灵芝破壁孢子粉的抗肿瘤活性研究

目的研究灵芝破壁孢子粉对乳腺癌和口腔癌生长的抑制作用。方法采用灵芝破壁孢子粉乙醇提取物处理乳腺癌MCF-7细胞、口腔癌KB细胞和宫颈癌HeLa细胞,检测三种细胞的增殖情况。构建裸鼠乳腺癌MCF-7移植瘤和口腔癌KB移植瘤模型,评价灵芝破壁孢子粉进行灌胃治疗后的肿瘤生长抑制情况。结果灵芝破壁孢子粉乙醇提取物显著抑制MCF-7、KB和HeLa细胞的增殖,且该抑制效应呈剂量依赖性。在MCF-7移植瘤模型中,低、中、高3组灵芝破壁孢子粉给药剂量均有显著的肿瘤生长抑制作用,肿瘤抑制率分别为50.35%、65.72%和80.55%;但在KB移植瘤模型中,低剂量组没有显示显著的肿瘤生长抑制作用,而中剂量组和高剂量组表现出明显的抗肿瘤作用,3组肿瘤抑制率分别为4.03%、37.63%和40.59%。结论灵芝破壁孢子粉能够抑制MCF-7乳腺癌和KB口腔癌荷瘤裸鼠肿瘤的生长。

灵芝孢子化学成分及相关药理作用研究进展

灵芝孢子是灵芝生长成熟期从菌盖弹射出来的极其细小的孢子,含有多种活性物质,如多糖、核苷、三萜类、生物碱、脂肪酸等,具有抗肿瘤、调节免疫、保肝、降血糖、降血脂等药理作用,对肿瘤、肝硬化、高血脂、糖尿病等疾病具有一定治疗作用。该药物目前尚未被《中华人民共和国药典》收录,基于此,此文使用PubMed、CNKI、万方数据库检索灵芝孢子近10年相关研究性文献,从化学成分-药理作用2个方面对灵芝孢子目前的研究进行系统分析阐释,为该药物的进一步研究开发提供实验依据。

超高压超临界流体撞击流方法制备破壁灵芝孢子粉的工艺研究

介绍了超高压超临界撞击流技术制备破壁灵芝孢子粉的方法及基本原理,对制备工艺进行了研究。加载压力、系统加热温度、保压时间及撞击靶距是影响灵芝孢子粉破壁率的因素,通过正交试验及对加热温度和撞击靶距所做的后续试验,确定了采用自行研制开发的试验系统进行灵芝孢子粉破壁的最佳工艺条件是加载压力300MPa,系统加热温度250°C,保压时间1h,撞击靶距10mm。在此工艺条件下,灵芝孢子粉的破壁率为88.48%。

破壁灵芝孢子粉破壁率测定的研究

通过筛选,得到7%的硫酸锌溶液与无水乙醇以10:1(体积比)的混合溶液能使灵芝孢子更好的悬浮。利用该悬浮体系,辅以超声60 min和涡旋处理30 s,通过血球计数板对不同质量的孢子粉进行计数,建立未破壁灵芝孢子粉质量和孢子数之间的标准曲线,对同批未知破壁率的破壁孢子粉的破壁率进行检测,并人为混合7个标准破壁率的破壁孢子粉对该方法的准确度和精密度进行试验。结果表明:在该悬浮体系下,灵芝孢子粉在0.01～0.05 g/25 mL与孢子数线性关系良好。

灵芝粉抗肿瘤及提高机体免疫力作用的研究

目的研究破壁灵芝孢子粉和灵芝精粉对小鼠移植性肿瘤和机体免疫功能方面的作用。方法分别以500、1000、1500mg/kg的破壁灵芝孢子粉和灵芝精粉,给小鼠经口连续灌胃20天后分别接种S-180、EAC瘤液(1×106个/ml)0.2ml。10天后,取肿瘤并进行NK细胞活性、单核-巨噬细胞功能测定。结果2种灵芝粉均能抑制肿瘤的生长,在同等剂量时,破壁型灵芝孢子粉的作用明显优于灵芝精粉,并能增强NK细胞活性,提高单核巨噬细胞的吞噬能力。结论破壁型灵芝孢子粉在抑制肿瘤作用和增强机体的免疫功能方面优于灵芝精粉。

灵芝孢子粉破壁技术、质量分析与深加工相关研究进展

破壁灵芝孢子粉为一种灵芝深加工产品,具有多种药理学活性,更易被人体吸收。灵芝孢子的破壁方法包括生物化学法、物理法和机械法等,工业生产多综合利用多种方法。破壁灵芝孢子粉的质量分析还没有统一的国家标准,灵芝孢子粉质量可以参考地方标准进行综合评价,还可以参考近期发表的一些分析方法。灵芝孢子粉提取物产品以孢子油为主,其它产品也有研发并推出市场。药理学研究表明,灵芝孢子油、灵芝孢子粉水提物和醇提物均具有抗癌活性,有良好的应用前景。

灵芝孢子粉生物酶破壁技术的研究

选择专一性较强的溶壁酶Ⅲ,结合超声波处理南韩赤芝、台芝和中华黑芝孢子粉孢子壁,破壁率可达98%以上。应用冷冻干燥技术,可使溶壁酶破壁灵芝孢子粉的有效成分(多糖)的保护率在99%左右。

赤芝孢子粉破壁前后多糖释放能力比较研究

目的 :探讨一种较准确测定中草药中水溶性多糖的分析方法。方法 :改良苯酚 硫酸法测定多糖释放能力。结果 :37℃、沸水浴及水煮条件下 ,破壁比未破壁孢子的多糖释放能力分别强 118.4% ,87.5 %和 6 9.6 % ;多糖含量的测定RSD <1.3 %。结论

超高压超临界撞击流技术制备破壁灵芝孢子粉

介绍了一种制备破壁灵芝孢子粉的新方法。此方法在现有撞击流技术的基础上,引入超临界流体作为撞击流技术应用的工作流体,对现有撞击流技术作了改进,使得该项技术可以应用于超高压领域。由此,提出了超高压超临界撞击流技术的概念。将此技术应用于灵芝孢子粉的破壁研究,并研制开发了一套新的实验系统,此系统具有操作简便,效率高,产品纯度高等特点。初步研究结果表明,灵芝孢子有效破壁率达75%。

灵芝孢子对肿瘤细胞生长的抑制效果研究

应用3种肿瘤细胞模型对未破壁灵芝孢子、机械破壁灵芝孢子和全灵芝剥壁孢子进行抗肿瘤试验研究。结果表明,未破壁及不同破壁方式的灵芝孢子对人恶性乳腺癌细胞(MT-1)、人恶性淋巴癌细胞株(Jurkat)、人恶性脑肿瘤细胞(U343)均有不同程度的抑制作用,抑制效果强弱为全灵芝剥壁孢子>机械破壁灵芝孢子>未破壁灵芝孢子,表明破壁的确能提高灵芝孢子对肿瘤细胞的抑制作用,而且选择破壁的方法也很重要,生物酶法破壁能使灵芝孢子的生物活性成分得到充分释放,所以大大提高灵芝孢子的功效。

超高压超临界撞击流方法制备破壁灵芝孢子粉的机理分析

从灵芝孢子粉破壁的过程出发,结合灵芝孢子粉的结构,分析了采用超高压超临界撞击流方法制备破壁灵芝孢子粉的机理。分析结果表明:高速射流引起的撞击是造成灵芝孢子破壁的最主要原因。

原木灵芝破壁孢子粉对小鼠免疫功能的影响

通过设3个浓度的原木灵芝破壁孢子粉药物组和阴性对照组,分别进行ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验,绵羊红细胞诱导小鼠DTH试验,小鼠血清溶血素测定,抗体生成细胞检测,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验,小鼠碳廓清试验,NK细胞活性测定试验和脏器指数测定。结果表明,与阴性对照组比较,低、中、高3个剂量原木灵芝破壁孢子粉均能提高小鼠脾淋巴细胞的增殖能力,差异均有显著性;高剂量组能提高小鼠左后足跖部24h与0h厚度差,差异有显著性;中剂量、高剂量组均能提高小鼠溶血空斑数,差异有显著性。说明原木灵芝破壁孢子粉具有较强的免疫调节作用。

破壁马尾松花粉中脂肪酸的成分分析

以石油醚为溶剂,采用索氏抽提法提取破壁马尾松花粉中的粗脂肪,进行甲酯化处理,并用GC-MS技术对脂肪酸甲酯进行分离鉴定,共鉴定出11种脂肪酸;测定其相对含量,不饱和脂肪酸相对含量高达73.14%,其中亚油酸相对含量最高,达36.53%。

全破壁灵芝孢子治疗男性更年期综合征

目的 :探讨全破壁灵芝孢子治疗法对男性更年期综合征的疗效。方法 :通过对 138例诊断为男性更年期综合征病人分组 ,其中 80例作全破壁灵芝孢子胶囊治疗并对其临床症状 ,血睾酮、SOD、MDA水平及主观抑郁症状评分作观察 ,并与 5 8例病情相同的病人予安慰剂对照。结果 :治疗组的病人症状改善率为 74 .3% ,血睾酮水平 3周前后分别为 (131.5 1± 19.12 )mg/L与 (2 5 3.78± 2 1.4 5 )mg/L ,SOD水平 3周前后分别为 (10 6 8.3± 12 1.4 )U/ g·Hb与 (1178.1± 132 .6 )U/ g .Hb ,MDA水平 3周前后分别为 (7.6± 0 .8) μmol/L与 (5 .8± 0 .6 )μmol/L。抑郁症状评分各指标均有较大改善。 结论 :全破壁灵芝孢子胶囊是治疗男性更年期综合征的一种有效、安全的方法。

几种水蕨孢子破壁方法的比较

[目的]比较不同破壁方法对水蕨孢子破壁率的影响。[方法]运用温差-机械破壁法、乙醇浸泡-超声破壁法、纤维素酶法、乙醇浸泡-纤维素酶法以及乙醇浸泡-混合酶法对水蕨孢子进行破壁,分析不同破壁方法对水蕨孢子破壁率的影响。[结果]温差-机械破壁法的水蕨孢子破壁率最低。用pH值4.5的磷酸盐缓冲溶液添加5%纤维素酶处理后,水蕨孢子的破壁率为47.08%。用50%乙醇浸泡、添加5%纤维素酶、超声破碎30 min处理,破壁率最高,达到61.22%。采用乙醇浸泡-混合酶法破壁的水蕨孢子破壁率比只加纤维素酶要低。[结论]该研究对提取和分析水蕨孢子的化学成分具有重要意义。

破壁与去壁灵芝孢子粉的化学成分与抗氧化活性比较

本研究以去壁灵芝孢子粉与破壁灵芝孢子粉为原料,探究不同孢子壁加工工艺对灵芝孢子粉化学成分及抗氧化活性的影响。实验对比了两种灵芝孢子粉的水分、灰分、膳食纤维、蛋白质、总三萜、总多糖、微量元素、氨基酸等主要指标及其体外抗氧化活性。结果表明,去壁灵芝孢子粉在灰分、水溶性膳食纤维、蛋白质、总多糖、总三萜和水解氨基酸的含量分别是2.227%、8.810%、15.922%、12.129%、2.556%、6.744%,均高于破壁灵芝孢子粉,其中总多糖含量较破壁提高了近12倍。三萜的色谱图显示,去壁孢子粉中含有更丰富的萜类物质。对比两种孢子粉醇提相与水提相的抗氧化活性,去壁灵芝孢子粉醇提相显示出最强的抗氧化活性,在2 mg/mL的浓度下,总还原力和DPPH自由基清除率分别为1.114和89.860%;在0.5 mg/mL的浓度下,其ABTS^+自由基清除率为99.714%,与同浓度下V_C阳性对照组结果相当;在10 mg/mL浓度时,羟基自由基清除率达到84.301%。因此,去壁技术提高了灵芝孢子粉中关键物质含量,增强了其抗氧化能力。

雨生红球藻破壁孢子粉对Ⅱ型糖尿病大鼠肝肾的保护作用

目的:研究雨生红球藻破壁孢子粉对Ⅱ型糖尿病大鼠肝肾的保护作用。方法:将SD大鼠随机分为正常组和造模组,正常组以普通饲料喂养,造模组70只大鼠采用高脂高糖饲料饲养4周后,腹腔注射一次链脲佐菌素(STZ)35 mg/kg BW;继续饲养4周,测血糖将造模成功大鼠再分为模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、降糖药物组(模型组灌胃蒸馏水,低、中、高三个剂量组分别给予50、100和200 mg/kg BW的雨生红球藻破壁孢子粉,降糖药物组给予28.5 mg/kg BW的盐酸二甲双胍),连续干预4周,处死大鼠;测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)活性以及白蛋白(ALB)和球蛋白(GLO)含量,测定肝肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量以及肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)水平;制作肝肾HE染色病理切片,观察病理学变化。结果:高剂量雨生红球藻破壁孢子粉可极显著降低糖尿病大鼠血清ALT、AST、ALP、LDH活性和GLO含量(P<0.01),显著减少ALB含量(P<0.05);极显著提高肝肾组织中SOD和GSH-Px活性(P<0.01),极显著降低MDA含量(P<0.01);极显著降低肝肾组织TNF-α和IL-1β水平(P<0.01)。雨生红球藻破壁孢子粉对肝肾组织的损伤有一定的缓解作用。结论:雨生红球藻破壁孢子粉可减轻糖尿病大鼠的肝肾损伤,机制可能与降低氧化应激和炎性反应有关。

雨生红球藻破壁孢子粉对小鼠酒精性肝损伤的保护作用

目的:研究雨生红球藻破壁孢子粉对小鼠酒精性肝损伤的保护作用。方法:将小鼠随机分为空白对照组、模型组和雨生红球藻粉低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg)。剂量组动物先灌胃受试物7 d,第8 d开始,给予剂量组和模型组50%酒精连续灌胃7 d,建立酒精性肝损伤模型。最后一次灌胃16 h后处死小鼠,取血清和相关脏器。测定小鼠血清中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)以及甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)的含量,测定肝组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性、谷胱甘肽(glutathione peroxidase,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,以及炎性因子Tumor Necrosis Factor-α(TNF-α)、Interleukin-1β(IL-β)水平,制作肝脏HE染色病理切片,观察肝组织的病理学变化。结果:与模型组相比,雨生红球各剂量组肝脏指数极显著降低(p <0.01),血清中AST含量极显著降低(p <0.01),TC含量显著降低(p <0.05),肝脏MDA和GSH含量降低,SOD活性提高,炎性因子TNF-α含量降低,IL-β含量极显著降低(p <0.01),肝组织病理损伤也得到明显改善。结果表明雨生红球藻破壁孢子粉对小鼠酒精性肝损伤具有明显的保护作用。

破壁灵芝孢子粉对虚热证和虚寒证小鼠环核苷酸水平及免疫功能的影响

目的研究破壁灵芝孢子粉(Sporoderm-broken Spores of Ganoderma Lucidum ,SSGL)对虚热和虚寒证小鼠环核苷酸水平及免疫功能的影响。方法健康雄性昆明小鼠适应性喂养一周后随机分组,用甲状腺素、氢化可的松分别制备小鼠虚热、虚寒模型,各组给予相应药物后观察破壁灵芝孢子粉对虚热和虚寒证小鼠血清环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)、环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate,cGMP)、cAMP/cGMP、白介素-2(interleukin-2,IL-2)、白介素-4(interleukin-4,IL-4)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)等的影响。结果与虚热模型组比,破壁灵芝孢子粉高剂量能升高小鼠体重、胸腺和脾脏指数(P<0.05),并降低小鼠血清中cAMP、cGMP、cAMP/cGMP值(P<0.05);破壁灵芝孢子粉低剂量升高小鼠脾脏指数、血清中cAMP、cGMP、IL-2、TNF-α值(P<0.05),降低IL-4值(P<0.01)。与虚寒模型组比,破壁灵芝孢子粉高、低剂量均能升高小鼠的体重、免疫脏器指数、血清中cAMP、cGMP、cAMP/cGMP、IL-2、TNF-α值(P<0.05),并降低小鼠血清中IL-4值(P<0.05)。结论破壁灵芝孢子粉能降低虚热证小鼠环核苷酸水平,升高虚寒证小鼠环核苷酸水平,具有“平”性药“双向适用,条件显性”药性特点;同时破壁灵芝孢子粉性平偏温,味甘能补,具有扶正固本功效,能调节虚热和虚寒证小鼠免疫功能。

段木灵芝与代料灵芝的化学成分的研究Ⅱ.主要营养成分、孢子、多肽、油脂成分

目的研究段木灵芝多肽、孢子破壁前后油脂与多糖变化.结果一般化学成分分析中代料灵芝的蛋白质含量14.34%,是段木灵芝的1.6倍.代料灵芝多糖含量高于段木灵芝1～2.6倍.灵芝破壁孢子油脂释放能力是未破壁孢子的5.2倍;破壁孢子的活性成分多糖肽是未破壁孢子多糖肽含量1.69倍.灵芝多糖肽由16种氨基酸组成.从脂肪分析结果来看,灵芝孢子油的饱和脂肪酸含量为23.70%,不饱和脂肪酸为76.20%,对于孢子油是否有应用价值,值得进一步研究.