Pollen morphology in Saxifraga(Saxifragaceae) from Ny-Alesund, Svalbard, Arctic, and its taxonomic significance

Pollen morphology of eight species of Saxifraga, i.e.S, cespitosa, S. oppositifolia, S. cernua, S. nivalis, S. aizoides, S. rivularis, S. hieraciifolia, and S. hirculus, collected from Ny-Alesund, Svalbard, Arctic was examined using light and scanning electron microscopy. Pollen grains of Saxifraga species are subprolate or prolate, 3-colpate, 15.4-44.4 μm in the polar axis, 11.4 34.6 μm in the equatorial axis, and show a P/E ratio 1.19-1.40. On the basis of exine ornamentation, four pollen types, viz., the S. oppositifolia type （striate without scabrae on the muff）, S. cernua type （striate with scabrae on the muri）, S. nivalis type （microreticulate and operculum absent）, and S. cespitosa type （microechinate and operculum present）, were recognized. Hierarchical cluster analysis of the pollen morphological characters indicated that pollen morphology supports the infrageneric classification of the genus Saxifraga.

虎耳草属的资源分类及育种进展

虎耳草属(Saxifraga Tourn. ex L.)资源丰富且分布广泛,全球有440~500个种,其分类一直受到植物学家的关注。该属具有重要的观赏和药用价值,欧洲多国非常重视其观赏资源的开发利用。虎耳草属的品种培育距今已有150多年的历史,到2022年国际虎耳草协会(The Saxifrage Society)网站收录了1 692个品种,但只有1个品种来自中国。可见,我国虽然是虎耳草属的多样性中心之一,但对其观赏资源的开发利用远远落后于欧美甚至日本。该文从虎耳草属的种质资源、分类概况、育种进展等方面进行综述,并简要介绍该属资源的利用现状,为今后我国虎耳草属的分类、育种及应用提供借鉴。结果表明:(1)虎耳草种质资源丰富,但属下系统演化关系仍存在诸多问题,有待整合形态和系统发育学手段开展系统而深入的研究。(2)该属品种主要通过杂交育种和变异筛选的方式育成,英国、捷克共和国、德国、荷兰为培育品种最多的国家。(3)我国对该属的品种选育工作起步晚,育成品种少且育种方式单一。

药用植物虎耳草的DNA条形码鉴定及基因组大小评估

目的:通过对虎耳草(Saxifraga stolonifera)进行物种鉴定和基因组大小测定,以更全面地开发其植物资源的遗传信息。方法:通过对虎耳草DNA条形码引物的筛选,发现ITS2+matK条形码可确认待测的植物样本为虎耳草。进一步利用虎耳草及其近似物种的ITS2和matK条形码序列构建系统发育树。进化分析结果表明虎耳草与其同属物种的亲缘关系较远。结果:流式细胞术估测虎耳草基因组大小约为949.4 Mb。结论:本研究基于条形码序列对十堰武当山本地的虎耳草物种进行了鉴定,为虎耳草的基因组提供了特征信息,为后续虎耳草全基因组测序研究的物种选择和测序策略规划提供了参考。

虎耳草表型特征多样性分析

为了全面理解虎耳草(Saxifraga stolonifera)的种内多样性,探讨种下分类的可能性,为资源保护及创新利用提供参考,对全国43个虎耳草居群的33个性状进行观察记录,通过数量性状变异和质量性状多样性分析、相关性分析、主成分分析和聚类分析等方法探讨该种的表型性状多样性。结果表明:(1)数量性状变异系数为0.05~0.67,质量性状多样性指数为0.19~1.39,居群间斑纹分布式样和叶色多样性水平高,匍匐茎分枝数和叶长宽比分别为最不稳定和最稳定的性状。(2)数量性状和导出性状变异系数普遍较大、质量性状的多样性指数普遍较高及各主成分的贡献率较分散,因此不宜仅仅依靠形态特征对该种进行种下分类。(3)虎耳草居群间各性状相关性存在差异,叶长和叶宽、下长花瓣长和下短花瓣长、下长花瓣宽和下短花瓣宽等性状相关性显著。(4)基于形态聚类结果可将国产虎耳草分为3个分支,并表现出一定的地域性,其中分支Ⅰ由8个西南居群、2个华东居群和3个西北居群组成;分支Ⅱ由4个华东居群、4个华中居群、4个西南居群和1个西北居群组成,这一类表型的虎耳草分布广泛;分支Ⅲ由10个华中居群、6个西南居群和1个华东居群组成。

炮制对虎耳草中岩白菜素及其止咳抗炎作用的影响

目的探讨不同炮制方法对虎耳草中岩白菜素的量及镇咳、抗炎作用的影响。方法用HPLC法测定虎耳草生品、盐制品、醋制品、蜜制品、姜制品、酒制品中岩白菜素的量;采用浓氨水引咳法、二甲苯致小鼠耳廓炎症肿胀法比较生品及各炮制品的镇咳、抗炎作用。结果虎耳草中岩白菜素的量高低顺序为醋制>蜜制>盐制>生品>酒制>姜制。虎耳草延长小鼠的咳嗽潜伏期作用强弱为盐制组>生品组>蜜制组>醋制组>姜制组>酒制组。虎耳草减少小鼠的咳嗽次数作用强弱为醋制组>姜制组>蜜制组>盐制组>酒制组>生品组。虎耳草对二甲苯致小鼠耳廓炎症肿胀模型的抗炎作用强弱为姜制组>盐制组>醋制组>生品组>蜜制组。结论不同炮制方法对虎耳草中岩白菜素含有量及镇咳、抗炎作用有显著影响,虎耳草止咳宜用醋制品。

藏药黑蕊虎耳草的化学成分

从黑蕊虎耳草(Saxifraga melanocentra)地上部分的乙醇提取物中分离得到10个化合物,通过波谱分析并与有关对照品比较,将其结构鉴定为山奈酚(1),槲皮素(2),山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(黄芪苷)(3),槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(4),山奈酚-3-O-芦丁糖苷(5),芦丁(6),2″-O-没食子酰芦丁(7),岩白菜素(8),没食子酸(9)和没食子酸甲酯(10),除化合物2、6、8和10外,其余6个化合物均为首次从虎耳草属植物中得到。这些成分的鉴定为该植物的药效学研究提供了新的化学依据。

虎耳草的化学成分及生物活性研究

从虎耳草分离得到8个单体化合物,运用MS、IR、1H NMR和13C NMR等波谱解析方法并结合文献对照分别鉴定为:原儿茶酸(1),琥珀酸(2),桦木酸(3),原儿茶酸甲酯(4),5,7-二羟基色原酮(5),槲皮素3-O-β-L-鼠李糖苷(6),槲皮素5-O-β-D-葡萄糖苷(7),1-O-β-D-glucopyranosyl-(2S,3S,4R,8E/Z)-2-[(2'R)-2'-hydroxytetracosanoylamino)]-8-octadecene-1,3,4-triol(8)。除化合物1,2,7之外,其它化合物均为首次从虎耳草属植物中分离得到。以MTT法测试化合物对PC-3前列腺癌细胞的体外抑制作用,以平板打孔法测试提取浸膏及化合物对不同菌种的抑制作用。结果表明化合物6,7对PC-3前列腺癌细胞的生长有一定的抑制作用,化合物2对枯草芽孢杆菌有潜在的抑制作用。

虎耳草不同光温条件下光合特性及有效成分含量的相关性分析

对盆栽的虎耳草进行不同光照和温度处理,测定其叶片光合特性及重要有效成分,分析虎耳草有效成分与光合速率的相关性。结果表明:虎耳草光合速率在透光率50%的条件下最高,透光率100%下最低;100%光照下的岩白菜素和没食子酸的含量最高。光合速率在20℃/16℃(12 h昼/12 h夜)适温下最高,此时岩白菜素和没食子酸的含量也最高。相关性分析表明,温度处理条件下的岩白菜素和没食子酸含量与光合速率、气孔张开面积等呈正相关,其中没食子酸含量与光合速率及蒸腾速率的正相关达极显著;不同光照条件下,没食子酸含量与光合有效辐射呈显著正相关。

虎耳草属山羊臭组的界定和系统发育:核糖体DNA ITS序列证据

虎耳草属Saxifraga山羊臭组sect.Ciliatae是该属中最大的一个组,共有175种,主要分布在喜马拉雅地区,我国分布有166种,占总种数的95%;其中,112种为中国特有。约80%的种类分布在我国青藏高原和西南地区,是中国喜马拉雅植物成分的代表类群。山羊臭组内物种分化十分显著,分类处理也很困难,该组是否为单系类群,组下的系统发育关系也不清楚,均需进一步验证。本文测定了虎耳草属山羊臭组及其他组33种植物样品的核糖体DNA内转录间隔区ITS序列,并从GenBank调取虎耳草组sect.Saxifraga等组和近缘属唢呐草属Mitella共22种植物的该序列。ITS分析结果表明:(1)所研究的山羊臭组类群聚为单独一支,而且与垫状组sect.Porphyrion、虎耳草组、球茎组sect.Mesogyne和仅在欧洲分布的sect.Cymbalaria和sect.Cotylea等8个组聚成的另一分支构成姊妹群;(2)根据形态特征建立的山羊臭组的3个亚组即唐古拉亚组subsect.Hirculoideae、莲座状亚组subsect.Rosulares和具芽亚组subsect.Gemmiparae各自聚为一支,但是莲座状亚组这一支的支持率较低。同时,山羊臭组的鞭匐枝亚组subsect.Flagellares和subsect.Hemisphaericae的代表类群单独聚为一支,位于具芽亚组类群分支内部而不能成立;(3)唐古拉亚组和莲座状亚组又聚为一亚分支与具芽亚组构成姊妹群,而且具芽亚组最早从山羊臭组这一支中分化出来。我们的研究还发现山羊臭组内种间形态分化较大,而ITS碱基变异较小,这可能是山羊臭组类群在青藏高原及毗邻地区的高山环境下物种快速分化的结果。

虎耳草抗前列腺癌生物活性部位筛选研究

目的筛选虎耳草抗前列腺癌生物活性部位。方法采用MTT法研究虎耳草不同极性提取物对PC-3细胞的增殖抑制作用,运用流式细胞法检测受试药对PC-3细胞周期分布的影响以及凋亡情况,应用电镜观察PC-3细胞凋亡的形态学特征,探讨抗前列腺癌作用机制。结果虎耳草不同提取部位对PC-3细胞的增殖均有一定抑制作用,随着药物浓度和作用时间的增加而增强。结论虎耳草乙醇提取后乙酸乙酯萃取部位具有很好的抗前列腺癌活性。

HPLC法测定篦齿虎耳草及其近缘品种中金丝桃苷的含量

目的建立常用藏药“松蒂”药材主流品种篦齿虎耳草Saxifraga umbellulata var．pectinata（MarquandetShaw）J．T．Pan中金丝桃苷的含量测定方法。测定“松蒂”药材相关基源植物共计15个样品，涉及虎耳草属8个种及变种中金丝桃苷含量，评价其药用合理性。比较高原藏区虎耳草品种和低海拔地区虎耳草品种中金丝桃苷含量，探讨高原藏区虎耳草品种和低海拔地区虎耳草品种的药用差异。方法采用高效液相色谱法，使用Amethyst-C18-P（4．6mm×250mm，5μm）色谱柱，以乙腈-0．1％磷酸水溶液（15：85）为流动相，流速为1mL·min-1，柱温35℃，在360nm波长处测定金丝桃苷的含量。结果3个篦齿虎耳草样品中金丝桃苷含量为0．02％-0．03％；其他品种虎耳草内均含有金丝桃苷，10个高原藏区样品中含量为0．02％～0．86％；2个低海拔地区样品含量分别为0．001％和0．002％。结论该方法用于金丝桃苷含量测定，便捷、准确、重复性好，可用于“松蒂”药材的质量控制。藏区多种虎耳草属植物金丝桃苷含量不低于主流品种篦齿虎耳草的含量，作为“松蒂”药材基源植物具有一定的合理性。高原藏区虎耳草品种的金丝桃苷含量显著高于低海拔地区虎耳草品种的含量，一定程度上说明其药用差异的内在物质基础原因。

黑蕊虎耳草中岩白菜素没食子酸酯类及其对丙型肝炎丝氨酸蛋白酶的抑制作用(英文)

研究了黑蕊虎耳草(Saxifraga melanocentra)中岩白菜素衍生物的化学和生物活性,从其地上部分分离纯化得到一个新的岩白菜素没食子酸酯,主要通过1维和2维核磁共振波谱鉴定结构为11-氧-(4-氧甲基没食子酰)岩白菜素[11-O-(4-O-methylgalloyl) bergenin(1)] ,该化合物对丙型肝炎丝氨酸蛋白酶(HCVNS3serine protease)具有抑制活性,其IC50为0.32 mg/mL。

自然强光对阴生植物虎耳草光合特性的影响

采用LI-6400光合测定仪对阴棚内和自然光强下的虎耳草叶片光合特性进行了比较,同时测定了叶绿素的含量。研究发现,阳光下的虎耳草光合速率显著降低,主要受光量子密度的影响;阳光下的叶片总叶绿素含量降低明显,类胡萝卜素却明显升高。

藏药松蒂(篦齿虎耳草)中总黄酮及绿原酸、芦丁、槲皮素的含量测定

目的建立常用藏药材松蒂(篦齿虎耳草)中总黄酮及绿原酸、芦丁、槲皮素的含量测定方法。方法以芦丁为对照品,采用分光光度法于491 nm波长处测定篦齿虎耳草中总黄酮的含量;采用Amethyst-C18-P(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.4%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速为1 mL.min-1,柱温30℃,在350 nm波长处,运用反相高效液相色谱法测定篦齿虎耳草中绿原酸、芦丁和槲皮素的含量。结果10批篦齿虎耳草样品中总黄酮的平均含量在7%以上;绿原酸含量为0.2182～0.2849 mg.g-1,芦丁含量为0.3914～0.5982 mg.g-1,槲皮素含量为0.3833～0.7028 mg.g-1。结论以上两种检测方法简捷、准确、重复性好,可用于篦齿虎耳草药材的质量控制。

超声辅助提取甘青虎耳草总黄酮工艺及其抑菌作用

目的:研究甘青虎耳草(Saxifraga tangutica Engl.)总黄酮的提取工艺及其抑菌作用。方法:用正交试验超声波辅助乙醇提取总黄酮;用琼脂扩散法和肉汤倍比稀释法研究不同质量浓度总黄酮提取物对6种供试菌的抑菌作用。结果:方差分析得各因素影响的顺序为提取次数>乙醇体积分数>超声时间>料液比,最佳工艺为提取50℃、超声功率100W、乙醇体积分数80%、料液比1:25(g/mL)、超声时间35min、提取4次,在此条件下提取率达81.73mg/g;抑菌试验显示总黄酮提取物对细菌均有抑制作用,对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌的最小杀菌质量浓度分别为0.156、0.313、0.625mg/mL;对酵母菌的抑制作用较弱;对霉菌没有抑制作用。结论:本实验结果可为甘青虎耳草总黄酮提取工艺的确定及在抑菌方面的应用提供实验依据。

虎耳草中抗氧化活性物质的提取及成分研究

对虎耳草中抗氧化活性物质提取工艺进行优化研究并对其进行总黄酮、总多酚、多糖的含量测定。通过单因素试验和Box-Behnken设计,以虎耳草中抗氧化活性物质对DPPH.自由基的清除率为响应值,利用响应面分析法对提取参数进行优化。结果表明:在提取温度39℃、料液比1∶40.5(g/mL)、提取时间3.7 min,微波功率500 W的优化条件下,以水为提取溶剂时,其提取液对DPPH.的清除率达到最大,为80.32%,同时将该提取液进行成分分析,1 g提取液中含有总黄酮11.30 mg,总多酚20.27 mg,多糖55.85 mg。

虎耳草乙醇提取物对细菌生长曲线的影响

以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为试验菌株,通过分析不同虎耳草乙醇提取物浓度下细菌生长曲线来研究虎耳草的抑菌作用。结果表明,0.01、0.05、0.10g/ml 3种较低浓度的提取物对摇床培养的金黄色葡萄球菌生长具有较强的抑制作用,而0.25和0.50g/ml 2种较高浓度的提取物对摇床培养的金黄色葡萄球菌生长有较强的促进作用;这5种浓度的提取物均对摇床培养的大肠杆菌生长表现为抑制作用。所以,虎耳草乙醇提取物具有明显的抑菌活性。

槐虎乳膏治疗慢性湿疹的随机对照临床研究

目的:观察中药外用制剂槐虎乳膏治疗慢性湿疹的临床疗效。方法:将42例慢性湿疹患者随机分成治疗组22例和对照组20例。其中治疗组外用槐虎乳膏,对照组外用丁酸氢化可的松(尤卓尔)软膏,2次/d,连续4周。两组患者均以2周为1个疗程,每疗程结束后观察用药效果。按照症状积分下降指数(symptom score reducing index,SSRI)积分法分别以瘙痒值、皮损分布面积和皮损形态3方面计算分值,评价槐虎乳膏治疗慢性湿疹的临床疗效。结果:治疗组22例患者2周临床总有效率为77.3%,4周结束时为86.4%;对照组20例2周临床总有效率为70.0%,4周结束时为85.0%。两组差异无统计学意义(P>0.05)。治疗2周和4周时的分类积分显示,瘙痒值、皮损形态和皮损分布面积等治疗组与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:槐虎乳膏治疗慢性湿疹与丁酸氢化可的松软膏疗效相似。

藏药“松蒂”(篦齿虎耳草)中黄酮类成分对L02肝细胞氧化损伤的影响

目的观察藏药“松蒂”(篦齿虎耳草)中所含总黄酮及其中5种黄酮类化合物对H2O2诱导的人肝系L02细胞氧化损伤的影响。方法采用MTT法检测细胞存活率,筛选H2O2诱导损伤L02细胞的浓度、时间,并确定各干预组分的最佳给药浓度范围。将细胞分为正常对照组、H2O2损伤模型组、阳性对照组(Trolox组,50μmol·L^(-1))、给药组[包括总黄酮组、金丝桃苷组、山柰酚-3-O-(6″-乙酰基)-D-半乳糖苷组、2′,4′,5,7-四羟基-5′-甲氧基黄酮组、槲皮素组、芦丁组],给药组再分别设置低、中、高3个剂量组。药物干预后,采用MTT法检测细胞存活率;采用速率法检测细胞上清液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)含量;测定细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)含量及血红素加氧酶-1(HO-1)的活性。结果选择100μmol·L^(-1)的H2O2作用8 h为造模条件建立氧化损伤L02细胞模型。与模型组比较,篦齿虎耳草总黄酮(200、400、800μg·mL^(-1))、金丝桃苷(50、100、150μg·mL^(-1))、槲皮素(50、100、150μg·mL^(-1))和芦丁(50、100、150μg·mL^(-1))预处理后,细胞存活率明显升高(P<0.05,P<0.01),AST、ALT水平明显降低(P<0.05,P<0.01),SOD、GSH-Px及HO-1活力明显升高(P<0.05,P<0.01),MDA含量明显降低(P<0.05,P<0.01),且在一定程度上呈剂量依赖性。结论篦齿虎耳草总黄酮及金丝桃苷、槲皮素和芦丁对H2O2致L02肝细胞氧化损伤具有保护作用,金丝桃苷、槲皮素和芦丁可能是篦齿虎耳草黄酮类成分保肝物质中的潜在活性化合物。

HPLC测定不同产地虎耳草中丹皮酚的含量

为建立虎耳草中丹皮酚的含量测定方法，并检测不同产地虎耳草中丹皮酚的含量。采用HPLC法，色谱柱为phenomenex C18（250min×4．60mm，5μm），流动相为甲醇-水（50：50），检测波长为274nm，流速为1．0mL／min。结果表明：丹皮酚进样量在0．0431～0．3877μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系（r=0．9998），平均回收率为98．97％，RSD=1．64％（n=6）。本法简便、易行、重现性好，可用于虎耳草的质量控制。