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猪带绦虫(Taenia solium)囊尾蚴发育过程的超微结构观察 被引量:9
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作者 赵艳兵 李庆章 郝艳红 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期614-617,共4页
系统地研究了猪囊尾蚴发育过程中超微结构的变化。5头仔猪,分别经口服感染3节猪带绦虫孕卵节片,于感染后不同时期剖杀,剥离囊尾蚴。取囊壁和头颈部,作透射电镜观察。观察结果表明,随感染时间的延长,猪囊尾蚴细胞或组织的类型未发生明显... 系统地研究了猪囊尾蚴发育过程中超微结构的变化。5头仔猪,分别经口服感染3节猪带绦虫孕卵节片,于感染后不同时期剖杀,剥离囊尾蚴。取囊壁和头颈部,作透射电镜观察。观察结果表明,随感染时间的延长,猪囊尾蚴细胞或组织的类型未发生明显变化,只在大小或发育程度上有所增加。头节和囊壁均由皮层和实质区构成,但二者的超微结构有差别。头节肌肉较发达,皮层外表面的微毛较短,基质区线粒体较少,实质区糖原颗粒不及囊壁贮存多,并且排泄管也较少。提示二者可能执行不同的功能:囊壁与营养吸收有关,而头节可能与将来的发育有关。 展开更多
关键词 猪囊尾蚴 发育 超微结构
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猪带绦虫(Taenia solium)囊尾蚴发育过程中的周围宿主反应 被引量:1
2
作者 刘永杰 郝艳红 李庆章 《上海农业学报》 CSCD 2003年第1期84-86,共3页
首次系统地研究了猪囊尾蚴发育过程中的周围宿主反应。结果显示 ,宿主炎性细胞在囊尾蚴周围出现有先后顺序。初期以嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞为主 ,随后巨噬细胞及上皮样细胞开始出现 ,并在虫体周围呈围墙样增生 ,最后在虫... 首次系统地研究了猪囊尾蚴发育过程中的周围宿主反应。结果显示 ,宿主炎性细胞在囊尾蚴周围出现有先后顺序。初期以嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞为主 ,随后巨噬细胞及上皮样细胞开始出现 ,并在虫体周围呈围墙样增生 ,最后在虫体外围形成结缔组织包囊。从病理组织学结果可以看出 。 展开更多
关键词 绦虫 囊尾蚴 发育过程 周围宿主反应 嗜酸性粒细胞
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Evaluation of activity of triclabendazole against Taenia solium metacestode in naturally infected pigs
3
作者 Ana Vargas-Calla Luis A.Gomez-Puerta +5 位作者 Juan Calcina Omar Gonzales-Viera Cesar Gavidia Maria T.Lopez-Urbina Hector H.Garcia Armando E.Gonzalez 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2016年第1期20-23,共4页
Objective:To assess the efficacy of triclabendazole(TCBZ) in porcine cysticercosis.Methods:Eighteen naturally infected cysticercotic pigs were divided into 3 groups of 6 individuals each.The first group was treated or... Objective:To assess the efficacy of triclabendazole(TCBZ) in porcine cysticercosis.Methods:Eighteen naturally infected cysticercotic pigs were divided into 3 groups of 6 individuals each.The first group was treated orally with TCBZ at a single dose of 30 mg/kg of body weight,the second group was treated orally with oxfendazole at a single dose of 30 mg/kg of body weight and the third group received a placebo(control group).All animals were kept under the same management conditions.The pigs were euthanized 17 wk post-treatment and the number of surviving cysts in muscles was assessed and compared between groups.Results:All pigs treated with oxfendazole had only degenerated cysts in their carcasses.In contrast,TCBZ had very little effect against the parasitic cysts.Cysts from pigs in the TCBZ group looked apparently normal after treatment.However,histological evaluation showed a mild to moderate degree of inflammation.Conclusions:TCBZ is not an efficacious drug against Taenia solium cysticercosis in swine using a single dose. 展开更多
关键词 TAENIA solium CYSTICERCOSIS TRICLABENDAZOLE OXFENDAZOLE Treatment
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Preparation of Taenia solium Stained Specimens and Morphological Observation
4
作者 Yang Yicheng Zhang Guoquan +4 位作者 Zhang Yuanlai Liu Lijun Zhang Liang Tian Qihui Zhang Jinlong 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2017年第4期195-196,203,共3页
[ Objective ] In order to observe the morphological structure of Taenia solium and improve the dyeing method of Taenia solium. [ Method ] Taenia soli- um was stained by hematoxylin-eosin (HE) staining method and obs... [ Objective ] In order to observe the morphological structure of Taenia solium and improve the dyeing method of Taenia solium. [ Method ] Taenia soli- um was stained by hematoxylin-eosin (HE) staining method and observed under microscope. Taenia solium specimens with clear structure and bright color were made. [ Results] Male reproductive system and excretory system of Taenia solium segment could be observed under the optical microscope, structures of uterus and eggs in Taenia solium gravid proglottid could also be observed. [ Conclusion] Aiming at providing a reference for the identification of Taenia solium and the diagnosis of the tapeworm disease. 展开更多
关键词 Taenia solium Hematoxylin staining MORPHOLOGY
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Analysis of the Knowledge, Attitudes and Practices of Populations in Four Villages of the <i>Boucle du Mouhoun</i>Region (Burkina Faso) Regarding <i>Tænia solium</i>Life Cycle
5
作者 Laibané Dieudonné Dahourou Oubri Bassa Gbati +3 位作者 Athanase Millogo Amadou Dicko Constant Rakiswendé Roamba Louis Joseph Pangui 《Health》 2018年第1期95-106,共12页
T. solium cysticercosis is a tropical neglected disease with a high impact on public health and agriculture. To better understand the socio-economical drivers of this disease, this study was carried out with the goal ... T. solium cysticercosis is a tropical neglected disease with a high impact on public health and agriculture. To better understand the socio-economical drivers of this disease, this study was carried out with the goal to analyze knowledge, attitudes and practices of populations of the Boucle du Mouhoun region in connection with the life cycle of T. solium. We carried out a knowledge-attitudes-practices (KAP) survey with 320 people in four villages. More than half of the interviewees (60.3%) have already seen pig’s carcasses with the parasite cysts. Only two people know that the infestation is associated with the consumption of human faeces. In addition, 32.2% think that they can get sick by ingesting infested meat. Wells water is consumed by 62.8% of people and 75.1% of wells do not carry curbs. Moreover, 84.1% of concessions had latrines but 52.2% of the people practice open defecation. Pig meat is consumed by 80.6% of people and 30.9% have already consumed meat with cysts. This study shows that the transmission routes of porcine cysticercosis are not known and that the populations adopt attitudes and practices which allow the perpetuation of teniasis/cysticercosis in these villages. 展开更多
关键词 TAENIA solium KNOWLEDGE CYSTICERCOSIS Attitude Boucle du Mouhoun
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<i>Taenia solium</i>Cysticercosis in Sub-Saharan Africa: Perspectives for a Better Control
6
作者 Beda John Mwang’onde 《Advances in Infectious Diseases》 2019年第2期105-121,共17页
For decades, Taenia solium cysticercosis (TSC) has remained an important constraint for public health and economic well being of the predisposed communities. Despite the fact that the disease is easily preventable, hu... For decades, Taenia solium cysticercosis (TSC) has remained an important constraint for public health and economic well being of the predisposed communities. Despite the fact that the disease is easily preventable, humans remain foci for transmission. They harbour the mature form of the parasite (Taenia solium) which may be curable at this stage and also easily prevented from contaminating pig feeds and environment with eggs of the parasite to break the cycle. Researchers, knowledgeable communities and international organisations such as the World Health Organisation work hard to make the disease a history. Nevertheless, persistence of the disease in endemic regions such as sub Saharan Africa is kept on increasing. While TSC in human may serve as a silent killer as it can go unnoticed for years, the immanent social cultural settings and lifestyles of the communities in endemic areas form the main concern on the epidemiology of the disease. Unless lifestyles change in endemic regions, front line research might rarely find its way into applications in an area of huge societal and economic impact, the TSC epidemiology. Sincerely, transmission of TSC is favoured by poor sanitation and hygiene which is motivated by lifestyle and poverty. What is perhaps missing is the knowledge on “why is the communities involved ease indiscriminately while almost every member of the community in endemic areas knows that indiscriminate defecation may harm their health? What social drivers are behind this motive (bush defecation)? How best can the disease be controlled and monitored? This review recommends for developing and implementing an interdisciplinary OneHealth community-based control mechanism and monitoring (surveillance) programme as standpoints towards eliminating TSC in sub-Saharan Africa and the rest endemic regions. 展开更多
关键词 TAENIA solium CYSTICERCOSIS EPIDEMIOLOGY Sub Saharan AFRICA
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猪带绦虫45W-4BX和TSOL18的高效表达及免疫效果研究 被引量:13
7
作者 骆学农 郑亚东 +7 位作者 胡志敏 丁军涛 张少华 侯俊玲 窦永喜 郭爱疆 景志忠 才学鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期212-217,共6页
RT-PCR扩增45W-4B和TSOL18基因,PCR截去45W-4B基因的N端信号肽和C端疏水氨基酸序列形成45W-4BX。将45W-4BX和TSOL18 PCR产物分别亚克隆入pGEX-4T-1,用IPTG诱导表达,取产物进行SDS-PAGE和Western blot分析。纯化表达产物制成油佐剂疫苗... RT-PCR扩增45W-4B和TSOL18基因,PCR截去45W-4B基因的N端信号肽和C端疏水氨基酸序列形成45W-4BX。将45W-4BX和TSOL18 PCR产物分别亚克隆入pGEX-4T-1,用IPTG诱导表达,取产物进行SDS-PAGE和Western blot分析。纯化表达产物制成油佐剂疫苗分别免疫家猪,用25 000枚猪带绦虫成熟虫卵进行攻击感染,ELISA检测各组的抗体水平,90 d后剖检计算各组的减虫率。结果表明,45W-4BX和TSOL18基因在大肠杆菌中分别以可溶性和包涵体形式获得高效表达,并能被囊虫病人血清所识别。重组蛋白免疫猪15 d血清抗体即为阳性,30 d左右达到峰值。2种重组抗原的减虫率均在88%以上,与囊虫粗抗原免疫效果相当。这为进一步研制基于45W-4BX和TSOL18的猪囊虫重组基因工程疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 TAENIA solium TSOL18 45W-4BX VACCINE protective EFFICACY
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山东省猪带绦虫病和囊尾蚴病流行病学调查 被引量:13
8
作者 刘新 赵中平 +10 位作者 万功群 傅斌 李桂萍 陈锡欣 缪峰 赵长磊 李顺平 李文 付兆义 高长兰 邓绪礼 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期25-28,共4页
目的 调查山东省猪带绦虫病和囊尾蚴病流行现状。 方法 采用现场访问、粪便检查及血清学检测等方法对猪带绦虫病和囊尾蚴病人群的感染流行状况、猪囊尾蚴感染情况及有关流行因素进行调查分析。 结果 全省人群猪带绦虫病和囊尾蚴病... 目的 调查山东省猪带绦虫病和囊尾蚴病流行现状。 方法 采用现场访问、粪便检查及血清学检测等方法对猪带绦虫病和囊尾蚴病人群的感染流行状况、猪囊尾蚴感染情况及有关流行因素进行调查分析。 结果 全省人群猪带绦虫病和囊尾蚴病平均患病率分别为 0 .0 4 8%和 0 .0 5 7% ,抗囊尾蚴特异性 Ig G4 抗体阳性率平均为 1.91%。各地区流行程度不同 ,性别及城乡人群患病率均无显著性差异。流行因素调查结果表明 ,居民普遍存在不卫生习惯 ,如 :切菜刀、板生熟不分 ,饭前便后不洗手等。“连茅圈”养猪占 92 .3% ,粪便管理及生活环境卫生均较差。囊尾蚴病猪检出率平均为 0 .0 6 % ,囊尾蚴抗体阳性率平均为 1.99%。 结论 山东省绦虫病和囊尾蚴病患病率呈下降趋势 ,但流行范围扩大 ,各地区流行程度不同 。 展开更多
关键词 流行病学 猪带绦虫 囊尾蚴病 调查 山东
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猪带绦虫TSOL18基因的表达、纯化和兔抗血清的制备 被引量:12
9
作者 周必英 周泠 +2 位作者 刘美辰 刘晖 张曦 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期977-980,985,共5页
目的构建猪带绦虫重组质粒pGEX-TSOL18,表达纯化TSOL18重组蛋白,制备兔抗重组蛋白血清。方法全基因合成猪带绦虫TSOL18抗原编码基因,定向克隆到pGEX-1λT表达载体,构建重组质粒pGEX-TSOL18;转化大肠埃希菌ArcticExpress(DE3),IPTG诱导表... 目的构建猪带绦虫重组质粒pGEX-TSOL18,表达纯化TSOL18重组蛋白,制备兔抗重组蛋白血清。方法全基因合成猪带绦虫TSOL18抗原编码基因,定向克隆到pGEX-1λT表达载体,构建重组质粒pGEX-TSOL18;转化大肠埃希菌ArcticExpress(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表达情况;亲和层析纯化获得重组蛋白,免疫兔制备抗血清;ELISA测定抗血清的效价,Western blot鉴定抗血清的特异性。结果全基因扩增出393bp的TSOL18抗原编码基因,酶切和测序鉴定证实TSOL18基因成功插入pGEX-1λT中;SDS-PAGE分析显示表达重组蛋白相对分子质量(Mr)约为41kDa,经亲和层析后可获得纯度为75%的重组蛋白;ELISA测定抗血清的效价为1∶256 000,Western blot证实该抗血清能与重组蛋白发生特异性反应。结论猪带绦虫TSOL18基因能在大肠埃希菌中高效表达,成功制备了高纯度的TSOL18重组蛋白和高滴度的兔抗重组蛋白血清,为猪带绦虫的疫苗研制奠定了基础。 展开更多
关键词 猪带绦虫 TSOL18 重组蛋白 抗血清 制备
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猪带绦虫六钩蚴45W基因家族分子克隆 被引量:10
10
作者 才学鹏 郑亚东 +3 位作者 贾万忠 骆学农 景志忠 陆承平 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期2117-2123,共7页
利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从激活的猪带绦虫六钩蚴克隆到45W基因家族。通过测序及DNAStar软件分析证实,共得到8个A型转录本、3个与A型转录本相应的B型转录本和4个其它B型转录本,以及1个C型转录本,提示45W相关基因可能更多。在... 利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从激活的猪带绦虫六钩蚴克隆到45W基因家族。通过测序及DNAStar软件分析证实,共得到8个A型转录本、3个与A型转录本相应的B型转录本和4个其它B型转录本,以及1个C型转录本,提示45W相关基因可能更多。在本研究中,发现45W-4B非常保守,有望以此为基础研制出有效的抗猪囊尾蚴病的疫苗。在大肠杆菌中以融合蛋白(GST)的形式对经改造的A型转录本(A3)和B型转录本(B2)进行表达,SDS-PAGE证明,A3呈可溶性表达;B2的表达产物主要形成了包涵体,用强变性剂(6M尿素)处理后再经SDS-PAGE,证明B2也得到了高效表达。Western分析结果表明,二者均与囊虫患者血清不反应或反应很弱;B2能与猪抗六钩蚴血清反应,说明B2可能具有免疫反应性,且其抗原表位可能是线性的。从预测的结果看,猪带绦虫45W蛋白可能是跨膜糖蛋白,跨膜区位于C末端,在它的结构中可能还存在FnⅢ组件。同时,A3和B2蛋白结构中还存在Cn-Em重复单元,以及由16~17个氨基酸构成的α-螺旋的结构单元。在45W蛋白的加工过程中,磷酸化修饰可能是一项重要内容。由此推测,45W蛋白的作用很复杂,可能在调节基因的表达和维持正常的细胞形态等过程中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 猪带绦虫 基因家族 六钩蚴 转录本 结构预测 分子克隆 反转录聚合酶链式反应 SDS-PAGE Western 跨膜糖蛋白
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猪带绦虫45W基因家族cDNA克隆和序列分析 被引量:7
11
作者 贾万忠 郑亚东 +4 位作者 王佩雅 陈涓 程晓红 景志忠 才学鹏 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期776-780,共5页
根据猪带绦虫45W基因序列设计引物,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)对六钩蚴总RNA进行cDNA扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分离、纯化、回收,与载体pGEMT-easyVector连接,转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆,测序。结果显示,已成功克隆到... 根据猪带绦虫45W基因序列设计引物,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)对六钩蚴总RNA进行cDNA扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分离、纯化、回收,与载体pGEMT-easyVector连接,转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆,测序。结果显示,已成功克隆到重要保护性抗原45W基因B型转录本cDNA,完整开放阅读框(ORF)的大小为459bp。序列同源性分析与比较表明,所获得的9个B型转录本cDNA除TSO45W-4B-1和TSO45W-4B-2与已报道的TSO45W-4B同源外,其余均属于首次报道的45W基因家族新成员。各cDNA克隆之间核苷酸序列的差异性为1.5%~19.8%,氨基酸序列之间的差异性为2.6%~29.7%,后者比前者的差异程度更大。 展开更多
关键词 带绦虫 45W基因家族 CDNA克隆 序列分析 囊尾蚴病
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猪带绦虫六钩蚴TSOL18基因疫苗表达载体的构建及其免疫原性研究 被引量:16
12
作者 郭爱疆 才学鹏 +3 位作者 房永祥 贾万忠 骆学农 刘红霞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期945-949,共5页
为研制新型猪囊尾蚴疫苗,将猪带绦虫六钩蚴阶段编码TSOL18的基因定向克隆于真核表达质粒pVAX1,经筛选、鉴定及DNA序列分析正确后,将重组质粒pVAX1/TSOL18转染BHK-21细胞,通过SDS-PAGE、Western blotting、免疫荧光试验等方法检测细胞中... 为研制新型猪囊尾蚴疫苗,将猪带绦虫六钩蚴阶段编码TSOL18的基因定向克隆于真核表达质粒pVAX1,经筛选、鉴定及DNA序列分析正确后,将重组质粒pVAX1/TSOL18转染BHK-21细胞,通过SDS-PAGE、Western blotting、免疫荧光试验等方法检测细胞中表达的TSOL18抗原。结果表明,重组真核质粒pVAX1/TSOL18可在BHK-21细胞中表达TSOL18目的蛋白,表达蛋白能被猪囊尾蚴病阳性血清所识别。动物免疫试验表明,真核表达载体能有效地诱导机体产生细胞免疫和体液免疫应答,这为猪囊尾蚴病基因疫苗的研究奠定了良好基础。 展开更多
关键词 猪带绦虫 TSOL18基因 基因疫苗表达载体 免疫原性
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猪带绦虫囊尾蚴的发育过程及形态观察 被引量:16
13
作者 刘永杰 李庆章 郝艳红 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期305-307,共3页
目的 观察猪带绦虫囊尾蚴的发育过程及其形态变化 ,以确定虫体的出现时间和成熟时间。 方法 仔猪感染猪带绦虫卵后不同时间剖杀 ,取各部位组织检查囊尾蚴的分布。剥离囊尾蚴作压片及组织切片 ,显微镜下观察其形态。 结果 猪囊尾蚴... 目的 观察猪带绦虫囊尾蚴的发育过程及其形态变化 ,以确定虫体的出现时间和成熟时间。 方法 仔猪感染猪带绦虫卵后不同时间剖杀 ,取各部位组织检查囊尾蚴的分布。剥离囊尾蚴作压片及组织切片 ,显微镜下观察其形态。 结果 猪囊尾蚴主要分布在肌肉组织 ,其次是脑、肝、肺、肾等器官。同一宿主不同部位甚至同一宿主同一部位囊尾蚴处于不同的发育阶段。感染后 19d仅在骨骼肌中发现幼期囊尾蚴 ,头节区未见吸盘和小钩。组织学检查显示了早期发育的头节。感染后 3 0d的囊尾蚴出现小钩及吸盘的雏形 ,随感染时间的延长 ,吸盘直径及小钩长度增加。感染后 60d ,囊尾蚴头节区出现较大的吸盘和许多折叠。 60d以后的囊尾蚴在形态学上与 60d的相似。在每一发育阶段均有退化变性的囊尾蚴出现。 结论 猪体感染猪带绦虫卵后 ,囊尾蚴 19d出现 ,60d成熟。 展开更多
关键词 猪带绦虫囊尾蚴 猪囊尾蚴 发育 形态
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猪带绦虫TSO45W-4B基因的克隆、表达和抗体制备 被引量:10
14
作者 周必英 周泠 +2 位作者 刘美辰 刘晖 张曦 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期372-375,共4页
目的克隆、表达猪带绦虫TSO45W-4B基因,以重组蛋白TSO45W-4B免疫兔制备抗体。方法全基因合成猪带绦虫TSO45W-4B抗原编码基因,定向克隆至pGEX-1λT表达载体,构建重组质粒pGEX-TSO45W-4B。转化至大肠埃希菌ArcticExpress(DE3)后,异丙基-β... 目的克隆、表达猪带绦虫TSO45W-4B基因,以重组蛋白TSO45W-4B免疫兔制备抗体。方法全基因合成猪带绦虫TSO45W-4B抗原编码基因,定向克隆至pGEX-1λT表达载体,构建重组质粒pGEX-TSO45W-4B。转化至大肠埃希菌ArcticExpress(DE3)后,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达情况。表达产物经谷胱甘肽-S-转移酶(GST)亲和层析柱纯化后,免疫新西兰大白兔,制备抗血清。GST亲和层析柱纯化获得血清中抗体后,ELISA测定抗体效价,蛋白质印迹法(Western blotting)鉴定抗体特异性。结果酶切和测序结果表明,重组质粒pGEX-TSO45W-4B构建成功。SDS-PAGE结果显示,重组蛋白相对分子质量(M r)约为40 000,经GST亲和层析后可获得纯度为90%以上的重组蛋白。ELISA结果显示,抗体的效价为1∶512 000。Western blotting分析结果显示,该抗体能与纯化的重组蛋白发生特异性反应,在约M r40 000处出现一条带,与预期大小一致。结论猪带绦虫TSO45W-4B基因能在大肠埃希菌中表达,制备了TSO45W-4B重组蛋白和兔抗血清。 展开更多
关键词 猪带绦虫 TSO45W-4B 表达 纯化 抗体
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猪带绦虫TSO45W-4BX与猪CD58分子在大肠埃希菌中的联合表达 被引量:7
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作者 骆学农 郑亚东 +3 位作者 窦永喜 侯俊琳 景志忠 才学鹏 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期285-289,共5页
目的以猪CD58为分子佐剂,将CD58基因与猪带绦虫疫苗候选抗原基因TSO45W-4BX联合表达,寻找新型抗猪囊尾蚴疫苗。方法分别以重组质粒pGEM-4B和pGEM-CD58为模板,PCR扩增猪带绦虫TSO45W-4BX基因和猪CD58基因,将TSO45W-4BX与酶切处理的pGEX-4... 目的以猪CD58为分子佐剂,将CD58基因与猪带绦虫疫苗候选抗原基因TSO45W-4BX联合表达,寻找新型抗猪囊尾蚴疫苗。方法分别以重组质粒pGEM-4B和pGEM-CD58为模板,PCR扩增猪带绦虫TSO45W-4BX基因和猪CD58基因,将TSO45W-4BX与酶切处理的pGEX-4T-1定向连接,转化大肠埃希菌JM109,重组质粒经鉴定正确后,在其下游酶切插入CD58基因,PCR扩增和测序证明阅读框正确后,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE))和蛋白质印迹法(Westernblotting)分析表达产物的免疫活性。结果pGEX-4BX和pGEX-4BX/CD58分别表达Mr41000和Mr69000的融合蛋白,pGEX-4BX表达产物主要以可溶性形式存在,而pGEX-4BX/CD58却以包涵体形式存在,但两者都能被囊尾蚴病患者血清识别。结论TSO45W-4BX与CD58基因联合表达,TSO45W-4BX仍具有免疫活性。 展开更多
关键词 猪带绦虫 TS045W-4BX CD58 联合表达
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感染猪囊尾蚴的家猪组织中不同时间IL-6、IL-8、TNF-α和sIL-2R含量变化 被引量:8
16
作者 方文 包怀恩 +1 位作者 肖靓靓 牟荣 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期556-559,共4页
目的研究实验家猪感染猪囊尾蚴不同时间组织中细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α和sIL-2R含量变化,从细胞因子角度探讨家猪抗猪带绦虫免疫应答的机制。方法用猪带绦虫虫卵直接灌胃20d龄健康乳猪4头,并以健康乳猪4头作对照。于感染后第40、60... 目的研究实验家猪感染猪囊尾蚴不同时间组织中细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α和sIL-2R含量变化,从细胞因子角度探讨家猪抗猪带绦虫免疫应答的机制。方法用猪带绦虫虫卵直接灌胃20d龄健康乳猪4头,并以健康乳猪4头作对照。于感染后第40、60、80和120 d取实验组猪肝脏、骨骼肌、心肌、舌肌及脑组织中囊尾蚴寄生处组织200 mg匀浆,用ELISA法测定匀浆上清液中细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α和sIL-2R的含量。结果1.肝脏病变组织中4种细胞因子的含量在40d时均明显高于同期对照组(P<0.01);随感染时间延长,4种细胞因子的含量逐渐降低,至80d时与同期对照组差别缩小(P<0.05),120d时肝脏已无囊尾蚴寄生;对照组肝脏组织中4种细胞因子的含量在不同时间始终保持基本稳定。2.肌肉和脑部份病变组织中4种细胞因子的含量在40d时也明显高于同期对照组(P<0.01);随感染时间延长至80d时与同期对照组差别变小(P<0.05),120d时与同期对照组差别无显著性(P>0.05)。3.对照组家猪肝脏中4种细胞因子的含量绝对值高于肌肉和脑组织(P<0.01);实验组肝组织在40d时各种细胞因子的增量更明显高于肌肉和脑组织中的增量(P<0.01)。结论家猪感染猪带绦虫早期,IL-6、IL-8和TNF-α作为前炎性反应因子在家猪肝脏的高水平表达诱导肝脏发生严重的炎症反应,限制和杀灭肝内的早期囊尾蚴,而肌肉和脑组织中这些细胞因子表达稍低,炎症反应相对较轻,因而囊尾蚴易于在这些部位存活。这一点可以从感染后期肌肉、脑组织中的囊尾蚴数量远多于肝脏而得到证实。 展开更多
关键词 猪带绦虫 猪囊尾蚴 IL-6、IL-8、TNF-α SIL-2R
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猪带绦虫乳酸脱氢酶基因的序列分析、克隆表达和免疫学分析 被引量:10
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作者 杜武英 黄江 +4 位作者 胡旭初 余新柄 徐劲 廖兴江 戴佳琳 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期246-251,共6页
目的利用生物信息学方法从猪带绦虫成虫cDNA文库中识别乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDH-A),分析和预测其编码蛋白的结构和功能,并对其进行克隆表达和免疫学特性研究。方法利用NCBI和ExPASy中有关基因、蛋白的序列和结构信息分... 目的利用生物信息学方法从猪带绦虫成虫cDNA文库中识别乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDH-A),分析和预测其编码蛋白的结构和功能,并对其进行克隆表达和免疫学特性研究。方法利用NCBI和ExPASy中有关基因、蛋白的序列和结构信息分析工具,结合其它生物信息学分析软件包,从猪带绦虫成虫全长cDNA质粒文库中识别乳酸脱氢酶A(TsLDH-A)的基因及其编码区,分析、预测该基因编码的蛋白的结构与功能;并将TsLDH-A克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠杆菌BL-21/DE3中诱导表达,表达产物经纯化后用蛋白印迹(Western Blotting)进行免疫学分析。结果该基因全长1 332bp,编码331个氨基酸。其氨基酸序列与其它物种LDH-A氨基酸序列一致性可达54%,具有乳酸脱氢酶保守结构域。其编码的蛋白理论分子量为3 5461.1Da,有3个跨膜区和多个磷酸化位点,蛋白的理化性质较稳定。预测有4个主要的B细胞抗原表位,L-乳酸脱氢酶活化位点之一的His192包含于表位190-199aa中。酶催化位点的3个关键氨基酸在空间结构上相互靠近。PCR、双酶切及DNA测序结果均表明重组质粒pET-28a(+)-TsLDH-A构建成功。SDS-PAGE结果表明目的基因在大肠杆菌BL-21/DE3中获得表达,经亲和层析获得了高纯度蛋白。重组蛋白能被TsLDH-A重组蛋白免疫的SD大鼠血清、感染了猪带绦虫的病人血清及猪血清识别,表明其具有较好的免疫原性和免疫反应性。结论应用生物信息方法从猪带绦虫成虫cDNA文库中筛选出了TsLDH-A的全长序列并预测得到其编码蛋白的结构与功能方面的信息,该基因可在原核表达系统中获得具有免疫学活性的表达。 展开更多
关键词 猪带绦虫 乳酸脱氢酶A 序列分析 克隆表达 免疫学特性
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猪囊尾蚴疫苗候选基因TSO18在酵母中的高效表达 被引量:9
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作者 袁改玲 才学鹏 +5 位作者 景志忠 郑亚东 骆学农 贾万忠 李辉 丁军涛 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期563-567,共5页
将猪带绦虫六钩蚴TSO18基因亚克隆至毕赤酵母分泌性表达载体pPIC9K,构建重组表达载体pPIC9K_TSO18,电转化毕赤酵母菌GS115,使重组表达载体与酵母染色体发生同源整合。采用G418抗性梯度法筛选得到多拷贝重组菌株,用甲醇进行诱导表达,并... 将猪带绦虫六钩蚴TSO18基因亚克隆至毕赤酵母分泌性表达载体pPIC9K,构建重组表达载体pPIC9K_TSO18,电转化毕赤酵母菌GS115,使重组表达载体与酵母染色体发生同源整合。采用G418抗性梯度法筛选得到多拷贝重组菌株,用甲醇进行诱导表达,并对表达产物进行SDS_PAGE和Westernblot分析、脱糖基化分析、分子筛纯化和小鼠免疫接种等表明,目的蛋白得到了高效表达并进行了适度的糖基化,易于纯化且具有免疫活性。在5L发酵罐中目的蛋白表达量达到2·54mg/mL,为制备基因工程疫苗打下了坚实的基础。 展开更多
关键词 猪囊尾蚴 TSO18基因 毕赤酵母 高效表达
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猪带绦虫双歧杆菌表达系统pGEX-TSOL18/B.longum的构建及鉴定 被引量:7
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作者 周必英 刘美辰 贺莉芳 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期239-241,共3页
通过全基因合成猪带绦虫TSOL18基因,将该基因定向克隆至大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT中,构建重组质粒pGEX-TSOL18,电穿孔法将该质粒导入长双歧杆菌(Bifidobacterium longum),构建猪带绦虫双歧杆菌表达系统pGEX-TSOL18/B.lo... 通过全基因合成猪带绦虫TSOL18基因,将该基因定向克隆至大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT中,构建重组质粒pGEX-TSOL18,电穿孔法将该质粒导入长双歧杆菌(Bifidobacterium longum),构建猪带绦虫双歧杆菌表达系统pGEX-TSOL18/B.longum,并通过酶切、PCR和测序鉴定。全基因合成了393 bp的TSOL18基因片段。酶切、PCR和测序鉴定结果证明猪带绦虫双歧杆菌表达系统pGEX-TSOL18/B.longum构建成功。 展开更多
关键词 猪带绦虫 双歧杆菌 TSOL18 重组菌
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猪带绦虫45W-4B基因在家蚕细胞中的表达 被引量:5
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作者 余招锋 才学鹏 +3 位作者 张志芳 于三科 陈寅 林旭瑷 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期527-530,共4页
猪带绦虫45W基因已被认为是预防猪囊虫病的基因工程疫苗候选基因之一。其中4B基因是45W基因家族中高度保守的一个成员(以下称45W-4B)。本试验将重组于pGEM-3Z载体上的4B基因转载到pVL1393转移载体中,通过鉴定获得重组质粒pVL1393-4B,然... 猪带绦虫45W基因已被认为是预防猪囊虫病的基因工程疫苗候选基因之一。其中4B基因是45W基因家族中高度保守的一个成员(以下称45W-4B)。本试验将重组于pGEM-3Z载体上的4B基因转载到pVL1393转移载体中,通过鉴定获得重组质粒pVL1393-4B,然后将重组质粒与BmNPV病毒共转染,筛选出重组BmNPV-4B重组病毒,用该重组病毒感染Bm细胞,收集细胞上清,SDS-PAGE电泳鉴定表达蛋白,并经Westernblot检测表明该蛋白能识别囊虫病人(猪)阳性血清,45W-4B蛋白的成功表达对进一步研究45W蛋白的结构和功能以及开发高效猪囊虫基因工程疫苗打下了基础。 展开更多
关键词 猪囊虫 45W-4B基因 家蚕 表达
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