基于GC-MS分析蕲艾挥发油成分及其抑菌活性研究

目的:分析半仿生法提取-水蒸气蒸馏法提取蕲艾挥发油的主要化学成分,对蕲艾挥发油抑菌活性进行研究。方法:采用半仿生法提取-水蒸气蒸馏法提取蕲艾挥发油,运用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对其化学成分进行鉴定,用面积归一化法计算各组分的相对百分含量。通过平板涂布法和二倍梯度液体稀释法考察蕲艾挥发油的抑菌效果。结果:蕲艾挥发油检测到52种化学成分,初步鉴定了20种化合物,占总挥发性成分的95.95%,其化学成分主要为蒿醇(55.49%)、3,3,6-三甲基-1,4-庚二烯-6-醇(15.37%)、桉油精(11.87%)和4-萜烯醇(3.50%)等,以醇类居多。蕲艾挥发油对金黄葡萄球菌、铜绿假单胞菌、沙门菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和白色念珠菌、黑曲霉、黄曲霉有显著的抑菌作用。结论:蕲艾挥发油主要由醇类组成,并具有较好的抑菌活性。

超声波-半仿生法提取桑叶黄酮及其活性的研究

【目的】对桑叶黄酮的提取工艺及其自由基清除能力,对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的活性抑制作用进行研究,旨在获得充分保持桑叶黄酮活性的新型制备方法,为桑叶资源开发利用提供理论依据。【方法】采用超声波–半仿生法提取桑叶黄酮,考察液料比、超声时间、超声温度、超声功率4个因素对桑叶黄酮得率和DPPH·以及OH·的平均清除率的影响,通过响应面试验优化桑叶黄酮提取工艺,评价桑叶黄酮对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用。【结果】桑叶黄酮最佳提取工艺为液料比30 mL/g、提取总时间97 min(3个阶段的时间比例为1∶2∶2)、超声温度49℃、超声功率400 W,黄酮得率为(38.23±0.42) mg/g,自由基平均清除率为(57.04±0.97)%。桑叶黄酮对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性抑制的IC_(50)值为(1.081±0.130) g/L和(1.204±0.190) g/L。超声波–半仿生法比单一超声波法提取桑叶黄酮的自由基清除能力强,比单一半仿生法提取桑叶黄酮的得率高。【结论】采用超声波辅助半仿生法提取的桑叶黄酮具有良好的自由基清除能力,且对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶有抑制作用,与单一提取法相比,超声波–半仿生法提取桑叶黄酮具备更高的生物活性和得率。桑叶黄酮可开发为高糖人群调节血糖的产品,超声波–半仿生法可为工业制备桑叶黄酮提供良好的技术储备。

半仿生-酶法提取半夏白术天麻汤中天麻素的含量测定

目的：为优选半夏白术天麻汤用半仿生-酶法提取的工艺条件，以天麻素为综合评价指标之一，探讨其用HPLC测定的可行性。方法：按处方比例称取各饮片，加入适宜的酶预处理，再按SBE法，采用正交实验L18 6×3^6表，于第1煎和第3煎的溶剂中加入适宜的消化酶，在适宜的温度下提取得提取液。以该提取液为研究对象，作天麻素的HPLC测定方法的研究。筛选供试品的制备方法和HPLC的流动相，采用Diamonsil TN C18柱（5μm，4．6mm×250mm）流动相为乙腈-0．05％磷酸（3：97），在220nm波长处检测，流速为1mL·min^-1，柱温为25℃。结果：天麻素在O．87～10．44μg范围内呈良好线性关系，r=0．9996，平均加样回收率为101．52％，RSD=1．58％（n=6）。结论：半夏白术天麻汤的半仿生-酶法提取液可用HPLC测定其天麻素的含量，该方法准确、重现性好。

黄连-吴茱萸药对化学成分的HPLC-DAD-MS分析

建立黄连-吴茱萸药对半仿生提取液化学成分的HPLC-DAD-MS分析方法,研究黄连-吴茱萸配伍机制的物质基础。以Hypersil BDS C18为色谱柱,梯度洗脱后,综合分析不同样品的色谱峰保留时间、紫外光谱,一级和二级全扫描质谱图,归属了黄连-吴茱萸(6∶1)半仿生提取液中的17个色谱峰,8个来自吴茱萸,其他9个均来自黄连,确认了4个色谱峰分别为药根碱、羟基吴茱萸碱、巴马汀和小檗碱;推断了3个色谱峰分别为表小檗碱、非洲防己碱和黄连碱,同时测定了小檗碱和巴马汀的含量。黄连配伍吴茱萸后半仿生提取无新物质生成,但小檗碱和巴马汀的溶出量降低。

半仿生-酶法提取中药不同成分的比较研究

目的探讨半仿生-酶法在提取不同中药及成分类别中的应用。方法以甘草、槐米和黄连3种中药为研究对象,分别以甘草酸、芦丁和小檗碱含量及干浸膏得率为指标,通过与其他方法比较,研究半仿生-酶法对上述不同有效成分的提取效果,探讨该提取方法的适用范围。结果半仿生-酶法与水提法、酶法、半仿生提取法比较,半仿生-酶法提取不同类别有效成分都具有一定优势;相对于其他药材,半仿生-酶法对甘草中主要成分的提取效率更高。结论半仿生-酶法更加适用于水溶性成分的提取。

丹参水溶性成分半仿生-生物酶提取方法比较研究

目的:优选丹参水溶性成分半仿生-生物酶提取方法。方法:以丹酚酸B、总酚酸含量和干浸膏收率为指标,以回流提取法为参照,对半仿生法、纤维素酶酶解法、α-淀粉酶酶解法、复合酶酶解法和半仿生-纤维素法、半仿生-α-淀粉酶法、半仿生-复合酶法提取法进行比较。结果:半仿生-纤维素酶法所得综合评价指标最优。结论:半仿生-纤维素酶法提取丹参水溶性成分更为科学合理。

正交试验设计优选栀子有效成分半仿生-纤维素酶提取工艺

目的优选半仿生-纤维素酶提取法提取栀子有效成分的最佳工艺条件。方法以栀子苷、总环烯醚萜得率和干浸膏收率为评价指标,以纤维素酶用量、酶解时间、酶解p H、料液比为考察因素,以正交试验设计优选最佳提取工艺。结果最佳提取工艺为水解酶用量2 mg·g-1,酶解时间2 h,酶解p H 6.5,料液比1:18。结论优选的工艺合理、可行,可为栀子后续研究提供参考。

甘青乌头抗炎镇痛活性部位的半仿生-酶法提取工艺优化

用半仿生-酶法提取甘青乌头抗炎镇痛的活性部位,考察加酶量、酶解时间、半仿生提取(SBE)温度和总时间4个因素的影响。结果表明,优选工艺为:加酶量36 U/g,酶解时间90 min,SBE温度80℃,SBE总时间180 min。

超声波-半仿生法提取桔皮黄酮的响应面优化及抗氧化性分析

采用超声波辅助半仿生法提取桔皮黄酮。响应面优化结果表明,在3次提取液p H值分别为1.3,7.6,8.4,提取时间32 min、提取温度53℃、超声波功率350 W和超声频率21 k Hz的条件下,黄酮总提取量可达6.23 mg/g。抗氧化检测显示,采用超声波辅助半仿生法能够提高黄酮的抗氧化性能,当桔皮黄酮的浓度为9 mg/L左右时,对DPPH自由基、羟基自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2-·)的清除率分别达37.6%,52.1%和46.1%,比溶剂提取法得到的试样分别提高了11.6%,12.7%和7.6%。

升清降糖合剂对氧化损伤胰岛β细胞Bcl-2、Bax、Akt表达的影响

目的:研究升清降糖合剂(SQ)对氧化损伤胰岛β细胞凋亡的保护作用,探讨其对凋亡蛋白Bcl-2和Bax、Akt蛋白表达的影响。方法:H2O2诱导胰岛细胞氧化损伤模型,流式细胞术测定胰岛细胞凋亡率,以荧光免疫法检测细胞凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达,免疫印迹测定细胞Akt磷酸化表达。结果:模型组细胞凋亡率增高,达(35.18±2.41)%,与正常组比较有差异(P<0.01),与SQ保护组比较有差异(P<0.01)。模型组细胞内Bax荧光表达较正常组增加(P<0.05);SQ保护组Bcl-2荧光表达上升,Bax荧光表达下降,与模型组比较,均有统计学差异(P<0.05)。对于胰岛细胞瘤株RINm5F,模型组磷酸化Akt蛋白表达减少,与正常组比较有统计学差异(P<0.05),与保护组比较有统计学差异(P<0.01);对于原代胰岛,模型组磷酸化Akt蛋白减少,与正常组比较有统计学差异(P<0.05),与保护组比较有统计学差异(P<0.05)。结论:升清降糖合剂可降低氧化损伤胰岛β细胞凋亡率,上调Bcl-2,抑制Bax蛋白表达,促进Akt磷酸化。升降糖合剂抗氧化和抗凋亡机制与调节凋亡蛋白Bcl-2和Bax及PI3K-Akt通路有关。

半仿生-酶法提取的半夏白术天麻汤中甘草次酸的含量测定

目的：为优选半夏白术天麻汤用半仿生-酶法提取的工艺条件，以甘草次酸为综合评判指标之一，探讨采用HPLC法测定的可行性。方法：按处方比例称取各中药，加入适宜的酶预处理，再按SBE法，采用正交实验L18（6×3^6）表，于第一煎和第三煎的溶剂中加入适宜的消化酶，在适宜的温度下提取得提取液。以该提取液为研究对象，HPLC法测定甘草次酸的含量，色谱条件：DiamonsilTM C18柱（5μm×4．6mm×250mm），流动相为甲醇：0．1％磷酸（87：13），流速为1ml／min，柱温为25℃，检测波长为250nm。结果：甘草次酸在0．145-1．740μg范围内线性关系良好，r=0．9999，平均加样回收率为98．14％，RSD=1．56％（11=6）。结论：半夏白术天麻汤的半仿生-酶法提取液可用HPLC测定其甘草次酸的含量，该方法准确、重现性好。

酸枣仁-五味子药对配比筛选及半仿生提取工艺研究

目的筛选酸枣仁-五味子药对镇静催眠作用的最佳配比,并优化该比例药对的半仿生提取工艺。方法50只小鼠随机分为空白组,阳性药组,酸枣仁-五味子(15 g:6 g组、12 g:6 g组)、6 g:6 g组,每组10只。空白组给予蒸馏水,阳性药组给予0.13%艾司唑仑水溶液,给药组给予相应配比混悬液。腹腔注射不同剂量戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠,记录各组小鼠入睡情况、睡眠潜伏期和睡眠持续时间改变,测定各组小鼠脑组织液中γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺(Gln)、5-羟色胺(5-HT)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量的变化筛选最佳配比;并以GABA和5-HT的综合评分为响应值,通过Box-Behnken响应面法筛选半仿生提取的最佳工艺。结果与空白组比较,阳性药组、15 g∶6 g组以及6 g∶6 g组小鼠睡眠潜伏期明显缩短、睡眠持续时间明显延长(P<0.05或P<0.01);与阳性药组比较,12 g∶6 g组睡眠潜伏期明显延长(P<0.05);与15 g∶6 g组比较,12 g∶6 g组睡眠潜伏期明显延长(P<0.05)。与空白组比较,阳性药组和15 g∶6 g组小鼠脑内GABA含量增加、Glu和Gln含量减少(P<0.05或P<0.01)。与阳性药组比较,12 g∶6 g组和6 g∶6 g组GABA含量减少、Glu和Gln含量增加(P<0.05)。与15 g∶6 g组比较,12 g∶6 g组GABA含量减少;6 g∶6 g组Gln含量增加(P<0.05)。与空白组比较,阳性药组、15 g∶6 g组、12 g∶6 g组和6 g∶6 g组的5-HT含量增加(P<0.05或P<0.01)。与阳性药组比较,12 g∶6 g组5-HT含量减少(P<0.05)。与15 g∶6 g组比较,12 g∶6 g组5-HT含量减少(P<0.05)。与空白组比较,阳性药组5-HIAA含量减少(P<0.05)。与阳性药组比较,15 g∶6 g组、12 g∶6 g组以及6 g∶6 g组5-HIAA含量增加(P<0.05或P<0.01)。半仿生提取最佳工艺为第1次提取人工胃液用量的9.5倍,时间2.5 h;第二次提取人工肠液用量的6.0倍,时间3.6 h。结论酸枣仁-五味子镇静催眠作用以15 g∶6 g配比(对应人体日给药量)疗效最佳,在此最佳配比条件下筛选的半仿生提取工艺可靠,可操作性强。

半仿生-回流法提取金线莲中黄酮的研究

文章采用半仿生-回流提取技术,以不同p H的乙醇-水溶液作为提取溶剂,分别进行单因素筛选和正交实验的方法,考察了p H,溶液组成和回流时间对金线莲中黄酮提取量的影响,优化了金线莲中提取的工艺条件。结果表明,半仿生-回流技术提取金线莲中黄酮的最佳条件:对于0.5克金线莲,提取液为200 m L p H=4的50%乙醇溶液,回流时间为2.0 h,黄酮提取量达到30.21 mg/g。

半仿生-生物酶提取法在中草药中的应用

介绍了半仿生-酶法提取中草药活性成分的原理,并重点介绍了半仿生-酶法在皂苷类、蒽醌类、生物碱类、黄酮类、酚酸类、糖类、二苯乙烯类等有效成分提取分离中的应用,说明了其相对于传统工艺所发挥的优势及作用,并分析了该法目前工业化应用面临的问题,为其深入研究和应用提供一定的参考。

半仿生-微波技术提取鸡蛋花中单宁酸的研究

研究了半仿生-微波技术提取鸡蛋花中单宁酸的新方法.利用Folin-Denis分光光度法测定单宁酸的含量来评价单宁酸的提取效率,分别研究了固液比、提取剂、pH、微波条件(功率、时间和功率)对单宁酸提取量的影响,用L9(34)正交试验优化了pH、微波条件(功率、时间和功率)等四个因素的条件.结果显示,pH6.0、温度55℃、时间10min、功率300W、固液比为1:160为最优提取条件.在最优条件下,单宁酸的提取量达29.57mg/g.

半仿生-微波组合技术提取夏枯草总酚酸的研究

研究了半仿生-微波技术提取夏枯草中总酚酸的新方法.以咖啡酸为标准品,利用三氯化铁-铁氰化钾分光光度法测定总酚酸的含量.单因素试验中,分别研究了固液比、提取剂、pH、微波条件(功率、时间和功率)对总酚酸提取量的影响.在单因素试验的基础上,用L9(3^4)正交设计试验优化了pH、微波条件(功率、时间和功率)的工艺条件.结果显示,pH=7,微波功率200 W,时间11 min,温度70℃为最优提取条件.在最佳条件下,总酚酸的提取量达38.95mg/g.

半仿生-酶法提取虎杖中大黄素的工艺研究

目的研究半仿生-酶法提取虎杖中大黄素的最佳工艺。方法以HPLC法检测大黄素含量为指标,优选出纤维素酶用于半仿生-酶法中,采用正交实验对半仿生-酶法提取条件进行优化,并与超声提取法、微波提取法和醇提法进行比较。结果半仿生-酶法较其他提取方法效率更高,其最优条件为:提取温度70℃,料液比1∶18,提取时间2h。结论半仿生-酶法提取虎杖中大黄素的方法经济、有效、提取效率高,可作为大黄素的提取工艺应用。

半仿生-微波组合技术提取金线莲多糖的研究

本文采用半仿生-微波组合技术研究了金线莲中多糖的提取方法.工作中,用蒽酮-硫酸光度法测定多糖的含量,以提取多糖的量为评价指标,单因素实验分别探讨了pH、温度、时间、微波功率、固液比等对提取金线莲多糖的影响.在单因素实验基础上,用四因素三水平正交实验优化提取条件.结果表明,半仿生-微波组合技术提取金线莲多糖的最佳条件为:pH 6.0,温度80℃,时间9 min,微波功率400 W,固液比为1:100(g:mL).在最优条件下,金线莲多糖的提取量为212.9 mg/g.

半仿生-微波组合技术提取金线莲腺苷的研究

本文用半仿生-微波组合技术研究了从金线莲中提取腺苷的新方法.文中,用光度法测定腺苷的含量,以金线莲腺苷提取量为评价指标,分别用单因素和正交设计试验对半仿生-微波组合技术提取腺苷的条件进行优化.结果显示,腺苷的最佳提取条件分别是:提取剂为pH=7.0的60%乙醇溶液,温度70℃,提取时间7 min,微波功率400 W.在最佳提取条件下,腺苷的提取量为13.33 mg/g.本工作将对金线莲的深度开发有重要的指导意义.

沙田柚种子黄酮类物质半仿生提取及体外抗氧化能力研究

本试验采用超声波辅助,半仿生法提取沙田柚(Citrus maxima)种子黄酮类物质,并评价其抗氧化能力。沙田柚种子中类黄酮化合物有11类,数量和含量占比例较高是黄酮醇类。用模拟酸性,中性和碱性环境的溶液提取,得到类黄酮物质含量与70%甲醇提取含量没有显著差异。半仿生法提取液具有较高的Fe^(3+)还原能力、DPPH清除率和羟基自由基清除率,分别具有类黄酮浓度正相关效应。柚种子提取物具有一定的抗氧化活性,实践中可以用半仿生法提取代替有机溶剂提取柚种子活性成分,并且可以重点关注含量较多的黄酮醇类物质。