spy1的DNA改组提高普那霉素的产量

目的研究普那霉素产生菌株选育的分子育种方法,提高普那霉素的产量。方法对来自6种始旋链霉菌基因组重排菌株的spy1调控基因,进行DNA改组研究,然后筛选阳性接合子进行发酵,HPLC法测定普那霉素两组分的产量变化。结果建立了普那霉素生物合成调控基因spy1的改组基因库,筛选出71个spy1改组接合子。接合子的普那霉素I产量都有了不同程度的提高,最高产量为出发菌株7.5倍,达60mg/L;普那霉素II产量则没有显著变化。结论利用DNA改组技术进行调控基因的分子进化可以有效提高抗生素的产量,为普那霉素分子育种研究中的首次尝试。

Spy1蛋白在胃癌中的表达及临床意义

目的:探讨Spy1蛋白在胃癌组织中的表达及其与胃癌患者临床病理特征的关系。方法:收集3201医院2013年1月到2014年12月间60例临床资料保存完整的患者的胃癌组织和相对应的癌旁组织。应用免疫组化法测定Spy1蛋白在胃癌及癌旁组织中的表达,分析其表达与胃癌临床病理特征的关系。结果:Spy1蛋白在胃癌组织中的免疫组化评分显著高于对应癌旁组织(3.25±0.31)vs(1.34±0.23),P<0.01;Spy1蛋白的阳性表达与有无淋巴结转移、分化程度及TNM分期有相关性(P<0.05)。结论:Spy1在胃癌组织中存在显著高表达,提示Spy1的异常高表达在胃癌的发生发展中起重要作用。

p27^(kip1)和Spy1在肝癌细胞HuH7增殖过程中的表达变化及其相互关系

目的探讨p27kip1和Spy1在肝癌细胞HuH7增殖过程中的表达变化及相互关系。方法采用血清饥饿合并释放处理肝癌细胞株HuH7,通过流式细胞术检测该处理对HuH7细胞生长周期的影响;同时采用Western blot、免疫荧光技术检测不同生长状态的HuH7细胞中p27kip1和Spy1的表达及亚细胞定位情况;采用免疫沉淀方法检测HuH7细胞中p27kip1与Spy1的结合情况。结果血清饥饿造成HuH7细胞生长周期停滞,Spy1表达下降,p27kip1蛋白总量增加,差异有统计学意义(P<0.05或<0.01)。与此同时,p27kip1的阳性信号也由整个细胞分布转变为胞核高分布,而Spy1的阳性信号则由胞核高分布转变为胞浆高分布。血清释放后刺激细胞进入细胞周期,上述分子呈现相反的变化,且p27kip1的阳性信号在胞浆分布增强。结论Spy1可能通过与p27kip1结合来介导p27kip1的核内外分布并影响其表达,从而参与调控肝癌细胞的生长。