检测,确定其是否可以作为油茶皂苷定量的标准品。同时建立香草醛浓硫酸比色法和高效液相色谱法(HPLC)定量的标准曲线,并比较两种方法。研究结果表明:制备的油茶皂苷对照品纯度高、杂质少,可作为定量油茶皂苷的标准品;建立的HPLC定量法较香草醛浓硫酸比色法测定油茶皂苷含量干扰少,准确度高,可用于油茶皂苷含量的测定。

活性炭柱层析纯化油茶皂苷的研究

本文通过选用特定的吸附柱层析活性炭纯化油茶皂苷。以总皂苷的得率及纯度为考察指标，确定活性炭吸附柱层析富集油茶总皂苷的性能、洗脱参数及再生使用情况。结果表明，水洗之后再以90％乙醇洗脱较好；香草醛．浓硫酸为检测方法检测下，总皂苷解吸得率为62．9％，总洗脱率为92．4％，纯度为50．1％以上；该类柱层析活性炭在分离纯化及脱色方面作用较显著，工艺简便、成本低，适合工业化生产。

茶皂素还原脱色法初探

实验通过还原脱色方法对茶皂素溶液进行脱色研究,取得了较好的效果。实验确定了四个参数:两种脱色剂的使用量(KBH4和NaHSO3)、pH以及脱色温度。通过响应面进行优化,最终优化的结果为:两种脱色剂KBH4、NaHSO3的添加量分别为1.2%(w/w)和2.2%(w/w),pH为4.8,脱色温度为51.0℃,该优化条件下ΔE值为31.324±0.378,得率为95.8%。使用LC-MS/MS对脱色后的样品进行测定,结果表明还原脱色法对茶皂素结构没有影响。

油茶皂素对枸橼酸致豚鼠咳嗽的影响

目的:探讨油茶皂素防治枸橼酸所致豚鼠咳嗽的作用。方法:豚鼠随机分成正常组、模型组、可待因组、油茶皂素高、中、低剂量组(125、75、25 mg·kg-1),分别连续灌胃给药7 d,最后1次给药1 h后,采用枸椽酸致豚鼠咳嗽模型,以生物信息采集系统记录咳嗽信号、录音和人工计数等方法统计咳嗽次数和咳嗽潜伏期,并对支气管进行病理切片观察。结果:与模型组咳嗽次数(51.3±9.7)次相比,油茶皂素高(31.5±8.7)次、中(38.6±8.2)次、低(35.4±3.6)次剂量组显示均能降低枸橼酸所致咳嗽次数(P<0.05);与模型组咳嗽潜伏期(35.7±25.3)s相比,只有高剂量组才延长咳嗽潜伏期(46.2±36.7)s(P<0.05)。支气管病理切片显示油茶皂素能保护黏膜上皮的完整性,明显抑制枸橼酸对黏膜组织结构的破坏,减少黏膜下层的血管充血和炎性细胞浸润。结论:油茶皂素对枸橼酸所致豚鼠有镇咳治疗作用。机制可能与其降低C-纤维受体对枸橼酸刺激敏感性及减少豚鼠支气管黏膜下层的血管充血及炎性细胞浸润有关。

油茶皂苷对LO2和HK-2细胞的毒性作用研究

目的：观察油茶皂苷（SQS）对人正常肝细胞（L02）和肾小管上皮细胞（HK-2）的细胞毒性作用，并初步探讨其毒性作用机制。方法：体外培养L02和HK-2细胞，采用MTr法评价SQS对L02和HK-2细胞的增殖抑制作用，观察不同浓度药物对乳酸脱氢酶（LDH）释放率的影响，并检测细胞裂解上清液超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）含量。结果：与阴性对照组比较，各浓度的SQs均可明显抑制L02和HK-2细胞增殖（P＜0．01），且呈浓度依赖性。在50．0～200．0mg／L范围内，SQS能明显提高L02和HK-2细胞培养上清液LDH活力（P＜0．05或P＜0．01），显著降低SOD的活力和增加MDA的含量（P＜0．01）。结论：SQS对L02和HK-2细胞有一定的细胞毒性作用，其作用机制可能是通过增加对细胞膜通透性的影响及氧化损伤而实现。

油茶子皂甙在体外的杀精子作用

在体外测试了油茶子皂甙对小白鼠和人精子的杀精子作用,并且与盖苯醇醚和醋酸苯汞的杀精作用进行了比较。结果发现,茶皂甙对小白鼠的杀精子作用(最低有效浓度=10μg/ml)比盖苯醇醚(最低有效浓度=40μg/ml)和醋酸苯汞(最低有效浓度=20μg/ml)的作用更强。但对人精子的杀精作用(最低有效浓度=100μg//ml)比盖苯醇醚(最低有效浓度=50μg/ml)更弱。还证明,人精浆可减弱茶皂甙的杀小鼠附睾精子作用。

油茶皂苷-干酪素控释片的制备及其性能研究

以油茶皂苷为主药,采用干酪素和瓜尔豆胶为控释辅料,制备油茶皂苷-干酪素控释片。研究油茶皂苷-干酪素片中油茶皂苷含量的测定方法、溶出介质对油茶皂苷-干酪素控释片释放度的影响及油茶皂苷-干酪素控释片的红外光谱,并对油茶皂苷-干酪素片体外释放动力学方程进行拟合。用香草醛-浓硫酸显色法测定pH 6.8的磷酸盐缓冲溶液作为释放介质时油茶皂苷-干酪素片中油茶皂苷的含量,回收率为98.59%。油茶皂苷-干酪素控释片在pH 6.8的磷酸盐缓冲液中,释放时间分别为3,6和12h时,其释放度分别为:23.80%,51.26%和94.77%。体外释药曲线与零级方程拟合相关性较好,相关系数(R2)为0.996。油茶皂苷、干酪素和瓜尔豆胶之间可能形成了化学键。

茶皂甙的药理实验研究

茶皂甙(SaS)20mg/kg ip能明显增加小鼠心肌营养性血流量,40mg/kg作用增强。离体兔心实验表明,SaS有负性频率、增加冠脉流量和一定的正性肌力作用。SaS还能增加小鼠耐缺氧能力,轻度减少耗氧量。

油茶皂苷对高脂血症大鼠血管内皮细胞的保护作用

目的研究油茶皂苷(SQS)对高脂血症大鼠血管内皮细胞的保护作用。方法 60只SD大鼠,随机分为SQS高、中、低剂量组、氯贝丁酯组、高脂模型组和正常组,建立大鼠高脂血症模型。连续给药14 d后检测大鼠血清血脂、氧化亚氮(NO)、氧化亚氮合酶(NOS)、血管内皮素(ET)、可溶性细胞间黏附分子(ICAM-1)和可溶性血管细胞黏附分子(VCAM-1)水平。结果与高脂模型组比较,SQS可降低高脂血症大鼠血清三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、ICAM-1、VCAM-1、ET,升高NO、cNOS,有效维持NO/ET平衡,对HDL-C、iNOS影响不明显。结论 SQS能调整脂质代谢,抑制炎症反应,并能改善高脂血症大鼠血管内皮细胞功能。