拟南芥SPX1蛋白原核表达及纯化分析

包含SPX结构域的蛋白在高等真核生物中广泛存在,这类蛋白的功能多数还不太清晰,但发现有些与磷信号相关,有些与铁信号相关。拟南芥中含有SPX结构域的蛋白可分为4个家族,本研究中的拟南芥SPX1(At SPX1)属于一个只含有SPX结构域的蛋白组成的家族,其它家族成员还包含额外的基因序列。进化树分析表明,At SPX1编码的氨基酸序列与双子叶植物具有较高的一致性,与单子叶植物进化距离较远。为了揭示At SPX1蛋白的结构形态与其生物学功能之间的联系,开展了At SPX1蛋白质体外可溶性表达实验,构建了原核体外表达载体,在大肠杆菌(E.coli)细胞中获得了该蛋白可溶性高表达。表达的蛋白包含有His标签方便了蛋白纯化,插入的SUMO融合蛋白标签可以通过蛋白酶切除,而目标蛋白通过硫酸铵沉淀实现了纯化。进一步分子筛层析分析表明At SPX1以单体形式存在。实验结果提供了一套表达纯化At SPX1蛋白的有效方案。

spx蛋白调控作用的研究进展

变异链球菌是人类龋病的主要致龋菌,在口腔内感受各种应激条件的变化,其致病性与其在各种应激环境中的耐受情况密切相关。spx蛋白是一种革兰阳性细菌全局性调节因子,在变异链球菌的应激耐受、生存和致龋过程中起着重要的作用。本文就spx蛋白及spx/α-C末端结构域复合体结构、非致龋菌的spx蛋白及其调控功能、变异链球菌spx蛋白及其调控作用等研究进展作一综述。