双氢青蒿素治疗狼疮肾炎与SIGIRR诱导免疫负调控的相关性

目的:探究双氢青蒿素(DHA)对狼疮肾炎的治疗作用与SIGIRR诱导的TLR4/NF-κB信号通路的相关性,并观察DHA对HK-2细胞炎性损伤的影响。方法:将MRL/lpr狼疮小鼠分为模型组、DHA(25、50、100 m/kg)治疗组、阳性对照组(强的松,5 mg/kg),另取C57BL/6小鼠为正常对照组,共给药12周。HE染色观察肾脏病理学改变,Western blot法检测肾脏SIGIRR,IRAK1和TRAF6蛋白表达变化。在体外,以10μg/ml LPS刺激人肾小管上皮细胞HK-2细胞,分别加入0.67、2.00、6.00μg/ml DHA,以Western Blotting法检测药物分别作用6、12和24 h后SIGIRR蛋白表达情况,ELISA方法检测上清IL-6、CCL2的分泌水平。结果:体内实验中,肾脏病理结果显示模型组小鼠肾脏受损,DHA 100 mg/kg治疗组肾脏损伤有所减轻。DHA 100 mg/kg组相比模型组,SIGIRR蛋白表达有一定的升高,且随DHA剂量增加该蛋白表达有升高趋势。体外实验中,不同浓度DHA能抑制CCL2的分泌,0.67μg/ml DHA作用24 h能显著增加SIGIRR的表达,且SIGIRR表达量随着时间延长有逐渐升高趋势。结论:DHA对狼疮肾炎有一定的治疗作用,且与肾脏SIGIRR表达升高抑制TLR4/NF-κB信号通路的过度活化有关;DHA对LPS诱导的HK-2炎症损伤的抑制与抑制CCL2分泌及增加SIGIRR表达有关。

单免疫球蛋白白细胞介素1受体相关蛋白在牙周膜干细胞中的抗炎作用

目的:探究单免疫球蛋白白细胞介素1受体相关蛋白(SIGIRR)在牙周膜干细胞(PDLSCs)炎症反应中的作用。方法:体外培养PDLSCs,用脂多糖(LPS)模拟炎症刺激,RT-PCR检测不同LPS刺激时长对SIGIRR表达水平的影响。免疫荧光与RT-PCR检测不同浓度LPS刺激下,SIGIRR表达水平的变化。将PDLSCs分为空白对照组、LPS组、正常对照(NC)+LPS组和SIGIRR过表达(OE)+LPS组,采用RT-PCR检测各组中IL-6、IL-8、TNF-α的表达水平。结果:LPS浓度为1000 ng/mL时,SIGIRR的下调最显著。随着LPS刺激时长增加,SIGIRR表达不断下调,到6 h时表达水平最低,随后逐渐上升。OE+LPS组中的IL-6、IL-8、TNF-α表达均较NC+LPS组与LPS组显著下调。结论:SIGIRR在PDLSCs的炎症反应中发挥抗炎作用。

IRAK-M基因SNP位点rs1821777多态性与成人支气管哮喘的相关性

目的:探讨IRAK-M基因SNP位点rs1821777多态性与成人支气管哮喘的相关性。方法:分别选取成人哮喘患者541人作为哮喘组和健康体检者514人作为对照组,收集2组研究对象的性别、年龄、血常规检查、血清免疫球蛋白E(IgE)及肺功能测定结果[包括1 s用力呼气容积(FEV1)、FEV1实测值/预测值、用力肺活量用力肺活量(FVC)、FEV1/FVC];抽取2组患者空腹外周静脉血3 mL,采用SNaPshot方法检测IRAK-M基因SNP位点rs1821777多态性、采用卡方检验比较2组患者基因型及等位基因分布差异。结果:哮喘组患者外周血嗜酸性粒细胞计数、嗜酸性粒细胞比例及血清IgE(经过对数转换后)水平均高于对照组,FEV1实测值/预测值、FEV1/FVC则均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);2组研究对象基因型分布和等位基因频率的差异均无统计学意义(P>0.05);与CC组比较,TT+CT组哮喘患者FEV1实测值/预计值、FEV1/FVC%降低,外周血嗜酸性粒细胞比例、外周血免疫球蛋白水平增高(P<0.05)。结论:IRAK-M基因SNP位点rs1821777多态性参与成人支气管哮喘临床表型特征的调节,但与成人哮喘易感性无关。

Toll样受体4及其负调控因子在大鼠不同发育阶段肠组织表达的比较

目的:通过比较Toll样受体4(TLR4)及其负调控因子单Ig区IL-1相关受体(SIGIRR)和Toll作用蛋白(Tollip)在SD大鼠不同发育阶段肠段组织的表达,进一步了解新生儿坏死性小肠结肠炎的发病机制。方法:将孕20 d胎鼠剖腹产获得早产新生大鼠6只纳入早产组,顺产第1天新生大鼠6只纳入足月组,生后6周SD大鼠作为成年组。处死3组大鼠并解剖腹部,获得回肠末端肠道组织。通过荧光定量PCR的方法检测3组大鼠回肠末段组织的TLR4、SIGIRR、Tollip基因mRNA相对表达量,分别比较3个基因在3组SD大鼠肠组织中表达量。结果:早产组TLR4 mRNA的表达量是足月组的2.36倍,而成年组则是足月组的1/4,差异均有统计学意义(P<0.05)。早产组SIGIRR mRNA的表达量是足月组的1/7,而成年组则是足月组的1.37倍,差异均有统计学意义(P<0.05)。早产组Tollip mRNA的表达量是足月组1/20,两组的差异有统计学意义(P<0.05),成年组的Tollip mRNA表达量未得到结果。结论:不成熟的肠道组织TLR4表达量多,TLR4负调控因子SIGIRR、Tollip表达下调。