Skp2通过调控Snaill水平对上皮性卵巢癌细胞EMT的作用研究

目的探讨S期激酶相关蛋白2(Skp2)通过调控转录因子Snaill水平对上皮性卵巢癌细胞上皮间质转化(EMT)的作用。方法分别检测15例上皮性卵巢癌组织和正常卵巢组织中Skp2和Snaill mRNA水平;体外培养SKOV3细胞,将其分为阴性对照组(只加脂质体)、Skp2干扰表达组(加Skp2干扰表达载体和脂质体)、Skp2过表达组(加Skp2过表达载体和脂质体),采用Lipofectamine法分别将脂质体、Skp2干扰表达载体和Skp2过表达载体转染到SKOV3细胞中,检测细胞中Skp2、Snaill、E-cadherin和Vimentin mRNA和蛋白表达情况,同时检测细胞体外侵袭、迁移能力。结果Skp2 mRNA在卵巢癌组织中的表达水平明显低于正常卵巢组织,Snaill mRNA在卵巢癌组织中的表达水平明显高于正常卵巢组织(P<0.05)。与阴性对照组相比,Skp2干扰表达组细胞中Skp2、E-cadherin mRNA和蛋白表达水平降低,侵袭细胞数和迁移细胞数以及Snaill、Vimentin mRNA和蛋白表达水平增加(P<0.05);与Skp2干扰表达组相比,Skp2过表达组细胞中Skp2、E-cadherin mRNA和蛋白表达水平增加,侵袭细胞数和迁移细胞数以及Snaill、Vimentin mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论Skp2通过降低Snaill水平,抑制上皮性卵巢癌细胞EMT,这可能是抑制卵巢癌细胞侵袭和迁移的新靶点。

FoxM1调控Snai1促进肝癌上皮-间充质转换的作用

目的探讨肝细胞癌FoxM1的表达及其在上皮-间充质转换(EMT)中的作用及分子机制。方法采用Western blot和qRT-PCR方法,检测FoxM1、Snai1和E-cadherin在不同转移潜能的肝癌细胞系和正常肝细胞系中的表达水平。通过转染pcDNA3.1-FoxM1和siRNA-FoxM1调控FoxM1的表达,探讨FoxM1、Snai1在肝细胞癌EMT中的作用。采用划痕实验和Transwell实验检测FoxM1对肝癌细胞侵袭和迁移能力的作用。结果FoxM1在肝癌细胞中高表达(F=29.617、18.037,P<0.05),肝癌细胞中高表达的FoxM1与E-cadherin表达呈负相关(r=-0.893,P<0.05),与Snai1表达呈正相关(r=0.993,P<0.05)。划痕实验显示,下调FoxM1表达可以降低肝癌细胞的迁移能力(t=4.594,P<0.05),而上调FoxM1表达可以增加肝癌细胞的迁移能力(t=-4.459,P<0.05)。Transwell侵袭实验显示,下调FoxM1表达可以降低肝癌细胞的侵袭能力(t=-4.385,P<0.05),而上调FoxM1表达可以增加肝癌细胞的侵袭能力(t=-4.950,P<0.05)。结论 FoxM1在肝癌细胞中高表达,通过调控EMT促进肝癌细胞的迁移和侵袭,FoxM1可能成为肝癌治疗的新靶点。