冠心病血清外泌体介导的lncRNA-miRNA-mRNA ceRNA调控网络研究及潜在靶向中药预测及实验验证

目的本研究采用生物信息学相关方法对冠心病(coronary heart disease,CHD)患者和正常人的血清外泌体测序数据分析,构建出竞争性内源性lncRNA-miRNA-mRNA(ceRNA)调控网络,并挖掘预测潜在的中药,并对ceRNA网络涉及的生物学过程和核心中药进行初步验证。方法利用exoRbase数据库获得差异基因的表达矩阵,结合生信方法构建ceRNA网络,并对网络中的差异的mRNA进行GO分析和KEGG分析,利用COREMINE数据库对ceRNA网络涉及的生物学过程及核心靶基因进行预测,筛选具有潜在治疗作用的中药;体外构建AVECs氧化损伤细胞模型,检测细胞骨架、成管功能、细胞增殖、LDH漏出率、ROS水平以及p-AKT、AKT、p-PI3K、PI3K蛋白表达情况,验证核心中药丹参治疗CHD的作用通路及靶点。结果与正常人比,CHD血清外泌体存在395个mRNA,80个miRNA,60个lncRNA差异基因,预测出80个miRNA,所构建ceRNA子网络,主要由21个lncRNA、80个miRNA、82个mRNA组成;AKT1、VEGFA、IL-1β等基因在网络中处于核心地位,异常表达的mRNA涉及细胞的氧化应激反应等生物学过程和PI3K/Akt等信号通路,丹参、川芎、三七等与CHD外泌体介导的生物学过程和核心基因最为密切;药物主要归属于补虚类、清热类和活血化瘀类,五味大多数归属于苦、甘和辛类,归经多集聚于心、肝、肾经;核心中药丹参的有效成分丹参酮IIA可以促进血管内皮细胞增殖、成管、骨架形成及修复,降低细胞LDH漏出率及ROS水平,促进p-AKT、p-PI3K蛋白的表达。结论CHD血清外泌体存在复杂的ceRNA调控网络转导,中药可通过多靶点干预治疗,丹参、川芎、三七等有望成为候选中药来源,其中丹参有效成分丹参酮IIA激活PI3K/Akt信号通路发挥对氧化应激损伤细胞的保护作用,治疗CHD。

血清lncRNA p21表达水平与PCI治疗急性心肌梗死患者预后的关系

目的研究血清lncRNA p21表达水平与经皮冠状动脉介入术(PCI)治疗急性心肌梗死患者预后的关系。方法选取2018年1月至2020年12月沭阳县中医院收治的102例PCI治疗的急性心肌梗死患者,患者术后随访1年,根据急性生理与慢性健康评分(APACHE-Ⅱ)将患者分为预后良好组和预后不良组,预后良好组72例,预后不良组30例。比较两组患者性别、身体质量指数(BMI)、高血压等一般临床资料,比较两组入院时肌钙蛋白(c Tnl)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平以及治疗前后血清lncRNA p21表达情况,分析血清lncRNA p21表达与患者预后的关系。结果预后良好组患者合并慢性阻塞性肺疾病(COPD)、早发冠心病、合并自身免疫疾病百分比低于预后不良组,差异有统计学意义(P<0.05)。预后良好组入院时cTnl、CK-MB水平均低于预后不良组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前预后良好组lncRNA p21表达水平高于预后不良组,治疗后两组lncRNA p21表达水平升高且预后良好组高于预后不良组,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示:高水平lncRNA p21与糖酵解酶的比值(lncRNA p21/GAPDH)表达是PCI治疗急性心肌梗死患者预后的保护因素,预后>60岁、合并COPD、早发冠心病、合并自身免疫疾病以及高水平CK-MB是PCI治疗急性心肌梗死患者预后的危险因素(P<0.05)。结论LncRNA-p21低表达可以加重心肌细胞及内皮细胞受损程度,内皮细胞损伤可能加重冠脉狭窄,不利于急性心肌梗死患者预后,血清高水平lncRNA p21表达水平是PCI治疗急性心肌梗死预后的保护因素。

脑胶质瘤患者血清lncRNA NEAT1表达与放疗敏感性的关系

目的探讨脑胶质瘤患者血清长链非编码核糖核酸(long noncoding RNA,lncRNA)核富集转录体(nuclear enriched abundant transcript 1,NEAT1)表达与放疗敏感性的关系。方法选取96例脑胶质瘤患者作为研究对象,患者均进行标准根治术放疗治疗。放疗完成后,参照世界贸易组织(WTO)的实体瘤疗效评定标准(RECIST)将其分为放疗敏感组和放疗耐受组。收集患者年龄、性别、病理分级、肿瘤直径、肿瘤位置、肿瘤数目等临床资料;放疗前采用RT-PCR检测患者血清lnc RNA NEAT1表达水平;采用Logistic回归分析脑胶质瘤患者发生放疗耐受的影响因素。结果96例患者中放疗敏感78例。放疗敏感组病理分级Ⅰ~Ⅱ级患者(42.31%)多于放疗耐受组(16.67%)(χ^(2)=4.103,P=0.043),2组年龄、性别、体重指数、肿瘤直径、肿瘤位置、肿瘤数目比较,差异无统计学意义(P>0.05);放疗敏感组血清lnc RNA NEAT1为(2.04±0.69),低于放疗耐受组的(3.21±1.05),差异有统计学意义(t=5.828,P<0.05)。血清lnc RNA NEAT1(OR=1.086,95%CI:1.015~1.162,P<0.05)是脑胶质瘤患者放疗耐受的影响因素。结论脑胶质瘤患者血清lnc RNA NEAT1表达与放疗敏感性密切相关,血清lnc RNA NEAT1高表达是脑胶质瘤患者发生放疗耐受的危险因素。

肺腺癌组织和血清中lncRNA-ATB表达及临床意义分析

目的：探讨长链非编码lncRNA？ATB在肺腺癌组织、血清中的表达水平及其临床意义。方法收集本院82例肺腺癌患者的术前血清标本及手术切除的癌组织和配对癌旁组织标本，同时选取年龄、性别配对的65例健康体检者的血清标本为对照，采用实时定量RT？PCR（ qRT？PCR）法检测以上标本的lncRNA？ATB水平；分析肺腺癌组织、血清中lncRNA？ATB水平与临床病理参数（性别、年龄、TNM分期、肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移及CEA水平）的关系，采用受试者工作特征曲线（ ROC）评价组织、血清lncRNA？ATB水平在诊断肺腺癌的效能。结果肺腺癌组织lncRNA？ATB水平高于癌旁组织，肺腺癌血清lncRNA？ATB水平高于健康对照，差异均有统计学意义（ P＜0？05），且肺腺癌患者血清与组织lncRNA？ATB水平呈正相关（ r＝0？642， P＜0？05）；肺腺癌组织、血清lncRNA？ATB表达与TNM分期、肿瘤大小及淋巴结转移均有关，其中TNM Ⅱ～Ⅲ期、肿瘤大小＞3 cm和有淋巴结转移者的lncRNA？ATB水平高于对应项（ P＜0？05）；组织、血清lncRNA？ATB水平诊断肺腺癌的价值较好，其曲线下面积和灵敏度均高于CEA。结论 lncRNA？ATB在肺腺癌组织、血清中均为高表达，且与TNM分期、肿瘤大小及淋巴结转移有关，可能在肺腺癌发生发展中有一定作用，且在肺腺癌诊断上，血清lncRNA？ATB水平有较高的价值，可考虑在临床应用。

胃癌患者组织和血清外泌体中lncRNA NEAT1表达及临床意义

目的探讨胃癌患者组织和血清外泌体中长链非编码RNA核富集转录体1(lncRNA NEAT1)的表达及其诊断价值。方法收集2019年1月至12月于我院行手术的胃癌患者90例作为研究组,另纳入胃部良性病变患者30例和健康志愿者30例作为对照组,取研究组患者肿瘤组织、癌旁组织以及提取所有受试者的静脉血血清外泌体,采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测血清外泌体、肿瘤组织及癌旁组织中的lncRNA NEAT1表达水平,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清外泌体lncRNA NEAT1对胃癌的诊断价值;分析lncRNA NEAT1与临床病理特征和常规血清肿瘤标志物(CEA、CA199、CA125)的关系。结果lncRNA NEAT1在胃癌组织中的相对表达量为2.35±0.86,高于癌旁组织的1.00±0.33(P<0.05);胃癌患者血清外泌体中lncRNA NEAT1相对表达量高于正常人群和良性病变组(1.52±0.36 vs.1.00±0.17 vs.1.09±0.20),差异具有统计学意义(P<0.05);胃癌患者血清外泌体和胃癌组织中lncRNA NEAT1表达呈正相关性(r=0.687,P<0.001);血清外泌体lncRNA NEAT1诊断胃癌的ROC曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异度分别为0.876(95%CI:0.823~0.929)、83.67%、67.78%;血清外泌体和组织中lncRNA NEAT1表达量与与肿瘤直径、淋巴结转移、临床分期、HP感染有关(P<0.05);胃癌组患者血清外泌体lncRNA NEAT1相对表达量与血清CEA、CA199、CA125水平呈正相关(r=0.587、r=0.457、r=0.394,P<0.001)。结论胃癌患者组织和血清中外泌体中lncRNA NEAT1表达量显著上调,并且血清外泌体lncRNA NEAT1未来作为胃癌的辅助诊断标志物具有很大的潜力。

糖尿病肾病患者血清LncRNA EXOC7的表达及意义

目的探讨LncRNA EXOC7(EXOC7)在糖尿病肾病患者血清中的表达及其临床意义。方法通过qRT-PCR法检测120例Ⅱ型糖尿肾病患者、120例无肾脏损害的Ⅱ型糖尿病患者及120例健康对照组血清中EXOC7的表达,分析其与患者蛋白尿、肾小球滤过率等临床病理参数的相关性。结果与健康对照组比较,EXOC7在Ⅱ型糖尿病患者及糖尿病肾病患者中的表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与Ⅱ型糖尿病患者比较,糖尿病肾病患者血清中EXOC7的表达明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。EXOC7在合并大量蛋白尿的糖尿病肾病患者中的表达明显高于合并微量蛋白尿患者,差异有统计学意义(P<0.05)。血清LncRNA EXOC7的表达与蛋白尿、空腹血糖、糖化血红蛋白、甘油三脂及低密度脂蛋白(LDL)的表达量呈正相关关系,差异有有统计学意义(P均<0.05);而与肾小球滤过率呈负相关关系(P<0.001)。多因素分析发现,空腹血糖、eGFR、HbA1c、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白是影响患者蛋白尿的因素(P<0.05)。结论 EXOC7的高表达与Ⅱ型糖尿病患者糖尿病肾病的发展有关,有望成为预测糖尿病肾病患者预后的生物标志物。

血清外泌体LncRNA NEAT1在非酒精性脂肪性肝病肝纤维化中的诊断价值

目的:探讨血清外泌体长链非编码RNA核富集转录体1(LncRNA NEAT1)对于非酒精性脂肪肝(NAFLD)肝纤维化的诊断价值。方法:收集2015年1月~2018年12月就诊的183例非酒精性脂肪肝炎(NASH)患者的病历资料和血液样本,包括90例未发生纤维化患者和93例纤维化患者。另收集50例健康对照志愿者血样作为正常对照组。提取血清样本中外泌体,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测LncRNA NEAT1相对表达量。结果:肝纤维化组患者血清外泌体LncRNA NEAT1相对表达量高于非肝纤维化组和正常对照组(P<0.05);并且血清外泌体LncRNA NEAT1>1.77是NASH患者发生肝纤维化的重要独立危险因素之一(P<0.05)。根据SAF评分,67例患者为F1~F2期轻中度肝纤维化,26例患者为F3~F4进展期肝纤维化,轻中度肝纤维化患者血清外泌体LncRNA NEAT1相对表达量低于进展期肝纤维化患者(P<0.05)。血清外泌体LncRNA NEAT1对于肝纤维化诊断的灵敏度和特异度分别为67.71%和99.96%,ROC曲线下面积为0.889(95%CI:0.884~0.934);对于进展期肝纤维化诊断的灵敏度和特异度分别为76.98%和80.65%,ROC曲线下面积为0.865(95%CI:0.783~0.948)。结论:肝纤维化NASH患者血清外泌体LncRNA NEAT1高于非肝纤维化NASH患者或正常对照人群,因此检测血清外泌体LncRNA NEAT1可为肝纤维化的诊断以及疾病进展评估提供有效的参考价值。

LncRNA KCNQ1OT1在糖尿病肾病患者血清中的表达及临床意义

目的探讨LncRNA KCNQ1OT1(KCNQ1OT1)在Ⅱ型糖尿病(T2D)、糖尿病肾病(DN)患者血清中的表达及意义。方法 qRT-PCR法检测KCNQ1OT1在77例T2D患者,60例DN患者,60例健康对照组中的表达,分析其临床意义。结果 KCNQ1OT1在T2D及DN患者中的表达较健康对照组明显升高(F=19.790,P <0.001)。KCNQ1OT1在合并大量蛋白尿的DN患者中的表达明显高于合并微量蛋白尿患者(t=13.620,P <0.001)。KCNQ1OT1的表达与蛋白尿的水平呈正相关关系(r=0.690,P <0.001),与肾小球滤过率呈负相关关系(r=-0.780,P <0.001)。在T2D与DN患者中KCNQ1OT1作为糖尿病肾病患者血清标志物的潜能的ROC曲线下面积(AUC)为0.861(95%CI:0.786～0.935,P <0.001),在DN患者与健康患者中KCNQ1OT1作为糖尿病肾病的AUC为0.914(95%CI:0.828～0.980,P <0.001)。结论 KCNQ1OT1的高表达与T2D患者DN的发展有关,有望成为预测DN患者预后的生物标志物。

系统性红斑狼疮患者血清LncRNA MIR155HG的表达及临床意义

目的探讨LncRNA MIR155HG在系统性红斑狼疮患者临床诊治中的价值。方法采用反转录PCR法(RT-PCR)检测80例2016年1月至2017年12月来我院门诊和住院就诊的系统性红斑狼疮(SLE)患者及40例同期来我院健康体检的对照者的血清LncRNA MIR155HG的表达,分析其表达与临床组患者血清LncRNA MIR155HG的表达水平显著增高,SLE活动期患者组高于SLE稳定期患者,差异均有统计学意义(P <0.001)。LncRNA MIR155HG的表达与系统性红斑狼疮疾病活动度(SLEDAI)呈正相关,差异均有统计学意义(P <0.001)。SLE合并狼疮肾炎患者血清LncRNA MIR155HG的表达明显高于无肾炎组,差异均有统计学意义(P <0.05)。血清LncRNAMIR155HG作为诊断SLE患者血清标志物的ROC灵敏度和特异性分别为81.3%(阈值15%)和90.2%(阈值30%)。血清LncRNA MIR155HG作为诊断是否合并狼疮肾炎的ROC曲线下面积为0.915(95%CI:0.870～0.960;P <0.001),灵敏度和特异性分别为82.5%(阈值20%)和90.8%(阈值30%)。结论血清LncRNA MIR155HG在SLE患者中高表达,与SLE患者的活动度相关,LncRNA MIR155HG有可能成为一个新的SLE疾病活动度评估及预后判断的分子标志物。

肝癌患者血清硒含量相关的lncRNA鉴定及其调节癌痛功能的研究

目的探索具有癌痛特征的HCC患者血清硒含量特点,鉴定血清硒含量相关的lncRNA,并探讨血清硒含量与癌痛等级以及HCC预后的相关性。方法入组51例具有癌痛特征的HCC患者、51例良性肝病患者以及51例健康对照,采集其血样并进行血清硒含量检测。将HCC患者分为血清硒高含量组(Se_(high),27例)和血清硒低含量组(Se_(low),24例)。鉴定两组间的差异lncRNA,并统计患者血清硒含量与临床指征、预后指标以及癌痛等级的相关性。结果具有癌痛特征的HCC患者血清硒含量显著低于良性肝病组和健康对照组,且良性肝病组的血清硒含量显著低于健康对照组。Se_(high)组患者的癌痛等级显著低于Se_(low)组、而SAS评分显著高于Se_(low)组。血清硒含量与肿瘤患者的淋巴转移、肿瘤分期、生存时间等预后指标显著负相关。鉴定出一系列血清硒相关lncRNA,其中在Se_(high)组具有最高表达的是XLOC_019295,而表达最低的是XLOC_162298。结论具有癌痛特征的HCC患者血清硒含量与其癌痛等级和临床预后指标存在负相关性,这种功能可能由相关lncRNA介导,适当补硒对癌症发展和癌症相关疼痛具有抑制作用。

血清lncRNA HOTAIR在肝癌患者中的表达及临床诊断意义

目的:探讨lncRNA HOTAIR在肝癌患者血清中的表达及其临床诊断意义。方法:采用qRT-PCR法检测61例原发性肝癌(PLC)患者、20例肝硬化患者及20例健康体检者的血清lncRNA HOTAIR表达水平,并分析其与患者临床病理特征关系及肝癌诊断价值。结果:PLC患者血清lncRNA HOTAIR表达量高于肝硬化组和健康对照组(P<0.05)。PLC患者血清lncRNA HOTAIR表达量与TNM分期、Child-Pugh肝功能分级标准、肝外转移、血管侵犯、癌栓形成、肿瘤大小有关(P<0.05)。ROC分析结果显示血清lncRNA HOTAIR表达量诊断肝癌的AUC、敏感度和特异性分别为0.991、95.7%、95.0%;预测TNM分期的AUC、敏感度和特异性分别为0.708、78.3%、60.5%(P<0.001)。结论:PLC患者血清lncRNA HOTAIR明显高于肝硬化组与健康组,lncRNA HOTAIR高表达PLC患者恶性程度高、肿瘤直径大、肝功能差,且lncRNA HOTAIR高表达与PLC的肝外转移、血管侵犯、癌栓形成有关,可能参与了肝癌的发生发展。血清lncRNA HOTAIR诊断PLC灵敏度、特异度、准确度高,对PLC临床诊断有一定价值。

血清外泌体LncRNA NEAT1检测对慢性HBV感染者肝纤维化无创诊断的价值研究

目的研究血清外泌长链非编码RNA(Long non-coding RNA,LncRNA)核富集转录体1(Nuclear abundant enriched transcripts,NEAT1)水平对慢性乙型肝炎病毒(Chronic hepatitis B virus,HBV)感染者不同程度肝纤维化的无创诊断价值。方法选择2018年1月-2021年6月于山西省临汾市中心医院消化科就诊的314例慢性乙肝病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染者为研究对象,根据纤维化程度分期共分为S0~1、S2、S3、S4组。记录患者入院时的白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清中HBV-DNA含量。采用化学发光法检测研究对象血清中白细胞介素-6(IL-6)、IL-10、IL-12和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。提取血清样本中的外泌体,采用实时荧光定量PCR法检测LncRNA NEAT1的相对表达量。应用受试者工作特征(Receiver operator characteristic,ROC)曲线和曲线下面积(Area under the curve,AUC)评估血清外泌体LncRNA NEAT1水平对不同程度肝纤维化的诊断价值。结果根据肝穿刺结果,分期S0~1组患者178例,S2期患者67例,S3期患者33例,S4期患者36例。4组患者的WBC、PLT、ALT、AST、HBV DNA、IL-6、IL-10、IL-12和TNF-α水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。分期S0~1、S2、S3、S4组患者血清外泌体LncRNA NEAT1的相对表达量分别为1.12±0.53、1.35±0.14、1.82±0.20和1.99±0.26,组间比较结果显示差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清外泌体LncRNA NEAT1水平诊断显著肝纤维化的AUC为0.928(0.900~0.956),灵敏度和特异度分别为83.8%和88.8%,诊断严重肝纤维化的AUC为0.767(0.702~0.833),灵敏度和特异度分别为59.4%和84.9%,诊断肝硬化的AUC为0.883(0.812~0.953),灵敏度和特异度分别为80.6%和86.7%。结论血清外泌体LncRNA NEAT1水平检测有助于对HBV感染者显著肝纤维化和肝硬化的诊断。

血清lncRNA TUG1和miR-542-3p表达与急性脑梗死患者病情和预后的关系

目的分析长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)、miR-542-3p与急性脑梗死(ACI)患者疾病严重程度和预后的关系。方法选取2020-01—2021-12在临汾市人民医院就诊并确诊为ACI患者174例,采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分评估疾病的严重程度,分为轻度组70例,中度组55例,重度组49例;根据90 d内患者改良Rankin量表(mRS)评分分为预后不良组70例,预后良好组104例。选取150例健康体检者为对照组。收集研究对象一般资料,采用实时荧光定量PCR法对血清lncRNA TUG1、miR-542-3p相对表达量进行检测,Pearson法分析lncRNA TUG1、miR-542-3p表达的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清lncRNA TUG1、miR-542-3p对ACI患者预后不良的预测价值,Logistic回归分析影响ACI患者预后不良的因素。结果ACI患者血清lncRNA TUG1相对表达量高于对照组,且随着疾病严重程度增加而升高(P<0.05);miR-542-3p相对表达量低于对照组,且随着疾病严重程度增加而降低(P<0.05)。Pearson法分析显示ACI患者血清miR-542-3p与lncRNA TUG1表达呈显著负相关(r=-0.492,P<0.05)。预后不良组患者的lncRNA TUG1相对表达量明显高于预后良好组患者,miR-542-3p相对表达量明显低于预后良好组患者(P<0.05)。ROC曲线显示,血清lncRNA TUG1、miR-542-3p水平预测ACI患者预后不良的AUC分别为0.857、0.911,对应的敏感度分别为85.71%、81.43%,特异度分别为75.00%、87.50%,二者联合预测的AUC为0.954,敏感度为82.86%,特异度为96.15%。Logistic回归分析显示lncRNA TUG1、miR-542-3p、NIHSS评分均是ACI患者预后的影响因素(P<0.05)。结论ACI患者血清lncRNA TUG1表达升高,miR-542-3p表达降低,二者与患者疾病严重程度和预后密切相关,可能作为预测ACI患者预后的血清学指标。

非小细胞肺癌患者血清中lncRNA GHET1的表达及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中lncRNA GHET1的表达及其临床意义。方法收集我院新确诊的50例非小细胞肺癌患者及40例健康对照者血清标本,采用qRT-PCR法检测血清中lncRNA GHET1的表达,并分析其表达水平与临床病理因素及化疗敏感性的关系。结果NSCLC病人血清中GHET1表达水平明显升高(P<0.05),ROC曲线分析结果表明GHET1的水平对NSCLC具有较好的诊断价值(AUC=0.767,P<0.05)。血清GHET1表达水平与NSCLC患者临床资料比较发现,NSCLC病人血清中GHET1表达量与NSCLC肿瘤大小和TNM分期密切相关(P<0.05),且化疗耐药组患者血清GHET1水平明显高于化疗敏感组(P<0.05)。结论NSCLC病人血清中lncRNA GHET1高表达且其表达水平可作为诊断、提示疾病进展和化疗耐药的生物学标志物,具有潜在的临床应用价值。

基于血清lncRNA PTENP1、DR-70在早期胃癌诊断及胃癌进展中的效能评估研究

目的:探讨基于长链非编码RNA(lncRNA)PTENP1、血清纤维蛋白降解复合物(DR-70)在早期胃癌诊断及胃癌进展中的效能评估研究。方法:本研究选取了2020年4月至2021年2月佛山市第五人民医院收治的胃癌患者100例为观察组,并选择同期进行胃镜检查者50例为胃良性病变组和健康体检者50例为正常组,采用PCR检测血清lncRNA PTENP1的表达水平,采用肿瘤标记DR-70酶免疫分析早期胃癌的检测水平。结果:胃良性病变组与健康组的血清lncRNA PTENP1水平(54.67±3.81)-log、(58.03±3.69)-log高于胃癌组患者的水平(10.58±1.69)-log,差异具有统计学意义(F=13.132,P=0.001);胃癌组患者的DR-70水平(4.51±0.58)μg/mL高于胃良性病变组与健康组的DR-70水平(0.71±0.45)μg/mL、(0.43±0.36)μg/mL,差异具有统计学意义(F=7.621,P=0.003);患者的血清DR-70与患者的TNM分期/淋巴转移呈现相关性(r=-6.583,P=0.037;r=-6.146,P=0.005)。胃癌患者血清lncRNA PTENP1联合DR-70检测敏感性与特异性显著提高。结论:血清lncRNA PTENP1、DR-70联合检测在早期胃癌诊断中具有较好的应用价值。

慢性牙周炎患者血清和龈沟液LncRNA MALAT1和miR-769-5p水平表达及其临床意义

目的:探讨慢性牙周炎患者血清和龈沟液长链非编码核糖核酸肺腺癌转移相关转录子1 (LncRNA MALAT1)和微小RNA-769-5p(miR-769-5p)水平表达及其临床意义。方法:选择2020年6月~2023年7月我院收治的慢性牙周炎患者117例纳入观察组,根据慢性牙周炎患者的病情严重程度分为轻度组39例、中度组42例和重度组36例,另选取117例健康志愿者纳入对照组。对比对照组、观察组血清和龈沟液LncRNA MALAT1和miR-769-5p表达水平。对比不同病情严重程度血清和龈沟液LncRNA MALAT1和miR-769-5p表达水平、血清和龈沟液炎症指标[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)]水平、牙周指标[牙周袋深度(PD)、附着丧失(AL)、龈沟出血指数(SBI)、菌斑指数(PLI)]。采用Pearson相关性分析法分析慢性牙周炎患者炎症指标、牙周指标和血清和龈沟液miR-769-5p、LncRNA MALAT1表达水平的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清和龈沟液LncRNA MALAT1、miR-769-5p对慢性牙周炎的诊断价值。结果:观察组血清和龈沟液LncRNA MALAT1表达水平高于对照组(P<0.05),血清和龈沟液miR-769-5p表达水平低于对照组(P<0.05)。轻度组的血清和龈沟液LncRNA MALAT1表达水平及IL-6、TNF-α、IFN-γ、PD、AL、SBI、PLI低于中度组(P<0.05),中度组低于重度组(P<0.05);血清和龈沟液miR-769-5p表达水平轻度组高于中度组(P<0.05),中度组高于重度组(P<0.05)。慢性牙周炎患者血清和龈沟液LncRNA MALAT1表达水平与IL-6、TNF-α、IFN-γ、PD、AL、SBI、PLI呈正相关(P<0.05),血清和龈沟液miR-769-5p表达水平与IL-6、TNF-α、IFN-γ、PD、AL、SBI、PLI呈负相关(P<0.05),血清和龈沟液LncRNA MALAT1表达水平与miR-769-5p表达水平呈负相关(P<0.05)。血清LncRNA MALAT1、miR-769-5p及联合检测诊断慢性牙周炎的曲线下面积(AUC)分别为0.800、0.743和0.877;龈沟液LncRNA MALAT1、miR-769-5p及联合检测诊断慢性牙周炎的AUC分别为0.786、0.849和0.891。结论:慢性牙周炎患者血清和龈沟液LncRNA MALAT1表达水平升高,miR-769-5p表达水平降低,可加重炎症反应和牙周炎症状,血清和龈沟液LncRNA MALAT1、miR-769-5p联合检测对慢性牙周炎具有较高的诊断价值。

类风湿关节炎患者血清外泌体长链非编码RNA Hotair和XIST的表达及意义

目的 研究类风湿关节炎(RA)患者血清来源外泌体中长链非编码RNA (lncRNA)Hotair、XIST、H19和MALAT1的表达水平,分析与RA患者炎症参数的相关关系,探讨其对RA的临床诊断价值。方法 收集70例RA患者为疾病组,同期就诊的40例系统性红斑狼疮(SLE)患者为疾病对照组,40例体检健康者为健康对照组(HC)。收集3组研究对象血清并提取外泌体,通过纳米粒径追踪仪检测外泌体浓度,采用实时定量PCR(RT-qPCR)法检测外泌体中lncRNA Hotair、XIST、H19和MALAT1的表达水平。采用Spearman秩相关分析Hotair、XIST与RA患者红细胞沉降率(ESR)、C-反应蛋白(CRP)和疾病活动评分-28(DAS-28)的相关性。绘制ROC曲线分析Hotair、XIST对RA患者的诊断价值。结果 与健康对照组相比,RA组和SLE组外泌体浓度显著升高(P<0.05),RA组与SLE组之间无显著差异(P>0.05)。血清外泌体lncRNA H19和MALAT1表达水平在3组间差异无统计学意义(P>0.05);lncRNA Hotair和XIST在RA组表达水平较SLE组和健康对照组显著增加(P<0.001),并且两者的表达水平与RA患者ESR、CRP、DAS-28具有正相关关系(P<0.05),诊断RA的ROC曲线下面积(AUCROC)分别为0.84(95%CI=0.78~0.90,P<0.001)和0.76(95%CI=0.68~0.83,P<0.001)。结论 血清外泌体来源lncRNA Hotair和XIST在RA患者中表达显著性升高,与血清ESR、CRP、DAS-28存在正相关关系,提示外泌体来源LncRNAHotair和XIST可作为诊断RA的潜在生物学标志物。

血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-129-5p与非小细胞肺癌患者临床病理特征及预后的关系

目的:研究血清外泌体长链非编码核糖核酸(lncRNA)前列腺癌基因表达标记1(PCGEM1)、微小核糖核酸(miR)-129-5p与非小细胞肺癌(NSCLC)患者临床病理特征及预后的关系。方法:选取2016年2月-2018年1月南京脑科医院收治的125例NSCLC患者作为NSCLC组,同期选取体检的70例健康人群作为健康组。采集两组静脉血,提取血清外泌体;采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-129-5p表达情况;采用Pearson相关性分析lncRNA PCGEM1与miR-129-5p的关系。并分析血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-129-5p与NSCLC患者临床病理特征的关系。对NSCLC患者行5年随访,绘制Kaplan-Meier曲线分析预后情况,多因素Cox比例风险回归模型分析预后不良危险因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析lncRNA PCGEM1、miR-129-5p对NSCLC预后的预测价值。结果:NSCLC组lncRNA PCGEM1相对表达量高于健康组,miR-129-5p相对表达量低于健康组(P<0.05)。血清外泌体lncRNA PCGEM1相对表达量与miR-129-5p表达呈负相关(r=-0.420,P<0.05)。血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-129-5p表达与患者TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。Kplan-Meier生存曲线显示,lncRNA PCGEM1低表达组5年生存率69.05%高于lncRNA PCGEM1高表达组35.53%,miR-129-5p高表达组5年生存率68.09%高于miR-129-5p低表达组33.80%。多因素Cox比例风险回归显示,TNM分期Ⅲ期、有淋巴结转移、lncRNA PCGEM1高表达、miR-129-5p低表达为NSCLC患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,lncRNA PCGEM1、miR-129-5p联合检测对NSCLC预后的预测曲线下面积(AUC)为0.865,预测价值高于两者单独预测。结论:NSCLC患者血清外泌体lncRNA PCGEM1表达上调、miR-129-5p表达下调,二者表达与NSCLC患者TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关,且与患者预后密切相关,对NSCLC预后不良具有较好预测价值。

长链非编码RNA MIAT在子宫颈癌中的表达水平及临床意义研究

目的观察长链非编码RNA心肌梗死相关转录本(long non coding RNA myocardial infarction associated transcript,lnc RNA MIAT)在子宫颈癌(cervical cancer,CC)中的表达情况,旨在为CC患者的早期诊断及预后评估提供可靠的实验指标。方法收集2018年1月—2020年12月于枣庄市立医院住院的子宫颈癌患者30例,并对患者进行分期,通过qRT-PCR方法,检测血清、子宫颈癌组织及癌旁正常组织中lnc RNA MIAT的表达水平,并每隔6个月监测患者血清中lnc RNA MIAT的表达水平,分析血清学lnc RNA MIAT的表达水平与子宫颈癌患者临床病理学指标及子宫颈癌生存率的相关性。结果(1)Ⅲ~Ⅳ期子宫颈癌患者血清中及癌组织中lncRNA MIAT的表达水平高于Ⅰ~Ⅱ期,差异有统计学意义(t=18.567,21.333,P<0.05)。(2)子宫颈癌患者病理特征如肿瘤直径>4cm,有淋巴结转移、Ⅲ及Ⅳ期、有复发/死亡者中,lncRNAMIAT表达水平显著高于其他项,差异有统计学意义(P<0.05),且lncRNA MIAT表达水平与子宫颈癌患者临床分期指标呈正相关,(r=0.665)。(3)lncRNAMIAT高表达组患者术后2年生存率低于低表达组(χ^(2)=3.871,P=0.037),每隔6个月表达水平与术后复发率呈正相关(r=0.834),与预后呈负相关(r=-0.789)。结论子宫颈癌中lncRNA MIAT的表达水平增高,且与子宫颈癌患者的临床分期存在相关性。术后患者血清中lncRNA MIAT的表达水平与预后呈负相关,对患者的预后评估具有潜在价值。

长链非编码RNA FENDRR在急性胰腺炎患者血清中的表达及意义

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)叉头蛋白F1相邻非编码发育调控RNA(FENDRR)在急性胰腺炎(AP)患者血清中的表达水平及临床意义。方法选择2016年3月至2018年5月在北京大学深圳医院就诊的123例AP患者作为研究对象(设为AP组),另择同期在本院体检的52位健康志愿者作为对照组。采用实时荧光定量PCR(real-time qPCR)法检测患者血清中lncRNA FENDRR的相对表达量。比较轻症AP(MAP)组与重症AP(SAP)组、生存组与死亡组患者血清中lncRNA FENDRR的相对表达量。分析lncRNA FENDRR与AP病情严重程度及患者预后的关系。结果AP组患者血清lncRNA FENDRR的相对表达量为4.47±1.87,低于对照组(6.66±1.26),差异有统计学意义(P<0.05)。SAP组患者血清lncRNA FENDRR的相对表达量为3.14±1.22,低于MAP组(5.45±1.64),差异有统计学意义(P<0.05)。血清lncRNA FENDRR诊断AP患者病情严重程度的ROC曲线下面积(AUC)为0.869(95%CI0.796~0.923),敏感度为71.15%,特异度为90.14%。单因素及多因素logistic回归分析结果显示,血小板(PLT)、国际标准化比值(INR)、血清钙、乳酸和lncRNA FENDRR与AP患者的预后关系密切。单指标评估AP患者预后结果指出,PLT的评估效能最大AUC=0.813(95%CI0.733~0.878),其次为lncRNA FENDRRAUC=0.784(95%CI0.701~0.853),乳酸的评估效能最小AUC=0.673(95%CI0.583~0.755)。PLT、INR、血清钙、乳酸和lncRNA FENDRR联合检测评估AP患者预后的效能高于各项单独检测的效能。结论血清lncRNA FENDRR的表达水平越低,提示AP患者病情越严重,预后不良风险越高。lncRNA FENDRR可能是AP疾病严重程度和预后评估的潜在生物标志物。