趋化因子受体CXCR4／CXCL12信号转导通路在结直肠癌肝转移中的作用

目的:探讨CXCR4／CXCL12在结直肠癌肝转移中的作用．方法:应用Western blot检测160例结直肠癌患者标本中肿瘤组织、邻近正常黏膜以及肝转移组织中CXCR4／CXCL12通路成员的表达情况,免疫组织化学法检测CXCR4／CXCL12在细胞水平的分布．结果:与正常组织相比,结直肠癌组织中 CXCR4／CXCL12表达水平明显增高(P<0．05); 与原发肿瘤相比,10例肝转移组织中CXCR4／ CXCL12表达增高(CXCR4:3．9±0．5 vs 2．2± 0．3,P<0．05:CXCL12:3．6±0．5 vs 2．4±0．3, P<0．05):TNMⅢ、Ⅳ分期CXCR4／CXCL12表达水平比Ⅰ、Ⅱ分期显著增加有关(CXCR4: 3．4±0．6 vs 1．8±0．3．P<0．05;CXCL12:3．6± 0．5 vs 1．8±0．4．P<0．05)．结论:趋化因子受体CXCR4／CXCL12在原发结直肠癌与肝转移组织中呈高表达,CXCR4／ CXCL12信号转导通路可能在结直肠癌肝转移过程中起一定作用．

游离脂肪酸与胰岛素抵抗

胰岛素抵抗是 2型糖尿病的重要组成部分,是引起代谢综合征的病理基础,但它的发病机制还不是很清楚。近年来发现在许多胰岛素抵抗状态均伴随着游离脂肪酸 (freefattyacids,FFA)水平的升高,逐渐引起了人们注意,FFA不仅可以干扰葡萄糖代谢的不同环节,重要的是在胰岛素受体及受体后的信号转导方面发挥作用,降低胰岛素刺激的葡萄糖转运。噻唑烷二酮类药物(TZDs)是近年来上市的胰岛素增敏剂,其主要效应之一就是降低FFA水平。可见,以控制FFA代谢紊乱为目标设计具有新作用机制的药物,将会使胰岛素抵抗和 2型糖尿病的治疗前景变得更加广阔。

眼针八区八穴对急性脑梗死Keap1-Nrf2/ARE信号传导通路的影响

目的：探讨眼针八区八穴对急性脑梗死患者Keapl—Nrf2/ARE信号传导通路的影响。方法：选取140例急性脑梗死患者作为研究对象，根据随机原则将140例患者随机分至对照组和观察组各70例，对照组予以抗血小板凝集、降低血黏度、改善脑功能、改善脑循环等药物治疗，观察组在对照组治疗基础上加以眼针八区八穴治疗，以上焦区穴及下焦区穴作为主穴，以肾区穴、肝区穴作为配穴，每10min行针1次，针刺时间为20min，每日针刺1次。两组患者的治疗周期均为2周。分别采用美国国立卫生研究院卒中量表（National Institute ofHealth stroke scale，NIHSS）、Barthel指数评价两组患者治疗前后神经功能缺损情况及日常生活活动能力变化情况，并比较两组患者的临床疗效。同时测量两组患者治疗前及治疗后14d外周血单个核细胞中Keapl、NQ01、ARE和Nrf2蛋白表达水平。结果：治疗后，对照组及观察组的NIHSS量表评分、Keapl蛋白水平均显著低于治疗前，且观察显著低于对照组；对照组及观察组的Barthel指数、NQ01、ARE和Nrf2蛋白表达水平均显著高于治疗前，且观察组显著高于对照组；均P〈0．05。对照组的总有效率为80．00％，观察组的总有效率为92．85％，经z检验，观察组的总有效率显著高于对照组，均P〈0.05。结论：眼针八区八穴治疗急性脑梗死可有效改善患者的神经功能缺损症状，提高患者的生活活动能力，这可能与眼针八区八穴提高NQ01、ARE和Nrf2蛋白的表达水平，降低Keapl蛋白的表达水平，改善Keap1—Nrf2/ARE信号传导通路，从而对抗急性脑缺血再灌注损伤，降低细胞氧化损伤程度等有关。

复方中药益肝康抑制肝星状细胞增殖的作用机制

目的:探讨活血化瘀复方中药益肝康抑制大鼠肝星状细胞(HSC)增殖的作用机制.方法:采用IL-1β激活HSC,应用Westernblot检测JNK的活化程度;应用活细胞计数试剂盒-CCK-8检测HSC增殖并观察JNK特异性阻断剂SP600125对IL-1β促HSC增殖的影响.应用凝胶电泳移动抑制法测定AP-1的活性.结果:IL-1β有明显促大鼠HSC增殖作用,IL-1β作用培养的HSC24h后,吸光值明显高于对照组(1.573±0.026vs1.339±0.073,P=0.000);经JNK特异性阻滞剂SP600125预处理后,IL-1β促HSC增殖作用受到抑制,SP600125浓度为10,20及40μmol/L时,吸光值分别为1.427±0.113,0.772±0.093,0.675±0.074,与对照组(1.560±0.110)相比其增殖反应均明显降低(P=0.03;P=0.000;P=0.000);IL-1β可激活大鼠HSCsJNK信号蛋白,并呈现出一定的时相变化.IL-1β作用HSCs后0,5,15,30,60及120min,JNK活性分别为0.982±0.299,1.501±0.720,2.133±0.882,3.360±0.452,2.181±0.789,1.385±0.368.与0(未加IL-1β)相比,15min,30min及60min均有显著差异(P=0.002,P=0.000,P=0.001).益肝康可抑制IL-1β诱导的HSCsJNK活性(1.610±0.242vs3.360±0.452,P=0.000);益肝康可抑制IL-1β诱导的HSCsAP-1活性,经益肝康预处理HSCs1h后,AP-1活性明显受到抑制(342.43±85.77vs597.70±83.96,P=0.005).结论:IL-1β可刺激HSC增殖,细胞内JNK信号转导通路参与了IL-1β促HSC增殖作用;益肝康可通过阻滞JNK/AP-1通路,抑制HSC增殖.

钙敏感受体通过PI3K信号通路介导缺氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖

目的:探讨钙敏感受体(CaSR)在缺氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖中的信号转导途径。方法:Ⅱ型胶原酶消化法提取、培养大鼠PASMCs。通过缺氧培养箱内(93%N2、2%O2、5%CO2)培养24 h的方法复制细胞缺氧模型。应用Western blotting分析不同处理情况下细胞周期素D1(cyclin D1)及磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)在PASMCs中的表达;采用流式细胞术检测不同处理因素对细胞增殖周期及增殖指数的影响,应用BrdU掺入法分析不同处理因素对细胞DNA合成的影响。结果:缺氧引起PASMCs的cyclin D1及p-Akt表达水平上调,增加BrdU掺入量、S期细胞数量和细胞增殖指数,GdCl3能够放大缺氧的作用,但上述效应可以被LY294002抑制。结论:CaSR通过PI3K/Akt信号通路参与缺氧诱导的大鼠PASMCs增殖。

川崎病免疫发病机制的研究进展

川崎病的发病机制尚不完全清楚,但目前研究趋势认为川崎病是在一定遗传易患性基础上,由外源性抗原触发,引起机体免疫紊乱所致。现重点对免疫因素在川崎病发生、发展中的可能发病机制进行综述,其中包括T、B细胞的异常活化,细胞因子介导的血管损伤,免疫信号转导途径的异常激活等。

十五肽BPC-157通过p38 MAPK信号通路途径调节人脐静脉内皮细胞的功能

目的:初步探究十五肽BPC-157调节人脐静脉内皮细胞(HUVEC)功能的信号通路作用机制。方法:首先利用生物芯片筛选BPC-157参与激活的细胞信号转导通路途径,进而通过real-time PCR证实BPC-157对候选信号通路中相关基因的mRNA表达水平的影响,最后采用Western印迹观察BPC-157对候选信号通路中相关蛋白的磷酸化水平影响。结果:10μg/mL BPC-157作用于HUVEC 24 h后,信号转导通路发现者芯片结果显示,与18条信号转导通路相关的96个关键基因中分别有4个基因的mRNA表达水平上调和下调,其中与MAPK信号通路相关的3个关键基因c-Fos、c-Jun和Egr-1的mRNA表达水平显著性上调;低剂量BPC-157(1μg/mL)作用于HUVEC 12 h后,能够促进早期即刻基因c-Fos、c-Jun和Egr-1的mRNA表达水平;10μg/mL BPC-157作用于HUVEC 30 min后,可明显促进ERK1/2、p38蛋白磷酸化。结论:BPC-157可能通过活化MAPK信号转导通路途径后,激活下游早期即刻基因转录,启动靶基因的表达,从而发挥促进HUVEC增殖、迁移等功能。

全光纤电流互感器的调制相位扰动补偿

为了提高全光纤电流互感器中的电流测量精度，针对正弦调制方案提出了一种改进的信号解调方法．首先给出了有效调制深度的表达式，分析了有效调制深度在实际工程应用中存在的3种外界干扰来源．为了克服这些干扰，采用高次谐波分量实时解出调制深度数值，以实现调制相位的扰动补偿．实验结果表明，被测电流在200．1500A范围时，改进的算法使系统的抗干扰性能提高了30倍，系统测量相对偏差维持在0．2％以下，满足高精度电流测量要求．

外源性IL-10对急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺及肝组织STAT3表达的影响

目的:探讨外源性人重组白介素10(IL-10)在急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠胰腺及肝组织中对信号转导和转录激活因子3(STAT3)表达的影响.方法:92只健康SD♂大鼠随机分为正常对照组(C组,n=24)、ANP组(A组,n=36)和IL-10后干预组(I组,n=32).采用腹腔注射左旋精氨酸(L-arginine)的方法诱导大鼠ANP模型,注射L-arginine后2、5、8h,腹腔注射重组IL-1010000U干预后,分别于4、12、24、36h分批处死各组大鼠,苏木精-伊红染色(HE)观察大鼠胰腺及肝组织病理学变化,快捷免疫组织化学MaxVisionTM法检测在胰腺和肝组织中STAT3的表达变化.结果:A组、I组各时点胰腺病理学评分显著高于C组(均P<0.01),12、24、36h的I组胰腺评分较A组低(均P<0.05).肝组织A组各时点病理学评分均显著高于C组(均P<0.05或0.01);I组肝脏病理评分高于C组(均P<0.05或0.01),除24h较A组下降以外,其余各时点与A组无差异.胰腺组织和肝组织的A组、I组各时点STAT3灰度值均显著低于C组(P<0.01);I组胰腺12、24、36h的STAT3灰度值显著高于A组(12h:174.61±6.25vs146.10±10.51;24h:178.55±10.36vs150.63±9.11;36h:193.37±21.54vs155.55±11.70,均P<0.05或0.01).I组肝组织24、36h的STAT3灰度值显著高于A组(24h:89.88±18.89vs38.85±10.27;36h:48.79±15.38vs23.51±5.67,均P<0.01).结论:外源性IL-10后干预对ANP胰腺及肝组织损伤有一定保护作用,STAT3可能早期即参与ANP胰腺和肝脏组织的炎症反应,IL-10可能通过抑制STAT3途径对胰腺、肝组织起保护作用.

NF-κB抑制剂对前列腺癌PC-3细胞STAT3核转位的影响

目的:观察IL-6刺激后的前列腺癌PC-3细胞STAT3和NF-κB的表达情况;验证NF-κB抑制剂咖啡酸苯乙基酯(CAPE)对PC-3细胞IL-6和STAT3表达的影响。方法:20 ng/ml IL-6分别作用于PC-3细胞0、5、10、20、30、45 min后,Western印迹和实时荧光定量PCR检测STAT3和NF-κB蛋白和mRNA水平的表达差异;流式细胞技术检测细胞周期。采用TNF-α或TNF-α联合CAPE作用于PC-3细胞,收集培养液上清,ELISA检测IL-6的表达;同时用Western印迹检测p-STAT3的表达。结果:IL-6刺激PC-3细胞后,p-STAT3蛋白的表达明显上调,细胞增殖指数明显增高。TNF-α作用于PC-3细胞后,培养液中IL-6的表达上调,同时p-STAT3蛋白的表达亦上调(P<0.05)。CAPE联合TNF-α作用于PC-3细胞后,培养液中IL-6的表达及p-STAT3蛋白的表达均明显低于TNF-α作用后的表达水平(P<0.05)。结论:CAPE能抑制TNF-α引起的IL-6的分泌,从而抑制IL-6引起的STAT3核转位;通过CAPE抑制NF-κB表达,继而影响STAT3等相关细胞信号传导途径,可能成为前列腺癌治疗的一条新途径。

基于RNA测序的尼古丁影响下大鼠前额叶皮质的基因表达分析

目的研究尼古丁处理对大鼠前额叶皮质(PFC)中基因表达的影响。方法 24只F344大鼠随机分为实验组和对照组,每组12只,分别注射尼古丁水溶液或生理盐水17 d。药物处理结束后,从每只大鼠大脑采集PFC组织。然后采用RNA测序(RNA-Seq)技术对24只大鼠大脑PFC区域的mRNA进行测序,测出的读段利用Bowtie、Tophat及Cufflinks等生物信息学工具比对到参考基因组上并测量转录子表达水平。随后采用统计学方法确定表达水平在实验组和对照组发生显著变化的基因,并进一步分析了这些基因的功能类别及与其相关的生化通路。结果通过分析每个转录子在处理组和对照组的表达水平,确定了在尼古丁影响下的表达水平发生显著变化的基因885个。在这些基因中,与多个Gene Ontology生物学过程如G蛋白偶联受体信号通路、蛋白质泛素化和神经递质吸收等,以及生化通路如胰岛素信号、阿尔茨海默病和长时程增强等相关的基因均显著富集。结论尼古丁处理可能调节大脑PFC区域神经信号传导和能量代谢等生物学过程。

STAT3与甲状腺癌

信号转导与转录激活因子（STAT）3是STATs家族的重要成员之一,能影响一系列基因的转录和表达,在细胞增殖、分化、衰老和凋亡中发挥重要作用.研究发现,在多种人类肿瘤细胞中均有STAT3持续性激活诱导的相应蛋白高表达,这些蛋白可以促进肿瘤发生、发展、侵袭和转移,并抑制肿瘤细胞凋亡.活化的STAT3与甲状腺癌的发生、发展及恶性生物学行为密切相关,有望成为甲状腺癌治疗的新靶标.

基于FLS细胞ERK信号通路机制的THD抗CIA作用

目的:研究沙利度胺(thalidomide,THD)对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)动物模型CIA大鼠血清炎症因子白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、血管内皮细胞生长因子(vascular endo-thelial cell growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶-1,-2,-9(matrix metalloproteinase-1,-2,-9,MMP-1,-2,-9)表达的影响,及对成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)ERK信号转导通路的影响,探讨THD治疗RA的可能机制。方法:采用Ⅱ型胶原建立CIA大鼠模型,通过免疫组化观察大鼠关节滑膜血管新生(微血管密度,MVD)情况;THD治疗后用West-ern Blot法检测IL-1β、TNF-α、VEGF、MMP-1,-2,-9表达,并用胶原酶消化法分离培养正常大鼠及CIA大鼠原代FLS;用Western Blot法检测不同浓度的THD处理后的CIA大鼠FLS中ERK和p-ERK表达情况。结果:CIA大鼠造模成功,通过THD治疗能降低CIA大鼠血清炎症因子IL-1β、TNF-α的表达,较造模组分别降低了56%,48%;并能降低血管新生相关因子VEGF、MMP-1,-2,-9表达,较造模组分别降低了52%,52%,13%,33%。并减轻了CIA大鼠的关节炎症及关节滑膜的血管新生;在原代培养CIA大鼠滑膜细胞中THD对FLS中ERK蛋白表达无明显影响,不同浓度的THD作用于FLS,可使p-ERK表达降低(P<0.05),低、中、高浓度的THD组p-ERK分别降低了54%,70%,84%。结论:THD能够调节炎症因子和血管新生相关因子的表达,从而发挥抗炎及抗血管新生的作用,其机制可能与调节ERK信号转导通路有关。