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SEPT9基因甲基化水平在膀胱尿路上皮病变鉴别诊断中的应用
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作者 王更芳 周晓莉 +1 位作者 郭媛 饶秋 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期373-379,共7页
目的探讨SEPT9基因甲基化水平在尿路上皮病变良、恶性鉴别诊断中的作用,并尝试通过联合使用SEPT9甲基化检测降低膀胱镜活检组织的假阴性率。方法对160例经病理诊断的尿路上皮病变进行SEPT9甲基化检测,分析其辅助诊断良、恶性病变的敏感... 目的探讨SEPT9基因甲基化水平在尿路上皮病变良、恶性鉴别诊断中的作用,并尝试通过联合使用SEPT9甲基化检测降低膀胱镜活检组织的假阴性率。方法对160例经病理诊断的尿路上皮病变进行SEPT9甲基化检测,分析其辅助诊断良、恶性病变的敏感性和特异性;比较癌和癌旁组织间SEPT9基因甲基化水平;在12例首次膀胱镜活检为炎症或良性病变而后续活检、电切为癌的病理组织中分别检测SEPT9基因甲基化水平。结果SEPT9基因甲基化水平鉴别诊断尿路上皮良、恶性病变的敏感性、特异性分别为98%(88/90)和94%(66/70)。47%(7/15)的癌旁组织中SEPT9基因甲基化检测结果为阳性,显示癌旁组织表观遗传修饰异常;12例首次膀胱镜活检为炎症或良性病变的组织中SEPT9基因甲基化检测阳性率为67%(8/12),再次活检、电切病理证实为癌的组织SEPT9甲基化检测阳性率为100%(12/12)。结论SEPT9基因甲基化检测可以辅助尿路上皮病变良、恶性鉴别诊断,并可能有助于减少膀胱镜活检组织的假阴性率。 展开更多
关键词 尿路上皮病变 活检组织 鉴别诊断 sept9甲基化
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SEPT12基因突变导致弱畸精子症引起男性不育
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作者 郭森朝 于慧 +6 位作者 顾梦 吴宝燕 李阔阔 汤冬冬 贺小进 曹云霞 吕明荣 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第6期939-946,共8页
目的研究septins基因家族成员SEPT12在人类精子发生过程的作用及其对精子运动力和精子超微结构的影响。方法对收集的375例弱畸精子症患者外周血提取DNA进行全外显子测序(WES),筛选出一例携带SEPT12复合杂合突变的特发性不育患者,行Sange... 目的研究septins基因家族成员SEPT12在人类精子发生过程的作用及其对精子运动力和精子超微结构的影响。方法对收集的375例弱畸精子症患者外周血提取DNA进行全外显子测序(WES),筛选出一例携带SEPT12复合杂合突变的特发性不育患者,行Sanger测序验证,家系共分离分析。用苏木精-伊红染色(HE)及扫描电镜(SEM)分析患者精子形态畸形,透射电镜(TEM)分析精子超微结构缺陷。然后,通过Western blot及免疫荧光(IF)分析突变对其蛋白水平及位置的影响及缺陷结构标志物位置及水平的变化情况。结果在1位弱畸精子症患者中筛选并鉴定SEPT12基因复合杂合突变c.C332A(p.T111K)和c.406_416 del TGCTCGTATTG(p.q 136 VFS*39)。Sanger测序验证,符合家系共分离遗传模式。突变导致其蛋白表达缺失、精子活力降低和精子形态畸形,主要包括短尾、卷尾、精子头部不规则。精子超微结构显示精子鞭毛中段与主段连接处的环缺失、精子头部顶体膜脱落、核空泡。精子鞭毛中段线粒体鞘排列紊乱、中央二联管缺失、微管双联体缺失及部分放射轴辐缺失。Western blot及IF结果显示SEPT家族相关蛋白SEPT4蛋白水平降低,SEPT6蛋白不变,顶体相关蛋白ACTL7A和ACROSIN蛋白缺失,线粒体及轴丝相关蛋白TOMM20,SPAG6和RSPH3蛋白水平显著降低。结论SEPT12基因突变引起SEPT12蛋白缺失,导致精子鞭毛中段与主段连接处环缺失,引起精子顶体、线粒体鞘及鞭毛组装异常。 展开更多
关键词 男性不育 弱畸精子症 sept12 全外显子测序
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超声微泡介导miR-545-3p通过调节SEPT2抑制乳腺癌的恶性进展
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作者 李雯静 张强 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第7期1222-1228,共7页
目的:研究超声微泡介导miR-545-3p通过调节胞裂蛋白2(septin 2,SEPT2)抑制乳腺癌恶性进展的机制。方法:以实时荧光定量PCR和免疫印迹实验检测人正常乳腺上皮细胞MCF-10A、人乳腺癌细胞MCF-7、HS-578T及HCC-1937细胞中miR-545-3p、SEPT2... 目的:研究超声微泡介导miR-545-3p通过调节胞裂蛋白2(septin 2,SEPT2)抑制乳腺癌恶性进展的机制。方法:以实时荧光定量PCR和免疫印迹实验检测人正常乳腺上皮细胞MCF-10A、人乳腺癌细胞MCF-7、HS-578T及HCC-1937细胞中miR-545-3p、SEPT2表达。体外培养MCF-7细胞并随机分为对照组、空微泡组、miR-545-3p微泡组、miR-545-3p+SEPT2过表达微泡组,分组处理后以实时荧光定量PCR和免疫印迹实验检测各组细胞miR-545-3p、SEPT2表达;以CCK-8、集落形成实验与流式细胞实验检测各组细胞增殖与凋亡;以细胞划痕、Transwell侵袭实验检测各组细胞迁移与侵袭。于裸鼠腹壁皮下接种MCF-7细胞构建其移植瘤模型并以同样方法分组,经分组处理后检测各组裸鼠肿瘤体积与质量。结果:与MCF-10A细胞相比,MCF-7、HS-578T及HCC-1937细胞中miR-545-3p表达降低(P<0.05),SEPT2 mRNA与蛋白表达升高(P<0.05)。与对照组相比,miR-545-3p微泡组细胞miR-545-3p表达、凋亡率升高(P<0.05),细胞SEPT2 mRNA与蛋白表达、细胞活力、集落形成率、迁移率、侵袭数、裸鼠肿瘤体积与质量降低(P<0.05);与miR-545-3p微泡组相比,miR-545-3p+SEPT2过表达微泡组细胞凋亡率降低(P<0.05),细胞SEPT2 mRNA与蛋白表达、细胞活力、集落形成率、迁移率、侵袭数、裸鼠肿瘤体积与质量升高(P<0.05)。结论:超声微泡介导miR-545-3p可通过降低SEPT2表达而减弱乳腺癌细胞增殖、迁移与侵袭,促使其凋亡,并抑制裸鼠移植瘤生长,最终抑制乳腺癌细胞恶性进展。 展开更多
关键词 超声微泡 miR-545-3p sept2 乳腺癌 恶性进展
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SEPT12基因新突变致弱畸精子症男性不育1例
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作者 刘红 周永红 +2 位作者 成艳君 杨宇霞 李雪梅 《汕头大学医学院学报》 2023年第2期120-121,共2页
1病例资料患者男,31岁,夫妻同居3年,性生活规律,每月5~7次,同房时阴茎勃起正常,阴道内射精。配偶平素月经规则,周期约28 d。经期7d,经量正常,各项基础内分泌检测正常。近3年未采取避孕措施而未育,于2018年5月到南方医科大学附属深圳市... 1病例资料患者男,31岁,夫妻同居3年,性生活规律,每月5~7次,同房时阴茎勃起正常,阴道内射精。配偶平素月经规则,周期约28 d。经期7d,经量正常,各项基础内分泌检测正常。近3年未采取避孕措施而未育,于2018年5月到南方医科大学附属深圳市妇幼保健院就诊。生殖系统检查显示,患者生殖器外形和功能正常,左、右睾丸体积均约为12 mL,质地正常。 展开更多
关键词 sept12基因 弱畸精子症 男性不育 精子环
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CircSEPT9调节miR-650/HSPB1轴对胶质瘤细胞恶性生物学行为影响的探讨 被引量:1
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作者 任成波 赵丽霞 +5 位作者 杜晓猛 李锦秋 邹念东 王聪 宋晓 张志林 《中国临床新医学》 2023年第8期842-849,共8页
目的探讨环状RNA(CircRNA)SEPT9调节miR-650/热休克蛋白B1(HSPB1)轴对胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响。方法通过实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)、Western blot法检测胶质瘤组织、癌旁组织、人类正常神经胶质细胞HEB及胶质瘤细胞系LN1... 目的探讨环状RNA(CircRNA)SEPT9调节miR-650/热休克蛋白B1(HSPB1)轴对胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响。方法通过实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)、Western blot法检测胶质瘤组织、癌旁组织、人类正常神经胶质细胞HEB及胶质瘤细胞系LN18、SW1088、U251中CircSEPT9、miR-650、HSPB1蛋白表达水平。将U251细胞分为对照组(NC组)、si-NC组、si-CircSEPT9组、mimic NC组、miR-650 mimic组、si-CircSEPT9+inhibitor NC组、si-CircSEPT9+miR-650 inhibitor组、si-CircSEPT9+pcDNA组、si-CircSEPT9+pcDNA-HSPB1组。采用qRT-PCR法检测CircSEPT9、miR-650表达水平。采用Western blot法检测HSPB1、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、Caspase-3、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达水平。通过双荧光素酶基因实验验证CircSEPT9与miR-650、miR-650与HSPB1的关系。结果在胶质瘤组织和细胞中,CircSEPT9和HSPB1蛋白呈高表达,miR-650呈低表达,且在U251细胞中CircSEPT9以及HSPB1蛋白表达水平最高,miR-650表达水平最低,差异有统计学意义(P<0.05)。沉默CircSEPT9或过表达miR-650均可抑制U251细胞增殖、侵袭、迁移及Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平,促进细胞凋亡及Caspase-3蛋白表达。下调miR-650或过表达HSPB1均可减弱沉默CircSEPT9对U251细胞的作用影响。CircSEPT9与miR-650、miR-650与HSPB1存在靶向关系。结论沉默CircSEPT9可能通过海绵化上调miR-650来抑制HSPB1表达,进而抑制U251细胞增殖、迁移与侵袭,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 环状RNA sept9 miR-650 热休克蛋白B1 胶质瘤 生物学行为
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CA125、HE4和mSEPT9对子宫内膜癌临床诊断价值的研究 被引量:6
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作者 吴健亮 闫洪超 《徐州医科大学学报》 CAS 2023年第1期54-58,共5页
目的评估血清中人附睾蛋白4(HE4)、糖类抗原125(CA125)、尿液中SEPT9基因甲基化(mSEPT9)水平在诊断子宫内膜癌的临床价值。方法选取2021年11月—2022年5月于徐州医科大学附属医院确诊为子宫内膜癌的患者40例作为研究组。选取同期子宫内... 目的评估血清中人附睾蛋白4(HE4)、糖类抗原125(CA125)、尿液中SEPT9基因甲基化(mSEPT9)水平在诊断子宫内膜癌的临床价值。方法选取2021年11月—2022年5月于徐州医科大学附属医院确诊为子宫内膜癌的患者40例作为研究组。选取同期子宫内膜良性病变患者39例作为对照组。采用化学发光法检测2组患者血清CA125、HE4水平。采用实时荧光定量PCR法检测2组患者尿液mSEPT9 Ct值。结果研究组血清CA125、HE4水平显著高于对照组(P<0.05)。根据ROC曲线,将血清CA125、HE4和尿液mSEPT9 Ct值的截断值分别设为14.65 kU/L,52.44 pmol/L,38.95。研究组CA125、HE4、mSEPT9阳性率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。CA125、HE4、mSEPT9的曲线下面积均>0.5,具有临床诊断意义,mSEPT9单项检测特异度明显高于HE4及CA125。CA125水平与病理分期、病理分级、淋巴脉管转移相关(P<0.05);HE4水平与年龄、肌层浸润深度相关(P<0.05);mSEPT9阳性率与手术病理分期、肌层浸润深度、淋巴及脉管转移相关(P<0.05)。结论尿液mSEPT9检测在子宫内膜癌筛查中具有较大潜力,为子宫内膜癌筛查提供新的思路。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 sept 9甲基化 肿瘤标志物 联合检测
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SEPT9甲基化检测在结直肠癌早期诊断中价值的研究进展 被引量:2
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作者 董优优(综述) 陈昌国(审校) 《国际检验医学杂志》 CAS 2023年第20期2548-2553,共6页
结直肠癌是我国常见恶性消化道肿瘤之一,其发病率逐年上升且预后不好,病死率较高。早发现、早诊断可有效降低结直肠癌致死率。目前,临床用于结直肠癌诊断及监测的肿瘤标志物有癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA199)、糖类抗原242(CA242)等... 结直肠癌是我国常见恶性消化道肿瘤之一,其发病率逐年上升且预后不好,病死率较高。早发现、早诊断可有效降低结直肠癌致死率。目前,临床用于结直肠癌诊断及监测的肿瘤标志物有癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA199)、糖类抗原242(CA242)等,这些标志物在结直肠癌早期诊断中的临床价值不够理想。因此,探索新的、早期诊断价值更高的肿瘤标志物用于结直肠癌筛查是当前研究的热点之一。SEPT9是一种抑癌基因,SEPT9基因甲基化检测对结直肠癌早期诊断有较高的特异度和灵敏度,该文就SEPT9基因甲基化检测在结直肠癌早期诊断中的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 结直肠癌 sept9 甲基化 肿瘤标志物 早期诊断
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血清SEPT9基因甲基化检测在结直肠癌诊断中的应用价值研究
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作者 虎文军 《中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生》 2023年第7期31-33,共3页
血清SEPT9基因甲基化检测在结直肠癌(CRC)诊断中的应用价值研究。方法取我院(2022年1月-2023年2月)结直肠癌70例,肠道腺瘤及息肉患者38例和15例其他肠道疾病患者,使用血清SEPT9基因甲基化检测,观察检查结果。结果 CRC的诊断价值敏感性... 血清SEPT9基因甲基化检测在结直肠癌(CRC)诊断中的应用价值研究。方法取我院(2022年1月-2023年2月)结直肠癌70例,肠道腺瘤及息肉患者38例和15例其他肠道疾病患者,使用血清SEPT9基因甲基化检测,观察检查结果。结果 CRC的诊断价值敏感性和特异性最高的是FOBT,分别为83.3%和93.3%。CEA的敏感性最低,为51.2%。SEP79检查约登指数最高为0.681,诊断准确性高于CEA,略高于3项联合检查准确性,但低于FOBT。回归结果显示,3个指标均为CEC的危险因素,(P<0.01)。结论 血清SEPT9基因甲基化水平软件检测CRC具备较高的敏感性和特异性,具备方法快速简便、患者生活质量高、手术治疗微创等优点和缺点。可广泛应用于疑似周围性肿瘤。人群。而且,SEPT9遗传基因甲基化与其他高甲基化标志物联合检测,能够进一步提高诊断效率。但血清SEPT9基因甲基化软件检测在结肠息肉的癌变筛查中具备良好而广阔的应用前景。 展开更多
关键词 血清sept9 基因甲基化 结直肠癌 筛查 诊断
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Difficult case of a trans-septal puncture: Use of a “SafeSept” guidewire
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作者 Martina Zucchetti Michela Casella +6 位作者 Antonio Dello Russo Gaetano Fassini Corrado Carbucicchio Eleonora Russo Vittoria Marino Valentina Catto Claudio Tondo 《World Journal of Cardiology》 CAS 2015年第8期499-503,共5页
A 69-year-old man was admitted to our center to undergo catheter ablation of paroxysmal atrial fibrillation refractory to antiarrhythmic drug therapy. This procedure required access to the left atrium through the inte... A 69-year-old man was admitted to our center to undergo catheter ablation of paroxysmal atrial fibrillation refractory to antiarrhythmic drug therapy. This procedure required access to the left atrium through the interatrial septum. During hospitalization, the patient performed routinely pre-procedure transthoracic echocardiography and gadolinium-enhanced cardiac magnetic resonance showing a normal anatomy of both the fossa ovalis and the interatrial septum. Access to the left atrium proved difficult and several unsuccessful attempts to perform the trans-septal puncture were made under both fluoroscopy and intracardiac echocardiography guidance, even with radiofrequency energy delivery. Finally, trans-septal puncture was successfully carried out using a novel nitinol J-shaped "Safe Sept" trans-septal guidewire, designed to cross the interatrial septum through the trans-septal needle thanks to a special sharp tip. Moreover, thanks to its rounded J shape that reduces the risk of atrial perforation, the "Safe Sept" guidewire, when advanced into the left atrium, becomes atraumatic. 展开更多
关键词 Trans-septal PUNCTURE "Safe sept" guide-wire Atrial fibrillation Interatrial septUM INTRACARDIAC echocardiography
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SEPT4蛋白在特发性弱精子症患者精子中的表达 被引量:11
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作者 李玉山 冯晓霞 +6 位作者 吉晓菲 王全先 高学敏 杨险峰 潘周辉 孙琳 马奎 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期699-702,共4页
目的:探讨SEPT4蛋白在特发性弱精子症发生机制中的作用。方法:采用非连续密度梯度离心分离和纯化精子,免疫细胞化学技术检测SEPT4在特发性弱精子症患者和正常男性精子中的定位及表达变化,同时用RT-PCR和W estern印迹技术,从基因和蛋白... 目的:探讨SEPT4蛋白在特发性弱精子症发生机制中的作用。方法:采用非连续密度梯度离心分离和纯化精子,免疫细胞化学技术检测SEPT4在特发性弱精子症患者和正常男性精子中的定位及表达变化,同时用RT-PCR和W estern印迹技术,从基因和蛋白水平检测SEPT4的表达及差异。结果:免疫细胞化学表明,SEPT4定位于精子环并且在特发性弱精子症患者精子中的表达显著低于正常男性(94.75±19.95vs111.51±17.57,t=3.452,P<0.01);RT-PCR显示,特发性弱精子症患者精子中SEPT4 mRNA的表达水平与正常男性相比显著降低(0.56±0.15vs0.71±0.16,t=3.521,P<0.05);W estern印迹结果与RT-PCR结果一致,SEPT4蛋白在特发性弱精子症患者精子中的表达亦显著低于正常男性(0.48±0.20vs0.77±0.18,t=5.872,P<0.05)。结论:SEPT4在特发性弱精子症患者精子中的表达水平显著降低,可能是导致弱精子症发生的原因之一。 展开更多
关键词 sept4蛋白 特发性弱精子症 精子环 逆转录-聚合酶链反应 免疫印迹
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利用SEPT9基因甲基化检测筛查结直肠癌的研究进展 被引量:6
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作者 宋乐乐 李月敏 +1 位作者 宫媛 何宝明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期589-594,共6页
结直肠癌发病率位居全球恶性肿瘤第三位,早期诊断和治疗可以大大降低结直肠癌的病死率。由于目前临床较普遍使用的粪便潜血和结肠镜检查患者依从性低,所以外周血Septin9(SEPT9)基因甲基化检测为结直肠癌早期诊断和筛查提供了一个较为有... 结直肠癌发病率位居全球恶性肿瘤第三位,早期诊断和治疗可以大大降低结直肠癌的病死率。由于目前临床较普遍使用的粪便潜血和结肠镜检查患者依从性低,所以外周血Septin9(SEPT9)基因甲基化检测为结直肠癌早期诊断和筛查提供了一个较为有前景的选项。截至目前有数项临床试验证明此检测对结直肠癌的灵敏度和特异性较高,与癌分期有一定相关性,其检测效果优于化学法粪便潜血检测及糖蛋白类肿瘤标志物,与免疫学粪便潜血检测和粪便DNA检测相比,也具备一定优势。此检测对结直肠癌前病变如腺瘤的检测效果仍有待观察,但其有可能成为结直肠癌治疗效果、复发和转移的监测指标,并对肿瘤的分期和分型有辅助作用。本文将简要介绍此检测的原理,重点回顾以此方法检测结直肠癌的临床研究,并与其他方法进行比较,最后简述其未来可能的应用方向。 展开更多
关键词 septin9(sept9) DNA甲基化 结直肠癌 腺瘤 息肉 便潜血试验
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血浆循环肿瘤DNA SEPT9基因甲基化与血清CEA及CA19-9在结直肠癌辅助诊断中的价值 被引量:6
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作者 刘伟 付波 +5 位作者 张安琪 刘义华 卢燕 张姗 唐文强 潘丽 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第41期68-70,共3页
目的比较SEPT9基因甲基化(m SEPT9)与癌胚抗原(CEA)及糖类抗原19-9(CA19-9)在结直肠癌(CRC)辅助诊断中的价值。方法收集CRC 35例(CRC组)、结肠直肠腺瘤65例(腺瘤组)和健康对照人群104例(对照组)的外周血样本,通过Real-time PCR法检测血... 目的比较SEPT9基因甲基化(m SEPT9)与癌胚抗原(CEA)及糖类抗原19-9(CA19-9)在结直肠癌(CRC)辅助诊断中的价值。方法收集CRC 35例(CRC组)、结肠直肠腺瘤65例(腺瘤组)和健康对照人群104例(对照组)的外周血样本,通过Real-time PCR法检测血浆m SEPT9状态,通过化学发光法检测血清CEA和CA19-9。结果 CRC组、腺瘤组、对照组血浆m SEPT9阳性率分别为74.29%(26/35)、12.31%(8/65)、1.92%(2/104),组间比较差异有统计学意义(P均<0.001)。CRC组、腺瘤组、对照组血清CEA阳性率分别为34.29%(12/35)、3.18%(2/63)、1.92%(2/104),组间比较差异有统计学意义(P均<0.001)。CRC组、腺瘤组、对照组血清CA19-9阳性率分别为17.14%(6/35)、0(0/62)、0.96%(1/104),组间比较差异有统计学意义(P均<0.001)。在不同TNM分期的CRC患者中m SEPT9阳性率:Ⅰ期60.0%(3/5),Ⅱ期62.5%(5/8),Ⅲ期77.78%(7/9),Ⅳ期84.62%(11/13);CEA阳性率:Ⅰ期0(0/5),Ⅱ期25%(2/8),Ⅲ期22.2%(2/9),Ⅳ期61.54%(8/13);CA19-9阳性率:Ⅰ期0(0/5),Ⅱ期12.5%(1/8),Ⅲ期11.1%(1/9),Ⅳ期30.77%(4/13)。CRC中m SEPT9的灵敏度和特异度分别为74.29%和94.08%,高于CEA及CA19-9单独检测(分别为34.29%和17.14%)或二者联合检测(37.14%)的灵敏度,差异有统计学意义(P均<0.01)。m SEPT9在早期(Ⅰ~Ⅱ期)CRC中的阳性率达61.54%,高于CEA及CA19-9的阳性率(分别为15.38%和7.69%),差异有统计学意义(P<0.05)。在CRC中m SEPT9与CEA联合的灵敏度为80%,与CA19-9联合的灵敏度为77.14%,三者联合的灵敏度为80%,与m SEPT9单独应用相比均不能显著提高CRC辅助诊断的灵敏度(P均>0.05)。结论 m SEPT9与CEA和CA19-9相比,在CRC辅助诊断中具有更高的灵敏度,可作为独立的分子标志物,且可用于CRC早期诊断。 展开更多
关键词 结直肠癌 sept9基因甲基化 癌胚抗原 糖类抗原19-9
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MS-HRM检测游离甲基化SEPT9在结直肠癌早期诊断中的应用 被引量:6
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作者 王侦 陈嘉昌 +4 位作者 何琼 彭焕玉 朱振宇 陈华云 李明 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1732-1734,共3页
目的建立一种稳定的甲基化敏感高分辨率熔解曲线(MS-HRM)定量检测血浆游离甲基化SEPT9的方法,并初步探讨利用此方法进行结直肠癌早期诊断的可行性。方法按照不同比例混合甲基化和未甲基化DNA建立标准品,复管反应作出标准熔解曲线,定量检... 目的建立一种稳定的甲基化敏感高分辨率熔解曲线(MS-HRM)定量检测血浆游离甲基化SEPT9的方法,并初步探讨利用此方法进行结直肠癌早期诊断的可行性。方法按照不同比例混合甲基化和未甲基化DNA建立标准品,复管反应作出标准熔解曲线,定量检测36例结直肠癌患者血浆样本和20例正常人血浆样本甲基化SEPT9,并与Methylight进行比较。梯度稀释其中1例结直肠癌血浆游离DNA,分析其甲基化程度与DNA量是否独立。随机取2例结直肠癌样本重复甲基化修饰至MS-HRM分析,以排除修饰不完全对实验结果的影响。结果 SEPT9 MS-HRM法可检出混合甲样本中1%的甲基化,其检测灵敏度达1%。36例结直肠癌患者血浆中检测到25例(69.44%)有不同程度SEPT9基因甲基化,20例正常人血浆样本有2例(10%)呈现1%~5%甲基化。不同DNA量甲基化程度恒定,初步确定检测范围可达皮克级DNA。2例独立重复检测样本检测结果基本符合初次实验结果。结论 MS-HRM法检测游离的甲基化SEPT9简单易行,快速,稳定,敏感性高,检测样本范围广,有望为结直肠癌筛查开拓一个新平台。 展开更多
关键词 结直肠癌 sept9 甲基化 高分辨率熔解曲线 MS-HRM
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血清SEPT9基因甲基化检测在结直肠癌诊断中的应用 被引量:15
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作者 郁迪 张小虎 鲁辛辛 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2015年第9期687-689,共3页
目的探讨血清代替血浆检测SEPT9基因甲基化在结直肠癌(CRC)诊断中的价值。方法收集70例CRC患者、38例腺瘤或息肉患者及15例其他肠道疾病患者血清样本。用Epi pro Colon 2.0试剂盒进行SEPT9基因甲基化检测,依据肠镜病理诊断进行验证,比... 目的探讨血清代替血浆检测SEPT9基因甲基化在结直肠癌(CRC)诊断中的价值。方法收集70例CRC患者、38例腺瘤或息肉患者及15例其他肠道疾病患者血清样本。用Epi pro Colon 2.0试剂盒进行SEPT9基因甲基化检测,依据肠镜病理诊断进行验证,比较SEPT9、癌胚抗原(CEA)和粪便潜血试验(FOBT)的敏感性和特异性,并进行统计学分析。结果 CRC患者血清SEPT9的阳性率(81.4%)明显高于对照组(13.2%),差异有统计学意义(χ2=92.814,P〈0.01)。CRC患者血清SEPT9的敏感性为81.4%(95%CI:72.4%-90.4%)、特异性为86.7%(95%CI:72.4%-100%)。临床分期为Ⅰ期的CRC患者SEPT9阳性率为42.9%,Ⅱ期为88.9%,Ⅲ期为82.4%,Ⅳ期为100%,差异有统计学意义(χ2=16.572,P〈0.01)。SEPT9的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.841,明显高于CEA(0.716)和FOBT(0.792)。3者联合检测AUCROC可达0.935。结论血清SEPT9基因甲基化的检测是早期诊断CRC的有效方法,联合检测CEA及FOBT可以提高诊断效能。 展开更多
关键词 结直肠癌 sept9 血清
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SEPT9与RNF180基因甲基化检测在早期胃癌筛查中的诊断价值 被引量:13
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作者 曹长琦 常琳 吴齐 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2019年第24期1251-1255,共5页
目的:胃癌在恶性肿瘤死亡率排名中位居前列,由于诊断时通常为进展期,因此预后较差。无创的早期胃癌(early gastric cancer,EGC)筛查技术,对提高患者5年生存率、降低癌症相关死亡率非常重要。本研究探讨外周血中SEPT9和RNF180的甲基化对... 目的:胃癌在恶性肿瘤死亡率排名中位居前列,由于诊断时通常为进展期,因此预后较差。无创的早期胃癌(early gastric cancer,EGC)筛查技术,对提高患者5年生存率、降低癌症相关死亡率非常重要。本研究探讨外周血中SEPT9和RNF180的甲基化对EGC的诊断价值。方法:本研究共纳入74例EGC患者(EGC组),99例胃良性疾病患者(胃良性疾病组),包括炎症、息肉、肠上皮化生、胃良性溃疡等,以及57例健康受试者(健康对照组)。对上述3组患者外周血中SEPT9和RNF180的甲基化进行检测,计算敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值,并计算ROC曲线下面积(AUC)。结果:SEPT9甲基化对EGC的敏感度为28.3%(95%CI:18.5%~40.0%),特异度为94.2%(95%CI:89.3%~97.3%),AUC为0.616(95%CI:52.0%~71.1%)。RNF180甲基化的敏感度为32.4%(95%CI:22.0%~44.3%),特异度89.7%(95%CI:83.9%~94.0%),AUC为0.636(95%CI:54.2%~73.0%)。两个基因甲基化的联合诊断敏感度为40.5%(95%CI:29.3%~52.6%),特异度为85.3%(95%CI:78.7%~90.4%),AUC为0.650(95%CI:55.7%~74.4%)。结论:SEPT9和RNF180甲基化有可能作为诊断EGC的生物学标志物。 展开更多
关键词 早期胃癌 诊断性生物学标志物 甲基化 sept9 RNF180
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沉默SEPT9基因对肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响 被引量:2
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作者 曾永秋 曹洋 +2 位作者 梅志强 刘岚 税青林 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期236-239,共4页
目的探讨SEPT9基因与肝癌的关系,进一步揭示SEPT9基因在肝癌发生发展过程中的作用。方法将构建的针对SEPT9基因的shRNA表达载体通过脂质体LipofectamineTM2000转染人肝癌HepG2细胞,荧光显微镜下观察细胞的转染效率,RT-PCR、Western blo... 目的探讨SEPT9基因与肝癌的关系,进一步揭示SEPT9基因在肝癌发生发展过程中的作用。方法将构建的针对SEPT9基因的shRNA表达载体通过脂质体LipofectamineTM2000转染人肝癌HepG2细胞,荧光显微镜下观察细胞的转染效率,RT-PCR、Western blot法分别检测SEPT9 mRNA和蛋白质的表达抑制情况,CCK-8检测细胞的生长抑制情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果荧光显微镜观察细胞的转染效率达到70%以上;SEPT9 mRNA及蛋白表达抑制率均受到明显抑制。CCK-8法检测结果显示,实验组HepG2细胞的生长受到明显抑制;流式细胞术检测结果显示实验组HepG2细胞凋亡明显(P<0.05)。结论抑制SEPT9基因的表达可有效抑制HepG2细胞的增殖,并对细胞凋亡有明显的促进作用。 展开更多
关键词 sept9基因 RNAI HEPG2细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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S100A4、SEPT7在儿童神经胶质瘤的表达特点及临床意义 被引量:3
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作者 李毅力 李映良 +3 位作者 梁平 翟暄 周渝冬 李禄生 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第16期1673-1676,共4页
目的研究儿童神经胶质瘤中S100A4、SEPT7的表达并比较其表达特点,探讨其在儿童神经胶质瘤中的表达与病理分级间的关系及临床意义。方法采用免疫组化(S-P法)检测10例儿童正常脑组织标本和37例儿童脑神经胶质瘤标本中S100A4、SEPT7的表达... 目的研究儿童神经胶质瘤中S100A4、SEPT7的表达并比较其表达特点,探讨其在儿童神经胶质瘤中的表达与病理分级间的关系及临床意义。方法采用免疫组化(S-P法)检测10例儿童正常脑组织标本和37例儿童脑神经胶质瘤标本中S100A4、SEPT7的表达,计算其阳性细胞的标记指数和阳性细胞表达率,通过SPSS 17.0分析儿童神经胶质瘤中S100A4、SEPT7的表达和儿童神经胶质瘤病理分级的相关性。结果 S100A4呈棕黄色颗粒散在分布,在细胞质和细胞间质中阳性表达。在儿童神经胶质瘤组织中表达率为72.97%,在儿童正常对照组织中未见明显表达,病理分级与S100A4的阳性表达呈正相关(r=0.800,P<0.05)。SEPT7蛋白在儿童脑神经胶质细胞瘤中的表达主要存在细胞质内,在儿童正常脑组织中的表达为100.00%,在神经胶质瘤组织中表达率为54.05%,病理分级与SEPT7的阳性表达呈负相关(r=-0.674,P<0.05)。S100A4和SEPT7两者在同一级别儿童胶质瘤中的表达呈负相关(r=-0.617,P<0.01)。结论联合检测儿童神经胶质瘤S100A4和SEPT7的蛋白表达对评估儿童胶质瘤的恶性程度有重要的参考意义。 展开更多
关键词 神经胶质细胞瘤 儿童 S100A4 sept7 免疫组织化学
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SEPT9基因甲基化在直结肠癌早期诊断中应用的临床意义 被引量:5
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作者 张立营 陈朴 +1 位作者 高鹏 沈伟 《医学研究杂志》 2016年第8期142-144,152,共4页
目的集中探讨SEPT9基因甲基化对于直结肠癌早期诊断中的临床应用意义。方法随机选取2015年3~12月因患结直肠癌于笔者医院普外科进行手术治疗的患者100例,从术中切取的癌灶、其癌旁组织和术前粪便样本中提取DNA,应用多重置换扩增(MD... 目的集中探讨SEPT9基因甲基化对于直结肠癌早期诊断中的临床应用意义。方法随机选取2015年3~12月因患结直肠癌于笔者医院普外科进行手术治疗的患者100例,从术中切取的癌灶、其癌旁组织和术前粪便样本中提取DNA,应用多重置换扩增(MDA)结合巢式甲基化特异性PCR扩增技术(nMPS)检测患者术前粪便样本中SEPT9基因的甲基化水平,同时比较粪便同癌灶组织中SEPT9基因甲基化在诊断结直肠癌中的敏感度及特异性。结果针对100例患者的癌灶组织的SEPT9基因的分析的过程中,基因甲基化的发生率为84.0%;在针对癌旁组织的SEPT9基因的过程中,基因甲基化的发生率为8.0%。患者癌灶及癌旁组织SEPT9基因甲基化发生率的比较差异有统计学意义(P〈0.01);临床分期为Ⅰ、Ⅱ期的结直肠癌患者,采用SEPT9基因甲基化诊断的准确率为87.5%;临床分期为Ⅲ、Ⅳ期的结直肠癌患者,采用SEPT9基因甲基化诊断的准确率为80.0%。针对不同的临床分期,采用SEPT9基因甲基化诊断结直肠癌的准确率差异无统计学意义(P〉0.05)。结论因粪便中SEPT9基因甲基化检测在结直肠癌患者中的特异性和敏感度较高,可在临床中应用于直结肠癌的早期诊断。 展开更多
关键词 sept9基因 直结肠癌 早期诊断
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帕金森病患者SEPT14基因多态性与临床症状的关系分析 被引量:3
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作者 宋秋霞 刘燕 +3 位作者 郭淼 王琳琳 王琳 张晓莺 《脑与神经疾病杂志》 CAS 2021年第11期688-693,共6页
目的探讨SEPT14 rs73701167、rs10241628位点多态性与与帕金森病(Parkinson’s disease,PD)的相关性,比较两位点多态性不同基因型对PD患者临床症状的影响。方法应用竞争性等位基因特异性PCR(kompetitive allele specific PCR,KASP)技术... 目的探讨SEPT14 rs73701167、rs10241628位点多态性与与帕金森病(Parkinson’s disease,PD)的相关性,比较两位点多态性不同基因型对PD患者临床症状的影响。方法应用竞争性等位基因特异性PCR(kompetitive allele specific PCR,KASP)技术分析新疆地区192例PD患者和192例健康对照者的SEPT14基因rs73701167、rs10241628位点多态性。对PD患者采用统一的调查表、统一PD评定量表(the Unified Parkinson’s Disease Rating Scale,UPDRS)、Hoehn-Yahr(H-Y)分级量表、简易精神状态检查(Mini-Mental State Examination,MMSE)量表和日常生活能力问卷(activities of daily living,ADL)进行评定,比较两个SNP位点不同基因型间PD患者的临床症状是否存在差异。结果(1)PD组和对照组间rs10241628的基因型和等位基因分布频率比较差异均无统计学意义(均P>0.05);(2)在总体样本中,PD组和对照组间rs73701167基因型频率比较差异无统计学意义(P>0.05)。进一步按照性别、年龄进行分层,在男性PD组和男性对照组间、女性PD组和女性对照组间、年龄<65岁的PD组和年龄<65岁的对照组间,rs73701167基因型频率比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。在年龄≥65岁的PD组和年龄≥65岁的对照组间,PD组TT基因型频率(80.6%)高于对照组(69.4%),差异有统计学意义(P=0.045,OR=1.840,95%CI为1.009-3.356);(3)PD患者不同rs73701167基因型间是否"N"字型进展分布有统计学意义(P=0.041),CT基因型PD患者非"N"字型进展、是"N"字型进展的频率分别为70.0%和30.0%。结论SEPT14基因rs10241628多态性与PD的发病不相关。SEPT14基因rs73701167多态性与年龄≥65岁群体PD的发病可能高度相关,在年龄≥65岁人群中携带rs73701167 TT基因型者其PD发病风险是非TT基因型携带者的1.84倍。携带rs73701167 CT基因型的PD患者病情进展呈现非"N"字型进展的概率更高。 展开更多
关键词 帕金森病 sept14基因 临床症状
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特发性弱精子症患者精子中SEPT7的表达 被引量:2
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作者 李玉山 杨夕阳 +5 位作者 侯方圆 王全先 刘军杰 王琳凯 苏彦华 孙琳 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2017年第1期48-51,共4页
目的:检测特发性弱精子症患者精子中SEPT7的表达。方法:正常对照组30例,特发性弱精子症组30例(弱精子症组),采用密度梯度离心法收集精子,分别采用RT-PCR和Western blot检测精子中SEPT7 mRNA和蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,弱精子... 目的:检测特发性弱精子症患者精子中SEPT7的表达。方法:正常对照组30例,特发性弱精子症组30例(弱精子症组),采用密度梯度离心法收集精子,分别采用RT-PCR和Western blot检测精子中SEPT7 mRNA和蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,弱精子症组精子中SEPT7 mRNA和蛋白的表达水平均降低(P均<0.001)。结论:SEPT7的表达水平降低可能影响精子活力。 展开更多
关键词 sept7 特发性弱精子症
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