Human chorionic gonadotropin in vitro: Effects on rat sperm motility and fertilization outcome

Objective:To investigate the effect of human chorionic gonadotropin (hCG) on the motility of rat sperm and the fertilization rate following in vitro fertilization. Methods: hCG concentrations of 25, 50, 75 and 100 ng/mL with incubation time of 1 h and 2 h were used in medium to study sperm motility. Then, 25 and 100 ng/mL of hCG with incubation time of 2 h were applied for in vitrofertilization. After 6 h, the number of two pronuclei was counted. Obtained data was subjected to one way ANOVA and Bonferroni-Dun hoc-post test.Results:Total motility and progressive motility of sperms were increased significantly (P<0.05) in hCG experimental group with concentration of 25 ng/L and incubation time of 2 h compared to control group, however, total motility and progressive motility of sperms were decreased significantly (P<0.05) with increasing dose of hCG. Fertilization rate was decreased significantly (P<0.05) in hCG experimental group with dose of 100 ng/mL compared to 25 ng/mL and control group. Conclusions:The effect of hCG on the rat sperm motility and the rate of their fertility is dose-dependent so that hCG with dose of 25 ng/mL leads to an increase in rat sperm motility and to some extent fertilization rate.

鸡精液甘油简易冷冻保存技术改进与优化效果评价

[目的]改进与优化鸡精液甘油细管简易冷冻保存技术。[方法]采用单因素设计试验,使用6%的冻存(3、6、9个月)与现配甘油保护液制作细管冷冻精液,比较冷冻精液冻后精子活力、活率及畸形率。采用液氮面上熏蒸法优化一步冷冻法冷冻速率,并用优化后一步冷冻法与前期研发的两步冷冻法制作细管冷冻精液,检测两种冷冻方案冻后与离心去甘油后的精子活力、活率、畸形率及种蛋受精率、孵化率。采用一步冷冻法冷冻不同品种公鸡精液,并采用不同输精轮次应用于不同年龄母鸡,通过输精试验评价输精效果。[结果]①添加冻存3、6、9个月的甘油保护液与现配甘油保护液冻后精子活力、活率、畸形率均无显著差异(P>0.05)。②经优化和重复率比较后一步冷冻法最佳冷冻速率为细管精液距离液氮面3 cm冷冻3 min,样品精子活力≥60%的重复率为100%,精子活力≥65%的重复率为65%。③一步冷冻法精子活力、精子活率分别为62.84%和76.00%,均极显著高于两步冷冻法(58.17%和68.62%)(P<0.01),两种冷冻方案的精子畸形率无显著差异(P>0.05)。一步法、两步法冷冻精液离心去甘油前、后平均精子活力、种蛋平均受精率和平均孵化率均无显著差异(P>0.05),单日最高受精率分别为68.34%和80.00%。④采用一步冷冻法制备的黑凤鸡与湘东鸡冻精输精后的种蛋受精率和孵化率均无显著差异(P>0.05)。给30周龄母鸡输精后种蛋受精率极显著高于68周龄母鸡(P<0.01)。3轮4次输精模式种蛋受精率极显著高于1轮2次输精模式(P<0.01)。[结论]将甘油保护液制备成储备液在―20℃冻存,采用一步冷冻法并预先进行冷冻速率优化,输精时注意精液冷藏时长、母鸡年龄、输精轮次,能得到稳定较好的输精效果。

小豆蔻明对精液中的巨噬细胞及抗精子抗体影响的研究

目的研究精液中的巨噬细胞及抗精子抗体阳性对精子质量的影响,探索小豆蔻明能否通过作用于精液中的巨噬细胞及抗精子抗体而发挥保护精子的作用。方法用Percoll梯度离心法得优质精子,将其与不同浓度的巨噬细胞共培养,筛选出对精子有损伤的巨噬细胞浓度范围;再将含有该损伤浓度范围的巨噬细胞、抗精抗体阳性的精子悬液,分别单独及两者均有与一定量的小豆蔻明共培养,观察结果。结果加有巨噬细胞且浓度达0.6×106/ml及以上的精子悬液组(高浓度组)精子的存活时间明显比空白组(精子悬液组)短;含有高浓度巨噬细胞的抗精子抗体阳性精子悬液组与空白组比较,精子的存活时间显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。小豆蔻明对巨噬细胞、抗精子抗体及两者结合对精子的损伤有保护作用,可提升精子存活率(P<0.01)、减少精子DNA碎片率及畸形率(P<0.05)。结论一定浓度巨噬细胞、抗精子抗体及两者共存可以明显降低精子存活数目;初步研究表明,小豆蔻明可逆转巨噬细胞及抗精子抗体对精子的损伤作用。

湖南省不同品种公猪精液品质及运动性能的研究

[目的]研究不同品种公猪精液质量的差异,提高公猪饲养管理水平。[方法]收集2021年4月—2022年11月,湖南省32个生猪良补县51批次247头成年公猪(长白猪73头、大白猪75头、杜洛克猪99头)的精液质量数据,通过方差分析探讨不同品种公猪精液的活力、畸形率和精子运动参数等差异。[结果]不同品种公猪精液的活力和畸形率没有显著差异;长白猪精子的缓慢比例显著高于杜洛克猪和大白猪,长白猪精子的转圈比例显著低于杜洛克猪和大白猪,其他运动轨迹参数差异不显著。[结论]长白猪精子的迁移速率低于杜洛克猪和大白猪,长白猪前向运动精子数的比例高于杜洛克猪和大白猪。

牛冷冻精液精子形态活力变化研究与分析

为探讨牛常规冷冻精液解冻后不同时间内精子的形态结构及活力的变化规律,利用河南某种公牛站同一牛号、同一生产批次的300剂常规冷冻精液进行解冻,检测其解冻后不同时间内精子活力、畸形率、顶体完整率及前进运动精子数。结果表明:刚解冻时、解冻后1h精子顶体完整率下降,但差异不显著(P>0.05),解冻后3h、6h、9h的精子顶体完整率显著低于刚解冻时和解冻后1h(P<0.05)。精子畸形率在精液解冻后随着时间延长而逐渐升高,刚解冻时与解冻后1h差异不显著(P>0.05),但显著低于解冻后3h、6h(P<0.05),且解冻后3h的精子畸形率显著低于解冻后6h的畸形率(P<0.05)。精子活力在精液解冻后随着时间延长而逐渐降低,刚解冻时的精子活力最高,与解冻后1h、3h、6h、9h差异显著(P<0.05),解冻后1h精子活力显著高于6h(P<0.05),解冻后9h精子活力低于任何一个阶段的活力,且差异显著(P<0.05)。可见,人工授精时,刚解冻精液与解冻1h内精液的顶体完整率较好、精子畸形率较低,此时输精效果为佳。

不同品种绵羊的细管冻精解冻质量检测分析

选取8个不同品种羊(引进品种2个,本地品种4个,培育品种2个)的细管冻精,进行外观、剂量、精子活力、前向运动精子数和精子顶体完整率指标的检测分析。结果显示,各细管冻精外观均完好,符合生产标准;剂量检测值为(0.21±0.01) mL,均符合国家标准(≥0.18 mL);精子活力为(37.50%±1.70%)~(51.0%±3.70%),其中,陶赛特羊精子活力值最高,黑裘皮藏羊精子活力值最低;前进运动精子数为≥3×10^(7)个,符合国标;精子顶体完整率为(71.90%±1.13%)~(81.23%±1.0%),其中,西藏(草地型)羊精子顶体完整率最高,陶赛特羊精子顶体完整率最低。8个品种的羊冻精在解冻复苏后各项指标均达到配种生产要求。引进品种的精子活力比本地品种高,前进运动精子数和顶体完整率等其他指标有高有低。

不同稀释保护液对羊精子在4℃低温保存条件下品质影响的探索研究

本研究旨在评估不同稀释保护液(含蛋黄、大豆卵磷脂、甘油等成分)在4℃条件下保存6 d对种公羊精子参数的影响,从而为种公羊鲜精低温延时保存技术提供科学依据,并提高优质种公羊的利用率。实验通过混合精液样本以消除个体差异,并将混合后的精液均分为三份,分别添加至三种不同的稀释保护液(Tris基础液+大豆卵磷脂、Tris基础液+蛋黄、牛奶+果糖)中进行等温稀释,使最终精子浓度达到40×10^(6)个/mL。随后,将稀释后的精子分装至0.25 mL麦管中,并使用聚乙烯醇进行密封,储存于4℃恒温冰箱中。在储存后的0、72、120和144 h,采用计算机辅助精子分析系统(CASA)测定精子活力参数,并利用伊红染色技术评估精子顶体完整性和异常率。实验结果显示,在初始状态下,各组精子活力相近且未检出异常率;然而,随着储存时间的延长,精子活力逐渐降低,异常率逐渐上升。特别是在储存144 h后,牛奶+果糖组的精子活力最低,异常率最高;相比之下,Tris基础液+大豆卵磷脂组在短期内对精子活力的保持效果更佳,且精子异常率相对较低。因此,本研究表明,在4℃低温保存种公羊精子时,选择合适的稀释保护液对于维持精子活力和降低异常率至关重要,其中Tris基础液+大豆卵磷脂稀释保护液表现出较好的应用潜力。

定时输精技术对奶绵羊批次受胎率影响的研究

[目的]探究定时输精技术在奶绵羊批次化生产中的应用效果。[方法]选定甘肃地区奶绵羊规模养殖场的经产母羊先进行疾病检测,合格后开展定时输精试验。2022年7—12月,根据羊场存栏实际情况以及生产安排,开展了5个批次、210只羊的同期发情+查情输精模式试验和26个批次、1290只羊的定时输精模式试验,统计各个批次的受胎率。[结果]5个批次的同期发情+查情输精模式的平均参配率为90%,平均参配受胎率为82%,而平均批次受胎率仅有74%;而26个批次的定时输精模式的批次受胎率为84%,羊群利用率提升了10%。[结论]定时输精模式免查情,可降低工作强度,提升批次受胎率;同时有效提高母羊利用率和配种工作效率,降低羊场生产成本。批次受胎率比参配受胎率更能衡量配种工作的真实效率。

Effects of Clindamycin on Sperm Function in Mice

[ Objective] To study the effects of clindamycin on germ cells of male mice. [Method] A total of 48 healthy adult male mice were randomly divided into group A, group B, group C and control group, 12 mice in each group. The mice in the group A, group B and group C were respectively administrated with clindamycin at doses of 15, 30 and 60 mg/kg.d via intraperitoneai injection, and those in the control group were trea- ted with normal saline. On Day 29 after administration, the mice were killed by dislocation, and the sperm motility rate, sperm deformity rate and the percentage of sperm having swollen tail membrane were determined, respectively. [ Result] The sperm motility rate and the percentage of sperm having swollen tail membrane of the group B and group C were lower than those of the control group; and the sperm deformity rate of the group B and group C was higher than that of the control group. The sperm motility rate, sperm deformity rate and percentage of sperm having swollen tail membrane had no significant difference between the group A and control group. [ Conclusion] The clindamycin at a dose equal to or more than that used for severe infection affects the normal function of sperm in mice.

乾华肉用美利奴羊精液稀释保存的研究与应用效果评价

为了研究常温和低温环境下不同稀释液对乾华肉用美利奴羊精液保存效果的影响,试验采集6只乾华肉用美利奴羊种公羊精液,取合格精液混匀后均分为7份,其中4份利用A液(萄萄糖-柠檬酸钠)、B液(萄萄糖-乳糖-柠檬酸钠)、C液(萄萄糖-蔗糖-柠檬酸钠)、D液(萄萄糖-果糖-柠檬酸钠-EDTA)稀释后进行常温(15~18℃)保存,3份利用E液(萄萄糖-柠檬酸钠-卵黄)、F液(果糖-柠檬酸钠-卵黄)和G液(生理盐水-卵黄)稀释后进行低温(2~4℃)保存,均保存24 h后测定精子体外存活时间和存活指数,选择最适常温和低温保存稀释液;然后将720只同期发情的乾华肉用美利奴羊种母羊随机分为6组,每组120只,利用上述筛选的常温和低温最适稀释液保存的0 h(精液稀释后立即输精)及6,12 h乾华肉用美利奴羊精液进行人工授精,测定母羊繁殖性能指标(第一情期妊娠母羊数、总妊娠母羊数、产羔数、第一情期受胎率、总受胎率、产羔率),筛选最适乾华肉用美利奴羊精液的保存方式。结果表明:常温条件下,C液保存的精子体外存活时间和存活指数均显著优于A液、B液、D液(P<0.05);低温条件下,F液保存的精子体外存活时间和存活指数显著高于E液、G液(P<0.05);利用C液进行常温保存的精液的平均第一情期受胎率、总受胎率和产羔数均显著高于利用F液进行低温保存的精液(P<0.05)。说明最适乾华肉用美利奴羊精液保存条件为利用C液在常温下保存。

淫羊藿苷对猪精液低温保存效果的影响

为了研究不同浓度淫羊藿苷对猪精液在低温(4℃)环境下的保存效果,试验采集4头长白猪种公猪精液,将检测合格的精液混匀后分为对照组及5,10,15,20,25 mg/L淫羊藿苷组共6组,分别添加0,5,10,15,20,25 mg/L的淫羊藿苷,均在低温环境下保存,分别在保存第1,2,3,4,5,6,7天检测猪精子活率、精子活力、路径速度、直线速度和精子畸形率指标,筛选最适猪精液低温保存的淫羊藿苷浓度。结果表明:添加淫羊藿苷的各试验组均能够在保存期间提高猪精子质量,且15 mg/L淫羊藿苷组的精子活率、精子活力、路径速度、直线速度在保存期间均显著高于或高于其他组(P<0.05或P>0.05),精子畸形率均显著低于或低于其他组(P<0.05或P>0.05)。说明在本试验条件下,用于猪精液低温保存的稀释液中淫羊藿苷的最适添加量为15 mg/L。

不同浓度大豆卵磷脂替代蛋黄对东佛里生奶绵羊精液冷冻保存效果的影响

本试验皆在研究添加不同浓度大豆卵磷脂(SL)冷冻保存东佛里生奶绵羊精液的效果。我们在Tris基础稀释液中,添加18%蛋黄为对照组,添加0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%SL设为试验组,检测冷冻精液解冻后的精子活率和顶体完整率。结果显示,添加0.5%、2.5%SL冷冻稀释液稀释的精液,解冻后精子活率和顶体完整率与其他组之间存在显著差异(P<0.05);添加18%蛋黄和1%~2%SL冷冻稀释液稀释的精液,冷冻解冻后精子活率和顶体完整率之间无显著差异(P>0.05);添加18%蛋黄和1.0%~1.5%SL冷冻稀释液稀释后的精液,进行人工授精后母羊的妊娠率与对照组无显著差异(P>0.05)。因此,大豆卵磷脂可以作为冷冻保护剂用于东佛里生奶绵羊精液的冷冻保存,其最佳添加浓度为1~2%(g/L)。

健脾益肾法论治不育症

中医对于男性不育症的认识最早见于《黄帝内经》,后世医家也有许多关于此病的论述,如“失精、强中、无子”等。脾为后天之本,肾为先天之本,二者与男性不育症关系密切,临床上治疗男性不育也多从脾肾入手,健脾益肾法为辨证论治男性不育症最常用治法之一,疗效显著。此文就相关研究进行综述,旨在为临床上治疗此病开拓新思路。

定时输精技术在关中奶山羊繁殖上的应用

[目的]探究定时输精技术在关中奶山羊繁殖方面的应用效果。[方法]选定陕西地区奶山羊规模养殖场的经产母羊先进行疾病检测,合格后开展定时输精试验。2020年7—9月,根据羊场存栏实际情况以及生产安排,将407只1胎羊分为4个批次开展试验,2021年7—9月,对同一批羊(2胎羊)以及新加入的1胎羊按照胎次分为4个批次开展试验,统计各个批次的受孕率。[结果]2020年,奶山羊应用定时输精技术平均受孕率为79.1%,剔除第一批羊的影响(部分可能存在生理缺陷),平均受孕率为83.4%;2021年,奶山羊应用定时输精技术平均受孕率为84.6%,且2胎羊的受孕率略高于1胎羊。[结论]在繁殖季节,奶山羊应用定时输精技术可获得理想的受孕率;提高优质种公羊的利用率,有利于良种群体的扩繁;可避免生殖器官疾病和寄生虫病的传播。

增精1号胶囊对少精子症患者精子动态及形态的影响

目的探讨增精1号胶囊对少精子症患者精子动态及形态的影响。方法将72例患者按随机数字表法分为治疗组(30例)和对照组(31例),分别给予增精1号胶囊和五子衍宗丸口服,于服药前及服药3个月后,取精液以改良巴氏染色法将精子染色后采用WLJY-9000伟力彩色精子质检计算机辅助精液分析系统(CASA)检测精子密度、活力及形态变化。结果增精1号胶囊治疗组精子密度、活力均较治疗前明显提高(P<0·01),精子畸形率降低(P<0·01),且优于五子衍宗丸对照组(P<0·01)。结论增精1号胶囊可改善少精子症患者的精子密度、活力,降低精子畸形率。

活动精子总数、精子形态与宫腔内人工授精妊娠率的关系

目的探讨在宫腔内人工授精(IUI)过程中,处理后A、B级精子总数、精子正常形态率与IUI临床妊娠率的关系。方法回顾该院2009年1月1日～8月31日330周期IUI的资料,比较了处理后A、B级精子总数、精子正常形态率对IUI临床妊娠率的影响。结果①治疗周期中排卵前后两次授精A、B级精子总数均≥(10×106)和均<(10×106)相比,其临床妊娠率分别为21.6%和9.0%,差异有显著性(P<0.05);若排卵前授精≥(10×106),排卵后<(10×106),其临床妊娠率为15.1%,与上述两组相比亦差异有显著性(P<0.05);②精子正常形态率<6%与精子正常形态率6%～10%、≥10%相比,其临床妊娠率差异有显著性(P<0.05)。结论①用于宫腔内人工授精的精液需要有10×106以上的A、B级精子总数,且排卵前授精和排卵后授精有相似的重要性;②用于宫腔内人工授精的精液精子正常形态率≥6%可获得较高的临床妊娠率。

真鲷精子的超低温冻存及DNA损伤的检测

因名贵经济鱼类育种或种质资源保存的需要,精子超低温冻存及冻精质量评价的研究已越来越引起研究者的重视。在海产鱼类中,已见对大黄鱼（Pseudosciaena crocea）、

黑鲷精子的超低温冻存及DNA损伤的SCGE检测

以0.5mL的麦细管为冻存管和DMSO为抗冻剂进行超低温冷冻黑鲷精子,对冻精核DNA的损伤情况进行单细胞凝胶电泳(SCGE)检测,其结果表明,以Cortland溶液为稀释液,5%、10%、15%及20%DMSO为抗冻剂的超低温冻存的黑鲷精子活力、受精率与鲜精无显著差异。其中以10%DMSO为抗冻剂的冻存效果最佳,冻精的激活率、运动时间、寿命及受精率分别达(92.91±1.25)%、(39.90±2.70)min、(53.82±2.84)min及(89.35±1.99)%;而以25%及30%DMSO为抗冻剂时,冻精活力及受精率显著下降。SCGE检测结果显示,DMSO浓度为5%、10%、15%及20%时,黑鲷冻精与鲜精的彗星率及损伤系数差异不显著;DMSO浓度为25%及30%时,冻精与鲜精的彗星率及损伤系数差异显著;冻精的彗星率与抗冻剂DMSO浓度成正相关。黑鲷鲜精及冻精核的DNA损伤主要为轻度和中度损伤,重度损伤比例较低,完全损伤仅存在于25%及30%DMSO为抗冻剂的冻精中,且比例低。分析认为,较高浓度的DMSO是引起冻精核DNA损伤的主要原因。

人工养殖西伯利亚鲟精子超低温冷冻保存研究

研究了人工养殖西伯利亚鲟精子的生物学特征及超低温冷冻保存方法。西伯利亚鲟的产精量为113.67±39.86 ml,精子密度为(6.49±3.10)×108/ml,精子活力为(85.4±9.5)%,精子寿命为353±23 s。精子密度与精子快速运动时间、精子寿命之间均存在线性相关,用方程分别表示为:y=1.0384x+1.5089(R2=0.7325);y=2.9069x+74.289(R2=0.6967)。结果表明精子密度可作为一项精子质量评价的标准。通过比较西伯利亚鲟精子在不同稀释液、不同抗冻剂和抗冻剂浓度、降温速率、解冻温度下的保存效果,结果表明:配方2作为稀释液,18%甲醇作为抗冻剂,二步法超低温(-196℃)冷冻保存精子,40℃水浴解冻取得最好的冻后活力,解冻后活力为(51.8±5.8)%。西伯利亚鲟授精的最佳精卵比为106∶1。在此精卵比下用冻精授精分别得到了(72.3±3)%的受精率和(52.9±4.1)%的孵化率,其中受精率与鲜精没有显著性差异,孵化率与鲜精有显著差异(P<0.05)。

几种不同浓度的离子及单糖对中华鲟精子活力的影响

本文研究在不同浓度Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Cu2+及葡萄糖、果糖溶液中,中华鲟(Acipenser sinensisGray)精子活动情况。结果表明:Na+浓度为2‰时,中华鲟精子寿命时间(Life time,LT)最长,为347s,而Na+浓度为1‰时,中华鲟精子剧烈运动时间(Acute movement time,AT)最长,为98.67s,精子激活率在Na+浓度小于等于2‰时,为100%,随着Na+浓度的增加中华鲟精子激活率明显下降;与Na+溶液不同,在K+浓度为0.005‰时中华鲟精子活力最佳,其AT和LT最长,分别为80s和174s。而精子激活率随K+浓度增加而增强,在浓度为0.005‰时激活率最强为60%,然后快速下降;在Ca2+、Mg2+、Cu2+三种溶液中,随着三种溶液浓度的增加,中华鲟精子剧烈运动时间和寿命逐渐缩短,精子激活率逐步下降;与Ca2+、Mg2+、Cu2+三种溶液完全不同的是,随着葡萄糖和果糖两种单糖浓度的增加,中华鲟精子AT及精子LT逐渐延长。结果说明适量浓度的Na+、K+可以延长中华鲟精子AT及其LT,激活精子活力;而Ca2+、Mg2+、Cu2+三种溶液即使在较低浓度下都表现出对中华鲟精子AT、精子LT及其激活率明显的抑制作用;而葡萄糖和果糖则能有效地延长中华鲟精子AT和LT。