期刊文献+
共找到42篇文章
< 1 2 3 >
每页显示 20 50 100
枇杷鲨烯合酶(Squalene synthase)基因的克隆及序列分析 被引量:2
1
作者 李惠华 刘小英 +2 位作者 王伟 常强 苏明华 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2014年第6期1090-1094,共5页
鲨烯合酶(SQS)是枇杷三萜酸生物合成过程中的关键酶。以枇杷(Eriobotrya iaponicn L.)悬浮培养细胞为材料,采用RT—PCR和RACE方法分离得到枇杷鲨烯合酶Ej-SQS(Squalene svnthase)基因的cDNA全长序列(GenBank,JQ294055),共17... 鲨烯合酶(SQS)是枇杷三萜酸生物合成过程中的关键酶。以枇杷(Eriobotrya iaponicn L.)悬浮培养细胞为材料,采用RT—PCR和RACE方法分离得到枇杷鲨烯合酶Ej-SQS(Squalene svnthase)基因的cDNA全长序列(GenBank,JQ294055),共1775bp,包含了5’非编码区为97bp,开放阅读框为1239bp,3’非编码区为439bp。该cDNA的开放阅读框推定的氨基酸序列(含412个氨基酸)与其它植物SQS具有79%~94%同源性.包含Trans_IPPS_HH保守结构域,可能属于Isoprenoid Biosynthesis enzymes,Class 1家族。为今后利用基因工程调控枇杷细胞悬浮培养物以提取目标产物奠定基础。 展开更多
关键词 枇杷 鲨烯合酶基因 基因克隆 序列分析
下载PDF
灰毡毛忍冬SS基因的克隆及表达分析
2
作者 陈勋 王珊 +3 位作者 龙雨青 曾娟 周日宝 刘湘丹 《安徽农业科学》 CAS 2024年第21期71-77,共7页
[目的]克隆灰毡毛忍冬SS基因全长序列,并进行生物信息学和表达模式分析。[方法]提取灰毡毛忍冬花总RNA,通过RT-PCR和RACE技术克隆LmSS基因的全长cDNA序列;运用相关软件对该基因序列进行生物信息学分析;利用qRT-PCR测定灰毡毛忍冬茎、叶... [目的]克隆灰毡毛忍冬SS基因全长序列,并进行生物信息学和表达模式分析。[方法]提取灰毡毛忍冬花总RNA,通过RT-PCR和RACE技术克隆LmSS基因的全长cDNA序列;运用相关软件对该基因序列进行生物信息学分析;利用qRT-PCR测定灰毡毛忍冬茎、叶和不同花期花中该基因的相对表达量。[结果]克隆的LmSS基因开放阅读框(ORF)长度为1245 bp,编码414个氨基酸,属于亲水性蛋白,定位于细胞质中,具有典型的多聚异戊二烯基合成酶活性结构域,与其他植物SS基因具有较高同源性。LmSS基因在灰毡毛忍冬不同花期和器官中表达有组织特异性。[结论]该研究成功地克隆灰毡毛忍冬中的SS基因,为进一步研究该基因的功能奠定基础,同时为探究灰毡毛忍冬皂苷生物合成和调节机制提供了科学依据。 展开更多
关键词 灰毡毛忍冬 鲨烯合酶(ss) 基因克隆 生物信息学 表达分析
下载PDF
东方泽泻实时荧光定量PCR内参基因的筛选及AoSS基因的组织表达特性分析 被引量:4
3
作者 刘青芝 谷巍 +5 位作者 孙云飞 吴启南 巢建国 桑晓华 王小浩 刘琪 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1467-1475,共9页
【目的】筛选适用于东方泽泻实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的内参基因,并分析其鲨烯合酶基因(AoSS)的表达特性,为后续研究东方泽泻原萜烷型三萜生物合成调控及诱导机制打下基础。【方法】从东方泽泻转录组中选取内参基因18S rRNA、EF1α、GA... 【目的】筛选适用于东方泽泻实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的内参基因,并分析其鲨烯合酶基因(AoSS)的表达特性,为后续研究东方泽泻原萜烷型三萜生物合成调控及诱导机制打下基础。【方法】从东方泽泻转录组中选取内参基因18S rRNA、EF1α、GAPDH、ACT、UBQ和UBC,应用qRT-PCR检测其在不同组织和激素处理下的表达情况,并借助Delta CT、GeNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder对其表达稳定性进行分析评价。以筛选到的内参基因分析AoSS基因在不同组织中的表达情况。【结果】18S r RNA、GAPDH和EF1α基因在东方泽泻不同组织的表达稳定性较高,但18S rRNA、UBC和EF1α基因在不同激素处理下的表达稳定性均较高。以18S rRNA、GAPDH和EF1α基因为内参分析AoSS基因在东方泽泻不同组织中的表达量情况,结果显示,AoSS基因在东方泽泻不同组织中均有表达,其表达情况基本一致,均在东方泽泻块茎中表达量最高,其次是叶柄和叶,而在根中表达量最低。【结论】18S rRNA、GAPDH和EF1α基因是研究东方泽泻不同组织中基因表达分析的首选内参基因;18S rRNA、EF1α和UBC基因是研究激素处理下基因表达的首选内参基因。AoSS基因的表达具有组织特异性,其可能在东方泽泻的生长发育中发挥重要的调控功能。 展开更多
关键词 东方泽泻 内参基因 鲨烯合酶(ss) 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) 表达特性
下载PDF
石柱参人参皂苷合成酶基因SS的克隆与序列分析
4
作者 王丹丹 孙英新 《辽东学院学报(自然科学版)》 CAS 2019年第4期265-269,共5页
以石柱参近缘种野生山参的人参皂苷合成酶基因SS为模板,利用NCBI中的primer-BLAST设计特异性引物,应用PCR技术从石柱参叶片基因组DNA克隆了SS基因。序列分析显示,克隆的基因片段为1285 bp,能够编码25个氨基酸以上的ORF(Open Reading Fra... 以石柱参近缘种野生山参的人参皂苷合成酶基因SS为模板,利用NCBI中的primer-BLAST设计特异性引物,应用PCR技术从石柱参叶片基因组DNA克隆了SS基因。序列分析显示,克隆的基因片段为1285 bp,能够编码25个氨基酸以上的ORF(Open Reading Frame)有10个,其中最长能够编码295个氨基酸。NCBI序列对比显示,该基因与人参的人参皂苷合成酶基因SS的同源性为97.05%,与西洋参的人参皂苷合成酶基因SS的同源性为96.63%。这些数据表明,从石柱参克隆的基因为其人参皂苷合成酶基因SS。 展开更多
关键词 石柱参 人参皂苷合成酶 ss基因 基因克隆
下载PDF
青钱柳鲨烯合成酶(CpSS)全长基因的克隆、分析与表达 被引量:2
5
作者 许小向 尹忠平 +3 位作者 刘泽波 严国荣 陈继光 上官新晨 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第2期111-119,共9页
为研究和调控青钱柳三萜代谢,克隆了青钱柳鲨烯合成酶(CpSS)全长基因,研究该基因的特征和蛋白结构,以及青钱柳悬浮培养细胞在黑曲霉诱导子作用下该基因的表达变化情况。本文以青钱柳悬浮细胞RNA为模板,采用RT-PCR和RACE技术克隆出全长为... 为研究和调控青钱柳三萜代谢,克隆了青钱柳鲨烯合成酶(CpSS)全长基因,研究该基因的特征和蛋白结构,以及青钱柳悬浮培养细胞在黑曲霉诱导子作用下该基因的表达变化情况。本文以青钱柳悬浮细胞RNA为模板,采用RT-PCR和RACE技术克隆出全长为1 667 bp的CpSS基因cDNA序列,该序列包含一个1 245 bp的完整ORF,编码414个氨基酸;CpSS序列与胡桃鲨烯合成酶基因的相似度最高,相似度达到97%,与白桦、葡萄、大豆、甘草、可可5个物种的相似度都在85%以上。序列分析表明,CpSS蛋白属于不稳定亲水蛋白,具有典型的鲨烯合成酶保守区和结构域,存在于内质网膜中,由多个α螺旋组成空穴状结构,该结构与大多数植物鲨烯合成酶蛋白的空间结构相似。实时荧光半定量RT-PCR检测结果表明,在黑曲霉诱导子作用下,悬浮培养细胞CpSS基因表达量显著增加,在诱导后60 h时的表达量最高。本文可为深入研究青钱柳三萜代谢途径及真菌诱导子的诱导作用机制提供参考。 展开更多
关键词 青钱柳 鲨烯合成酶 基因克隆 序列分析 基因表达
下载PDF
橘核角鲨烯合成酶基因(ss)的克隆、分析及表达 被引量:1
6
作者 吴沂芸 罗静 +2 位作者 王黎 王倩 裴瑾 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期270-274,共5页
目的:从大红袍Citrus reticulata‘Dahongpao’种子的总RNA中克隆角鲨烯合成酶基因(ss),并对其进行生物信息学及表达分析。方法:采用RT-PCR技术克隆基因并对其在橘核不同生长时期的表达进行分析,利用在线分析工具对基因进行生物信息学... 目的:从大红袍Citrus reticulata‘Dahongpao’种子的总RNA中克隆角鲨烯合成酶基因(ss),并对其进行生物信息学及表达分析。方法:采用RT-PCR技术克隆基因并对其在橘核不同生长时期的表达进行分析,利用在线分析工具对基因进行生物信息学分析。结果:克隆所得ss总长度为1 205 bp,编码397个氨基酸,与芸香科柑橘属Citrus L.甜橙Citrus sinensis、克莱檬蒂娜橘Citrus clementina角鲨烯合成酶(SS)蛋白质序列具有99%的相似性。将橘核生长发育过程分为形态建成末期、成熟期和脱水期3个阶段,其中,种子成熟期的ss表达量最高。结论:首次从大红袍中成功克隆ss,可为橘核中柠檬苦素类化合物生物合成及调控机制的研究提供参考。 展开更多
关键词 大红袍 橘核 角鲨烯合成酶 克隆 生物信息学分析 基因表达
下载PDF
膜荚黄芪鲨烯合酶基因SS密码子偏爱性分析 被引量:1
7
作者 郎红 全雪丽 吴松权 《广东农业科学》 CAS 2015年第18期115-121,共7页
运用EMBOSS及Codon W等在线软件分析了膜荚黄芪鲨烯合酶(squalene synthase,SS)基因的同义密码子偏好性,并将其与大豆、拟南芥等7种植物SS基因及大肠杆菌基因组密码子偏好性进行比较,为该基因选择合适的宿主及高效表达提供理论依据。结... 运用EMBOSS及Codon W等在线软件分析了膜荚黄芪鲨烯合酶(squalene synthase,SS)基因的同义密码子偏好性,并将其与大豆、拟南芥等7种植物SS基因及大肠杆菌基因组密码子偏好性进行比较,为该基因选择合适的宿主及高效表达提供理论依据。结果表明,膜荚黄芪SS基因偏好以A或T碱基结尾的密码子,与大肠杆菌基因组共有24个密码子存在差异。为进一步提高膜荚黄芪SS基因在大肠杆菌中的表达水平,需对其密码子进行优化。 展开更多
关键词 膜荚黄芪 鲨烯合酶 密码子偏好性 基因表达
下载PDF
Effects of Arsenic Treatments on Saponin Content and Heterogeneity Extracted from Rhizome and Main Root of Panax notoginseng Plants Grown in Shaded Field
8
作者 Yanqun Zu Jinjin Sun +4 位作者 Ni Ma Qiang Min Guangquan Feng Jiong Wu Yuan Li 《Journal of Geoscience and Environment Protection》 2016年第7期15-27,共13页
As contamination is one of important factors to Panax notoginseng quality and safety. Saponin is one of important compounds with the medicinal values of P. notoginseng. The impact of soil As on production of saponin o... As contamination is one of important factors to Panax notoginseng quality and safety. Saponin is one of important compounds with the medicinal values of P. notoginseng. The impact of soil As on production of saponin of P. notoginseng knew very little. This study was performed to determine content and heterogeneity of saponins from P. notoginseng and its mechanisms upon treatments with different concentration levels of As in soil. Plants of P. notoginseng were treated with arsenic [As (V)] at 0, 20, 80, 140, 20 and 260 mg/kg concentration levels which were supplied as sodium arsenate (Na<sub>3</sub>AsO<sub>4</sub>)<sub>.</sub> These experimental plants were grown in shade condition in a greenhouse. Plants were harvested at vigorous vegetative growth and fruit ripening stages, separately. Effects of As treatments on saponin content, and heterogeneity of monomers in the mixtures of notoginesenosides and ginsenosides, enzymatic activity and gene expression level of squalene synthetase were determined for rhizome and main root tissues. Results show that:(1) Of all the As treatments from the lowest to the highest concentration levels, the As content in both rhizome and main roots from As-treated plants was within the standard level for superior products derived from P. notoginseng. The content of notoginsenosides from all tissues except the main roots at fruit ripening stage, was 5% higher than the standard level specified in the Chinese Pharmacopoeia;(2) The treatment of As at 20 mg/kg led to an 3.5% - 183.9% increases in total notoginesenosides content in rhizome and main roots, respectively. Treatments with the highest As concentration at 260 mg/kg<sup> </sup>resulted in a significant decline in total notoginsenosides content, and lower enzymatic activity and gene expression levels of squalene synthetase;(3) Under As treatment conditions, the ratio of Rb1/Rg1 decreased but the ratio of (Rb1 + Rg1)/R1 increased in both rhizomes and main roots. Conclusively, this study demonstrated that low As concentration (20 - 80 mg/kg) treatments resulted in higher notoginsenoside content in P. notoginseng. However, treatments with high As concentrations had an adverse effect. The repression in the synthesis of notoginsenoside and interruption of the conversion process from propanaxadiol into propanaxatriol are responsible for more heterogeneous monomer mixtures and low notoginsenoside content. For plants treated with the highest As concentration of 260 mg/kg, both gene expression and enzymatic activities of squalene synthetase were greatly repressed thus leading to a significantly low saponin content in rhizome and main root tissues. 展开更多
关键词 Panax notoginseng SAPONIN As squalene synthase gene Expression
下载PDF
刺五加鲨烯合酶基因家族两成员的表达及其与皂苷含量的关系 被引量:15
9
作者 邢朝斌 龙月红 +3 位作者 李非非 周秘 修乐山 劳凤云 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第3期1252-1255,共4页
为了探明刺五加鲨烯合酶(SS)基因家族2成员对皂苷含量的作用机制,以actin为内参基因,利用real time PCR技术,分析刺五加不同生长发育时期、不同器官及茉莉酸甲酯(MeJA)处理对SS1、SS2基因表达及皂苷含量的影响。结果表明:刺五加SS基因... 为了探明刺五加鲨烯合酶(SS)基因家族2成员对皂苷含量的作用机制,以actin为内参基因,利用real time PCR技术,分析刺五加不同生长发育时期、不同器官及茉莉酸甲酯(MeJA)处理对SS1、SS2基因表达及皂苷含量的影响。结果表明:刺五加SS基因家族的SS1和SS2在整个生长期和各器官中均有表达,且表达量差异显著(P<0.05),其中,在萌芽期两者的表达量差异最大。SS1在叶片、叶柄和根器官中的表达量显著高于SS2的表达量(P<0.05)。MeJA处理可显著提高SS1和SS2基因的表达量。刺五加SS1的表达量与皂苷含量间的相关系数低,未达显著水平。SS2的表达量与皂苷含量呈显著的正相关关系(P<0.01)。SS2表达量的高低决定了皂苷含量的高低,是刺五加中三萜皂苷生物合成中的关键酶。 展开更多
关键词 刺五加 表达 鲨烯合酶基因 REAL time PCR 皂苷
下载PDF
刺五加鲨烯合酶基因cDNA的克隆与序列分析 被引量:7
10
作者 龙月红 邢朝斌 +4 位作者 王明艳 吴鹏 陈龙 梁能松 何闪 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期112-116,共5页
采用改良的异硫氰酸胍法提取刺五加总RNA,逆转录为cDNA,根据已报道的人参鲨烯合酶基因(squalene synthasegene,SS)cDNA序列设计引物,利用RT-PCR法克隆刺五加SS基因的cDNA序列。克隆得到长度为1258 bp的刺五加SS基因cDNA序列,开放阅读框... 采用改良的异硫氰酸胍法提取刺五加总RNA,逆转录为cDNA,根据已报道的人参鲨烯合酶基因(squalene synthasegene,SS)cDNA序列设计引物,利用RT-PCR法克隆刺五加SS基因的cDNA序列。克隆得到长度为1258 bp的刺五加SS基因cDNA序列,开放阅读框全长1248 bp,编码415个氨基酸残基,GenBank登录号为HQ456918,与人参的SS1、SS2和SS3氨基酸序列一致性分别为91.73%、97.59%和96.63%。首次分离并报道了刺五加SS基因cDNA序列,为刺五加苷生物合成中关键酶的表达分析及调控机理研究提供参考。 展开更多
关键词 刺五加 鲨烯合酶基因 克隆 RT-PCR
下载PDF
刺五加鲨烯合酶基因的表达及其对皂苷含量的影响 被引量:15
11
作者 邢朝斌 龙月红 +2 位作者 劳凤云 庄鹏宇 修乐山 《经济林研究》 北大核心 2013年第1期25-29,共5页
为了了解刺五加鲨烯合酶基因(squalene synthase,SS)的表达特点及其对刺五加中皂苷含量的影响情况,以GAPDH基因为内参照基因,采用实时定量PCR技术,分析了SS基因在刺五加不同生长发育时期不同器官中的表达量及茉莉酸甲酯对其表达的影响情... 为了了解刺五加鲨烯合酶基因(squalene synthase,SS)的表达特点及其对刺五加中皂苷含量的影响情况,以GAPDH基因为内参照基因,采用实时定量PCR技术,分析了SS基因在刺五加不同生长发育时期不同器官中的表达量及茉莉酸甲酯对其表达的影响情况;还利用SPSS 17.0软件分析了SS基因的表达量与刺五加中皂苷总含量的相关性。结果表明,在刺五加的整个生长期中,SS基因的表达量呈现出"低—高—低—高—低"的变化趋势:萌芽期(4月26日)该基因的表达量最低,而盛花期(6月26日)该基因的表达量最高,为萌芽期的3.11倍;SS基因在刺五加根中的表达量显著高于茎、叶和叶柄中的表达量(P<0.05),其在茎中的表达量最低,仅为根中表达量的51.88%。茉莉酸甲酯可提高SS基因的表达量,但其与对照组的差异未达到显著水平。刺五加中的皂苷总含量与SS基因的表达量间呈现出同升同降的变化趋势,存在极显著的正相关关系(P<0.01)。文中初步判定,鲨烯合酶是刺五加皂苷生物合成的关键酶。 展开更多
关键词 刺五加 鲨烯合酶基因 表达 皂苷 实时定量PCR
下载PDF
麻疯树鲨烯合酶基因SQS的克隆及生物信息学分析 被引量:6
12
作者 侯嵘 龚诺希 +1 位作者 刘法涛 林娟 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期391-399,共9页
以麻疯树(Jatropha curcas L.)总RNA为模板,根据已报道的鲨烯合酶基因序列设计简并引物,用RACE方法克隆得到麻疯树鲨烯合酶基因全长cDNA,命名为JcSQS。JcSQS全长1609 bp,包含1个1242 bp的开放阅读框,预测麻疯树鲨烯合酶基因编码的蛋白含... 以麻疯树(Jatropha curcas L.)总RNA为模板,根据已报道的鲨烯合酶基因序列设计简并引物,用RACE方法克隆得到麻疯树鲨烯合酶基因全长cDNA,命名为JcSQS。JcSQS全长1609 bp,包含1个1242 bp的开放阅读框,预测麻疯树鲨烯合酶基因编码的蛋白含有413个氨基酸。JcSQS具有鲨烯合酶类的保守结构域,JcSQS蛋白与蓖麻、柿、木榄等植物中SQS基因编码的氨基酸序列具有高度同源性。这为研究麻疯树萜烯类物质的生物合成和调控机制奠定了基础。 展开更多
关键词 麻疯树 鲨烯合酶基因SQS RACE 生物信息分析
下载PDF
甜瓜鲨烯合酶基因克隆及酶分子结构分析 被引量:3
13
作者 黄海霞 苏何玲 +5 位作者 史云龙 肖雅伦 谭燕莲 梁杨浩 刘永明 吴耀生 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期373-379,387,共8页
葫芦素类是主要分布于葫芦科植物中具有多种医药活性的四环三萜类化合物,目前药用葫芦素原料主要从甜瓜蒂中提取。该研究从甜瓜中克隆葫芦素类合成关键酶——鲨烯合酶(SQS)的基因,并对其序列进行了生物信息学分析。结果表明:DNA测序和BL... 葫芦素类是主要分布于葫芦科植物中具有多种医药活性的四环三萜类化合物,目前药用葫芦素原料主要从甜瓜蒂中提取。该研究从甜瓜中克隆葫芦素类合成关键酶——鲨烯合酶(SQS)的基因,并对其序列进行了生物信息学分析。结果表明:DNA测序和BLASTRefSeqGene分析表明,克隆的甜瓜SQS基因片段具有完整的该酶基因开放阅读框架(ORF)序列。ORF分析显示,甜瓜SQS由417氨基酸残基构成,等电点为7.56。对推衍的甜瓜SQS氨基酸序列分析结果提示,该酶二级结构以α螺旋为主。结构域预测结果表明,SQS属于异戊二烯合酶家族,具有法呢酰基二磷酸及镁离子的结合位点。三级结构预测提示,甜瓜SQS为单体酶,其活性中心主要由几个α螺旋围绕形成的穴状结构。磷酸化位点分析显示,S^(48)处于酶活性中心相关^(47)VSRSF^(52)的模体中,而S^(196)是正选择位点,提示这两处磷酸化位点可能是甜瓜SQS酶活性调节的关键部位。以甜瓜SQS基因ORF序列构建系统发生树的系统发生分类结果与形态学分类结果一致。该研究结果为葫芦素类的生物合成调控研究提供了新的线索和实验依据。 展开更多
关键词 甜瓜 鲨烯合酶 基因克隆 序列分析
下载PDF
刺五加鲨烯合酶基因2 cDNA的克隆与蛋白结构分析 被引量:4
14
作者 龙月红 邢朝斌 +3 位作者 梁能松 何闪 李宝财 朱金丽 《北方园艺》 CAS 北大核心 2012年第2期117-120,共4页
采用RT-PCR和RACE法克隆了刺五加鲨烯合酶基因2(squalene synthase gene 2,SS2)cDNA的全长序列(GenBank登录号:JN714465)。该序列全长1 463bp,其中5’端非翻译区长10bp,3’端非翻译区长208bp,开放阅读框长1 245bp,编码414个氨基酸。该... 采用RT-PCR和RACE法克隆了刺五加鲨烯合酶基因2(squalene synthase gene 2,SS2)cDNA的全长序列(GenBank登录号:JN714465)。该序列全长1 463bp,其中5’端非翻译区长10bp,3’端非翻译区长208bp,开放阅读框长1 245bp,编码414个氨基酸。该蛋白具有1个Trans_IPPS_HH保守区域、2个鲨烯合酶和八氢番茄红素合成酶特异性识别区域及2个跨膜区。氨基酸序列比对结果表明,该蛋白与五加科其它植物SS的一致性均大于90%,与刺五加SS1的一致性为91.79%。 展开更多
关键词 鲨烯合酶基因 刺五加 RT-PCR RACE
下载PDF
甘草鲨烯合成酶基因的分离及植物表达载体的构建 被引量:16
15
作者 卢虹玉 刘敬梅 +1 位作者 阳文龙 高山林 《药物生物技术》 CAS CSCD 2007年第4期255-258,共4页
采用RT-PCR技术从乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis)中克隆甘草鲨烯合成酶(Squalene Syn-thase,SS)基因,并通过酶切连接的方法构建相关植物表达载体。结果表明,两个SS基因编码区长分别为1242bp、1239bp,分别编码412、413个氨基酸残基... 采用RT-PCR技术从乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis)中克隆甘草鲨烯合成酶(Squalene Syn-thase,SS)基因,并通过酶切连接的方法构建相关植物表达载体。结果表明,两个SS基因编码区长分别为1242bp、1239bp,分别编码412、413个氨基酸残基的多肽,与Hayashi等报道的光果甘草两个SS基因(GgSQS1和GgSQS2)同源性高达98%,分别命名为GuSQS1和GuSQS2(GenBank登录号分别为:AM182329,AM182330);植物表达载体构建的鉴定结果表明,已将GuSQS1和GuSQS2序列分别正向插入到双T-DNA表达载体中的CaMV 35S启动子和NOS终止子之间,重组质粒分别命名为130/35S-GuSQS1和130/35S-GuSQS2,为今后的次生代谢基因工程研究奠定基础。 展开更多
关键词 乌拉尔甘草 甘草酸 鲨烯合成酶 基因克隆 双T-DNA表达载体
下载PDF
基于转录组测序黑老虎角鲨烯合酶基因克隆和生物信息学分析 被引量:5
16
作者 王丽君 李艳青 +4 位作者 谢舒平 石雨荷 朱敏 童巧珍 段礼新 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期870-878,共9页
目的研究黑老虎[Kadsura coccinea(Lem.)A. C. Smith]转录组特征,克隆三萜生物合成上游途径的关键酶基因角鲨烯合酶(KcSQS),为黑老虎资源利用奠定基础。方法对黑老虎不同部位进行转录组测序分析,根据筛选出的KcSQS候选基因序列设计引物... 目的研究黑老虎[Kadsura coccinea(Lem.)A. C. Smith]转录组特征,克隆三萜生物合成上游途径的关键酶基因角鲨烯合酶(KcSQS),为黑老虎资源利用奠定基础。方法对黑老虎不同部位进行转录组测序分析,根据筛选出的KcSQS候选基因序列设计引物,利用PCR技术进行基因克隆,并借助生物学软件进行生物信息学分析。结果克隆得到一个KcSQS基因,包含全长1 227 bp的开放阅读框(ORF),编码408个氨基酸,预测其蛋白分子量为46.65 kD,定位于细胞质膜,含一段跨膜超螺旋结构。该基因在黑老虎叶片中表达量最高,与同科植物厚朴(Magnolia officinalis Rehd. et Wils.)角鲨烯合酶(MoSQS)蛋白序列相似性为76.77%,预测为角鲨烯合酶。结论该研究对黑老虎植物根、茎和叶进行转录组测序,成功克隆了角鲨烯合酶基因,并对其进行生物信息学分析,可为进一步研究黑老虎三萜类化合物的生物合成提供依据。 展开更多
关键词 黑老虎 角鲨烯合酶 转录组测序 基因克隆
下载PDF
青蒿鲨烯合酶基因打靶研究 被引量:1
17
作者 冯丽玲 杨瑞仪 +1 位作者 杨雪芹 曾庆平 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1857-1861,共5页
目的通过代谢途径工程调整代谢流向,试图增大转基因青蒿Artemisia annua植株中的青蒿素产量。方法利用青蒿鲨烯合酶(SS)基因、绿色荧光蛋白(GFP)基因和胞嘧啶脱氨酶(CodA)基因构建基因打靶载体,并通过冻融法将载体导入根癌农杆菌Agrobac... 目的通过代谢途径工程调整代谢流向,试图增大转基因青蒿Artemisia annua植株中的青蒿素产量。方法利用青蒿鲨烯合酶(SS)基因、绿色荧光蛋白(GFP)基因和胞嘧啶脱氨酶(CodA)基因构建基因打靶载体,并通过冻融法将载体导入根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens。以叶盘法转化青蒿,采用"分段选择法"筛选转基因再生植株。结果对表达GFP基因后发出绿色荧光的转基因植株,采用PCR及PCR产物杂交法,在1棵转基因植株中检测到外源GFP基因,而未检测到内源SS基因。初步证据显示,在转基因青蒿植株中,突变型SS基因已取代野生型SS基因。结论青蒿鲨烯合酶基因打靶已取得初步成功。 展开更多
关键词 青蒿 鲨烯合酶 基因打靶 基因敲除
下载PDF
竹节人参角鲨烯合成酶基因的克隆与生物信息学分析 被引量:3
18
作者 黄志伟 郑亚凤 +1 位作者 许明 郑金贵 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第1期216-218,共3页
人参(Panax ginseng C.A.Mey.)属于五加科(Araliaceae)人参属(Panax)植物,是传统的名贵中药材,人参属的所有植物均具有较高的药用价值,其主要活性成分是皂苷[1-2]。人参根的总皂苷含量为2%~7%,而竹节人参(Panax japoni... 人参(Panax ginseng C.A.Mey.)属于五加科(Araliaceae)人参属(Panax)植物,是传统的名贵中药材,人参属的所有植物均具有较高的药用价值,其主要活性成分是皂苷[1-2]。人参根的总皂苷含量为2%~7%,而竹节人参(Panax japonicus C.A.Mey.)根的总皂苷含量高达15%以上,约为前者的2—7倍、西洋参的3倍,是总皂苷含量最高的人参属植物[2-3]。。 展开更多
关键词 竹节人参 人参皂苷 角鲨烯合成酶 基因克隆 序列分析
下载PDF
啤酒酵母鲨烯合酶基因的克隆及其基因表达载体的构建 被引量:3
19
作者 冯丽玲 卢文婕 曾庆平 《广州中医药大学学报》 CAS 2009年第4期394-397,共4页
【目的】克隆啤酒酵母鲨烯合酶基因及构建其基因表达载体,为在微生物体内重建青蒿素合成途径打下基础。【方法】采用聚合酶链反应(PCR)扩增、扩增片段与T-载体连接和克隆片段的序列分析;酶切并回收目的基因,反向插入酵母表达载体pGAPZ... 【目的】克隆啤酒酵母鲨烯合酶基因及构建其基因表达载体,为在微生物体内重建青蒿素合成途径打下基础。【方法】采用聚合酶链反应(PCR)扩增、扩增片段与T-载体连接和克隆片段的序列分析;酶切并回收目的基因,反向插入酵母表达载体pGAPZαA,双酶切鉴定重组子。【结果】通过PCR扩增获得1 335 bp片段,克隆后经PCR和酶切反应进行了鉴定。初步测序结果与GenBank上已登录的酵母鲨烯合酶基因序列基本吻合,相差仅数个碱基对;将此片段反向插入酵母表达载体pGAPZαA,构建了反义酵母表达载体,并通过双酶切加以鉴定。【结论】成功克隆了啤酒酵母鲨烯合酶基因并进行了测序,同时构建了反义酵母表达载体。 展开更多
关键词 啤酒酵母 鲨烯合酶基因 基因复制 反义酵母表达载体
下载PDF
佛手瓜鲨烯合酶基因克隆及酶分子结构分析 被引量:3
20
作者 苏何玲 肖雅伦 +4 位作者 谭燕莲 梁斌 谷云艳 刘永明 吴耀生 《安徽农业科学》 CAS 2016年第32期142-146,共5页
[目的]克隆佛手瓜鲨烯合酶(SQS)基因,并基于克隆的SQS序列分析该酶的分子结构,为佛手瓜生物活性成分的利用提供理论依据。[方法]根据SQS基因5'末端保守序列和3'race方法扩增的佛手瓜SQS基因3'末端序列设计佛手瓜SQS基因克... [目的]克隆佛手瓜鲨烯合酶(SQS)基因,并基于克隆的SQS序列分析该酶的分子结构,为佛手瓜生物活性成分的利用提供理论依据。[方法]根据SQS基因5'末端保守序列和3'race方法扩增的佛手瓜SQS基因3'末端序列设计佛手瓜SQS基因克隆引物。扩增的佛手瓜SQS基因片段插入p GEM-T Easy Vector后经DNA测序。应用生物信息学方法分析克隆序列的开放阅读框架(ORF)、酶蛋白的疏水性/亲水性和蛋白质磷酸化位点,预测酶蛋白的二级结构、结构域、三级结构和跨膜区。以布朗葡萄藻为outgroup,应用MEGA 5.0进行UPGMA算法构建系统树,并进行1 000次的Bootstrap测试。[结果]佛手瓜SQS由417氨基酸残基构成,等电点为6.983。构象预测提示该酶二级结构以α螺旋为主,是一种只有三级结构的单体酶,其活性中心是主要由几个α螺旋围绕形成的穴状结构,酶蛋白肽链中具有1个跨膜区。结构域分析表明SQS属于异戊二烯合酶家族。磷酸化位点分析显示该酶共有17个磷酸化位点,其中,S48位于与酶活性中心相关模体中,而S196为陆生植物SQS基因的正选择位点。以佛手瓜SQS基因ORF序列构建系统发生树得到的系统发生分类结果与形态学分类结果一致。[结论]佛手瓜SQS是由417氨基酸残基构成的单体酶,具有1个跨膜区和17个磷酸化位点,其中,S48和S196可能是佛手瓜SQS酶活性调节的关键性磷酸化位点。 展开更多
关键词 佛手瓜 鲨烯合酶 基因克隆 结构分析
下载PDF
上一页 1 2 3 下一页 到第
使用帮助 返回顶部