党参炔苷调节AKT/GSK-3β/snail信号通路对胃癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响

目的探究党参炔苷(LOB)调节蛋白激酶B(AKT)/糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)/Snail信号通路对胃癌(GC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法将GC细胞株SGC7901随机分为对照组(Control组)、低浓度LOB组(LOB-L组,10μmol/L LOB)、中浓度LOB组(LOB-M组,20μmol/L LOB)、高浓度LOB组(LOB-H组,40μmol/L LOB)和高浓度LOB+AKT激活剂SC79组(LOB-H+SC79组,40μmol/L LOB+20μmol/L SC79)。CCK-8法检测5组细胞增殖能力。划痕实验检测细胞迁移能力。Transwell实验检测细胞侵袭能力。流式细胞术检测细胞凋亡。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法测定5组细胞AKT、GSK-3β、snail1 mRNA的表达。Western Blot检测5组细胞AKT/GSK-3β/snail信号通路和凋亡、EMT过程相关蛋白表达。结果与Control组比较,LOB-M组、LOB-H组SGC7901细胞OD450值(48 h、72 h)、细胞划痕愈合率、细胞侵袭数目、AKT、GSK-3β、snail1 mRNA表达和AKT、GSK-3β磷酸化水平、snail1、Bcl-2、N-cadherin、Vimentin蛋白表达显著下降(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05)。SC79减弱了LOB对GC细胞增殖和EMT的抑制作用,抑制了细胞凋亡。结论LOB可能通过下调AKT/GSK-3β/snail信号通路抑制GC细胞增殖和EMT过程,促进细胞凋亡。

TGF-β1 Snail E-cadherin及N-cadherin在胃癌中的表达及意义

目的:探讨TGF-β1、Snail、E-cadherin及N-cadherin在胃癌中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学法检测96例胃癌组织及80例癌旁组织中TGF-β1、Snail、E-cadherin、N-cadherin的表达,并与临床病理资料做对照分析。结果:胃癌组织中TGF-β1、Snail、E-cadherin及N-cadherin阳性表达率分别为63.5%、83.3%、37.5%、44.8%,癌旁组织分别为28.8%、41.3%、100%、11.3%。四种蛋白在胃癌组织及癌旁组织的表达差异均有显著性(P<0.05)。E-cadherin表达的降低及TGF-β1、Snail、N-cadherin表达的升高与胃癌不同分化程度、组织学类型、浸润深度、淋巴结转移及远处转移有关(P<0.05)。N-cadherin与TGF-β1蛋白的表达呈正相关,并且与E-cadherin的表达呈负相关。E-cadherin与TGF-β1、Snail的表达均呈负相关(P<0.05)。结论:TGF-β1、Snail蛋白的高表达、E-cadherin蛋白的低表达与N-cadherin的反常表达与胃癌的浸润和转移有密切的关系;在胃癌的发展过程中,E-cadherin向N-cadherin转化及TGF-β1、Snail表达可能发挥重要作用。

转录因子Snail及黏附分子E-cadherin在胃癌中的表达

目的探讨转录因子Snail及黏附分子E-cadherin在胃癌中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测96例胃癌组织和80例癌旁组织中Snail、E-cadherin的表达,分析两者在不同组织类型与分化程度胃癌中的表达,以及与临床病理因素之间的关系。结果胃癌组织E-cadherin的阳性率(37.5%)显著低于癌旁组织(100%)(P<0.05),E-cadherin的表达与胃癌不同分化程度、组织学类型、浸润深度、淋巴结转移、临床分期及远处转移有关(P<0.05)。胃癌组织Snail阳性率(83.3%)显著高于癌旁组织(41.25%)(P<0.05),Snail的表达与胃癌不同分化程度、组织学类型、浸润深度、淋巴结转移及远处转移有关(P<0.05)。胃癌组织中E-cadherin与Snail的表达呈负相关(P<0.05)。结论E-cadherin蛋白低表达与Snail蛋白高表达可能是胃黏膜恶性转变以及胃癌发生浸润转移的重要生物学标志。联合检测E-cadherin及Snail对预测胃癌浸润转移有重要意义。

Snail、E-cadherin在膀胱尿路上皮癌中的表达及其与膀胱癌复发的关系

目的:研究膀胱尿路上皮癌中Snail与E-cadherin的表达,并探讨其与膀胱癌复发的关系。方法:应用免疫组化方法,检测40例膀胱尿路上皮癌组织和20例癌旁组织中Snail、E-cadherin的表达情况,并分析与临床病理资料的关系。结果:膀胱尿路上皮癌组织中Snail的阳性率(80%)显著高于癌旁组织(45%)(P<0.05),Snail的表达与膀胱尿路上皮癌不同临床分期、病理分级、肿瘤数量、远处转移及复发有关(P<0.05);膀胱尿路上皮癌组织中E-cadherin的阳性率(27.5%)显著低于癌旁组织(65%)(P<0.05),E-cadherin的表达与膀胱尿路上皮癌不同临床分期、病理分级、肿瘤数量及远处转移有关(P<0.05)。膀胱尿路上皮癌组织中Snail与E-cadherin的表达呈负相关(P<0.05)。结论:Snail高表达及E-cadherin低表达与膀胱尿路上皮癌的浸润和转移密切相关,Snail有可能作为膀胱尿路上皮癌复发的重要生物学标志。

Snail蛋白在骨肉瘤中的表达及临床意义

目的观察Snail蛋白在骨肉瘤中的表达,探讨其在骨肉瘤发生、发展中的作用。方法采用免疫组化SP法检测骨肉瘤组织42例、骨软骨瘤10例中Snail蛋白的表达。结果①Snail蛋白在骨肉瘤中表达高于骨软骨瘤组织中的表达,差异有统计学意义(P<0.01);②Snail蛋白在骨肉瘤组织中的表达与软组织浸润、Enneking分期、肺转移密切相关(P<0.01),而与性别、年龄、肿瘤部位、Dahlin类型无关(P>0.05);③骨肉瘤中Snail蛋白阳性患者累积生存率明显低于阴性患者,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Snail蛋白在骨肉瘤组织中的高表达提示其对骨肉瘤的发生、发展和浸润、转移起重要作用并预示预后不良。

Snail与E—cadherin在胃癌中的表达及临床意义

目的研究胃癌中转录因子Snail及黏附因子E—cadherin的表达，并探讨与胃癌浸润转移的关系。方法用组织芯片和免疫组化sP的方法检测189例胃癌组织、54例癌旁组织、32例正常胃黏膜中Snail及E—cadherin表达。结果胃癌组织Snail阳性率f84．13％）显著高于癌旁组织f48．15％，10〈0．05），Snail的表达与胃癌不同分化程度、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期及Lauren分型有关fP〈0．05）。胃癌组织E—cadherin的阳性率（22．2％）显著低于癌旁组织（55．5％，P〈0．05），E—cadherin的表达与胃癌不同分化程度、浸润深度、TNM分期及Lauren分型有关（P〈0．05）。E—cadherin阳性组生存期高于阴性组，Snail阴性组生存期高于阳性组。结论Snail蛋白高表达与E—adherin蛋白低表达可能参与胃癌浸润转移的发生，并且联合检测可作为其重要生物学标志，有助于胃癌早期诊断和预后评价。

转录因子Snail在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的检测转录因子Snail mRNA及蛋白在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达,探讨Snail在NSCLC发生发展中的作用。方法采用免疫组织化学、RT-PCR的方法检测NSCLC、癌旁相对正常肺组织(>5cm)中转录因子Snail蛋白及mRNA的表达,并分析其与临床病理参数之间的关系。结果 NSCLC组织中Snail mRNA的阳性表达率(82.7%)高于癌旁相对正常肺组织(23.1%,P<0.05);NSCLC组织中Snail mRNA的阳性表达量(1.368±0.614)高于癌旁相对正常肺组织(0.579±0.217,P<0.05)。NSCLC组织中Snail蛋白的阳性表达率(80.8%)高于癌旁相对正常肺组织(23.1%,P<0.05),且癌组织中Snail蛋白阳性表达率与TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05),而与组织分型、分化程度、吸烟史无关(P>0.05)。结论 NSCLC的癌变、侵袭、转移可能与Snail蛋白、mRNA的高表达有关。

LMP2A、Snail和N-cadherin在鼻咽癌及其淋巴结转移灶中高表达

目的探讨潜伏膜蛋白2A(latent membrane protein 2A,LMP2A)、Snail和N-cadherin在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)中的表达及意义。方法通过免疫组织化学检测LMP2A、Snail和N-cadherin在鼻咽黏膜慢性炎、NPC和淋巴结转移灶中的表达,比较3种蛋白的表达相关性及其与临床病理的关系。通过体外实验检测LMP2A对鼻咽癌CNE2细胞形态的影响及Snail和N-cadherin蛋白表达的影响。结果 LMP2A、Snail和N-Cadherin蛋白的高表达与NPC患者临床恶性进展呈正相关(尤其是淋巴结转移);LMP2A与Snail、N-cadherin蛋白表达均呈正相关;体外实验证实LMP2A可上调鼻咽癌CNE2细胞中N-cadherin和Snail蛋白的表达并诱导细胞发生上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)样改变。结论 LMP2A、Snail和N-cadherin在鼻咽癌及其淋巴结转移灶中的高表达与NPC恶性进展和淋巴结转移密切相关。

Snail在AP-1介导的肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的:探讨Snail在AP-1介导的肾小管上皮细胞转分化中的作用及对细胞外基质分泌的影响。方法:将体外培养的人肾小管上皮细胞(HK2)分为正常对照组、高糖组、AP-1阻断组。细胞免疫化学法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达,ELISA法测定培养液上清中纤连蛋白(FN)的浓度变化,用凝胶电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测HK2细胞AP-1的改变,RT-PCR法检测vimentin mRNA和Snail mR-NA的表达,Western blotting检测E-cadherin的表达。结果:高糖作用HK2细胞48h后,高糖组FN浓度较正常对照组显著增加(P<0.05),而AP-1阻断组浓度显著低于高糖组(P<0.05);高糖能够刺激AP-1结合活性,AP-1阻断剂可显著抑制AP-1的活化;高糖组Snail mRNA表达水平较正常对照组显著增加(P<0.05),而AP-1阻断组其水平显著低于高糖组(P<0.05);与正常对照组相比,高糖组E-cadherin蛋白表达明显降低(P<0.05),而AP-1阻断组其水平显著高于高糖组(P<0.05);高糖组vimentin mRNA和蛋白水平明显高于正常对照组(P<0.05),而AP-1阻断组显著低于高糖组(P<0.05)。结论:高糖可导致肾小管上皮细胞AP-1活化,诱导Snail表达而下调E-cadherin,同时导致vimentin蛋白的表达、细胞外基质FN的分泌增加,诱导其表型转化,参与糖尿病肾病的纤维化进程。

Snail蛋白表达与胃癌浸润转移的相关性研究

目的:研究Snail蛋白在胃癌中的表达与胃癌浸润转移的关系。方法:应用免疫组织化学SP法,检测Snail蛋白在87例胃癌和24例正常胃粘膜组织中的表达及其在细胞中的定位。结果:Snail蛋白高度表达于胃癌组织的细胞核、细胞质,正常胃粘膜组织中表达较少甚至不表达,阳性率分别为89.6%和29.1%,两者有统计学意义(P<0.05)。Snail的表达与胃癌的组织学分化、浸润深度和淋巴结转移有关(P<0.05)。结论:胃癌的侵袭转移与Snail蛋白的表达有关,Snail蛋白有可能成为胃癌侵袭转移的生物学标志。

转录因子Twist、Snail在宫颈鳞癌中的表达及其与血管生成的关系

目的探讨Twist、Snail蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达情况及其与微血管密度的关系。方法采用免疫组织化学方法对60例宫颈鳞癌组织Twist及Snail蛋白的表达进行检测,分析其与临床病理特征的关系。CD34抗体标记癌组织内血管内皮细胞数量,计算微血管密度(MVD)。结果宫颈鳞癌组织中Twist及Snail的阳性表达均与患者的组织学分级及临床分期无关(P>0.05),与淋巴结转移有关(P<0.05)。Twist及Snail阳性表达组MVD显著高于Twist、Snail阴性组。在宫颈鳞癌组织中Twist及Snail蛋白的表达之间存在显著正相关(r=0.529,P<0.05)。结论宫颈鳞癌组织中存在Twist及Snail蛋白的高表达,两者的联合表达可能增加肿瘤细胞的侵袭力,并且可以通过微血管生成在宫颈鳞癌的浸润、转移过程中发挥促进作用。

Expression of TGF-β1,Snail,E-cadherin and N-cadherin in Gastric Cancer and Its Significance

OBJECTIVE To investigate the expression of TGF-β1,Snail,E-cad-herin and N-cadherin in gastric cancer(GC),and to examine its relationship to malignant features of the tumors. METHODS The expression of TGF-β1,Snail,E-cadherin and N-cadherin proteins was detected in GC and adjacent tissues by immunohistochemical staining,and compared with the clinico-pathological data. RESULTS Positive rates of expression for TGF-β1,Snail,E-cadherin and N-cadherin were 63.5%,83.3%,37.5%and 44.8%in GC,and 28.8%, 41.3%,100%,11.3%in adjacent tissues,respectively.The expression of all four proteins showed a significant difference between the GCs and adjacent tissues(P<0.05).The positive rate of TGF-β1,Snail and N-cadherin,or the negative rate of E-cadherin expression was significantly related to the differentiated degree,histological type,invasion and metastasis of GC.In addition,the expression of N-cadherin was positively related to that of TGF-β1, but negatively related to that of E-cadherin.There was negative correlation between expression of E-cadherin and TGF-β1 and Snail in GC(P<0.05). CONCLUSION The over-expression of TGF-β1 and Snail and decreased expression of E-cadherin and the abnormal expression of N-cad-herin were involved in the process of invasion and metastasis of GC.The data showed that E-cadherin might switch to N-cadherin.TGF-β1 and Snail might play a fundamental role in the process.

小干扰RNA对高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞Snail 1表达的抑制作用

目的:观察小干扰RNA对高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞Snail1表达的抑制作用及意义。方法:将原代培养肾小管上皮细胞分为5组,(1)对照组(含糖5.5 mmol/L);(2)高糖组(含糖25 mmol/L);(3)Snail1 siRNA处理组,转染Snail1 siRNA,6 h后更换为高糖(含糖25 mmol/L)培养;(4)Control siRNA处理组,转染Control siRNA作为阴性对照,6 h后换为高糖(含糖25 mmol/L)培养;(5)高渗组(含甘露醇19.5 mmol/L)。72 h后收集细胞,用Western blot检测Snail 1、Vimentin蛋白表达,用半定量RT-PCR检测Snail 1、Vimentin、成纤维细胞特异性蛋白-1(FSP-1)和纤维连接蛋白(FN)的mRNA表达。结果:肾小管上皮细胞转染Snail1 siRNA后,与高糖组比较Snail1mRNA和蛋白表达分别下降62%和68%(P<0.01);与高糖组比较,Snail1 siRNA处理组Vimentin、FSP-1、FN蛋白和(或)mRNA表达显著下调(P<0.01)。结论:(1)小干扰RNA能显著抑制高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞Snail1表达;(2)Snail1参与了高糖作用下肾小管上皮细胞病理改变,并在细胞外基质的沉积中起重要作用。

宫颈鳞癌组织中Snail mRNA和蛋白的表达

目的:检测宫颈鳞癌组织中Snail mRNA和蛋白的表达。方法:采用免疫组织化学及RT-PCR法,检测宫颈鳞癌组织(n=141、48)、癌旁组织(n=48、48)及正常宫颈组织(n=48、48)中Snail蛋白及mRNA的表达,并分析其与临床病理参数之间的关系。结果:宫颈鳞癌、癌旁组织中Snail mRNA的阳性表达率高于正常组织(P均<0.05),且癌组织中Snail mRNA阳性表达率与淋巴结转移情况有关(P<0.05),但与肿瘤的分化程度、FIGO分期无关(P均>0.05)。3组组织中Snail mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。宫颈鳞癌及癌旁组织中Snail蛋白的阳性表达率高于正常宫颈组织(P<0.05),且癌组织中Snail蛋白阳性表达率与分化程度、FIGO分期、淋巴结转移情况有关(P均<0.05)。结论:宫颈鳞癌的癌变、侵袭、转移可能与Snail蛋白及mRNA的高表达有关,Snail可作为预测宫颈鳞癌预后的指标之一。

Snail与E-cadherin在食管癌中的表达及临床意义

目的研究食管癌中转录因子Snail及黏附因子E-cadherin的表达,并探讨与食管癌浸润转移的关系。方法采用免疫组化SP法检测68例食管癌组织和40例癌旁组织中Snail,E-cadherin的表达情况,分析两者在不同分化程度的食管癌中的表达,以及与临床病理因素之间的关系。结果食管癌组织Snail阳性率(82.4%)显著高于癌旁组织(42.5%)(p<0.05),Snail的表达与食管癌不同分化程度、浸润深度、淋巴结转移及远处转移有关(p<0.05)。食管癌组织E-cadherin的阳性率(36.7%)显著低于癌旁组织(87.5%)(p<0.05),E-cadherin的表达与食管癌不同分化程度、浸润深度、淋巴结转移、临床分期及远处转移有关(p<0.05)。食管癌组织中Snail与E-cadhrin的表达呈负相关(p<0.05)。结论Snail蛋白高表达与E-cadherin蛋白低表达可能参与食管癌浸润转移的发生,并且联合检测可作为其重要生物学标志,有助于食管癌早期诊断和预后评价。

Snail基因及E-cadherin蛋白在贲门癌的表达及其临床意义

目的:研究贲门癌中转录因子Snail及黏附因子E-cadherin的表达,并探讨与贲门癌的浸润、转移和分化程度之间的关系,以及两者之间的相关性。方法:采用免疫组化SP法检测136例贲门癌组织和42例癌旁组织中Snail、E-cadherin的表达情况,分析两者在不同分化程度的贲门癌中的表达,以及与临床病理因素之间的关系。结果:贲门癌组织Snail阳性率72.8%显著高于癌旁组织42.9%(P<0.05),Snail的表达与贲门癌不同分化程度、浸润深度、淋巴结转移及远处转移有关(P<0.05)。贲门癌组织E-cadherin的阳性率36.7%显著低于癌旁组织85.7%(P<0.05),E-cadherin的表达与贲门癌不同分化程度、浸润深度、淋巴结转移、临床分期及远处转移有关(P<0.05)。贲门癌组织中Snail与E-cadhrin的表达呈负相关(P<0.05)。结论:Snail蛋白高表达与E-cadherin蛋白低表达可能参与贲门癌浸润转移的发生,并且联合检测可作为其重要生物学标志,为贲门癌早期诊断和预后评估提供更多的理论依据。

Snail蛋白表达与肝细胞癌术后预后的相关性研究

目的研究Snail蛋白在肝细胞癌(HCC)中的表达及其与临床病理特征和术后预后的关系。方法应用免疫组织化学SP法,检测Snail蛋白在103例肝细胞癌及25例正常肝组织中的表达及其在细胞中的定位。结果Snail蛋白高度表达于肝癌组织的细胞核、细胞质,正常肝组织中表达较少甚至不表达,阳性率分别为51.5%和16%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。Snail在肝癌中的高表达与肝癌的pTNM分期、肿瘤有无包膜和微血管侵犯有关(P<0.05)。结论HCC患者的术后的预后与Snail蛋白的表达有关,Snail蛋白有可能成为肝癌术后预测复发判断预后的生物学标志。

Twist和Snail在滑膜肉瘤中的表达

目的:检测上皮-间充质转换的转录因子Twist和Snail在滑膜肉瘤组织中的表达,分析二者之间关系及其对滑膜肉瘤远处转移的影响,并探讨其预后意义。方法:通过组织病理学观察和免疫组织化学染色,检测133例滑膜肉瘤组织标本中Twist和Snail的表达情况,应用统计学软件SPSS13.0分析二者的不同表达与各临床病理参数特点的关系,并作KaplanMeier生存分析。结果:Twist和Snail在滑膜肉瘤组织中表达部位为细胞质和/或细胞核,133例组织标本中Twist高表达者55例(55/133)且与组织学分型、临床分期以及融合基因类型有关(P<0.05);Snail高表达者82例(82/133),与组织学分型有关(P<0.05)。二者的表达与不同性别、年龄、肿瘤大小、部位、组织学分级等无关(P>0.05)。Twist和Snail在滑膜肉瘤组织中的表达存在正相关(r_s=0.191,P=0.027),Log-Ranktest显示Twist高表达组,患者总生存期和无转移生存期明显低于低表达组,差异有统计学意义(x^2=8.620,P=0.03和x^2=11.462,P=0.001);Snail高表达组,患者无转移生存期明显低于其弱表达者,差异有统计学意义(x^2=4.575,P=0.032),但两组的总生存期差异无统计学意义(x^2=0.602,P=0.438);且二者联合表达组患者总生存期和无转移生存期明显低于其弱表达组,差异有统计学意义(x^2=13.619,P=0.003和x^2=15.548,P=0.001)。结论:滑膜肉瘤组织中存在EMT的主要转录因子Twist和Snail的高表达,二者可独立诱导EMT,且二者的联合表达更加促进肿瘤转移的发生,提示患者预后不良。

Snail和Raf激酶抑制蛋白与非小细胞肺癌侵袭转移的关系

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织中Snail和Raf激酶抑制蛋白(RKIP)的表达情况。方法采用免疫组织化学方法检测124例NSCLC及67例癌旁正常肺组织中Snail和RKIP的表达情况,比较临床病理特征与Snail和RKIP阳性表达率的关系,分析Snail和RKIP的相关关系。结果 Snail蛋白在肺癌中表达率为79.03%,高于正常肺组织的19.40%(χ2=63.538,P<0.01);RKIP在肺癌中的表达率为36.29%,低于正常肺组织的77.61%(χ2=29.716,P<0.01)。两者的表达水平均与肺癌的分化程度、TNM分期、淋巴结转移及术后生存时间有关;Snail与RKIP的蛋白表达水平呈负相关(P<0.05)。结论 Snail高表达与RKIP低表达可能是NSCLC侵袭转移的重要生物学标志,可作为NSCLC的预后指标。

肝癌前体细胞snail表达与肝癌术后预后相关性研究

目的本研究通过检测CD44分子和Snail蛋白在HCC中的表达,探究CD44和Snail蛋白与HCC患者临床病理因素以及术后预后的关系。方法利用免疫组化方法检测252名肝癌术后患者癌及癌旁组织CD44和Snail蛋白的表达。结果 CD44阳性表达125例,见于细胞膜和细胞浆,Snail蛋白阳性表达121例见于细胞浆和细胞核。二者阳性表达均显著高于癌旁组织。CD44和Snail蛋白共阳性表达89例,其1-,3-,5年生存率为49.4%,31.5%,24.7%,1-,3-,5年复发率为59.9%,76.6%,81.6%。COX多因素分析中,CD44和Snail共阳性表达是生存复发的独立危险因素。结论 CD44和Snail共阳性表达与肝癌的复发和侵袭性密切相关,可作为预测肝癌患者术后预后的指标。