基于荧光素的高选择性Hg^(2+)荧光探针的合成及其光谱性质研究

以荧光素、水合肼及费舍尔氏醛制备了一种新颖的Hg^(2+)荧光探针,其分子结构通过核磁及质谱进行了表征。该探针在金属离子中能够特异性识别Hg^(2+),可应用于对Hg^(2+)的检测。在生命科学及环境科学领域对于Hg^(2+)的准确、快速的实时监测备受关注,本研究在此方面具有潜在的应用价值。

苯并噻唑酰腙类荧光探针合成及对锌离子检测

以苯并噻唑-2-甲酰肼与4-二乙胺基水杨醛为原料,设计并合成一种新型苯并噻唑酰腙类荧光探针L,并通过核磁、红外及质谱等手段表征。在DMSO溶液中,探针L可迅速与Zn^(2+)以1:1比例络合成L-Zn^(2+),实现对锌离子的即时荧光增强响应,且这一过程不受常见阳离子与阴离子的干扰。荧光滴定实验中计算出探针L对锌离子的检测极限低至15.8 nM,具有良好的检测灵敏度。探针L可实现土壤中锌离子的便捷、高效检测,加标回收率为95.72~103.20%,相对标准偏差为1.79~5.92%。

三芳胺类荧光探针合成及对化妆品中Hg^(2+)的检测

基于汞离子促进硫代缩醛脱保护作用,设计合成了一种三芳胺类荧光探针N-(1,1′-联苯-4-基)-N-(4-(双(乙基硫代)-甲基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-胺(简称L),并采用核磁共振、红外光谱及高分辨质谱对其结构表征。荧光发射光谱表明,在乙腈(ACN)/4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)(V∶V=9∶1,HEPES 10mmol·L^(-1),pH=7.4)缓冲溶液中,探针可实现对Hg^(2+)的“turn-off”检测,检测过程具有响应时间短、离子选择性好、抗共存金属离子干扰性强等优点。在0~20μmol·L^(-1)范围内,Hg^(2+)浓度与荧光强度呈现良好线性关系,探针对Hg^(2+)检测极限低至1.57×10^(-8)mol·L^(-1),可实现Hg^(2+)的痕量检测。将探针L应用于化妆品中Hg^(2+)检测,加标回收率96.3%~101.7%,相对标准偏差0.52%~2.76%,准确度较高,具有良好的应用前景。

新型Cu^(2+)比色探针RCAIM的制备与性能研究

以罗丹明B酰肼为荧光团,利用三聚氯氰和异佛尔酮为原料修饰荧光团,设计制备出了一种功能性有机小分子比色探针(RCAIM),该探针在乙醇与水溶液(v/v=95∶5)中能够特异性地识别Cu^(2+),与Cu^(2+)结合形成配合物之后,溶液颜色从黄色变成红色。实验结果显示,将Cu^(2+)加入探针溶液后,探针RCAIM与Cu^(2+)以1∶2的方式形成配合物,配合物在吸收峰波长为555 nm处呈现出特异性较高的吸收,同时研究也证实探针RCAIM对Cu^(2+)检测具有良好的专一选择性以及抗干扰能力;探针RCAIM对Cu^(2+)的检出限为0.9×10^(-6)mol/L,表明其具有高灵敏性。同时该探针也能应用于湖水和自来水水样中Cu^(2+)的检测,检测结果灵敏度高,准确性强。并将该探针制备成便携试纸条,结果表明其能裸眼快速识别检测Cu^(2+)。

钡A-偶氮氯膦Ⅲ络合物探针分光光度法测定蛋白质

在pH 1.0～ 1.5的酸性介质中 ,蛋白质与Ba 偶氮氯膦Ⅲ络合物发生作用 ,导致络合物溶液褪色 ,其最大吸收波长处吸光度的降低值与蛋白质的浓度成正比。基于此建立了以Ba 偶氮氯膦Ⅲ络合物为光谱探针 ,分光光度测定蛋白质含量的新方法。该法灵敏度高 ,选择性好。蛋白质 (以牛血清白蛋白为例 )的浓度在 0～ 4 0mg/L范围内服从比尔定律 ,表观摩尔吸光系数ε656=6 .4 7× 10 5L·mol-1·cm-1。生物体内常见物质均不产生干扰 ,直接应用于人血清样品中蛋白质总量的测定 。

钼(Ⅵ)-水杨基荧光酮配合物探针定量测定尿蛋白

本文研究了金属－占吨类染料配合物与蛋白质结合物的吸收光谱行为。提出了以钼（Ⅵ）－水杨基荧光酮配合物作为光谱探针测定微量蛋白质的新方法。测得配合物与蛋白质的最大结合数ｎ＝１００，结合物的摩尔吸光系数ε５７５＝２．８６×１０６Ｌｍｏｌ－１ｃｍ－１。方法具有很高的灵敏度和选择性，可以直接用于尿蛋白的测定。

Tb^（3＋）配合物的电子振动光谱研究

采用时间分辨荧光光谱系统测量了几种稀土ＴＰ３＋配合物的７Ｆ６－５Ｄ４电子跃迁的激发光谱，同时测量了与该跃迁及配合物中配位基团相关的电子振动光谱。结合电子振动跃迁的理论分析，研究了这些电子振动光谱的强度和位置的特征，及其与Ｔｂ３＋周围配位情况的关系，表明电子振动光谱有可能用作稀土在其配合物或在生物分子中结合位置的微结构光谱探针。

偶氮羧Ⅰ-铽(Ⅲ)配合物与蛋白质相互作用的吸光光谱行为的研究及应用

研究了偶氮羧Ⅰ-铽(Ⅲ) 与蛋白质的相互作用及其应用.在pH 1.20的HCl-KCl缓冲溶液中,蛋白质的加入使得偶氮羧Ⅰ-铽 (Ⅲ) 在510 nm 处的吸收峰峰值明显降低,且吸光度的变化与加入的蛋白质的浓度呈线性关系,于510 nm处测得摩尔吸光系数为ε=7.75×105L/(mol·cm)-1,牛血清白蛋白在0～55 mg/L范围内符合朗伯-比尔定律.将此方法用于尿样和奶粉中蛋白质的测定,结果令人满意.

二溴羟基卟啉与核酸相互作用的光谱行为研究

研究了meso-4（3，5-二溴-4-羟基苯基）卟啉（T（DBHP）P）与小牛胸腺DNA（ct DNA）相互作用的光谱行为，探讨了以T（DBHP）P作为光谱探针测定核酸的最佳条件及作用机理。在pH4．92 HAc-NaAc缓冲液中，T（DBHP）P在最大吸收波长425nm处的吸收峰强度显著下降，且下降程度与ct DNA含量呈线性关系，ct DNA含量在0．20～1．80μg·mL^-1范围内符合比尔定律，检出限为0．024μg·mL^-1。实验中发现Tween-80微乳液的加入能显著增加体系的灵敏度。同时，用摩尔比法测定了DNA与卟啉的结合数为21，并初步探讨了反应机理。

免疫纳米金共振散射光谱探针检测痕量免疫球蛋白A

将纳米金的共振散射效应和纳米金标记免疫反应结合起来建立了一种测定免疫球蛋白A的新方法.采用柠檬酸三钠改良法制备了粒径约为10nm的纳米金,用于标记羊抗人免疫球蛋白A获得了免疫球蛋白A(IgA)的免疫共振散射光谱探针.在pH5.6的Na2HPO4-C6H8O7缓冲溶液和PEG6000存在下,金标羊抗人免疫球蛋白A与IgA产生特异性结合,引起金纳米粒子聚集,导致金纳米粒子580nm处的共振散射峰增强.对免疫分析的条件进行了优化,IgA浓度在0.0054～1.35μg·mL-1范围内与580nm处的共振散射强度呈线性关系,方法的检测限(3σ)为2.0ng·mL-1,相关系数为0.9983.用于定量分析人血清中的免疫球蛋白A,结果满意.

Meso-四(3,5-二溴-4-羟基苯基)卟啉褪色光度法测定蛋白质的研究与应用

采用吸光光度法研究了meso-四（3，5-二溴-4-羟基苯基）卟啉[T（DBHP）P]作为新型光谱探针与蛋白质相互作用的光谱行为。发现在pH4．17Britton-Robinson缓冲液中，吐温-80（Tween-80）微乳液介质可以显著增强了体系的灵敏度。在最佳实验条件下，考察了T（DBHP）P-蛋白质体系的吸收光谱特性，于425nm处蛋白质的浓度在一定范围内与吸光度A呈良好的线性关系。分别用于测定牛血清白蛋白（BSA）和卵血清白蛋白（Ova），线性范围分别为0．50～6．00μg·mL^-1和0．05-0．60μg·mL^-1，检出限分别为0．11和0．039μg·mL^-1。实验结果表明，该方法具有较高的灵敏度、选择性和稳定性，成功地用于牛奶样品中蛋白质的测定，回收率为99．56％～100．2％，相对标准偏差低于2．2％。从而建立了一种测定蛋白质的灵敏方法并用于食品分析领域中。另外考察了离子强度及温度对体系的影响。

蛋白质三元复合物空间定向作用机理的研究——BSA/SDS/天青A反应体系

应用光谱探针技术研究了牛血清白蛋白(BSA)/十二烷基硫酸钠(SDS)/天青A(AA)相互作用的吸收光谱,考察了SDS/BSA摩尔比对BSA/SDS/AA反应体系吸收光谱的影响。研究结果表明,BSASDSAA三元复合物产生新的光谱吸收峰以及变色反应,主要是由于结合态AA分子空间定向作用形成的聚集体聚集程度不同所造成的。

牛血清白蛋白与光谱探针相互作用机理的研究

在酸性条件下研究了考马斯亮蓝光谱探针与牛血清白蛋白结合物的光学性质,探讨了考马斯亮蓝染料和蛋白质的相互作用机理。研究结果表明染料考马斯亮蓝的疏水作用和亲水作用的协调作用以及与生物大分子蛋白质具有相反电荷的静电作用,是光谱探针与生物大分子形成大分子聚集体的必要因素。

罗丹明B光谱探针测定面粉中过氧化苯甲酰

研究在磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲溶液中(pH6.84),以罗丹明B为光谱探针,分光光度法测定面粉中过氧化苯甲酰(BPO)的方法。结果表明,室温下,罗丹明B-BPO体系在550nm波长处有最大吸收,表观摩尔吸光系数(ε)为1.1×104L/mol·cm。BPO含量在0.00～0.80mg/ml范围内符合朗伯比尔定律。检出限为0.056mg/kg,加标回收率为97.5%～101.0%,RSD为1.46%～2.53%。该法简便易行,适用于基层单位测定面粉中微量BPO。

一种检测痕量IgG的免疫纳米银共振散射光谱探针

以柠檬酸三钠作还原剂,采用微波高压合成法制备了粒径约为20 nm的银纳米微粒。在pH9.0条件下,用银纳米微粒标记羊抗人IgG制备了IgG的免疫纳米银探针(AgGIgG)。在pH为6.0的磷酸盐缓冲溶液及聚乙二醇(PEG)-6000和KCl存在下,IgG与AgGIgG发生免疫反应,裸露的银纳米颗粒在KCl和PEG-6000的作用下发生了聚集,导致体系在485 nm处的共振散射峰增强。考察了pH值、AgGIgG、PEG和KCl浓度,温育温度和时间及共存物质的影响。在最佳条件下,IgG浓度cIgG在4.0～480 ng.mL-1范围内与485 nm处的共振散射光强度增加值ΔI485 nm呈线性关系,回归方程为ΔI485 nm=76.8cIgG+4.7,方法检出限为2.4 ng.mL-1IgG。该法用于定量分析血清IgG,简便快速,本法结果与免疫比浊法结果一致。

蛋白质的偶氮胂Ⅲ-钡(Ⅱ)配合物光谱探针测定

研究了偶氮胂Ⅲ-Ba（Ⅱ）配合物与牛血清白蛋白（BSA）三体系复合物的吸收光谱，建立了一种新的蛋白质定量分析方法。研究发现，在表面活性剂阿拉伯树胶（gumarobic）存在下的酸性溶液中，偶氮胂Ⅲ-Ba（Ⅱ）配合物与BSA发生反应形成三元复合物，引起吸收光谱发生红移，吸收峰明显增高。摩尔吸光系数为ε611=1．01×10^6 L·mol^-1·cm^-1，BSA的质量浓度在0—67mg／L范围内服从比尔定律。用摩尔比法研究了此配合物与BSA的最大结合数为51。该法灵敏度高，选择性好，用于实际血清样品总蛋白的测定，与双缩脲法相关性良好。

甲基橙为光谱探针研究聚电解质与表面活性剂相互作用

The interactions of sulfonated polystyrene (SPS) and cetyl trimethylammonium bromide (CTAB) have been investigated with methyl orange (MO) as spectral probe. The increasing of the solution viscosity is related closely with the presence of hydrophobic domain, which forms through the interaction between the polymer chains and CTAB molecules. The viscosity of the solution reaches two maximums at the molar ratio of CTAB:SPS [-SO 3Na unit]=～0.5 and ～1.5, which are consistent well with two hydrophobic domains appearing in solution at the same ratios. In the case of higher concentration of SPS(>0.04?mol/L), at a specific ratio of CTAB/SPS, the solution will convert to a gel due to crosslinking formed from the aggregation of CTAB molecules in micelles with SPS polymer chains.

胶束形成前十二烷基硫酸钠与天青A变色机理的研究

应用光谱探针技术研究了胶束形成前十二烷基硫酸钠(SDS)与天青A(AA)相互作用的吸收光谱,比较了SDS和硫酸软骨素(CS)与AA相互作用的光谱曲线,考察了乙醇和NaCl对SDS-AA复合物吸收光谱的影响,对胶束形成前SDS与AA变色反应的机理进行了研究。研究结果表明,SDS-AA反应体系呈现蓝色→紫红色→蓝色的颜色变化,主要是由于SDS有序集合体中结合态AA分子定向聚集,形成聚集体的程度不同所造成的。依据cSDS和ΔA498/ΔcSDS的关系,确定了SDS水溶液的临界预胶束浓度(critical premicelle concentration,CPC),其数值为1.0×10-4mol·L-1。

铌-铬天青S与牛血清白蛋白结合反应及其应用

探讨了铌-铬天青S配合物与牛血清白蛋白（BSA）结合反应体系。在pH 4.6的邻苯二甲酸氢钾-NaOH（Clark-Lubs）缓冲溶液中,在OP存在下,铌-铬天青S配合物与牛血清白蛋白进一步形成复合物,其最大吸收峰位于595 nm,且随着BSA量的增加,体系在595 nm波长处吸收峰也随着增大。据此建立以铌-铬天青S配合物为光谱探针,分光光度法测定蛋白质含量的新方法。牛血清白蛋白含量在0-0.32 mg/mL的范围内符合比尔定律,摩尔吸光系数5ε95为4.4×10^5L.mol^-1.cm^-1,相关系数为γ=0.9996,生物体内的常见物质基本上不干扰测定,方法可用于人血清蛋白中蛋白质的测定。

碳纳米管与PVA协同加强光谱探针并应用于灵敏测定肝素钠

提出将碳纳水箭（CNTs）作为一种新型分析增效试剂用于加强光谱探针，研究了其与水溶性大分子增效试剂聚乙烯醇（PVA）的协同增敏机理，并应用于乙基紫（EV）光度法测定肝素钠（Heparin．Hep）的体系中。在此缔合物显色体系中，含芳香环大分子的EV通过π-π作用于CNTs的管肇上，增大了行色物质的吸光面积；PVA的加入提高了CNTs及离子缔合物的分散性。结果表明，在CNTs与PVA复配的影响下，EV与Hep在pH为6．5的Britton—Robinson（B—R）缓冲溶液中形成稳定的紫红色缔合物后在610nm处发生明显的褪色，△Amax提高了330．7％。肝素钠浓度在0～2．5mg／L范围内与△A成正比．回归方程为△A=-0．006＋0．360C（mg／L），表观摩尔吸光系数ε=4．29×10^6L·mol-1·cm，R=0．9991。在最佳实验条件下，对肝素钠注射液效价进行了测定。