支气管哮喘合并RSV感染患儿IgE、Th17、CD4^+CD25^+Treg评估病情效能

目的观察分析外周血血清免疫球蛋白E(serum immunoglobulin E,IgE)、辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)、CD4^+CD25^+调节性T细胞(regulatory cells,简称Tregs)水平在支气管哮喘(bronchial asthma,BA)合并呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染患儿病情评估中的效能。方法选取本院2017年1月—2019年10月收治的BA合并RSV感染患儿80例设为研究对象,其中40例为疾病发作期定义为A组,40例病情缓解期定义为B组,选取同时期健康体检儿童40例设为参照组,比较三组儿童外周血IgE、Th17、CD4^+CD25^+Treg水平以及炎性因子相关指标变化。结果外周血IgE与Th17水平A组>B组>参照组,CD4^+CD25^+Treg水平A组<B组<参照组(P<0.05)。白介素17(interleukin,IL-17)指标水平A组>B组>参照组,白介素10(IL-10)与干扰素-α(Interferon,IFN-α)指标水平A组<B组<参照组(P<0.05)。结论BA合并RSV感染患儿IgE与Th17水平显著增加,CD4^+CD25^+Treg水平明显降低,评估相关指标变化能确定患儿病情效能,从而实施对症治疗,加速疾病康复。

慢性阻塞性肺疾病患者外周血CD_4^+CD_(25)^+调节性T细胞和Foxp3的表达

目的探讨慢性阻塞性肺疾病患者外周血CD_4^+CD_(25)^+调节性T细胞及Foxp3的表达及意义。方法采用病例-对照研究,选取2013年6月至2015年3月在我院就诊的105例慢阻肺患者作为病例组,另选健康人群108例作对照组。对受试者进行肺功能测定;流式细胞术检测外周血Treg表达;ELISA检测血清浓度;RT-PCR检测Foxp3 mRNA表达,并进行相关统计分析。结果与对照组比较,慢阻肺患者FEV_1、FEV_1/FVC水平,IL-10、TGF-β浓度,Foxp3 mRNA及蛋白的表达,CD_4^+Treg、CD_4^+CD_(25)^+Treg的表达和CD_4^+CD_(25)^+Treg所占CD_4^+Treg比例显著降低(P<0.01);Foxp3 mRNA和蛋白与肺功能指标FEV_1(%)和FEV_1/FVC(%)以及蛋白与血清细胞因子IL-4、IL-10、IFN-α、IFN-γ和TGF-β均呈一定的正相关(P<0.05)而与FVC(%)和PEF(%)无显著相关性(P>0.05)。结论慢阻肺患者CD_4^+CD_(25)^+调节性细胞数量减少且血清浓度降低,Foxp3基因表达降低。

小鼠Foxp3抗血清的制备及应用

目的:制备高效价的特异性小鼠Foxp3抗血清,并初步应用于正常小鼠组织的Foxp3表达的鉴定。方法:构建重组质粒pGEX-6p-2/Foxp3,并转化至E.coliBL21(DE3)中进行大量诱导表达,用纯化的重组融合蛋白免疫新西兰兔,制备抗血清。以制备的抗血清为一抗,Western blot检测小鼠组织的Foxp3蛋白的表达。结果:SDS-PAGE及Western blot鉴定,诱导表达及纯化的重组融合蛋白能被抗GST单克隆抗体(mAb)识别,在Mr45000附近有特异条带,与预期融合蛋白大小一致,获得的抗血清效价在1∶12800以上,该抗血清能特异性识别NIH3T3细胞中表达的Foxp3蛋白。Westernblot鉴定结果显示在脾脏、胸腺、淋巴结中Foxp3蛋白有较高表达,胃也有少量的表达,而骨骼肌、脂肪组织未见表达。结论:制备了高效价的特异性小鼠Foxp3抗血清,并可用于正常小鼠组织的Foxp3蛋白的表达鉴定,为进一步研究Foxp3奠定了实验基础。

成人Still病相关噬血细胞性淋巴细胞组织增多症37例临床分析

目的 探讨成人Still病相关噬血细胞性淋巴细胞组织增多症(AOSD-HLH)的临床特点及可能用于早期识别该病并监测其治疗效果的指标.方法 回顾性分析2012年6月~2017年4月于我科治疗的37例AOSD-HLH患者的临床资料、实验室检查结果、治疗方案及预后情况,并对其进行随访.总结不同治疗方案患者的生存情况,并比较分析其治疗前后各项实验室指标的变化情况.结果 37例AOSD-HLH患者中,男9例,女28例,中位年龄26岁.随访至2017年5月,共死亡6例,存活31例,存活率为83.8% .主要临床表现为发热(100.0% )、皮疹(86.5% )和脾肿大(83.8% );实验室检查表现为血清铁蛋白升高(97.3% )、噬血现象(83.3% )、自然杀伤细胞(NK细胞)活性降低(74.2% )和可溶性 CD25 (sCD25 )升高(65.6% ).患者治疗后的血清铁蛋白(P<0.001)、sCD25(P=0.002)、白细胞介素(IL)-18(P=0.043)水平较治疗前均明显下降.根据预后将患者分为存活组和死亡组进行比较结果显示,死亡组确诊时的sCD25(P=0.020)、IL-18 (P=0.037)水平均明显高于存活组,PLT计数明显低于存活组(P=0.031).结论 AOSD-HLH临床表现多样,其中最具早期诊断意义的表现为脾肿大.对于NK细胞活性降低、sCD25升高及脾肿大的 AOSD患者应注意其是否出现继发性 HLH.血清铁蛋白、IL-18及 sCD25可作为监测AOSD-HLH治疗效果的指标.

自身免疫在复发性流产中的表达

目的研究复发性流产(RSA)患者外周血自身免疫抗体、淋巴细胞亚群及血清维生素D水平表达及其临床意义。方法选取2015年2月—2018年5月来我院就诊的RSA保胎患者500例作为RSA组,另选取同期我院体检健康的孕妇500例作为对照组,比较两组受试者外周血自身免疫抗体、淋巴细胞亚群及血清维生素D水平。结果 RSA组抗心磷脂抗体检出率21.8%、抗核抗体检出率20.4%、抗甲状腺过氧化物酶抗体检出率27.2%、抗子宫内膜抗体检出率19.0%、抗精子抗体检出率15.4%、抗绒毛膜促性腺激素抗体检出率13.6%、CD4^+/CD8^+比值(1.58±0.26)均高于正常孕妇组,差异均具有统计学意义(P <0.05);CD4^+CD25^+Tr含量(10.82±2.13),25(OH)D含量(17.84±2.23)ng/mL均低于正常孕妇组,差异均具有统计学意义(P <0.05)。结论自身免疫反应、CD4^+/CD8^+比值升高,CD4^+CD25^+Tr、维生素D水平不足可能是导致复发性流产的危险因素。

中药联合化疗对ALL患者CD4、CD25细胞调节及sE-cad的影响

目的:研究中药联合化疗方案对急性淋巴细胞白血病(Acute lymphocytic leukemia,ALL)患者CD4+、CD25+细胞调节的影响、血清s E-cad的影响以及临床意义。方法:选取我院血液科收治的急性淋巴细胞白血病患者60例,随机分为两组,其中对照组30例给予常规化疗方案治疗,中药组30例在常规化疗方案的基础上加用中药辅助治疗。对比治疗前后患者血常规、CD4+、CD25+细胞及血清s E-cad的改变。结果:1治疗后两组患者CD4+、CD25+T细胞较治疗前均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),与对照组相比,中药组CD4+、CD25+T细胞下降明显,差异有统计学意义(P<0.05);2治疗后两组患者血清s E-cad均改善,且中药组(55.58±10.47)较对照组(67.27±11.32)明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);3两组有效率比较重,中药组总有效率(86.67%)明显优于对照组(66.67%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:中药联合化疗治疗急性淋巴细胞白血病CD4+、CD25+T细胞调节及血清s E-cad的改变明显,对临床具有指导意义。

表达抗-CD25单克隆抗体的GS-NS0骨髓瘤细胞无血清培养及代谢特性

抗-CD25单克隆抗体作为免疫抑制剂拥有广阔的市场前景和巨大的经济价值。本实验以表达抗?CD25单克隆抗体的GS-NS0细胞为研究对象,开发了支持其大规模培养和抗体表达的无血清低蛋白培养基,批培养最大活细胞密度和最大抗体浓度分别达3×106cells/mL和300mg/L以上,比商业无血清培养基(Excell 620+0.2% primatone)分别提高了100%和46%。通过批培养实验,研究了细胞的生长、葡萄糖和氨基酸代谢、以及产物表达特点,并揭示了批培养过程中初始葡萄糖浓度对GS-NS0细胞生长与代谢的影响规律。为优化GS-NS0细胞培养过程和抗CD25单抗成功迈向产业化提供了重要的科学依据。

针灸及其血清对荷瘤小鼠CD4^+CD25^+Treg细胞体外增殖的影响

目的:观察针灸治疗对H_(22)荷瘤小鼠CD4^+CD25^+Treg细胞(CD4^+CD25^+regulatory T cells)体外增殖的影响和针灸血清刺激下的CD4^+CD25^+Treg细胞的体外增殖变化,探讨针灸及其血清对荷瘤小鼠免疫调节细胞的干预作用。方法:48只小鼠随机分为电针治疗组、艾灸治疗组、肿瘤对照组、正常对照组。采用H_(22)肿瘤细胞移植性实体瘤模型,电针和艾灸"大椎"治疗后,磁珠分离CD4^+CD25^+Treg细胞,氚标记胸腺嘧啶核苷掺入法观察不同组小鼠CD4^+CD25^+Treg细胞体外增殖能力和针灸血清对CD4^+CD25^+ Treg细胞体外增殖的影响。结果:肿瘤对照组CD4^+CD25^+Treg细胞增殖水平比正常对照组明显增高(P<0.05);电针治疗组和艾灸治疗组CD4^+CD25^+Treg细胞增殖水平与肿瘤对照组比较均明显降低(P<0.01)。电针治疗组和艾灸治疗组1:1、1:8稀释度血清刺激正常小鼠CD4^+CD25^+Treg细胞体外增殖,较正常对照、肿瘤对照组血清显著增高(P<0.05),各组1:16、1:32稀释度血清对Treg细胞作用的差别无统计学意义(P>0.05)。结论:针灸治疗能下调荷瘤小鼠CD4^+CD25^+Treg细胞体外增殖能力。不同浓度针灸血清体外刺激CD4^+CD25^+Treg细胞增殖表现出不一致的效应。

可溶性白细胞介素2受体／血清铁蛋白对诊断淋巴瘤相关性噬血细胞综合征的意义

目的探讨可溶性白细胞介素2受体（sCD。）／血清铁蛋白在诊断淋巴瘤相关性噬血细胞综合征（LAHS）中的意义，为进一步提高LAHS诊断率，及时诊断和治疗LAHS提供临床依据。方法收集2008年10月至2011年6月首都医科大学附属北京友谊医院经诊的确诊噬血细胞综合征患者70例，包括31例LAHS和39例非LAHS。收集所有患者血清，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测其sCD25水平，并于当日检测血清铁蛋白水平，然后计算sCD25和血清铁蛋白的比值，并比较LAHS和非LAHS之间血清sCD25、血清铁蛋白以及sCD。／血清铁蛋白有无差异。结果LAH：S和非LAHS患者sCD25质量浓度分别为（15760．52±7851．74）、（12727．41±11285．28）pg／ml（t=-1．78，P=0．075，血清铁蛋白中位质量浓度分别为1750．00、2947．00ng／ml（Z=-1．490，P=0．136），sCD25／血清铁蛋白中位比值分别为8．57×10^-3、2．84×10^-3，差异具有统计学意义（Z=-2．106，P=0．035）。结论sCD25／血清铁蛋白在LAHS中明显升高，对诊断LAHS具有重要的提示意义，有可能成为诊断LAHS的重要指标。