Effects of MK-801 and Schizandrol A on DA/DOPAC Measured by Voltammetry in Ischemic Rat Striatum

The time course of changes in the levels of extracellular DA/DOPAC in rat striatum during brain ischemia and reperfusion was measured by the method ofin vivo differential normal pulse voltammetry(DNPV).Acute cerebral ischemia of rats was pro- duced by four—vessel occlusion.The effects of(+)MK-801 and schizandrol A on the change of DA/DOPAC were investigated.The results showed that the DA/DOPAC peak in- creased markedly during 6 min of ischemia and,after reperfusion,the peak height decreased gradually.Both(+)-MK-801 and schizandrol A significantly inhibited the DA release after ischemia jn the striatum.

一测多评高效液相色谱法同时测定五味子中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素

建立一测多评高效液相色谱法同时测定五味子中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素含量的方法,并验证该法的可行性和准确度。通过Plackett-Burman设计考察流动相中甲醇比例、流动相流量、柱温、进样体积对五味子醇甲色谱峰分离度的影响,确定流动相中甲醇比例、柱温为关键分析参数(P<0.05)。通过中心组合设计优化关键分析参数,建立色谱分析条件:以甲醇-水(体积比为70∶30)溶液作为流动相进行洗脱,流量为1.0mL/min,柱温为35℃,检测波长为254nm,进样体积为10μL。以五味子醇甲为内参物,分别建立五味子甲素、五味子乙素与五味子醇甲的相对校正因子,计算各成分含量,实现一测多评。采用外标法测定五味子甲素、五味子乙素含量,比较外标法的实测值与一测多评法预测值之间的差异,以验证一测多评法的准确度及可行性。五味子中五味子醇甲与五味子甲素、五味子乙素的相对校正因子分别为1.039、1.246。五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素色谱峰面积与质量浓度在5~500μg/mL范围内呈良好的线性关系,相关系数均大于0.999。样品加标回收率分别为100.1%、100.6%、100.3%,测定结果的相对标准偏差分别为1.6%、1.8%、1.1%(n=6)。分别采用一测多评法和外标法测定10批样品,测定结果基本一致。一测多评法可用于测定五味子中五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素的含量,方法准确。

高效液相色谱法同时测定五味子中的4种木脂素成分

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定五味子中五味子醇甲等4种木脂素成分的含量。方法:采用Sepax C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,甲醇-乙腈-水流动相梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,进样量20μL,检测波长220 nm。结果:五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素分别在0.365~13.194 mg/g、0.388~14.853 mg/g、0.442~16.630 mg/g、0.313~11.882 mg/g浓度范围内呈良好的线性关系,回收率、精密度、稳定性等试验结果均符合方法学测定要求。12批不同产地五味子的4种木脂素成分含量有差异,RSD为0.76%~3.28%。结论:建立的高效液相色谱法可用于同时分析五味子中的4种木脂素成分。

醋蒸五味子炮制工艺研究

目的:探讨五味子的最佳醋蒸工艺。方法:以五味子醇甲及五味子乙素为指标,选择闷润时间、蒸制时间、醋的用量3个因素,以L9(3)4正交设计表,采用方差分析方法,对五味子进行醋蒸工艺的优选。结果与结论:最佳醋蒸工艺为取五味子100 kg,加入20%醋,拌匀闷润1.5 h,蒸制5 h,干燥即得。

五味子与丹参配伍对其成分五味子乙素、醇甲的药代动力学影响

目的探讨五味子和丹参配伍后其有效成分的生物药剂学特征。方法五味子醇甲,五味子乙素,五味子,五味子配伍丹参分别灌胃给于小鼠,按时间顺序点采集血浆,加硫酸胺与乙腈—甲醇(4∶1)混合液萃取制备样品液,经HPLC测定五味子醇甲,五味子乙素含量,并用SIP和3P97程序计算药动学结果。结果配伍组所含乙素、醇甲在小鼠体内吸收代谢速度要明显地低于单味对照品乙素、醇甲和五味子,消除半衰期延长,生物利用度提高。结论中药配伍有其药代动力学的意义。

UFLC法同时测定护肝胶囊中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素

目的建立UFLC同时测定护肝胶囊(柴胡、五味子等)中五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素的方法。方法色谱柱Agilent SB C18(100 mm×4.6 mm,1.8μm);流动相为乙腈-水梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;柱温40℃;检测波长250 nm。结果五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素进样量分别在0.029～0.584μg(r=0.999 9)、0.016～0.328μg(r=0.999 6)、0.02～0.40μg(r=0.999 1)范围内具有良好的线性关系。平均回收率分别为99.7%、98.5%、99.2%;RSD分别为1.1%、2.3%、1.6%(n=5)。结论本方法简便、准确、重复性好,可用于护肝胶囊的质量控制。

HPLC同时测定复方五味含片中葛根素、甘草苷、甘草酸铵、五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素

目的建立HPLC同时测定复方五味含片中葛根素、甘草苷、甘草酸铵、五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素6种成分含量的方法。方法KromasiL C18柱（250mm×4．6mm，5μm）；流动相：乙腈－0．05％磷酸水溶液，梯度洗脱；流速1．0mL／min；柱温30℃，检测波长250nm。结果葛根素、甘草苷、甘草酸铵、五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素分别在0．0310～0．1549、0．0137～0．0685、0．0424～0．2118、0．0174～0．0871、0．0018～0．0091、0．0136～0．0681mg／mL线性范围良好；相关系数均大于0．9995；平均加样回收率分别为98．6％、100．4％、98．3％、98．3％、96．8％、99．4％；RSD分别为2．6％、2．8％、1．2％、2．3％、0．9％、2．5％。结论该方法简便、重复性好，可用于复方五味含片的质量控制。

HPLC测定安神补心丸中的五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和丹参酮Ⅱ_A

目的测定安神补心丸中的五味子醇甲、酯甲、甲素、乙素和丹参酮ⅡA。方法样品用超声提取，采用RP—HPLC法直接测定，用十八烷基键合相，乙腈-水-冰醋酸（60：40：0．1）为流动相，流速1ml·min^-1，检测波长220nm。结果五昧子醇甲、酯甲、甲素、乙素和丹参酮ⅡA分别在0．0006～0．1230μg（r=0．9999）、0．0013～0．2550μg（r=0．9998）、0．0017～0．3391μg（r=0．9997）、0．0026～0．5260μg（r=0．9999）、0．0020～0．4000μg（r=0．9999）与峰面积具有良好线性关系。平均加样回收率分别为97．3％、98．8％、101．1％、98．1％和100．2％。RSD（n=5）分别为3．1％、2．2％、3．7％、3．2％和2．0％。方法用于安神补心丸中五味子醇甲、酯甲、甲素、乙素和丹参酮ⅡA的含量测定，RSD（n=5）分别为1．1％～3．7％、1．7％～3．8％、2．8％-4．8％、3．1％～4．4％和1．8％～3．1％。结论所建方法灵敏度高，准确，简便快速。

RP-HPLC法同时测定生脉注射液中人参皂苷Rb_1与五味子醇甲的含量

目的:建立生脉注射液中人参皂苷 Rb_1、五味子醇甲的含量测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法,使用 KromasilC_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-水梯度系统为流动相,流速1.1 mL·min^(-1),检测波长203 nm。结果:人参皂苷 Rb_1线性范围为75.0～750 μg·mL^(-1)(r=0.9999,n=6),平均回收率为98.5%(n=9);五味子醇甲线性范围为9.0～89.8 μg·mL^(-1)(r=0.9998,n=6),平均回收率为98.3%(n=9)。结论:本法操作简便、结果准确,为生脉注射液的质量评价提供了可靠的依据。

醋五味子饮片质量标准研究

目的对不同批次醋五味子饮片样品进行分析研究,建立醋五味子饮片的质量标准。方法采用薄层色谱鉴别及HPLC法测定醋五味子饮片中五味子醇甲和五味子乙素;同时对其杂质、水分、灰分、浸出物等进行测定。结果不同批次醋五味子饮片中五味子醇甲、五味子乙素的量存在一定差异。结论该方法操作简便、专属性强、重现性好,可用于醋五味子饮片的质量控制。

五味子醇甲对中枢神经系统单胺类递质的影响

本实验用高效液相色谱—电化学检测法及受体配体结合法观察五味子醇甲对大鼠脑内单胺类递质及其受体的影响,结果表明五味子醇甲可使大鼠纹状体及下丘脑多巴胺含量明显增加,提示五味子醇甲的中枢抑制作用可能与多巴胺系统有一定联系。

HPLC测定安神补心丸中五味子醇甲、五味子酯甲和五味子甲素的含量

目的：建立安神补心丸（丹参、五味子、石昌蒲等）中五味子醇甲、五味子酯甲和五味子甲素含量的HPLC测定方法。方法：样品用超声提取，过滤，取续滤液，采用RP—HPLC法直接测定，用十八烷基键合相，甲醇-水-冰醋酸（65：35：0．1）为流动相，流速为1mL／min，检测波长为220nm。结果：五味子醇甲、五味子酯甲，五味子甲素分别在0．0012～0．5000μg（r=1．0000）、0．0014～0．5760μg（r=0．9995）和0．0021～0．8230μg（r=0．9998）范围内，质量与峰面积具有良好线性关系。平均加样回收率分别为99．51％．99．40％和99．06％，平均RSD（n=5）分别为1．48％、1．27％和1．38％。方法用于安神补心丸中五味子醇甲、五味子酯甲和五味子甲素的含量测定，RSD（n=5）分别为1．19％～1．53％、1．09％～1．52％和1．36％-1．72％。结论：方法具有灵敏度高，准确，简便，稳定快速的特点，能用于安神补心丸中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素的含量测定。

HPLC测定眠而安滴丸中五味子醇甲的含量

目的 :建立眠而安滴丸 (酸枣仁 ,五味子等 )中五味子醇甲含量测定的方法。方法 :高效液相色谱法 ,hypersilC1 8分析柱 ,甲醇 水 (6 5∶35 )为流动相 ,流速 1mL·min-1 ,柱温为室温 ,检测波长 2 5 4nm。结果 :五味子醇甲回归方程Y =6 77836X - 372 4 3,r =0 .9999,线性范围 0 .3～ 1 .8μg ,平均回收率 1 0 0 .2 %,RSD 2 .9%。 结论 :该方法快速、准确 ,可作为制剂的含量测定方法。

辽宁不同产地五味子中五味子醇甲的含量测定

目的:测定辽宁地区不同产地五味子中五味子醇甲的含量。方法:采用高效液相色谱法,Agilent1100LC液相色谱仪,色谱柱:ZorbaxeclipseXDBC18,150mmi.d。流动相为甲醇:水(13∶7);检测波长为250nm;柱温为30℃。结果:辽宁省各地五味子中五味子醇甲的含量均大于药典规定的0.4%,质量均合格,其中以本溪所产五味子中五味子醇甲含量最高。结论:本实验方法简便、准确、重现性好。

安神健脑液质量标准研究

目的建立安神健脑液的质量标准。方法采用薄层色谱法鉴别麦冬、丹参、枸杞子和人参;采用高效液相色谱法测定五味子中五味子醇甲的含量,C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-水(55∶45),流速1.0mL/min,检测波长250nm。结果在薄层色谱中可检出丹参、枸杞子和人参的特征斑点;五味子醇甲在0.1218～1.218μg范围内线性关系良好,r=0.9999,精密度RSD=0.22%(n=6),重复性试验RSD=1.1%(n=6),平均加样回收率为97.34%(RSD=1.7%,n=6)。结论本方法简便、灵敏、专属性强、重复性好,可作为安神健脑液的质量控制方法。

HPLC法测定利肝隆冲剂中五味子醇甲的含量

目的 :修订利肝隆冲剂的质量标准。方法 :用HPLC法测定五味子醇甲的含量。结果 :五味子醇甲在 0 .0 8～ 1.2 0 μg范围内呈良好的线性关系 :r=0 .9991,平均回收率 99.3% ,RSD为 1.1%。结论 :所建立的方法简便可行 ,重现性好 ,为利肝隆冲剂质量控制提供了方法。

药材不同粉碎度对安神胶囊人工胃液中主要成分溶出量的影响

目的探讨中药材不同粉碎程度对安神胶囊在人工胃液中溶出量的影响。方法以不同粉碎度的中药材药粉制备样品,以五味子醇甲含量为测定指标,以桨法测定药物在人工胃液内45 min的溶出量。结果不同粉碎度中药材制得的安神胶囊中五味子醇甲在人工胃液内溶出量没有显著差异。结论在制剂过程中,安神胶囊中药材粉碎无需过细,以50～100目为宜。

孔枕益智片质量标准研究

目的建立孔枕益智片的质量标准.方法采用TLC法对孔枕益智片中石菖蒲和远志两味药材进行了定性鉴别;采用HPLC法对孔枕益智片中五味子醇甲进行了含量测定.色谱条件：YMC-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇-水（65∶35）,流速为0.8 mL/min,柱温为25℃,检测波长为250 nm.结果供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点,阴性对照色谱在相应位置上无斑点.五味子醇甲在0.04～0.32μg内呈良好的线性关系（r=0.999 9）,平均加样回收率为98.68%,RSD为0.46%（n=5）.结论本方法简便、快速,准确、可靠,可有效地控制孔枕益智片的质量.

盐炙北五味子最佳炮制工艺研究

优选北五味子最佳盐炙炮制工艺。以五味子醇甲和五味子醇乙含量为评价指标,分别选择加盐量、闷润时间、炒制时间为考察因素,采用正交试验法,对五味子进行盐炙工艺的优选。北五味子最佳炮制工艺为加盐1%、闷润1h、炒制80s。优选出的北五味子盐炙工艺稳定可行,重现性好。

五味子愈伤组织培养及醇甲含量分析

以五味子叶片和茎段作为外植体进行愈伤组织的诱导,对愈伤组织诱导的影响因素、愈伤组织发育特征以及愈伤组织形成过程中五味子醇甲的积累情况进行研究。结果表明:B5培养基比MS培养基更利于愈伤组织的诱导。根据愈伤组织的发育状态特征可以将其分为4类,其中颜色微黄、质地疏松的C类愈伤组织中所积累的五味子醇甲含量最高。添加1.0mg/L BA、0.2mg/L NAA和0.1mg/L KT的B5培养基上较易诱导出C类愈伤组织,其五味子醇甲含量最高达到4.28mg/g FW。该研究的初步结果对通过愈伤组织悬浮培养生产五味子素的进一步研究奠定了重要基础。