微生物培养体系预处理在MALDI-TOF MS快速鉴定血培养阳性病原菌的应用价值

目的分析微生物培养仪(HB&L)微生物培养体系预处理在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)快速鉴定血培养阳性样本病原菌的临床应用价值。方法收集2022年1月至2022年12月安阳市人民医院实验室常规方法鉴定的120份血培养报警后单一细菌感染的阳性样本,所有样本均接受HB&L微生物培养体系预处理、分离胶促凝管法预处理,将传统方法的鉴定结果作为“金标准”对照,运用MALDI-TOF MS鉴定。对比HB&L微生物培养体系预处理、分离胶促凝管法预处理下MALDI-TOF MS快速鉴定的鉴定率;另外对比HB&L微生物培养体系预处理、分离胶促凝管法在不同分值下MALDI-TOF MS样本细菌菌属快速鉴定结果。结果HB&L微生物培养体系预处理下MALDI-TOF MS快速鉴定例数为116例,鉴定率为96.67%;分离胶促凝管法预处理下MALDI-TOF MS快速鉴定例数为92例,鉴定率为76.67%,两种预处理方法鉴定率对比差异有统计学意义(P<0.05);在3.000~2.300分值下HB&L微生物培养体系MALDI-TOF MS样本细菌菌属快速鉴定率均高于分离胶促凝管法,差异有统计学意义(P<0.05);在2.299~2.000、1.999~1.700、<1.700分值下两种预处理方法菌属鉴定率对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论HB&L微生物培养体系是MALDI-TOF MS快速鉴定血培养阳性样本病原菌优质的预处理方法,可大幅提升鉴定率,值得应用。

分离胶采血管制备血清对血糖、补体C3和NSE测定结果及稳定性的影响

目的观察用分离胶采血管与直空玻璃管制备的血清其血糖(Glu)、补体C3和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的检测结果是否具有可比性。同时探讨3个项目在分离胶采血管中保存的稳定性。方法分别采用分离胶采血管与真空玻璃管收集20名志愿者的血清,测定Glu、补体C3和NSE后,将样本置于4℃保存,并分别于6 h、24 h、48 h和72 h后再次测定Glu、补体C3和NSE。结果真空玻璃管血清与分离胶采血管血清各指标测定结果差异无统计学意义(P>0.05)。以真空玻璃管为标准管,分离胶采血管血清测定结果的偏差均在临床可接受的范围内。采用分离胶采血管保存血清,Glu 72 h时测定结果下降<5%;补体C3 48 h时上升1.6%,72 h时上升>10%;NSE在72 h内的偏差<4.2%。结论分离胶采血管在Glu、补体C3和NSE的测定中具有较好的稳定性。

不同采血管、标本处理过程以及存放时间对NSE检测结果的影响

目的探究不同采血管、标本处理过程以及存放时间对神经元特异性烯醇化酶(NSE)检测结果的影响。方法随机选取广东省中医院50例住院患者,空腹采静脉血,每份血液标本同时分装于2个试管,试管1为无添加剂干燥管(红管),试管2为促凝剂分离胶管(黄管),用罗氏E601全自动电化学发光免疫分析仪测定两管血清NSE水平。每管标本共测定3次,测定时间分别为标本采集后1、24、48h。其中1h和24h之间,标本经历了4℃保存24h、标本稍混匀和再离心的处理过程;24h和48h之间,标本只经历了4℃保存24h,随后直接上机检测NSE。结果红黄两管血清NSE水平在1h时结果,差异无统计学意义(P>0.05);红管在24h时结果的均差值及阳性率显著高于1h结果的均差值及阳性率,且差异有统计学意义(P<0.05);红管的48h结果的均差值及阳性率与24h相比,差异无统计学差异(P>0.05)。黄管标本的3次(1、24、48h)NSE测定结果的均差值及阳性率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论促凝剂分离胶管(黄管)对NSE血清测定结果的稳定性优于无添加剂干燥管(红管)。

不同血液分离结果的多发性骨髓瘤患者临床特征及预后分析

目的:研究分离胶真空采血管离心后2种不同血液分离结果的多发性骨髓瘤(MM)患者的临床特征,并比较2种分离结果对MM患者预后的价值。方法:回顾性分析本院2009年3月至2017年12月收治的168例初诊MM患者的临床资料,并根据分离胶真空采血管离心后血液分离结果将血液样本分为对照组(自上而下依次为血清、胶体、红细胞)和异常组(自上而下依次为血清、红细胞、胶体、红细胞),比较2组患者的年龄、性别、生化指标(总蛋白、白蛋白、免疫球蛋白、β2微球蛋白、血钙、乳酸脱氢酶、肌酐)、血常规指标(血红蛋白、血小板)以及免疫分型和临床分期等临床数据的差异;分析血液分离结果与疗效的关系,并比较2组患者总生存期(OS)的差异。结果:对照组和异常组的总蛋白、白蛋白、免疫球蛋白、β2微球蛋白、血红蛋白、免疫分型、临床分期差异明显(P<0.05),而性别、年龄、血钙、乳酸脱氢酶、肌酐、血小板在2组间无明显差异(P>0.05)。异常组治疗后获得完全缓解(CR)和非常好的部分缓解(VGPR)的患者血液分离结果转为正常,部分缓解(PR)的患者血液分离结果部分转为正常、部分未发生变化,而获得PR疗效以下的患者血液分离结果没有变化,对照组患者治疗后获得PR疗效以下的患者血液分离结果部分转为异常;正常血液分离结果患者具有较好的OS,而异常血液分离结果患者的OS明显缩短。结论:MM患者血液离心后存在异常分离现象;异常分离现象与总蛋白、白蛋白、免疫球蛋白、β2微球蛋白、血红蛋白、免疫分型及临床分期有关。这提示,异常分离存在更高的肿瘤负荷;正常血液分离结果提示预后较好,而异常血液分离结果提示预后不良。

分离胶促凝管联合MALDI-TOF MS直接检测血培养阳性细菌

目的建立用分离胶促凝管联合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）直接检测血培养阳性待测菌的方法并评估其鉴定符合率。方法共收集阳性血培养491例,利用分离胶促凝管直接从血培养瓶中富集并提纯菌体,采用MALDI-TOF MS对待测菌进行菌种鉴定,同时对报阳性血培养瓶进行转种培养,纯菌落用Vitek 2 Compact全自动微生物分析系统（简称Vitek 2 Compact）进行鉴定。若两者鉴定结果不一致,则以基因测序结果予以确证。结果 491例阳性血培养瓶鉴定出的待测菌包括30个属和64个种。在462例单菌株感染血培养瓶中,菌株的种、属鉴定符合率分别为73.6%和3.7%。其中175例革兰阴性菌的种、属鉴定率分别为84.0%（147例）和2.9%（5例）;251例革兰阳性菌的种、属鉴定率分别为75.3%（189例）和4.4%（11例）;36例念珠菌的种、属鉴定率分别为19.4%（7例）和2.8%（1例）。在29例复数菌感染血瓶中,鉴定出其中一种细菌的种、属鉴定率分别为79.3%（23例）和10.3%（3例）。血流感染中常见病原菌的菌种鉴定符合率达83.3%～96.9%。结论本研究建立了分离胶促凝管联合MALDI-TOF MS直接检测血培养阳性待测菌的方法,与传统的培养鉴定方法相比,对血流感染中主要病原菌的鉴定符合率较高,且方法快速、简便,成本低廉,适合在临床微生物实验室中推广应用。

血清免疫球蛋白等因素对分离胶采血管血液分离效果的影响

目的探讨血清免疫球蛋白(Ig)等因素对分离胶采血管血液分离效果的影响。方法选取221例多发性骨髓瘤(MM)患者(IgG型149例、IgA型65例、IgM型7例),根据Ig水平分组,将IgG型患者分为IgG≤47 g/L组(A组,84例)和IgG>47 g/L组(B组,65例),将IgA型患者分为IgA≤38 g/L组(C组,39例)和IgA>38 g/L组(D组,26例),所有IgM型患者IgM≤63 g/L,为IgM≤63 g/L组(E组,7例);根据总蛋白(TP)水平将50例自身免疫性疾病患者分为TP≤90 g/L组(F组,27例)和TP>90 g/L组(G组,23例);根据血细胞比容(HCT)水平将55例贫血患者分为HCT≤30%组(H组,26例)和HCT>30%组(I组,29例)。采集患者空腹静脉血分别注入2种分离胶采血管中,完全凝固后离心,观察血液分离效果。结果 B和D组2种分离胶采血管的分离效果均为离心后分4层,自上而下依次为:血清、红细胞(RBC)、分离胶、RBC,上层有少量血清,其下RBC明显增多,底层有少量RBC;A、C、E、F、G、H和I组2种分离胶采血管均分3层,自上而下依次为:血清、分离胶、RBC,血清量较多。结论分离胶采血管血液分离效果受Ig、TP、HCT等多种因素的共同影响,Ig和TP水平明显升高、HCT明显降低的MM患者不宜采用分离胶采血管采集血液。

分离胶辅助VITEK-MS质谱仪快速鉴定血培养阳性菌的方法学研究

目的探讨用分离胶采血管联合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱系统（VITEK-MS）快速鉴定血培养阳性菌的方法。方法收集2015年3~10月广州医科大学附属第一医院BacT/ALERT3D血培养仪报阳性,且直接涂片染色为革兰阴性菌的血培养标本50例,通过分离胶采血管直接从血培养瓶中提取细菌,采用VITEK-MS对细菌进行快速鉴定;同时用常规方法对细菌进行转种培养及鉴定,比较该方法的鉴定符合率。结果 50例血培养阳性的革兰阴性菌中,21例鉴定不出细菌名,29例鉴定出细菌名,阳性率58.0%,与常规鉴定方法阳性正确率为96.6%;分离胶联合VITEK-MS较常规法提前近24h。结论采用分离胶集菌联合VITKE-MS鉴定细菌的方法,对血培养阳性革兰阴性菌的鉴定符合率高,可以大大缩短鉴定的时间,方法快速、简便。

血清分离胶采血管对生化检测结果影响的研究进展

血清分离胶采血管提供了一个收集、运输、加工、取样和储存标本的封闭系统,被广泛用于临床实验室进行常规血液采集,但分离胶的成分、性质以及血清在分离胶真空采血管中的保存时间和温度是否会对检查结果造成影响,目前鲜有报道。通过阐述分离胶的性质、采血管的材质、分离胶采血管标本放置时间与温度和血清免疫球蛋白等因素对血清分离胶采血管标本检查结果的影响,综述血清分离胶采血管对电解质分析结果、激素分析结果、药物分析结果、肿瘤相关结果、C反应蛋白(CRP)分析结果和血糖及蛋白质分析结果等生化检查结果影响的研究进展。

真空采血管内添加物对常见生化项目测定结果的影响

目的评估真空采血管内添加物对常见生化项目测定结果的影响。方法用含不同添加物的6种真空采血管分别采集20位志愿者的静脉血液。测定血清或血浆中常见的21个生化项目。以只含促凝剂的血清管为对照,比较其余5种采血管获得的血清或血浆测定结果与对照管的差异是否有统计学意义。结果与血清管比较,分离胶管21个项目测定结果差异无统计学意义(P>0.05)。肝素管除AST、TC、TG、HDL-C、Cl外,其余项目测定结果差异无统计学意义(P>0.05)。EDTA管除GGT、Cre、Glu外,其余项目测定结果差异有统计学意义(P<0.05)。枸橼酸钠管所有项目测定结果差异均有统计学意义(P<0.05)。氟化钠管除Glu外,其余项目测定结果差异有统计学意义(P<0.05)。结论分离胶管和血清管适用于临床常见生化项目的测定,肝素管适于多数生化项目,氟化钠管仅限于血糖的测定,EDTA管和枸橼酸钠管不适用于生化项目的测定。

真空采血管致生化指标异常的原因

目的探讨使用真空采血管所致生化指标异常的原因,提出改进措施。方法利用5种真空采血管分别采集10例健康志愿者空腹血清,在日立7600全自动生化分析仪上检测28项生化指标。同时留取每例志愿者全血500μL,分别加EDTAK2抗凝血2μL、5μL、10μL、20μL、50μL,观察不同剂量的EDTAK2抗凝血对血清钾(K+)、钙(Ca2+)、镁(Mg2+)等离子浓度的影响。结果采用血凝管与分离胶试管相比11项生化指标存在统计学差异(P<0.01)。使用夹层凝血管或血常规管(EDTAK2)将导致部分生化结果异常。结论临床护士应正确选择真空采血管,真空采血管的错误选择以及不恰当的采血顺序均会导致生化结果异常。

分离胶采血管对化学发光分析技术测定血清孕酮的影响

目的:探讨分离胶采血管对孕酮检测的影响程度,分析孕酮含量在普通血清采血管和分离胶采血管内随时间变化的趋势。方法:采集患者静脉血标本,分别置于普通血清采血管和分离胶采血管内,离心后采用免疫分析系统检测两种采血管内的血清孕酮含量,并根据孕酮含量的不同将其分为低值组(<10 ng/ml)、中值组(10~20 ng/ml)和高值组(>20 ng/ml)后保存在2~8℃条件下,并在第24 h、48 h和72 h重新进行检测。比较两种采血管对孕酮检测的影响。结果:两种真空采血管内孕酮含量在72 h内随时间变化无明显差异。两种管间孕酮含量在低值组(<10 ng/ml)中无差异,而中值组(10~20 ng/ml)和高值组(>20 ng/ml)分离胶采血管中孕酮检测结果低于普通采血管,其差异有统计学意义(Z=-2.580,Z=-2.667;P<0.05)。结论:孕酮含量在两种真空采血管内2~8℃保存条件下,72 h内可以均保持稳定,但使用分离胶采血管采集血液可使血清孕酮测定值偏低,不含分离胶的普通采血管中血清检测孕酮含量普遍高于分离胶采血管。

分离胶采血管对激素类检测项目的影响

目的评价两种塑料分离胶试管对激素类项目检测结果的影响。方法选取国内A、B两厂家生产的塑料分离胶促凝管,以美国BD公司的无添加塑料采血管作为对照,分别在雅培和西门子化学发光免疫分析仪检测13项免疫指标。结果经配对t检验和Bland-Altman分析,A试管与对照管之间在孕酮、雌二醇、总甲状腺素项目存在统计学差异(P<0.05),孕酮和总甲状腺素差值无临床意义,雌二醇差值超过可接受范围。B试管与对照管之间在总甲状腺素项目存在统计学差异(P<0.05),但差值在可接受范围内。结论 13项免疫指标除了A试管对雌二醇检测结果的影响超出可接受范围外,A、B两试管对其余的免疫指标检测结果的影响在可接受范围内。

血液葡萄糖在分离胶血液真空采集管中的稳定性观察

目的观察用分离胶血液真空采集管采集的血糖标本,按其浓度与放置时间的不同进行分组,观察血糖浓度的变化情况,以评价血液葡萄糖在分离胶血液真空采血管中的变化趋势。方法(1)以葡萄糖氧化酶法对用美国BD公司的SSTⅡ惰性分离胶真实采血管采样的66例血糖标本、实验组按血糖浓度分为小于8mmol/L、8～11mmol/L之间、大于11mmol/L三组,并按采血后1、2、4和6小时分为四组并测定各组血糖浓度。(2)以同样的分离胶管采集血液标本31例,先作取血后的首次血糖测定,然后按采血后72小时再测定其血糖浓度。测定数据分别作方差分析,以观察其变化情况。结果以分离胶真空采血管采样、保存的血液标本中的葡萄糖浓度在6小时内的变化不明显,72小时内的血糖浓度变化也不大,表明3天内血液葡萄糖在分离胶真空采血管中的稳定性良好。结论分离胶血液真空采血管可在72小时内用于对血液葡萄糖的分离保存。

分离胶促凝管对10项生化检测项目影响的比对研究

目的通过与无抗凝管做比对,观察分离胶促凝管对丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总蛋白(TP)等10项生化检测项目的影响,判断两种管在10项生化检测项目上是否实质等同。方法按照美国临床和实验室标准协会的EP9-A2文件要求,以无抗凝管为参比方法(X),以分离胶促凝管为待比方法(Y),用随机抽取的血清样本对上述10项生化项目分别进行检测,计算相关系数及直线回归方程,以CLIA′88规定的室间质量评价允许误差范围的1/2为标准,判断不同检测系统的偏差临床是否可以接受性。结果在所检测的项目中,两种管子检测结果的偏差均在临床可接受范围内。结论在ALT等10项生化检测项目上,分离胶促凝管和无抗凝管可以实质等同。

用分离胶真空采血管保存血清对ALT测定结果的影响

观察用分离胶真空采血管保存血清对谷丙转氨酶(ALT)测定结果的影响。采集静脉血,分别置于两管分离胶真空采血管中,分离血清,立即测定ALT后,用原管保存血清,一管放室温,一管放4℃冰箱保存,连续4天测定两管血清ALT,对两组下降率进行比较。表明第2、3、4、5天测定结果表明,分离真空胶采血管室温保存血清ALT明显下降,下降率平均为16.2%、32.2%、47.0%、57.6%;将第1天和第2、3、4、5天的结果进行配对t检验.结果有显著性差异(P<0.05);同时测定4℃冰箱保存血清AST,平均每天下降率为6.9%、7.7%、10.2%、12.2%,下降率无显著性差异。这表明这种分离胶真空采血管室温保存血清,不能用于第2天以后检查及复查ALT。

含添加剂真空采血管对生化结果的影响分析

目的观察两种含添加剂的真空采血管和普通真空采血管对临床生化分析结果的差异,评价其在临床生化检验中的应用价值。方法采集同一供血者肘前正中静脉血,分别置于普通真空采血管(无任何添加剂)、含促凝剂的真空采血管和含分离胶的真空采血管中,采用日立7180生化分析仪在2 h内进行30项常规生化项目测定,并对结果进行比较分析。结果含促凝剂的真空采血管血清钾、乳酸脱氢酶、α-羟丁酸脱氢酶与普通真空采血管比较差异有统计学意义(P<0.05);含分离胶的真空采血管白蛋白与普通真空采血管比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论含添加剂的真空采血管对于某些生化项目结果有影响,使用前应对真空采血管进行评估,采用影响较小的真空采血管,以保证实验结果的准确性。

ISO15189认可过程中两种分离胶采样管的质量评价

目的探讨建立两种不同的分离胶采样管的质量评价方法。方法以硅化玻璃采血管为标准管,以两种分离胶采样管为测试管,随机收集50例患者血清,利用电化学发光、酶联免疫吸附法、反射发光法、免疫荧光法等方法定量或者定性检测血清中各种临床免疫、临床生化指标,并进行相应的统计分析。结果对于定量项目而言,两种分离胶采样管与标准管相比,检测结果比较差异无统计学意义(P>0.05);对于定性项目而言,两种分离胶采样管与标准管相比,真阳性率和真阴性率比较差异无统计学意义(P>0.05,K>0.75),一致性较好。结论通过使用不同的检测方法和检测项目证明了分别采用两种分离胶采样管不会影响到检测结果的准确性和一致性,初步建立了ISO15189实验室认可过程中该实验室针对外部供应品的质量评价方法。

惰性分离胶管采集保存样品对血糖结果的影响

目的:观察用惰性分离胶管采集保存样品对血糖结果的影响。方法:选择糖尿病及非糖尿病患者共80例,采用惰性分离胶真空管采集血标本,离心后吸取部分样品另行分装并做血糖的即时测定,放置24小时后再测定原始管与分装管的血糖结果。结果:即时测定与放置24小时的分装管和原始管之间的血糖结果差异无显著性(P>0.05)。结论:惰性分离胶试管可防止糖酵解,血糖测定时可在离心后用原始管保存待测样品。

多发性骨髓瘤患者血液异常分离结果的临床意义

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者血液异常分离结果的临床意义。方法选择河北省沧州中西医结合医院2008年3月—2019年10月收治的282例MM患者(IgG型152例、IgA型92例、IgD型6例、轻链型32例)以及同期200例自身免疫性疾病患者和200名健康体检者为研究对象。采用分离胶真空采血管采集空腹静脉血,离心后观察血液分离结果。根据血液分离结果将其分为对照组和异常组,比较两组检验免疫球蛋白(Ig)、总蛋白(TP)、血红蛋白(Hb)、血细胞比容(Hct)、血小板计数(PLT)、纤维蛋白原(Fig)水平的差异。结果自身免疫病患者、健康体检者及部分MM患者血液分离正常,分3层,自上而下依次为:血清、分离胶、红细胞,血清和红细胞比例适当;血液分离异常者均为MM患者,异常血液分离为4层,自上而下依次为:血清、红细胞、分离胶、红细胞,上层有少量血清,其下红细胞增多,底层有少量红细胞。282例MM患者中血液异常分离有46例(16.31%)。异常分离现象仅见于IgG型(28例)和IgA型(18例),所占比例分别为60.87%和29.13%。异常组TP、Ig水平高于对照组,Hb、Hct水平低于对照组(均P<0.05)。结论MM患者分离胶真空采血管可能存在血液分离异常现象。日常工作中遇到血液分离异常现象时,应及时与临床医师沟通并进一步进行确诊试验。

离心温度对惰性分离胶真空促凝管的影响

目的观察离心温度对惰性分离胶促凝管分离血清的影响。方法分别使用普通离心机和低温离心机对惰性分离胶促凝管进行离心分离血清,观察两种离心方式分离管中血清出现油珠的比率,并应用追溯性方法观察两种离心方式对仪器的影响及对一些生化项目结果的影响。结果室温应用普通离心机分离的惰性分离胶促凝管血清清晰,但有15%～20%的样品中出现了大小不一的油性小珠,而用低温离心机离心的试管分离出的血清,未发现油性小珠。仪器在受到分离胶干扰时及排除干扰后血清部分生化结果的对比,显示总蛋白、白蛋白受到的影响较大。结论离心温度对惰性分离胶促凝管分离血清有显著的影响,温度超过分离胶管要求的贮存温度时,惰性分离胶将溶解在血清中,不但对生化仪样品针及反应杯产生堵塞及污染,而且将对一些生化测定结果产生比较大的影响。