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Some biological characteristics of hybridomas and parental myelomas cultivated in serum-free medium for long-term period
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作者 李纪良 李英杰 +2 位作者 巢穗 欧阳明辉 彭一兵 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1992年第3期246-250,共5页
It has been developed in this laboratory that a serum-free medium, designated asDMI,is adaptive for long-term culture,freezing and resurgence in liquid nitrogen,and cloningof hybridoma and parental myelomas as well as... It has been developed in this laboratory that a serum-free medium, designated asDMI,is adaptive for long-term culture,freezing and resurgence in liquid nitrogen,and cloningof hybridoma and parental myelomas as well as for cell fusions.In this report,it is describedthat the myeloma cells grown in DMI for more than 3 months maintained their biological charac-teristics such as induction of aseites and subcutaneous somatic tumor in BALB/c mice and toler-ance toward 8-azaguanine,ete..However,the ability of the tumor cells to attach to glass wallwas decreased.The selecting assay of these cells in HAT medium(medium containing hypoxan-thine,aminopterin and thymidine)showed that the death time in DMI was similar to that in theconventional 15% newborn calf serum-supplemented medium(RPS15).The hybridoma cellsadapted in DMI secrete monoclonal antibodies in quantities comparable to those produced inRPS15. 展开更多
关键词 MYELOMA HYBRIDOMA serum-free medium MONOCLONAL antibody
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Novel sericin-based hepatocyte serum-free medium and sericin's effect on hepatocyte transcriptome
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作者 Yun Huang Qing Peng +3 位作者 Hai-Yan Li Zhi-Dong Jia Yang Li Yi Gao 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2018年第30期3398-3413,共16页
AIM To develop a novel hepatocyte serum-free medium based on sericin,and to explore the effect of sericin on the hepatocyte transcriptome.METHODS A controlled trial comparing novel serum-free medium and other media: C... AIM To develop a novel hepatocyte serum-free medium based on sericin,and to explore the effect of sericin on the hepatocyte transcriptome.METHODS A controlled trial comparing novel serum-free medium and other media: C3 A cells were cultured in our novel serum-free medium,Hepato ZYME,complete medium(DMEM/F12 with 100 m L/L FBS),and DMEM/F12,andthen cell attachment,proliferation,and function as well as the biocompatibility of the media were assessed.A comparative study of serum-free media with or without 2 mg/m L sericin: the effect of sericin on C3 A growth was assessed by cell viability and proliferation,the effect of sericin on C3 A cell cycle distribution was determined by flow cytometry,and the effect of sericin on the C3 A transcriptome was assessed by gene-chip array and RT-q PCR.RESULTS More C3 A cells attached to the plate containing our serum-free medium than to those containing Hepato ZYME and DMEM/F12 at 24 h post-seeding.Both the viability and proliferation rate of C3 A cells in sericin-based serum-free medium were superior to those of cells in Hepato ZYME and DMEM/F12(P < 0.001).The content of albumin and urea in our serum-free medium was significantly higher than that in Hepato ZYME and DMEM/F12 throughout the whole culture period(P < 0.001) and was similar to that in complete medium at day 3,4,and 5.In part 2,cell viability and proliferation were greater in the presence of 2 mg/m L sericin(P < 0.001),as was the proportion of cells in S phase(16.21% ± 0.98% vs 12.61% ± 0.90%,P < 0.01).Gene-chip array analysis indicated that the expression of CCR6,EGFR,and FOS were up-regulated by 2 mg/m L sericin,and RT-q PCR revealed that the expression of CCR6,EGFR,FOS,AKT1,JNK1,NFk B1,MMP-9,MEK2,ERK1/2 and MYC was upregulated by 2 mg/m L sericin(P < 0.05).CONCLUSION We developed a novel hepatocyte serum-free medium.Sericin probably enhances cell attachment through the CCR6-Akt-JNK-NF-κB pathway and promotes cell proliferation through CCR6-mediated activation of the ERK1/2-MAPK pathway. 展开更多
关键词 SERICIN serum-free medium MAPK pathway Bioartificial liver support system CCR6
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Cholesterol requirement for growth of rodent parental myeloma cells in serum-free medium
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作者 李纪良 李英杰 +4 位作者 林来兴妹 欧阳明辉 巢穗 彭一兵 常文生 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1991年第2期135-140,共6页
Cholesterol,a major lipid component of plasma membrane,is thoughtto have profound effects on the structure and function of cells.Mostanimal tis-sues are capable of synthesizing cholesterol de novo from acetate;however... Cholesterol,a major lipid component of plasma membrane,is thoughtto have profound effects on the structure and function of cells.Mostanimal tis-sues are capable of synthesizing cholesterol de novo from acetate;however,thereare relatively few mammalian cells in vitro expressing an absolute requirement foran exogenous source of cholesterol.In this paper,it was shown that IR983F(983)rat myeloma cells and P3X63-AgS-U1(P3U1)and P3X63-Ag8.653(653)mousemy eloma cells which had been cultivated in serum-free medium for more than 6months required cholesterol in vitro for growth in serum-free medium.Optimalgrowth of P3U1,653 and 983 occurred in cholesterol concentration of 5,10 and15μg/ml,respectively.Moreover,it was demonstrated that the cholesterol couldbe replaced by human low density lipoprotein in a concentration of 10μg/ml butnot by mevalonic acid lactone.In contrast to the parental myeloma cells,hybridoma cells derived from the mouse myeloma cells which had been cultivatedin serum-free medium for more than 6 months did not require cholesterol. 展开更多
关键词 CHOLESTEROL serum-free medium MYELOMA
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MDCK细胞无血清悬浮培养技术在流感疫苗研究与生产中的应用进展
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作者 靳莉武 张震宇 +4 位作者 靳冬武 马花 马玉梅 乔自林 王家敏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期38-47,共10页
流感是一种常见的呼吸道疾病,由流感病毒引起,接种疫苗是预防流感的有效手段。MDCK细胞(Madin-Darby Canine Kidney Cells)具有易于培养和高产量的特点,可以支持流感病毒的复制和增殖,被广泛用于流感疫苗的研究和生产。随着对流感病毒... 流感是一种常见的呼吸道疾病,由流感病毒引起,接种疫苗是预防流感的有效手段。MDCK细胞(Madin-Darby Canine Kidney Cells)具有易于培养和高产量的特点,可以支持流感病毒的复制和增殖,被广泛用于流感疫苗的研究和生产。随着对流感病毒研究的不断深入,为了进一步拓展MDCK细胞用于流感病毒研究和工业应用的能力,研究人员开始发展MDCK细胞无血清全悬浮培养技术。通过长期的培养和优化,驯化的MDCK悬浮细胞株可以更好地适应流感病毒的生长环境,提高流感病毒的产量和感染性。总之,MDCK细胞无血清悬浮培养技术在流感病毒研究和工业应用中发挥着重要作用,为流感疫苗生产和抗流感药物研发提供更好的工具。同时也必须重视MDCK细胞的安全性,采取合适的措施来确保其应用的安全性和可靠性。 展开更多
关键词 MDCK细胞 细胞悬浮驯化 无血清培养基 流感疫苗 安全性
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Pilot-Scale Production of Lyophilized Inactivated Rabies Vaccine Candidate in Vero Cells under Fully Animal Component-Free Conditions Using Microcarrier Technology and Laboratory Animal Trials
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作者 Engin Alp Onen Srinivas Bezawada 《Journal of Biomedical Science and Engineering》 2022年第6期157-178,共22页
The upstream process was carried out in an animal component-free medium on Cytodex 1 microcarriers. Recombinant trypsin is a non-animal derived protease used as an alternative to animal-derived trypsin. To inactivate ... The upstream process was carried out in an animal component-free medium on Cytodex 1 microcarriers. Recombinant trypsin is a non-animal derived protease used as an alternative to animal-derived trypsin. To inactivate recombinant trypsin, a soybean trypsin inhibitor (STI) should be added to the medium. A protocol was first tested in T-flasks and then passaged to 500 mL and 3 L spinner flasks. Cell detachment was completed in 10 - 12 min, and 0.4 g/L STI was added to a 3L spinner, and cells were transferred into a 30 L stirred tank bioreactor. On day 5, the cell density had reached its maximum (around 1.8 × 106 cells/mL). At an MOI of 0.3 with serum-free medium conditions, cell infection yielded a maximal rabies virus titer of 1.82 × 10<sup>7</sup> FFU/mL at 5 days. All cell culture conditions and virus growth kinetics in serum-free media were investigated. In conclusion, Vero cells were grown on Cytodex 1 with serum-free media and a high amount of rabies virus was obtained. A mouse challenge was used to determine the immune response to an inactivated rabies virus vaccine candidate. Also, we evaluated inactive rabies vaccine candidate safety, and immunogenicity in mice, sheep, horses, and cattle. We found that no horses, sheep, or cattle who were given vaccine IM at 3.2 IU/dose exhibited any clinical sign of disease and all developed high VNA titers (up to 10.03 IU/mL) by 3 - 4 WPI. After the accelerated stability studies, the lyophilized inactivated rabies vaccine candidate showed enough antigenic potency (2.6 IU/mL) in the mouse challenge test. Also, 18-month long-term stability studies showed enough immune response (1.93 IU/mL) on day 14. The activity of the vaccine candidate showed a good immune response and safety criteria that meet WHO requirements. This is the first pilot-scale mammalian cell-based viral rabies vaccine production study in Türkiye that used microcarriers. 展开更多
关键词 LYSSAVIRUS RABIES VIROLOGY Inactivated Vaccine Potency Test MICROCARRIERS TEM Analysis Vero Cell Culture serum-free medium Non-Animal Derived Recombinant Trypsin Preclinical Trials
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STUDY ON REPRODUCTIVE ENDOCRINOLOGY OF HUMAN PLACENTA--CULTURE OF HIGHLY PURIFIED CYTOTROPHOBLAST CELL IN SERUM-FREE HORMONE SUPPLEMENTED MEDIUM 被引量:9
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作者 李荣皓 庄临之 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1991年第8期938-946,共9页
A new method of long-term culture of cytotrophoblast cells in serum-free medium has been developed. Cytotrophoblast cells were isolated with cold trypsin and purified by unit gravity sedimentation through BSA density ... A new method of long-term culture of cytotrophoblast cells in serum-free medium has been developed. Cytotrophoblast cells were isolated with cold trypsin and purified by unit gravity sedimentation through BSA density gradients. The cells were cultured in the FD medium with supplement of EGF, insulin, transferrin and sodium selenite. They could survive over three weeks. The results showed that both EGF and insulin stimulated hCG and progesterone secretion and that sodium selenite elevated hCG output but not progesterone secretion. Transferrin produced synergistic effect with EGF and insulin on hCG and progesterone secretion but it was ineffective when used alone. This study demonstrates that the four growth factors mentioned above are essential for the survival of cytotrophoblast cells in vitro. It is therefore suggested that EGF, insulin and selenium may possibly be involved in the regulation of hCG and progesterone secretion in the human placenta. 展开更多
关键词 CYTOTROPHOBLAST cell HORMONAL regulation serum-free medium growth factors.
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Enrichment of breast cancer stem cells using a keratinocyte serum-free medium 被引量:6
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作者 LIU Zhen-zhen CHEN Ping +2 位作者 LU Zhen-duo CUI Shu-de DONG Zi-ming 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2011年第18期2934-2936,共3页
Background Keratinoyte serum-free medium (K-SFM) is a defined medium used to support the growth of primary keratinocytes and embryonic stem cell. The aim of this research was to optimize enrichment of breast cancer ... Background Keratinoyte serum-free medium (K-SFM) is a defined medium used to support the growth of primary keratinocytes and embryonic stem cell. The aim of this research was to optimize enrichment of breast cancer stem cells (CSCs) using K-SFM. Methods' A K-SFM was used to enrich CSCs from two breast cancer cell lines and a primary culture of breast cancer. RPMI-1640 supplemented with 10% fetal calf serum (FCS) was used as a control. CSCs were identified with flow cytometry using CD44+/CD24-as molecular markers. The expression of a variety of CSC markers (Oct-4, ABCG2, Nanog, N-cadherin, and E-cadherin) was analyzed with real-time PCR. Results Much higher percentage of CSCs was achieved with K-SFM: 17.3% for MCF-7 cells, 17.4% for SKBR-3, and 20.0% for primary breast cancer culture. Less than 1% CSC was achieved using RPMI-1640 supplemented with 10% FCS. In comparison to the CSCs obtained with RPMI-1640, CSCs in the K-SFM expressed higher levels of Oct-4, ABCG2, Nanog and N-cadherin, and lower level of E-cadherin. Conclusion K-SFM is an optimal culture medium to maintain and to enrich breast CSCs. 展开更多
关键词 breast cancer cancer stem cells keratinocyte serum-free medium defined medium enrichment
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Application of Serum-Free Culture Medium for Preparation of A-NK Cells 被引量:6
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作者 Zhihua Wang Zhibin Zhang Hui Zhang Yan Zhang 《Cellular & Molecular Immunology》 SCIE CAS CSCD 2006年第5期391-395,共5页
To compare the differences between proliferation and cytotoxicity of adherent natural killer (A-NK) cells cultured with serum-free medium AIMV and standard serum-containing medium in vitro, and also observe the assi... To compare the differences between proliferation and cytotoxicity of adherent natural killer (A-NK) cells cultured with serum-free medium AIMV and standard serum-containing medium in vitro, and also observe the assisting effect of IL-12 on the activation and the morphology character of IL-2-treated A-NK cells, cellular proliferation was evaluated by MTT method in vitro. The morphology of the target cells killed by A-NK cells was observed through electroscope. All of the A-NK cells cultured in serum-free medium AIMV could rapidly proliferate and keep high cytotoxicity compared with that in standard serum-containing medium. A-NK cells activated by both moderate-dose IL-2 and IL-12 were superior to the high-dose IL-2-treated A-NK cells. These data indicated that serum-free medium AIMV could replace standard serum-containing medium for culturing A-NK cells, and moderate-dose IL-2 and IL-12 could reduce side effects caused by high-dose IL-2. The study provided a new experimental basis for experimental and clinical preparation of A-NK cells. Cellular & Molecular Immunology. 展开更多
关键词 A-NK cell serum-free medium AIMV IL-12
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脐带间充质干细胞无血清培养体系的筛选
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作者 肖琼 黄象艳 +1 位作者 刘宣 曲伟红 《蚌埠医学院学报》 CAS 2023年第11期1494-1498,共5页
目的:筛选培养脐带间充质干细胞的无血清培养基。方法:采集新生儿脐带标本,将脐带剪成组织碎块,随机分为A组、B组、C组,分别加入MesenCult、Ultraculture和AM-V 3种不同的无血清培养基进行培养。观察3组脐带原代细胞游出时间和细胞形态... 目的:筛选培养脐带间充质干细胞的无血清培养基。方法:采集新生儿脐带标本,将脐带剪成组织碎块,随机分为A组、B组、C组,分别加入MesenCult、Ultraculture和AM-V 3种不同的无血清培养基进行培养。观察3组脐带原代细胞游出时间和细胞形态,检测细胞的增殖能力、分化能力和表面抗原的表达。结果:A组、B组、C组原代细胞从组织块长出的平均时间分别是17 d、6 d、7 d。显微镜下观察可见,从组织块游出的细胞散在分布,呈短梭形或多角形,形态饱满,折光性好,生长融合时A组和B组细胞呈旋涡状生长,细胞折光性好,大小均一,C组细胞细长,折光性稍差,无明显的旋涡状生长的特征。3组均表达CD105、CD90、CD73抗原,不表达CD34、CD45、HLA-DR抗原;3组各标志物的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。3组间充质干细胞均具有向成脂细胞、成骨细胞分化的能力,C组分化能力弱于A组和B组。结论:B组培养体系用时较短,干细胞特性保持较好,价格适宜,可以作为大规模培养人间充质干细胞的首选培养基。 展开更多
关键词 间充质干细胞 无血清培养基 分化潜能 表面抗原
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多孔微载体无血清培养rCHO细胞生产u-PA 被引量:17
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作者 胡显文 肖成祖 +5 位作者 李佐虎 郭志霞 高丽华 张正光 胥照平 王菲 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期387-391,共5页
在 30L搅拌式反应器中无血清培养分泌尿激酶型纤溶酶原激活剂 (u PA)的DNA重组CHO细胞 ,定期部分更换Cytopore多孔微载体 ,使生长在多孔微载体中的细胞不断更新繁殖 ,解决大规模细胞培养中的细胞凋亡问题。在 91d连接换液培养过程中 ,... 在 30L搅拌式反应器中无血清培养分泌尿激酶型纤溶酶原激活剂 (u PA)的DNA重组CHO细胞 ,定期部分更换Cytopore多孔微载体 ,使生长在多孔微载体中的细胞不断更新繁殖 ,解决大规模细胞培养中的细胞凋亡问题。在 91d连接换液培养过程中 ,细胞密度可维持在 (1 3~ 2 6 )× 10 7/mL ,活细胞比率维持在 90 %以上。在7 5L搅拌罐中培养细胞 ,利用外部周期性压力振荡刺激并结合载体更新技术 ,可减轻密度效应对细胞生长和表达的影响 ,在一定程度上提高细胞在高密度培养条件下的表达水平。在 6 7d连续换液培养中 ,细胞最高密度为 2 6 4× 10 7/mL ,活细胞比率维持在 95 %以上。与稳压操作相比 ,利用周期变压刺激技术可提高产量 10 %~ 2 0 % ,且可降低葡萄糖厌氧代谢生成乳酸的转化率 ,利用 4步纯化工艺 ,从含u PA约 135g的 2 10 0L上清中获得约 80 gu PA(单链比例约为 90 % )。 展开更多
关键词 动物细胞培养 微载体更新 U-PA RCHO细胞
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蛋白水解物在动物细胞培养中的应用研究进展 被引量:13
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作者 谷瑞增 刘艳 +3 位作者 林峰 刘文颖 马涛 蔡木易 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期21-27,共7页
蛋白水解物是蛋白质经水解得到的混合物,其主要成分为肽类。蛋白水解物可优化动物细胞培养基的组成,并且其中所含部分肽段可作为外部分子信号对细胞代谢、生物合成、生长、凋亡及产物表达等生命活动产生特殊的调控作用,因而被广泛应用... 蛋白水解物是蛋白质经水解得到的混合物,其主要成分为肽类。蛋白水解物可优化动物细胞培养基的组成,并且其中所含部分肽段可作为外部分子信号对细胞代谢、生物合成、生长、凋亡及产物表达等生命活动产生特殊的调控作用,因而被广泛应用于动物细胞培养领域,以生产单克隆抗体、疫苗、干扰素等生物制品。其作为无血清或低血清培养基的营养成分,可消除或降低血清带来的病毒微生物污染。随着蛋白水解物生产工艺的改进及优质产品的问世,其必将在细胞培养等生物技术领域发挥越来越重要的作用。 展开更多
关键词 蛋白水解物 动物细胞 蛋白表达 无血清培养基
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用无血清培养基在填充床生物反应器生产 rHuEPO 被引量:6
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作者 邓继先 杨琴 +2 位作者 程萱 李琳 周江 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期375-379,共5页
在填充床生物反应器用含5%FBS的DMEM:F12培养基培养产重组人促红细胞生成素(rHuEPO)的细胞C28~10d后,使用自制的无血清生产培养基(SFMp)生产rHuEPO。SFMp培养基既能维持细胞生长,又... 在填充床生物反应器用含5%FBS的DMEM:F12培养基培养产重组人促红细胞生成素(rHuEPO)的细胞C28~10d后,使用自制的无血清生产培养基(SFMp)生产rHuEPO。SFMp培养基既能维持细胞生长,又能生产EPO,也便于纯化分离rHuEPO。使用填充床生物反应器培养细胞,能维持培养20~25d,rHuEPO表达水平达12~284mg/L之间,反应器的产率达到710mg/L/d,比滚瓶的产率增加12~14倍。葡萄糖最高消耗量达到21g/L/d,细胞培养密度最高达到30×107/ml以上,每次可收无血清培养上清80~87L。由于细胞被固定在聚酯片上,培养上清中脱落细胞很少。观察了反应器的乳酸和氨的含量,其结果表明乳酸和氨含量分别低于35g/L和5mmol/L,不影响产物的表达。经过多批培养和生长rHuEPO的结果表明,自行配制的SFMp培养基在该反应器能有效地维持细胞生长和生产rHuEPO。 展开更多
关键词 促红细胞生成素 重组 药物 生物反应器 RHUEPO
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无血清培养的大肠癌Colo205细胞生成肿瘤干细胞球的研究 被引量:8
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作者 李鹰飞 肖冰 +3 位作者 赖卓胜 涂三芳 王媛媛 张小兰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期236-240,共5页
目的通过含生长因子的无血清培养基(SFM)培养大肠癌Colo205细胞,分离并扩增出肿瘤干细胞球。方法SFM培养大肠癌Colo205细胞,以含血清培养基(SSM)组为对照。观察细胞形态,检测正常肠道干细胞标志Musashi-1的表达,更换培养基为SSM诱导其分... 目的通过含生长因子的无血清培养基(SFM)培养大肠癌Colo205细胞,分离并扩增出肿瘤干细胞球。方法SFM培养大肠癌Colo205细胞,以含血清培养基(SSM)组为对照。观察细胞形态,检测正常肠道干细胞标志Musashi-1的表达,更换培养基为SSM诱导其分化,分别检测SFM组细胞分化前、分化后以及SSM组细胞表面标志CD133、CD44表达的改变,分析各细胞周期的比例,最后进行核型分析。结果Colo205细胞能在SFM中存活、增殖并形成肿瘤干细胞球,高表达Musashi-1,SFM组细胞分化前CD133、CD44的表达高于SSM组和SFM组分化后,差异有统计学意义(P<0.05),SFM组分化后与SSM组相比差异无统计学意义(P>0.05)。细胞周期分析发现肿瘤干细胞球处于高增殖状态,核型分析发现SFM组细胞与SSM组细胞染色体条数未见明显差别。结论含生长因子的SFM培养Colo205细胞,可生成肿瘤干细胞球,这种细胞球富集了肿瘤干细胞。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 Colo205细胞 肿瘤干细胞 肿瘤干细胞球 无血清培养基
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无血清培养基与完全培养基体外诱导扩增CIK细胞分泌细胞因子水平的比较 被引量:5
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作者 蒋永新 李高峰 +5 位作者 王熙才 金从国 李佳 陈晓群 李明 伍治平 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期784-787,共4页
目的比较无血清培养基(AIMV)与完全培养基(CM)体外诱导扩增CIK细胞及CIK细胞分泌细胞因子水平。方法分别用AIMV及完全培养基加入4种细胞因子(IFN-γ、IL2、IL-1及OKT3)将脐带血单个核细胞(CBMNCs)诱导成CIK细胞,比较细胞的增... 目的比较无血清培养基(AIMV)与完全培养基(CM)体外诱导扩增CIK细胞及CIK细胞分泌细胞因子水平。方法分别用AIMV及完全培养基加入4种细胞因子(IFN-γ、IL2、IL-1及OKT3)将脐带血单个核细胞(CBMNCs)诱导成CIK细胞,比较细胞的增殖能力、细胞表型及分泌细胞因子水平。结果与完全培养基比较,无血清培养基培养的CIK细胞增殖高峰较晚(14~17天),但增殖倍数高,在细胞表型、分泌细胞因子水平方面两种培养基培养的CIK细胞均无明显的差别(P〉0.05)。结论无血清培养基可代替完全培养基。 展开更多
关键词 无血清培养基 免疫 细胞培养 细胞因子 肿瘤
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无血清培养基与完全培养基对体外诱导免疫细胞支持作用的比较 被引量:5
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作者 孙婧 陈红松 +3 位作者 高燕 王松霞 张毅 王宇 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第3期208-212,共5页
目的 :多方面比较无血清培养基AIMV与完全培养基对体外诱导免疫细胞支持作用。方法 :分别用AIMV及完全培养基在IFN γ ,IL 2 ,及抗 CD3单抗存在的条件下培养人外周血单个核细胞 ,比较细胞的增殖能力、细胞表型、及细胞因子分泌能力 ,... 目的 :多方面比较无血清培养基AIMV与完全培养基对体外诱导免疫细胞支持作用。方法 :分别用AIMV及完全培养基在IFN γ ,IL 2 ,及抗 CD3单抗存在的条件下培养人外周血单个核细胞 ,比较细胞的增殖能力、细胞表型、及细胞因子分泌能力 ,并比较不同培养基培养细胞回输体内后的抑制病毒效果。结果 :与完全培养基培养细胞相比 ,无血清培养基AIMV培养细胞增殖能力与之相当 ;CD2 5的表达率增高 ,表达持续时间延长 ;细胞因子IFN γ的分泌时间延长 ;回输体内后的抑制病毒作用更明显。结论 :无血清培养基AIMV用于培养临床治疗用的免疫细胞 ,综合效果优于完全培养基。 展开更多
关键词 无血清培养基 免疫治疗 细胞表型 细胞因子 细胞培养
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人牙周膜成纤维细胞在无血清培养液中的生长特性 被引量:7
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作者 张云飞 段银钟 +2 位作者 冯雪 刘源 赵宇 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2002年第2期68-71,共4页
目的 :探讨人牙周膜成纤维细胞在无血清培养液中的生长特性。方法 :用倒置显微镜和MTT法观察人牙周膜成纤维细胞在无血清培养液中的生长和增殖变化。结果 :人牙周膜成纤维细胞在无血清培养液条件下可以生长和增殖 ,但与含血清培养液相... 目的 :探讨人牙周膜成纤维细胞在无血清培养液中的生长特性。方法 :用倒置显微镜和MTT法观察人牙周膜成纤维细胞在无血清培养液中的生长和增殖变化。结果 :人牙周膜成纤维细胞在无血清培养液条件下可以生长和增殖 ,但与含血清培养液相比 ,其增殖速率变缓 ,分化明显。结论 :无血清培养液可应用于人牙周膜成纤维细胞的体外培养和实验研究中。 展开更多
关键词 人牙周膜成纤维细胞 无血清培养液 体外培养 细胞增殖
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神经干细胞提取与培养方法的比较研究 被引量:7
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作者 吴增 李媛 +2 位作者 靳晓飞 周晓红 高维娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期729-734,共6页
目的探讨神经干细胞(neural stem cells,NSCs)提取、培养的最佳方法,为NSCs的基础研究提供技术参考。方法对NSCs的不同提取、培养方法进行比较:提取胎鼠与乳鼠的大脑皮质、采用不同类型培养基、不同接种密度、不同培养方法、不同换液方... 目的探讨神经干细胞(neural stem cells,NSCs)提取、培养的最佳方法,为NSCs的基础研究提供技术参考。方法对NSCs的不同提取、培养方法进行比较:提取胎鼠与乳鼠的大脑皮质、采用不同类型培养基、不同接种密度、不同培养方法、不同换液方法、不同传代方法,观察NSCs的成球率和NSCs未分化状态的稳定性。用多功能微孔板读数仪检测NSCs活性。结果 (1)胎龄14 d胎鼠较新生24 h内乳鼠的大脑皮质提取NSCs的比例高,杂细胞少,形成的神经球数量多。(2)采用无血清培养基,NSCs可以稳定在未分化状态;而采用含血清培养基,NSCs多数分化为神经元和胶质细胞。(3)以1.0×109·L^(-1)密度接种的NSCs,培养形成的神经球数量多,且状态良好。(4)悬浮培养法较贴壁培养法,可以形成稳定的神经球,有利于保持NSCs处于未分化的状态。(5)半量换液法和只加液不弃液法培养形成的神经球的状态优于全量换液法。(6)原代和1代的神经球用机械吹打法传代后,NSCs的活细胞比例高,再次形成的神经球状态好,且较其他两种方法简便;2代及以后的神经球用Accutase酶传代后,NSCs的活细胞比例高,再次形成的神经球状态好。(7)14 d胎鼠Accutase酶消化组的NSCs活性高于另外3组,差异均具有显著性(P<0.05)。结论提取胎龄14 d胎鼠的大脑皮质,采用无血清培养基,以1.0×10~9·L^(-1)1的密度接种于25 cm^2培养瓶,采取悬浮培养法,每2~3 d加液1~1.5m L,每6~7 d传代1次,所得到的NSCs增殖分裂旺盛,成球率高,神经球状态良好,可以保持稳定的未分化状态。 展开更多
关键词 神经干细胞 细胞提取 悬浮培养法:无血清培养基 细胞活性 巢蛋白
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哺乳动物细胞无血清培养基研究进展 被引量:9
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作者 杨学义 刘飞 +1 位作者 向双云 周珍辉 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第2期69-72,共4页
随着哺乳动物细胞培养种类、规模和应用范围的不断扩大以及安全性能要求的不断提高,无血清培养基的研制已经成为细胞工程领域的重要课题。许多类型的哺乳动物细胞无血清培养基配方得到了研究开发和优化,且有些已经进入第3代无蛋白无血... 随着哺乳动物细胞培养种类、规模和应用范围的不断扩大以及安全性能要求的不断提高,无血清培养基的研制已经成为细胞工程领域的重要课题。许多类型的哺乳动物细胞无血清培养基配方得到了研究开发和优化,且有些已经进入第3代无蛋白无血清培养基研制阶段。论文重点概述了无血清培养基在添加因子作用机制、细胞分化条件、细胞和组织移植以及肿瘤治疗等方面的研究进展。 展开更多
关键词 无血清培养基 细胞工程 哺乳动物
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无血清培养基与完全培养基对体外诱导扩增CIK细胞及抗肿瘤活性的比较研究 被引量:4
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作者 蒋永新 李高峰 +5 位作者 王熙才 金从国 陈晓群 李佳 伍治平 李明 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第12期900-903,共4页
目的:比较无血清培养基AIMV与完全培养基对体外诱导扩增CIK细胞的效果。方法:分别用AIMV及完全培养基加入4种细胞因子(IFNγ、IL2、IL1及OKT3)将脐带血单个核细胞(CBMNCs)诱导成CIK细胞,比较细胞的增殖能力、细胞表型、对肿瘤细胞的增... 目的:比较无血清培养基AIMV与完全培养基对体外诱导扩增CIK细胞的效果。方法:分别用AIMV及完全培养基加入4种细胞因子(IFNγ、IL2、IL1及OKT3)将脐带血单个核细胞(CBMNCs)诱导成CIK细胞,比较细胞的增殖能力、细胞表型、对肿瘤细胞的增殖抑制作用及其诱导肿瘤细胞凋亡等几个方面。结果:与完全培养基比较,无血清培养基AIMV培养的CIK细胞增殖高峰较晚(14~17d),但增殖倍数高(倍),在细胞表型、对三株肺癌细胞的生长抑制作用及不同效靶比诱导细胞凋亡方面两种培养基培养的CIK细胞差异无统计学意义,P>0.05。结论:无血清培养基AIMV可代替完全培养基。 展开更多
关键词 无血清培养基 免疫 细胞培养 细胞因子 肿瘤
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人结直肠癌干细胞微球体培养及鉴定 被引量:5
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作者 周继陶 龚日祥 +5 位作者 陈向征 周海俊 朱亚杰 刘素蕊 黄娟 毕锋 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期918-922,926,共6页
目的探索结直肠癌细胞系干细胞微球体培养方法,并对Colo205细胞微球体是否具有肿瘤干细胞特性进行鉴定。方法结直肠癌Lovo、Colo205及SW480细胞在含生长因子无血清培养基(SFM)中悬浮培养。流式细胞术、裸鼠成瘤实验、Transwell小室实验... 目的探索结直肠癌细胞系干细胞微球体培养方法,并对Colo205细胞微球体是否具有肿瘤干细胞特性进行鉴定。方法结直肠癌Lovo、Colo205及SW480细胞在含生长因子无血清培养基(SFM)中悬浮培养。流式细胞术、裸鼠成瘤实验、Transwell小室实验分别检测Colo205细胞及其微球体表面标记分子CD133、CD44表达,体内成瘤能力和体外侵袭能力。微球体细胞在含血清培养基中贴壁培养后流式检测CD44分子表达变化。RT-PCR分析Colo205细胞及其微球体CD44、Musashi-1及Oct4 mRNA的表达。结果3种细胞系均能在特殊配制的SFM中形成可以稳定传代的微球体,SFM新鲜配制、用细胞分离剂Accutase替代胰酶传代以及保持细胞的悬浮状态均有利于微球体的形成和增殖。Colo205微球体中CD44+细胞比例显著增多,贴壁分化后逐渐减少至与Colo205细胞无明显差异。与Colo205细胞相比,微球体具有更强的侵袭能力和体内成瘤能力,并高表达干细胞标记分子Musashi-1及Oct4 mRNA。结论利用特制SFM悬浮培养可得到结直肠癌细胞系微球体,这种微球体富集了肿瘤干细胞。 展开更多
关键词 结直肠癌 肿瘤干细胞 微球体 无血清培养基 悬浮培养
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