DISTRIBUTION OF NOS-B1 IN THE MYENTERIC PLEXUS OFRABBIT SMALL BOWELS

The distribution or NOS-BI In the myenterlc plexus or the rabbit small ho'vels was studied by using NOS--BI lmm unohlstoc hemlstry with cool emount stal nl ug method. The resul is Indicatedthat the NOS--BI-like lmmunoreactlvity was observed in all specimens or myenterlc plexus. These positive nerve fibers rorlned a regular, ladder-like meSkwork in the myenterlc plexus. The positive product deposited in the cytoplasm, and the majority of NOS-BI neurons had ckaracterlstlcs similar to theDoglel type 1. Thes. cells had many short and long Process. This study provided the morphologicalsupport for the bypotbesls that NO Is pro'duced by neurons and serves as a neurotransmitter in therabbit small bowels.

小黑杨Rubisco小亚基基因启动子的克隆及表达活性分析

核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶(Rubisco)是光合作用中决定碳同化速率的关键酶,其中小亚基(rbcS)是由核基因编码,并且主要在叶片中表达。利用RT-qPCR技术确定了小黑杨(Populus×xiaohei)叶片中高表达的Rubisco小亚基基因PxrbcS1和PxrbcS2基因,并克隆了其上游2 240、2 174 bp的启动子。对其进行启动子元件分析结果表明,PxrbcS1和PxrbcS2的启动子具有多个与光诱导表达相关的元件,例如G-box、MRE和Box4等元件。构建pBI-121-p PxrbcS1::GUS和pBI-121-p PxrbcS2::GUS植物表达载体并遗传转化84K杨(P. alba×P. glandulosa)。GUS组织化学染色以及qPCR表达分析表明PxrbcS1和PxrbcS2的启动子能够驱动GUS基因在84K杨叶片特异性高表达。总之,上述结果表明该研究成功地从小黑杨中克隆了具有叶片高表达活性的PxrbcS1和PxrbcS2的启动子,该启动子可应用到包括杨树在内的植物光合作用相关的基因功能研究以及提高植物光合作用的遗传操作中。

小巨核细胞碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶染色在血液病中的鉴别诊断意义

目的:研究小巨核细胞(SMK)碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(APAAP)染色在贫血、骨髓增生异常综合征(MDS)中的鉴别诊断意义。方法:应用抗血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(CD41a)单克隆抗体对238例血液病的骨髓片进行APAAP染色并镜检。结果:分别用瑞氏和APAAP两种染色方法计数全片的巨核细胞,两者差异有显著性(P<0.01),后者明显优于前者。各疾病组SMK阳性率由高到低依次为MDS>特发性血小板减少性紫癜(ITP)>原发性血小板增多症(ET)>巨幼细胞贫血(MgA)>肿瘤转移>巨核细胞生成血小板不良>骨髓纤维化症(MF)>混合性贫血>继发性贫血>溶血性贫血(HA)>缺铁性贫血(IDA),再生障碍性贫血未见SMK;MDS组、MgA组和ITP组在SMK类型方面有显著性差异(P<0.05)。结论:APAAP染色有助于识别SMK;SMK的数量及类型变化对贫血的分类、MDS的诊断有一定的鉴别诊断意义,为早期治疗提供了可靠的依据。

猪小肠黏膜下层脱细胞支架的制备及组织学评价

目的评价不同浓度的十二烷基磺酸钠(SDS)处理猪小肠黏膜下层(SIS)的脱细胞效果,筛选最佳脱细胞浓度,为组织工程化角膜上皮的制备提供支架材料。方法配制0.1%、0.2%、0.3%、0.5%SDS随机分成A、B、C、D 4组,分别脱细胞处理SIS 15min、30min、1h、2h(n=20),同时观察SIS的大体形态变化,HE和4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察脱细胞前后SIS的生物学特性,并对脱细胞支架进行基因组DNA分析(n=5)。结果脱细胞SIS肉眼观察呈乳白色、半透明的膜状物,具有一定的弹性、韧性及透光性;HE和DAPI染色光学显微镜观察结果显示,A组及B组处理30min时SIS生物支架无细胞及DNA残留,组织结构保留完整,胶原纤维间孔隙率增加;A组及B组处理30min脱细胞率可达90%以上。结论 0.1%及0.2%SDS处理30min条件下脱细胞效果较好,能更好地降低SIS的免疫原性,是SDS脱细胞处理SIS比较理想的浓度时间条件,为组织工程化角膜上皮的构建奠定理论基础。

磷酸化STAT3在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨磷酸化信号转导与转录激活因子3(pSTAT3)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与NSCLC各临床病理因素的关系。方法:采用免疫组织化学染色法检测59例NSCLC及其癌旁组织中pSTAT3的表达。结果:(1)NSCLC组织中,pSTAT3的表达明显高于癌旁组织(P<0.01);(2)pSTAT3的阳性表达与肿瘤组织的大小及NSCLC患者的吸烟状况有关,与性别、年龄、淋巴结转移、临床分期及组织分化程度无关。pSTAT3在腺癌中的阳性表达率较鳞癌高,但无统计学意义。结论:pSTAT3可能在肺癌的发生发展及指导靶向治疗中发挥重要作用。

原发性食管小细胞神经内分泌癌临床病理分析

目的分析原发性食管小细胞神经内分泌癌(ESCNC)的临床病理学特征在临床诊断中的价值。方法回顾性分析41例行食管根治手术的ESCNC患者的临床病理学特征。结果 ESCNC的发病率占同期原发性食管恶性肿瘤的0.80%。41例患者中淋巴结转移26例(63.41%)。CgA、Syn、NSE、CK阳性表达率分别为58.54%、58.54%、82.93%、90.24%,LCA均阴性表达。结论 ESCNC分化差、恶性程度高、进展迅速,CgA、Syn、NSE、CK在其诊断中有一定的意义。

Ventana免疫组化检测非小细胞肺癌EML4-ALK融合基因及其结果判读难点分析

目的分析Ventana免疫组织化学染色(IHC)检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织中EML4-ALK融合基因的突变情况。解析Ventana IHC结果判读的难点和陷阱,为此项检测的开展提供参考。方法回顾性分析695份Ventana IHC检测NSCLC标本,对部分标本进行了实时定量PCR(qRT-PCR)对照研究。结果 EML4-ALK在腺癌中的突变率为8.78%,鳞状细胞癌中的突变率为4.49%,总突变率为8.48%。10例Ventana IHC为(-)和(+)标本qRT-PCR检测为阴性;5例Ventana IHC染色(+++)标本qRT-PCR检测均为阳性;5例Ventana IHC(++)标本qRT-PCR检测1例阳性。结论 EML4-ALK融合基因主要发生在肺腺癌。Ventana IHC检测结果存在判读难点和陷阱,判读需要谨慎。EML4-ALK IHC检测阳性(++)的需要qRT-PCR或其它方法进一步证实。

巴豆提取物诱导小鼠小肠组织中蛋白质差异表达的初步研究

目的 建立和优化蛋白质分子差异展示的双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 ,初步观察巴豆提取物诱导小鼠小肠组织中蛋白质的差异表达 ,为进一步筛选其中介导巴豆生物作用的蛋白质分子奠定基础。方法 应用巴豆提取物灌胃制备小鼠慢性胃肠运动增强模型 ,提取其小肠组织中总蛋白质 ,优化蛋白质分子差异展示的双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 ,并用其分析模型动物小肠组织中蛋白质 ,双向电泳凝胶银染法显示其蛋白质的差异表达。结果 建立了小鼠慢性胃肠运动增强模型 ,优化并运用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术展示出模型动物小肠组织中有差异蛋白质的表达。结论 巴豆提取物可以诱导小鼠小肠组织中蛋白质差异表达 。

Glil和β-catenin基因在非小细胞肺癌中细胞核表达及临床意义

目的探讨Glil和β—catenin在tH,细胞肺癌组织中细胞核表达与临床病理学特征的关系及其相互关系。方法采用免疫组织化学SP法，检测58例非小细胞肺癌患者及15例癌旁组织中β-catenin和Glil的表达。结果15例癌旁组织中，Glil和β—catenin在正常支气管上皮细胞和腺细胞膜表达，极少胞质和胞核内表达，癌组织细胞核表达明显增高；Glil细胞核表达与分化程度（P〈0．05）、以及TNM分期（P〈0．05）差异有统计学意义，而与淋巴结转移（P〉0．05）无关；β—catenin核表达与分化程度、淋巴结转移以及TNM分期差异均有统计学意义（P〈0．05）；Glil和β-catenin在非小细胞肺癌细胞核表达呈负相关（r=-0．386，P=0．03）。结论Glil和β—catenin细胞核表达上调可能与非小细胞肺癌的发生、发展密切相关。

鲜红斑痣光谱测定系统与临床实验

对进行激光治疗的鲜红斑痣患者的皮肤进行光谱定量分析,有利于正确分析患者病变皮肤的光学特性、调整手术设备的工作参数和提高激光治疗的效果。基于对鲜红斑痣形成机理分析及激光临床治疗过程观察,文章建立了一套自动数据采集和分析的光谱系统,可以用于测定鲜红斑痣皮肤微区在380～780nm范围内的光谱,光谱分辨率为1nm。实验可测定不同年龄、不同色素痣的光谱曲线,分析并讨论了影响系统工作的原因和解决方法。

百脉根Rac1基因启动子的克隆与表达分析

百脉根小G蛋白Rac1基因促进共生结瘤过程,但其转录调控机制尚不明确.采用生物信息学方法对百脉根Rac1基因的启动子序列进行了预测,并对该启动子中含有的顺式调控元件进行了统计分析.克隆了约1.8kb的启动子片段,并构建了GUS融合的重组质粒p1391Z-Rac1Pro.通过百脉根毛根转化法获得转基因毛根,进一步利用组织化学染色法对Rac1基因在阳性毛根中的表达部位进行了研究.结果显示:该启动子除含有常见的转录调控保守元件TATA-box和CAAT-box外,还含有调控防御和胁迫、激素、光照等信号的应答元件.组织化学染色发现,Rac1基因在接种根瘤菌的根毛、根尖、根瘤原基皮层中表达量较高.

单抗CD41免疫酶标染色在全血细胞减少症中的诊断意义

目的:通过对116例全血细胞减少症的骨髓涂片采用单抗 CD41免疫酶标染色,观察5种小巨核细胞在此类疾病中的不同。方法:于光学显微镜下,仔细观察染色后小巨核细胞的检出率,并作统计学处理。结果:单抗 CD41免疫酶标染色对小巨核细胞的检出及形态学观察有较好的优越性,能及时发现体积小的淋巴样巨核细胞。结论:单抗 CD41免疫酶标染色检测小巨核细胞具有方法简便、特异、敏感、染色后的巨核细胞颜色鲜明、细胞轮廓清楚、容易测量大小、观察形态等特点,特别容易发现淋巴样小巨核细胞,对 MDS 与其它全血细胞减少症的鉴别诊断有重要价值。

细胞HE染色涂片与细胞蜡块检测晚期非小细胞肺癌胸腔积液标本中表皮生长因子受体基因突变

目的:伴发胸腔积液的晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者已失去手术机会,表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)是EGFR敏感突变的晚期NSCLC患者的一线用药。但EGFR-TKIs治疗时或治疗后出现的疾病进展以及药物的更新迭代给临床诊治带来了挑战,需要对存档的胸腔积液细胞样本进行EGFR复检或比对研究。本研究采用细胞HE染色涂片与细胞蜡块两种制作方法对NSCLC胸腔积液样本的EGFR突变基因进行检测,分析两种保存方式、保存时间对胸腔积液细胞DNA质量的影响,以期探索出一条保存细胞学资料及充分利用细胞学档案资料的可靠途径。方法:选取2014年10月—2021年4月航天中心医院病理科接收的胸腔积液样本57例,所有样本同时制作细胞HE染色涂片与细胞蜡块。将57例配对的细胞HE染色涂片与细胞蜡块采用扩增阻碍突变系统-聚合酶链反应(amplification refractory mutation system-polymerase chain reaction,ARMS-PCR)技术进行EGFR基因突变检测。DNA检测浓度为2 ng/μL,细胞HE涂片与配对细胞蜡块DNA样本并排进行扩增。结果判读按试剂说明书要求,待测样本的8号孔外控循环阈值(cycle threshold,Ct值)在13~21之间为样本合格,EGFR基因突变Ct值<26时,判断为阳性;26≤Ct值<29为临界阳性,Ct值≥29为阴性。ΔCt值为突变Ct值与外控信号Ct值的差值。比较细胞HE染色涂片与细胞蜡块检测为阳性的ΔCt值。同时将57例患者按时间段分为4组:2014—2015年(n=10),2016—2017年(n=20),2018—2019年(n=17),2020—2021年(n=10)。比较不同时间段的检测结果。结果:57例晚期NSCLC患者中以胸腔积液为首发症状入院者42例,占73.7%;57例中37例发生EGFR突变,突变率64.9%;19del突变和L858R突变为主要的突变类型,分别占37.8%(14/37)和48.6%(18/37);37例突变患者中女性占56.7%(21/37);细胞涂片与配对的细胞蜡块突变一致率为100%;细胞HE染色涂片的ΔCt值小于配对细胞蜡块的ΔCt值(t=4.526,P<0.001)。37例配对细胞蜡块与细胞HE染色涂片的突变Ct值均<26。4个时间段中,2014—2015年、2016—2017年、2018—2019年的细胞蜡块突变基因Ct均值均高于2020—2021年(P<0.05);4个时间段的细胞HE染色涂片突变Ct均值差异无统计学意义(P>0.05)。57例配对细胞蜡块与细胞HE染色涂片的外控Ct值均在13~21之间。2014—2015年、2016—2017年的细胞蜡块与细胞HE染色涂片的外控Ct值均高于2018—2019年、2020—2021年(均P<0.05)。结论:细胞HE染色涂片与细胞蜡块检测NSCLC胸腔积液样本EGFR突变具有极好的一致性,且细胞HE染色涂片的DNA质量优于细胞蜡块,但细胞HE染色涂片的局限在于不可复制性,建议在胸腔积液标本制作中进行多张涂片,以满足多次检测的需求。

非小细胞肺癌中p53基因突变的初步研究

为了解非小细胞肺癌中ｐ５３基因突变的情况，应用改良聚合酶链反应－单链构象多态（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染技术检测１７例非小细胞肺癌中ｐ５３基因第５～８外显子的突变情况，有８例存在ｐ５３基因突变，突变率为４７．００％（８／１７），其中鳞癌为５５．５６％（５／９），腺癌为３７．５０％（３／８）。本研究结果表明：非小细胞肺癌中ｐ５３基因突变较为常见；

小尾寒羊胚胎不同时期背最长肌的组织学研究

[目的]利用组织生物学方法对不同时期小尾寒羊背最长肌进行研究。[方法]以小尾寒羊为研究对象,利用组织切片技术从微观层面研究胚胎期不同阶段肌纤维生长发育的变化情况。[结果]肌纤维的密度随着时间的增长呈现下降的趋势,而肌纤维直径随着密度的降低而增加。胚胎前期胎儿增重不明显,而胚胎后期及出生后体重迅速增加,差异显著。[结论]该研究可为开展优质肉羊杂交育种工作积累基础性数据。

拟南芥DCL1启动子的分离及其表达特性分析

Dicer酶是类似于RNaseⅢ的核酸内切酶,能够特异性地将双链RNA剪切成约20nt的小RNA,在基因沉默途径中起到非常重要的作用。从拟南芥中分离出DCL1基因上游启动子序列2kb及DCL1基因的5′端1kb序列,构建了含有该启动子和GUS报告基因的植物表达载体,通过农杆菌介导法转化拟南芥,并对转基因植株进行GUS组织化学染色及荧光定量分析,结果表明,在DCL1基因启动子的驱动下,报告基因GUS主要在拟南芥的叶片中表达,在幼嫩的叶片及茎尖中表达量也比较高,茎中的表达量较低,在根中只有微量的表达。

细菌生物膜检测方法改进与应用

针对结晶紫染色法为细菌生物膜(biofilm,BF)检测的经典方法存在的不足,通过增加乙酸用量和减少洗菌次数等进行改进后,BF测定更为准确。另尝试采用多模式小动物活体成像系统检测发光菌的BF形成,并利用培养板和小圆玻片探究BF在不同载体上的形成情况,以优化小动物活体成像系统检测方法。用改进后的2种方法摸索鼠伤寒沙门菌BF形成的最适浓度和时间,结果发现,接种浓度为107 CFU/mL、培养72h时检测效果最佳。在BF检测方法优化的基础上。探究鼠伤寒沙门菌质粒对BF形成的影响,结果发现质粒可促进BF的形成。不同亚抑菌浓度双黄连对鼠伤寒沙门菌BF作用的实验结果显示,1/4 MIC(MIC为最小抑菌浓度)双黄连对BF形成的抑制作用显著低于1/2 MIC和1/8 MIC,表明双黄连的抑菌作用与浓度不成正比关系,需严格控制临床用药剂量。

两种固定液对鸭小肠肥大细胞染色效果的比较

为了探讨不同固定液对鸭小肠肥大细胞甲苯胺蓝染色效果的影响及鸭小肠内肥大细胞的数量和分布情况,试验选择5只100日龄的健康淮南麻鸭公鸭为研究对象,取鸭只十二指肠、空肠和回肠组织样品,均分为两份,分别置于10%中性福尔马林固定液和卡恩氏(Carnoy)固定液中固定,常规制作石蜡切片,切片经甲苯胺蓝染色后,观察小肠肥大细胞染色效果和肥大细胞形态、数量及分布,并进行统计分析。结果表明:Carnoy固定液对肥大细胞的染色效果优于10%中性福尔马林固定液,染色评分极显著高于10%中性福尔马林固定液(P<0.01);Carnoy固定液固定的十二指肠、空肠、回肠肥大细胞数量均极显著高于10%中性福尔马林固定液(P<0.01)。鸭十二指肠、空肠和回肠中肥大细胞形态和数目不同,在黏膜固有层血管、腺管周围的结缔组织中分布较多;空肠中肥大细胞数量最多,形态多样;十二指肠和回肠中肥大细胞数量递减,形态多为圆形。说明与10%中性福尔马林固定液相比,经Carnoy固定液固定的鸭小肠组织染色后,可清晰显示肥大细胞的形态分布。

滑鼠蛇胃肠道组织结构

探究滑鼠蛇胃、肠道的显微组织结构与特征,以便为滑鼠蛇的人工养殖与野生保护提供理论依据。采用常规解剖方法、石蜡制片和H-E染色技术,对滑鼠蛇的胃、肠道进行光镜下的组织学研究。结果表明:滑鼠蛇胃部的黏膜上皮为单层柱状上皮,固有层内有泡状腺和单管状腺两种腺体;胃腺中Ⅱ型细胞为未分化的主细胞与壁细胞,肌层由内环行肌和外纵行肌两层构成。小肠褶皱发达;黏膜上皮由大量柱状细胞和杯状细胞构成;小肠缺乏肠腺与黏膜下腺。大肠存在褶皱,没有肠腺。滑鼠蛇胃肠道可容纳大量食物,其消化能力弱于哺乳动物。

pin1基因在非小细胞肺癌中的表达及其意义

背景与目的:Pin是人类高度保守的特异性磷酸化肽基脯氨酰顺及异构酶,它作用于脯氨酸所形成的肽键,并且仅使磷酸化pSer/Thr-Pro发生异构化,这一磷酸化后调控机制能诱导磷酸蛋白的构像变化,使其发挥功能。近来的研究显示这种新的调控机制在许多生理过程中起重要的调节作用,一旦失调便导致一系列人类疾病。如癌症患者体内Pin1表达异常增高,并调控多种癌基因的信号通路。本研究探讨pin1基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其意义。方法:利用免疫组织化学方法、定量PCR方法分别检测肺癌组织和正常肺组织中Pin1基因在翻译水平和mRNA水平上的表达差异。结果:在蛋白质水平上,Pin1的表达在正常/癌两种不同的肺组织中,表达量差异有显著性;而在mRNA水平上,Pin1的表达量在正常/癌两种不同的肺组织中,差异无显著性。结论:Pin1在NSCLC组织中的表达,可能是在翻译水平受到了调控;我们的研究进一步证实:Pin1在NSCLC组织中存在蛋白水平的过量表达,这对利用Pin1作为NSCLC组织检测标志物提供了理论依据。