不同品种灵芝子实体及孢子粉元素成分分析及重金属安全性评价

针对我国鲁西地区主栽灵芝品种,利用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定不同品种灵芝子实体、孢子粉及破壁孢子粉中元素及重金属含量,开展元素成分分析及重金属安全性评价。元素成分分析结果表明,藏芝和香血芝子实体中大部分元素含量明显高于赤芝、美芝和新大片子实体中元素含量,特别是Fe、Cu、Zn、Mn、Se、B、V、Co、Sr 9种人体必需微量元素,其中藏芝子实体中Fe元素含量达到234 mg/kg、Zn元素含量达到57.9 mg/kg、Se含量达到0.309 mg/kg,香血芝子实体样品Sr元素含量最高,达到3.60 mg/kg。赤芝粉和赤芝椴木粉元素营养质量高于美芝粉和新大片孢子粉元素营养质量,赤芝粉和赤芝椴木粉中硒含量分别是美芝粉中硒含量的3倍和2倍。重金属安全性分析结果表明5种灵芝子实体与4种孢子粉样品Pb、Hg 2种重金属含量远低于相关标准,安全性较高,藏芝及香血芝子实体、新大片孢子粉样品As元素含量较高,具有一定的安全性风险。破壁技术会造成孢子粉中As、Pb、Cd、Cr、Cu、Ni金属元素含量不同程度的提高,孢子粉破壁过程中重金属存在一定的安全风险。

灵芝破壁孢子粉的抗肿瘤活性研究

目的研究灵芝破壁孢子粉对乳腺癌和口腔癌生长的抑制作用。方法采用灵芝破壁孢子粉乙醇提取物处理乳腺癌MCF-7细胞、口腔癌KB细胞和宫颈癌HeLa细胞,检测三种细胞的增殖情况。构建裸鼠乳腺癌MCF-7移植瘤和口腔癌KB移植瘤模型,评价灵芝破壁孢子粉进行灌胃治疗后的肿瘤生长抑制情况。结果灵芝破壁孢子粉乙醇提取物显著抑制MCF-7、KB和HeLa细胞的增殖,且该抑制效应呈剂量依赖性。在MCF-7移植瘤模型中,低、中、高3组灵芝破壁孢子粉给药剂量均有显著的肿瘤生长抑制作用,肿瘤抑制率分别为50.35%、65.72%和80.55%;但在KB移植瘤模型中,低剂量组没有显示显著的肿瘤生长抑制作用,而中剂量组和高剂量组表现出明显的抗肿瘤作用,3组肿瘤抑制率分别为4.03%、37.63%和40.59%。结论灵芝破壁孢子粉能够抑制MCF-7乳腺癌和KB口腔癌荷瘤裸鼠肿瘤的生长。

去壁灵芝孢子粉水溶成分抑制头颈鳞癌细胞增殖及转移

目的探讨去壁灵芝孢子粉水溶成分(A-GSP)在头颈鳞癌细胞中的生物学作用。方法利用MTS法检测A-GSP在头颈鳞癌细胞系SCC15和SCC25中的细胞活力。采用平板克隆、划痕愈合实验和穿室实验探究A-GSP对头颈鳞癌细胞增殖、转移能力的影响。通过流式分析试剂盒检测A-GSP对头颈鳞癌细胞凋亡能力和细胞周期分布的影响。免疫蛋白印迹法检测A-GSP处理后上皮间质转化(EMT)分子和细胞周期蛋白的表达变化。结果A-GSP作用后,头颈鳞癌细胞的增殖能力减弱(F=62.72,P<0.0001),转移能力下降(F=95.7,P<0.0001),细胞凋亡能力增加(F=87.65,P<0.0001),G2/M期停滞(F=15.31,P<0.01)。此外,A-GSP处理导致上皮细胞标志物E-cadherin上调,间质细胞标志物Vimentin、N-cadherin、Snail、Slug下调,细胞周期激酶CDK1下调,P21和P27上调,但是,并未引起凋亡通路蛋白Caspase和Bax水平改变。结论A-GSP通过诱导细胞周期G2/M期停滞和抑制EMT从而抑制头颈鳞癌细胞的增殖转移。

灵芝孢子化学成分及相关药理作用研究进展

灵芝孢子是灵芝生长成熟期从菌盖弹射出来的极其细小的孢子,含有多种活性物质,如多糖、核苷、三萜类、生物碱、脂肪酸等,具有抗肿瘤、调节免疫、保肝、降血糖、降血脂等药理作用,对肿瘤、肝硬化、高血脂、糖尿病等疾病具有一定治疗作用。该药物目前尚未被《中华人民共和国药典》收录,基于此,此文使用PubMed、CNKI、万方数据库检索灵芝孢子近10年相关研究性文献,从化学成分-药理作用2个方面对灵芝孢子目前的研究进行系统分析阐释,为该药物的进一步研究开发提供实验依据。

不同破壁方法对灵芝孢子粗多糖抗氧化活性的影响

采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基清除法、羟自由基清除法、2,2’-联氮基双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐自由基（2,2’-azinobis(3-ehtylbenzothiazolin-6-sulfnicacid)diammonium salt，ABTS＋·）清除法和铁氰化钾法以及酵母细胞氧化损伤保护模型，分别对未破壁灵芝孢子（unbroken Ganoderma lucidum spore，UGS）、机械法破壁灵芝孢子（mechanically broken Ganoderma lucidum spore，MGS）、生物法与机械法复合破壁的灵芝孢子（biologically and mechanically broken Ganoderma lucidum spore，BGS）提取粗多糖进行体外抗氧化活性评价。结果表明，3种处理方法的灵芝孢子粗多糖表现出不同的抗氧化活性，且抗氧化活性与多糖质量浓度呈一定效量关系，多糖质量浓度越高，抗氧化活性越强。BGS所得粗多糖对DPPH自由基、羟自由基、ABTS＋.的清除能力以及还原力在3种处理方法中均为最强。多糖质量浓度为5.0mg/mL时，对3种自由基的清除率分别为84.6%、91.0%、99.9%，还原力为1.09；BGS所得粗多糖对紫外损伤酵母细胞保护能力也相对较强。表明BGS粗多糖具有较高的抗氧化活性。

破壁灵芝孢子粉破壁率测定的研究

通过筛选,得到7%的硫酸锌溶液与无水乙醇以10:1(体积比)的混合溶液能使灵芝孢子更好的悬浮。利用该悬浮体系,辅以超声60 min和涡旋处理30 s,通过血球计数板对不同质量的孢子粉进行计数,建立未破壁灵芝孢子粉质量和孢子数之间的标准曲线,对同批未知破壁率的破壁孢子粉的破壁率进行检测,并人为混合7个标准破壁率的破壁孢子粉对该方法的准确度和精密度进行试验。结果表明:在该悬浮体系下,灵芝孢子粉在0.01～0.05 g/25 mL与孢子数线性关系良好。

超高压超临界流体撞击流方法制备破壁灵芝孢子粉的工艺研究

介绍了超高压超临界撞击流技术制备破壁灵芝孢子粉的方法及基本原理,对制备工艺进行了研究。加载压力、系统加热温度、保压时间及撞击靶距是影响灵芝孢子粉破壁率的因素,通过正交试验及对加热温度和撞击靶距所做的后续试验,确定了采用自行研制开发的试验系统进行灵芝孢子粉破壁的最佳工艺条件是加载压力300MPa,系统加热温度250°C,保压时间1h,撞击靶距10mm。在此工艺条件下,灵芝孢子粉的破壁率为88.48%。

瓦韦孢子壁的结构和发育的研究

利用光镜、扫描电镜和透射电镜对水龙骨科(Polypod iaceae)瓦韦(Lepisorus thunbergianus(Kaulf.)Ching)孢子壁的结构和发育进行了研究。研究结果表明瓦韦孢子两侧对称、单裂缝,表面具波纹状纹饰。孢壁从内到外由内壁、外壁和周壁三部分构成。外壁来源于绒毡层物质,由外壁内层和外壁外层构成,外壁外层表面的波纹状纹饰形成孢子表面的纹饰轮廓。周壁薄,紧贴外壁表面,由2层片状结构叠合而成。在外壁外层形成过程中,孢子表面和周围出现较多小球。本文探讨了孢壁各层的结构、来源和发育过程,为蕨类植物系统学和孢粉学研究积累资料。

不同破壁技术对灵芝孢子油提取的影响

通过比较酸热法、超声波冻融法和高能纳米冲击磨法对灵芝孢子粉破壁效果,找到适合工业化生产的孢子油提取的最佳破壁技术。结果显示:采用高能纳米冲击磨法可显著提高灵芝孢子的破壁率和孢子油得率,在球料比3∶1(质量比),球磨时间6 h的条件下,破壁率为90.36%,灵芝孢子油得率为30.79%。

破壁处理对灵芝孢子粉质量的影响

对机械法破壁前后灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉中粗脂肪、粗多糖、三萜、微量元素铬以及氧化程度(酸值、过氧化值和羰基值)的变化进行了比较。结果表明,破壁处理有利于灵芝孢子粉中三萜、粗多糖、粗脂肪等成分的溶出,增加了人体对上述物质吸收和利用的可能性,但破壁后微量元素铬的含量及代表油脂酸败程度的过氧化值和羰基值亦明显升高。

灵芝粉抗肿瘤及提高机体免疫力作用的研究

目的研究破壁灵芝孢子粉和灵芝精粉对小鼠移植性肿瘤和机体免疫功能方面的作用。方法分别以500、1000、1500mg/kg的破壁灵芝孢子粉和灵芝精粉,给小鼠经口连续灌胃20天后分别接种S-180、EAC瘤液(1×106个/ml)0.2ml。10天后,取肿瘤并进行NK细胞活性、单核-巨噬细胞功能测定。结果2种灵芝粉均能抑制肿瘤的生长,在同等剂量时,破壁型灵芝孢子粉的作用明显优于灵芝精粉,并能增强NK细胞活性,提高单核巨噬细胞的吞噬能力。结论破壁型灵芝孢子粉在抑制肿瘤作用和增强机体的免疫功能方面优于灵芝精粉。

灵芝孢子粉破壁技术、质量分析与深加工相关研究进展

破壁灵芝孢子粉为一种灵芝深加工产品,具有多种药理学活性,更易被人体吸收。灵芝孢子的破壁方法包括生物化学法、物理法和机械法等,工业生产多综合利用多种方法。破壁灵芝孢子粉的质量分析还没有统一的国家标准,灵芝孢子粉质量可以参考地方标准进行综合评价,还可以参考近期发表的一些分析方法。灵芝孢子粉提取物产品以孢子油为主,其它产品也有研发并推出市场。药理学研究表明,灵芝孢子油、灵芝孢子粉水提物和醇提物均具有抗癌活性,有良好的应用前景。

海金沙孢子壁结构和发育的研究

利用光镜、扫描电镜和透射电镜对海金沙科(Lygodiaceae)海金沙[Lygodium japonicum(Thunb.)Sw.]孢壁的形成和发育进行了研究。结果表明:海金沙孢子壁由内壁、外壁和周壁3部分构成。外壁由2层构成,即薄的内层和厚的外层,其中外层是在四分体分离前通过孢粉素的逐层沉积并浓缩凝聚而形成的均质层,其表面具不明显的疣状突起。周壁由绒毡层残余物在外壁表面逐层沉积形成,可分为周壁内层、周壁中层和周壁外层3部分;周壁中层具辐射状排列的长条形成分,周壁外层形成瘤状纹饰的轮廓。本研究为孢粉学和蕨类植物系统演化分析提供基础资料。

凤丫蕨孢子壁的结构和发育研究

利用光镜、扫描电镜和透射电镜对裸子蕨科(Hemionitidaceae)凤丫蕨(Coniogramme japonica(Thunb.) Diels)孢壁的结构和发育进行了研究。结果表明,凤丫蕨孢子外壁表面光滑,由2层构成,即薄的内层和厚的外层。周壁分为周壁内层和周壁外层两部分,周壁内层中上部具辐射状排列的小柱状成分,周壁外层由鳞片和小球体疏松交织成平面或立体网状,由两层周壁共同构成孢子表面皱状纹饰的轮廓。探讨了凤丫蕨孢子周壁的来源,为孢粉学和蕨类植物系统演化研究提供基础资料。

灵芝孢子粉生物酶破壁技术的研究

选择专一性较强的溶壁酶Ⅲ,结合超声波处理南韩赤芝、台芝和中华黑芝孢子粉孢子壁,破壁率可达98%以上。应用冷冻干燥技术,可使溶壁酶破壁灵芝孢子粉的有效成分(多糖)的保护率在99%左右。

乌蕨孢子壁的形成和发育

利用光镜、扫描电镜和透射电镜对鳞始蕨科(Lindsaeaceae)乌蕨(StenolomachusanumChing)孢壁的形成和发育进行了研究。结果表明乌蕨孢子两侧对称、单裂缝,表面具疣状纹饰。孢壁由内壁、外壁和周壁三部分构成。外壁在四分体阶段已基本形成,其表面光滑,质地均匀,由孢粉素形成。周壁是由绒毡层残余物在外壁表面沉积形成,可分为周壁内层、周壁中层和周壁外层三部分。在周壁中层与外层之间有一层均匀的空间。最后,本文探讨了孢壁的形成和发育规律,研究结果对揭示孢子纹饰和孢壁各层的形成过程、来源和稳定性有重要的意义,并为孢粉学和系统学研究提供基础资料。

水蕨孢子壁的形成和发育

利用光镜、扫描电镜和透射电镜对水蕨科(Parkeriaceae)水蕨(Ceratopteris thalictroides(L.)Brongn.)孢子壁的形成和发育进行了研究。结果表明,水蕨孢子呈辐射对称,三裂缝,表面具肋条状纹饰。孢子壁由内壁、外壁和周壁三部分构成。在四分体阶段外壁已基本形成,其外壁显著,表面光滑,质地均匀,由孢粉素形成,外壁厚约3-5μm,脊高约5-7μm。周壁由绒毡层残余物在外壁表面沉积形成,较薄,厚度只有0.1μm,表面具有杆状突起。研究结果对揭示孢子纹饰和孢子壁各层的形成过程、来源和稳定性有一定的意义,并为蕨类植物孢粉学和系统学研究提供基础资料。

灵芝孢子对肿瘤细胞生长的抑制效果研究

应用3种肿瘤细胞模型对未破壁灵芝孢子、机械破壁灵芝孢子和全灵芝剥壁孢子进行抗肿瘤试验研究。结果表明,未破壁及不同破壁方式的灵芝孢子对人恶性乳腺癌细胞(MT-1)、人恶性淋巴癌细胞株(Jurkat)、人恶性脑肿瘤细胞(U343)均有不同程度的抑制作用,抑制效果强弱为全灵芝剥壁孢子>机械破壁灵芝孢子>未破壁灵芝孢子,表明破壁的确能提高灵芝孢子对肿瘤细胞的抑制作用,而且选择破壁的方法也很重要,生物酶法破壁能使灵芝孢子的生物活性成分得到充分释放,所以大大提高灵芝孢子的功效。

赤芝孢子粉破壁前后多糖释放能力比较研究

目的 :探讨一种较准确测定中草药中水溶性多糖的分析方法。方法 :改良苯酚 硫酸法测定多糖释放能力。结果 :37℃、沸水浴及水煮条件下 ,破壁比未破壁孢子的多糖释放能力分别强 118.4% ,87.5 %和 6 9.6 % ;多糖含量的测定RSD <1.3 %。结论

超高压超临界撞击流技术制备破壁灵芝孢子粉

介绍了一种制备破壁灵芝孢子粉的新方法。此方法在现有撞击流技术的基础上,引入超临界流体作为撞击流技术应用的工作流体,对现有撞击流技术作了改进,使得该项技术可以应用于超高压领域。由此,提出了超高压超临界撞击流技术的概念。将此技术应用于灵芝孢子粉的破壁研究,并研制开发了一套新的实验系统,此系统具有操作简便,效率高,产品纯度高等特点。初步研究结果表明,灵芝孢子有效破壁率达75%。