血球计数板检测破壁灵芝孢子粉破壁率方法的优化研究

目的对现行常用的血球计数板检测破壁灵芝孢子粉破壁率的方法进行优化研究,以降低检测误差,避免人为主观判断,并提高检测效率。方法通过考察不同的悬浮液体系,筛选出能使破壁灵芝孢子粉分散性最佳的悬浮液体系;通过考察常用的细胞染色剂,筛选出能是破壁灵芝孢子粉染色,而灵芝孢子粉不被染色的最适染色剂。结果优化后检测方法重复性与再现性良好,重复性与再现性相对标准偏差(relativestandard deviationg,RSD)均为0.3%;回收率良好,不同破壁率水平的样品回收率平均值在98.9%~100.9%范围内;检测效率明显提高,单个样品的检测时间从18.2 min降低至8.1 min。结论本研究通过优化悬浮液体系及引用细胞染色技术与血球计数法结合,降低了检测方法误差,避免了人为主观判断,建立了一种更为准确、客观、高效的破壁率检测方法,为破壁灵芝孢子粉破壁率检测提供了可靠手段。

破壁灵芝孢子粉破壁率测定的研究

通过筛选,得到7%的硫酸锌溶液与无水乙醇以10:1(体积比)的混合溶液能使灵芝孢子更好的悬浮。利用该悬浮体系,辅以超声60 min和涡旋处理30 s,通过血球计数板对不同质量的孢子粉进行计数,建立未破壁灵芝孢子粉质量和孢子数之间的标准曲线,对同批未知破壁率的破壁孢子粉的破壁率进行检测,并人为混合7个标准破壁率的破壁孢子粉对该方法的准确度和精密度进行试验。结果表明:在该悬浮体系下,灵芝孢子粉在0.01～0.05 g/25 mL与孢子数线性关系良好。

灵芝孢子粉生物酶破壁技术的研究

选择专一性较强的溶壁酶Ⅲ,结合超声波处理南韩赤芝、台芝和中华黑芝孢子粉孢子壁,破壁率可达98%以上。应用冷冻干燥技术,可使溶壁酶破壁灵芝孢子粉的有效成分(多糖)的保护率在99%左右。

基于高光谱技术的灵芝孢子粉破壁率快速检测方法研究

目的 利用高光谱技术结合化学计量学建立灵芝孢子粉破壁率快速无损的检测方法。方法 采集不同破壁率灵芝孢子粉样品的高光谱图像,选定感兴趣区域后计算获得各样品可见-短波近红外波段(397~1 004 nm)内的光谱数据;比较运用标准正态变量变换、多元散射矫正、Savitsky-Golay(SG)平滑、小波变换、SG平滑+标准正态变量变换及SG平滑+多元散射矫正6种光谱预处理方法,竞争性自适应重加权、连续投影算法、无信息变量选择、最小角回归、遗传算法5种特征波段提取方法以及偏最小二乘法、支持向量回归、极限学习机回归、多层感知机回归及LightGBM回归5种算法所建立的定量校正模型预测性能。结果 获得最优预测性能的算法组合为SG平滑+竞争性自适应重加权特征波段选择+偏最小二乘;基于该算法组合建立的定量校正模型在破壁率区间为90%~100%的灵芝孢子粉样品预测集决定系数为0.868 2,均方根误差为0.011 7;将选定的最优算法组合应用于构建样品破壁率区间为0~100%的定量校正模型,计算测试集决定系数为0.973 1,均方根误差为0.049 3,表现出良好的泛化能力。结论 所建立的定量检测模型可以实现对灵芝孢子粉破壁率的快速、无损检测,为破壁灵芝孢子粉及其产品的质量控制提供技术支撑。

灵芝孢子粉破壁率分析方法的测量不确定度评估及方法改良与优化

目的:对中华人民共和国农业行业标准NY/T1677-2008《破壁灵芝孢子粉破壁率的测定》测定灵芝孢子粉破壁率测量不确定度进行评定。分析产生不确定度的主要来源,优化方法为有效地控制用NY/T 1677-2008标准测定灵芝孢子粉破壁率提供可靠的理论依据。方法:参照NY/T1677-2008标准,分析了整个测定过程产生的不确定度。通过对灵芝孢子粉破壁率分析方法进行检讨,并对分析方法进行改良与优化。结果:实验给出灵芝孢子粉破壁率的扩展不确定度为29.8%(k=2)。对分析方法进行优化后,灵芝孢子破壁率的扩展不确定度下降至13.0%(k=2)。结论:优化后的方法不确定度水平降低,分析方法的准确性提高。