脑胶质瘤中凋亡抑制生存基因和细胞周期蛋白b1的表达及临床意义

目的探讨凋亡抑制生存基因（survivin）在人脑胶质瘤中的表达及其与细胞周期蛋白（cyclin）b1蛋白表达的相关性。方法采用免疫组织化学SABC法检测survivin、cyclin b1表达蛋白在41例胶质瘤和10例正常脑组织中的表达。结果survivin基因表达蛋白在正常脑组织中无表达;41例胶质瘤中25例呈阳性表达,占61.0%。病理分级Ⅰ~Ⅱ级和Ⅲ~Ⅳ级间的表达差异有统计学意义（P〈0.05）。胶质瘤组织survivin蛋白的表达与cyclin b1蛋白表达密切相关（rs=0.836,P〈0.01）。结论 survivin蛋白异常表达在胶质瘤的发生中起重要作用,它可能与cyclin b1共同在胶质瘤细胞有丝分裂的G2/M期中起特殊促进作用。

3种不同survivin基因启动子驱动Apoptin表达的重组慢病毒构建及体外抑瘤效果比较

目的构建3种不同长度的survivin基因启动子融合6×his标签Apoptin cDNA的重组慢病毒载体,经鉴定后行慢病毒包装并感染人结直肠癌细胞(SW480),体外实验观察并比较抑瘤效果。方法克隆3种不同长度的人survivin基因启动子(160、270、987 bp)和Apoptin-6×his cDNA,将其分别连接到pMD18-T载体并在该载体上完成survivin基因启动子和Apoptin基因组装。将组装好的表达盒构建入polyA改造后的慢病毒载体FG12中,利用三质粒包装系统包装成慢病毒。为观察重组慢病毒的抑瘤效果,以最适MOI值感染SW480肿瘤细胞后第5天及第30天,利用AnnexinV-PE/7-AAD凋亡试剂盒和流式细胞术检测细胞凋亡和周期变化,Western blot检测Apoptin-6×his表达。结果成功构建3种重组慢病毒载体,经包装浓缩后获得高滴度病毒,可以有效地感染目的细胞(感染效率大于80%)。体外结果提示病毒感染的SW480可以正确表达Apoptin-6×his蛋白,并能在感染后第30天出现明显的凋亡/坏死。其中,含有270 bp启动子的慢病毒抑瘤作用更为明显。结论采用270 bp survivin启动子,apoptin基因构建的重组慢病毒在靶细胞中显示出较好的抑瘤效果。

Survivin基因与人类肿瘤

Survivin是一种新的凋亡抑制蛋白 ,在正常成人组织的表达仅见于胸腺和生殖腺 ,而在多数人类肿瘤细胞中高表达 .对Survivin基因在人类肿瘤的早期诊断。

Survivin基因在脐血CD_(34)^+干/祖细胞中的表达及意义

目的 探讨Survivin基因在人脐血CD34 +干 /祖细胞中的表达及意义。方法 采用链霉亲和素 生物素 过氧化酶 (SABC)技术和RT PCR技术对人脐血CD34 +细胞中Survivin蛋白及mRNA进行了检测。结果 Survivin基因在新鲜脐血CD34 +细胞中有表达 ,蛋白表达率为 9.4± 1.2 ,SurvivinmRNA为弱阳性。在体外培养过程中 ,造血生长因子可上调Survivin基因的表达 ,其中以SCF、FL、Tpo组合作用最显著 ,体外培养 3d后 ,Survivin蛋白表达率为 2 5 .2± 5 .3 ,SurvivinmRNA表达增强 ,去除细胞因子后 2 4hSurvivin表达下降。结论 Survivin基因不是癌细胞特异性抗凋亡蛋白 ,在正常人造血干 /祖细胞中有表达 ,对正常人造血过程有调节作用。

丙型肝炎病毒NS3蛋白对QSG7701细胞survivin的影响

目的观察丙型肝炎病毒NS3蛋白对QSG7701细胞survivin的影响及其与细胞凋亡的关系，以探讨HCVNS3蛋白是否通过调节survivin的表达来参与对细胞凋亡的调控，进而参与HCV相关性肝癌的发生。方法采用Western blot、免疫细胞化学检测血清饥饿前后细胞survivin蛋白表达的变化，采用TUNEL法检测血清饥饿前后细胞凋亡的变化。结果HCVNS3蛋白促进QSG7701细胞survivin的表达，血清饥饿诱导凋亡后，survivin表达降低，HCV NS3蛋白亦表现出促进survivin表达的作用，效果呈浓度依赖性和时间依赖性。经血清饥饿诱导凋亡后，HCV NS3蛋白抑制凋亡。结论HCV NS3蛋白可能通过促进QSG7701细胞survivin的表达从而抑制细胞凋亡，对HCV相关性肝癌的形成有一定作用。