柑桔茎尖嫁接操作方法的改进及研究

通过大量摸索试验，对影响茎尖嫁接成活率的关键步骤嫁接操作方法作了改进。改进的“⊥”压法能使供试品种嫁接成活率提高到６０％～８０％，而对照成活率则为３８．５％～５８．１％；采用不同浓度的６－ＢＡ（６－苄氨基嘌呤）作茎尖预处理，在３个品种试验中发现用０．５ｍｇ／ｋｇ的６－ＢＡ预处理１０ｍｉｎ成活率明显优于对照。试验还在试管苗移栽、最佳消毒条件的确定、试管苗提早结果几个方面作了有益的尝试。

瓯柑微芽嫁接脱毒及试管苗的快速培育技术

研究了不同大小的瓯柑茎尖分生组织进行微芽嫁接脱除黄龙病病原的效果。在双目实体显微镜下,分别切取含有生长锥及1、2、3和4个叶原基的茎尖分生组织嫁接到黄化砧木上,以获得茎尖微芽嫁接苗,用PCR进行黄龙病分子检测。试验表明:用含1个和2个叶原基的茎尖嫁接获得的试管苗全部不带病毒;含有3个和4个叶原基的茎尖嫁接获得的试管苗其脱毒率分别为95.7%和73%,感病母株和长春花阳性对照可以扩增出535 bp的特异性片段;尽管在含2个叶原基条件下获得的STG成活率为47.7%,但可以达到理想的脱毒效果。试验还证明,瓯柑二次嫁接与茎尖嫁接直接移栽苗的生长量差异极显著。

茎尖嫁接脱除柑橘黄龙病病原及其检测方法比较

运用茎尖微芽嫁接技术脱除柑橘黄龙病病原,并采用PCR技术和直接荧光法对脱毒后的植株进行脱毒效率检测。结果表明,茎尖微芽嫁接成活率最高为75%;茎尖微芽嫁接技术是脱除黄龙病病原的一种有效方法,脱毒率达100%,脱毒后均检测不到病原存在;PCR技术检测病毒的检出率为100%,而直接荧光法的检出率仅为33.3%,说明PCR技术具有更高的灵敏度。

柑橘衰退病和碎叶病复合感染病原的脱毒研究

以带毒柑橘品种为试材,采用植物中药制剂处理与热处理结合、茎尖微芽嫁接与植物中药制剂处理结合,用RT-PCR法检测病原带毒情况,并在药剂处理后1、3、5、7、9 d取样,检测抗性相关酶活性的含量变化,结果表明:采用板蓝根和黄芩混合中药制剂处理8次,结合热处理,在PC板制成的温室(白天40℃(6 h/d),晚上25℃,处理50 d)中,可有效地脱除试验苗木中柑橘衰退病和柑橘碎叶病复合感染病原;对柑橘茎尖微芽嫁接苗进行板蓝根和黄芩混合中药制剂脱毒处理后苗木经RT-PCR法检测表明:85.7%植株可以脱除柑橘衰退病和柑橘碎叶病病毒;药剂处理后PPO、POD、SOD酶活性与对照相比均有所提高。

柑桔碎叶病毒的脱毒

夏天将带有碎叶病毒的粹潼脐橙、金堂早脐、新会橙、雪柑、蕉柑新１号、德森温州蜜柑盆栽苗置于玻璃房中，１０～４０天不同时间从其上采嫩芽进行茎尖嫁接，所获茎尖苗全部或部分无碎叶病毒。不同品种不同时间热处理后采其茎尖进行茎尖嫁接的脱毒效果木同。