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Assessment of the inhibitory effects of sodium nitrite, nisin, potassium sorbate, and sodium lactate on Staphylococcus aureus growth and staphylococcal enterotoxin A production in cooked pork sausage using a predictive growth model 被引量:1
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作者 Lu Lin Jie Yun Hu +3 位作者 Yi Wu Min Chen Jie Ou Wei Ling Yan 《Food Science and Human Wellness》 SCIE 2018年第1期83-90,共8页
This study was conducted to analyze the effects of sodium nitrite,nisin,potassium sorbate,and sodium lactate against Staphylococcus aureus(S.aureus)growth and staphylococcal enterotoxins(SEs)production in cooked pork ... This study was conducted to analyze the effects of sodium nitrite,nisin,potassium sorbate,and sodium lactate against Staphylococcus aureus(S.aureus)growth and staphylococcal enterotoxins(SEs)production in cooked pork sausage by inoculating sausage samples containing preservative with an S.aureus strain producing staphylococcal enterotoxin A(SEA)and then storing them at 37℃ for 36 h.Samples were analyzed every 3 h to count the S.aureus colonies and to detect SEA.The modified Gompertz model was used to describe S.aureus growth in the samples under various conditions,and the preservatives with a significant antimicrobial effect were selected.In addition,the antimicrobial effects of the selected preservatives under various concentrations were tested.Results showed that sodium nitrite,nisin,and potassium sorbate had a weak effect against S.aureus growth and had no effect against SEA production,whereas sodium lactate could significantly inhibit S.aureus growth and SEA production.Moreover,the antimicrobial effect of sodium lactate was concentration-dependent,wherein sodium lactate concentration<12 g/kg showed no inhibitory effect,but when the concentration was increased to 24 g/kg,sodium lactate could effectively inhibit S.aureus growth and SEA production,and at 48 g/kg,sodium lactate had a significant inhibitory effect. 展开更多
关键词 staphylococcus aureus staphylococcal enterotoxin A Cooked pork sausage PRESERVATIVE Sodium lactate
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Effect and Mechanism of Superantigen Staphylococcal Enterotoxin Therapy for Mouse Gastric Tumor
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作者 李毅清 舒晓钢 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2003年第2期161-162,共2页
The anti-tumor effect and mechanism of the staphylococcal enterotoxin A (SEA) were studied. The mouse gastric tumor model was produced by subcutaneously inoculating gastric tumor ceils (MGC80-3). The experimental grou... The anti-tumor effect and mechanism of the staphylococcal enterotoxin A (SEA) were studied. The mouse gastric tumor model was produced by subcutaneously inoculating gastric tumor ceils (MGC80-3). The experimental group was treated with SEA, and the control group was treated with normal saline. The percentage of tumor generation and tumor mass was measured. The results showed that the percentage of the tumor generation in the SEA-treated mice was lower than in the control group, but there was no significant difference (P>0. 05). However, the tumor mass in the experimental group was significantly lighter than in the control group, with the difference being very significant (P<0. 001). There were more CD4+ T cells and CD8+ T cells in the tumor of the mice treated with SEA than those of the control group. SEA has an obvious anti-tumor effect on mice gastric tumor. The mechanism might be that SEA induces the effect of superantigen-dependent cell mediated cytotoxicity to the tumor cells. 展开更多
关键词 SUPERANTIGEN staphylococcal enterotoxin A gastric tumor
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THE EFFECT OF SUPERANTIGEN STAPHYLOCOCCALENTEROTOXIN B AND D-GALACTOSAMINE ON BALB/CMOUSE HEPATOCYTES
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作者 印彤 童善庆 +2 位作者 朱佑明 陆德源 谢玉才 《Medical Bulletin of Shanghai Jiaotong University》 CAS 1999年第1期29-32,59,共5页
Objective To observe the role of superantigen staphylococcal enterotoxin B(SEB) andD - galactosamine (D - GalN) on Balb/c mouse hepatocytes and its mechanism. Methods After Balb/c mice wereinjected intraperitoneally w... Objective To observe the role of superantigen staphylococcal enterotoxin B(SEB) andD - galactosamine (D - GalN) on Balb/c mouse hepatocytes and its mechanism. Methods After Balb/c mice wereinjected intraperitoneally with SEB, D- GalN or both, blood samples were collected and livers were removed at 2,6, 12, 24h. Patterns of hepatocellular death were studied morphologically and biochemically, circulating cytokines(TNF, IFN-γ) were determined, and mice mortality within 24h was assessed. Results SEB could induce thetypical apoptotic changes of hepatocytes morphologically and biochemically. The mechanism is probably associatedwith the production and release of Cytokines (such as TNF, IFN- γ, etc).D - GalN could induce hepatocytesapoptosis and degeneration at the same time. Besides this, we confirmed hepatocytes of the mice which wereadministered SEB and D - GalN developing apoptosis at 2, 6h, but after 12h hepatocytes were characterized bysevere injury, the mice mortality within 24h is 50%. Conclusion SEB or D - GalN alone could induce the typicalapoptotic changes of hepatocytes. SEB+D-GalN developed hepatocytes apoptosis in the early stage and necrosisin the later. It suggests that there is some relationship between hepatic cell apoptosis and necrosis, and massivehepatocyte apoptosis is the probably initiating step of acute hepatic necrosis in mice. 展开更多
关键词 SUPERANTIGEN staphylococcal enterotoxin B D - GALACTOSAMINE apoptosisacute hepatic necrosis
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The Akt Pathway Inhibitor Degeulin Prevents Staphylococcal Enterotoxin B Induced Splenocyte Proliferation and Inflammation
4
作者 Sarah Joanne Christine Whitfield Jane Elizabeth Risdall +2 位作者 Gareth Griffiths Ethel Diane Williamson Alun James Carter 《Advances in Bioscience and Biotechnology》 2017年第1期1-12,共12页
Staphylococcal Enterotoxin B (SEB) is considered a potential biological weapon. It is toxic by both inhalation and ingestion. Effects of ingestion include fever, vomiting and diarrhoea, while inhalation may additional... Staphylococcal Enterotoxin B (SEB) is considered a potential biological weapon. It is toxic by both inhalation and ingestion. Effects of ingestion include fever, vomiting and diarrhoea, while inhalation may additionally result in chest pain, dyspnoea, pulmonary oedema and respiratory failure. Severe exposure may be fatal and treatment relies on symptomatic support. At a cellular level, SEB up-regulates T-cell proliferation leading to a pathological inflammatory response. Deguelin, a rotenoid isolated from the African plant Mundulea sericea (Leguminosae), has been shown to reduce cellular proliferation by inhibiting the phosphoinositide 3-kinase/Akt (PI3K/Akt) signalling pathway. Using isolated murine splenocytes, we have demonstrated that treatment with deguelin reduces SEB inducing T cell proliferation by 60%. Deguelin treatment also decreased IL-2 and CCL2 secretion by splenocytes exposed to SEB. We demonstrate that targeting cellular proliferation can significantly reduce inflammation after SEB exposure and suggest that anti-proliferatives may have a role as potential generic medical counter measures if superantigens are used as biological weapons. 展开更多
关键词 staphylococcal enterotoxin B DEGUELIN Therapy INFLAMMATION Biological WEAPON
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A non-viral gene therapy for melanoma by staphylococcal enterotoxin A
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作者 Ling Yang Min Ren +7 位作者 Jie Wang Liming He Shanshan Wu Shuai Yang Wei Zhao Hao Cheng Xiaoming Zhou Maling Gou 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2024年第5期325-329,共5页
Staphylococcal enterotoxin A(SEA)derived from Staphylococcus aureus,as a superantigen,shows potential for cancer immunotherapy,but systemic immunotoxicity restricts its clinical application.Targeted delivery of SEA to... Staphylococcal enterotoxin A(SEA)derived from Staphylococcus aureus,as a superantigen,shows potential for cancer immunotherapy,but systemic immunotoxicity restricts its clinical application.Targeted delivery of SEA to tumor site provides a promising option for reducing the systemic toxicity.Here,we constructed an iRGD peptide(H-[Cys-Arg-Gly-Asp-Lys-Gly-Pro-Asp-Cys]-NH_(2))modified nanoparticle(iDPP)to deliver plasmids encoding SEA for melanoma treatment.The iDPP/SEA nanocomplexes efficiently mediated SEA expression in B16-F10 cells in vivo and in vitro and induced the activation of lymphocytes and maturation of murine bone marrow-derived dendritic cells(BMDCs)in vitro.In the subcutaneous B16-F10 melanoma model,the iDPP/SEA nanocomplexes could effectively enhance immune response and T lymphocytes infiltration in tumor site after intravenous administration,thereby considerably decreased melanoma growth.Meanwhile,no obvious adverse effect was observed after intravenous administration of the iDPP/SEA nanocomplexes in vivo.Our findings demonstrated that gene therapy of SEA is a potential candidate for melanoma treatment. 展开更多
关键词 Gene therapy SUPERANTIGEN MELANOMA staphylococcal enterotoxins A Immunotherapyene therapy
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Predictive Modeling for Growth and Enterotoxin Production of Staphylococcus aureus in Milk 被引量:1
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作者 Dang Fang-fang Jiang Yu-jun +7 位作者 Pan Rui-li Zhuang Ke-jin Wang Hui Sun Lu-hong Wang Rui Zhao Feng Li Tie-jing Man Chao-xin 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2018年第3期81-89,共9页
Predictive microbiology was utilized to model Staphylococcus aureus (S. aureus) growth and staphylococcal enterotoxin A (SEA) production in milk in this study. The modifed logistic model, modifed Gompertz model an... Predictive microbiology was utilized to model Staphylococcus aureus (S. aureus) growth and staphylococcal enterotoxin A (SEA) production in milk in this study. The modifed logistic model, modifed Gompertz model and Baranyi model were applied to model growth data of S. aureus between 15℃ and 37℃. Model comparisons indicated that Baranyi model described the growth data more accurately than two others with a mean square error of 0.0129. Growth rates generated from Baranyi model matched the observed ones with a bias factor of 0.999 and an accuracy factor of 1.01, and ft a square root model with respect to temperature; other two modifed models both overestimated the observed ones. SEA amount began to be detected when the cell number reached106.4 cfu ? mL-1, and showed the linear correlation with time. Besides, the rate of SEA production ftted an exponential relationship as a function of temperature. Predictions based on the study could be applied to indicate possible growth of S. aureus and prevent the occurrence of staphylococcal food poisoning. 展开更多
关键词 staphylococcus aureus staphylococcal enterotoxin A MILK predictive model
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基于荧光生物传感技术检测牛奶中金黄色葡萄球菌肠毒素B 被引量:1
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作者 王美玲 胡婷 +3 位作者 李昌哲 周焕英 高志贤 罗鹏 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第1期57-64,共8页
目的利用纳米金粒子(gold nanoparticles,AuNPs)荧光猝灭性能和核酸适配体的高亲和力,构建一种简便、灵敏的纳米金“Turn-on”型荧光生物传感方法检测牛奶中金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxins B,SEB)的方法。方法以Au... 目的利用纳米金粒子(gold nanoparticles,AuNPs)荧光猝灭性能和核酸适配体的高亲和力,构建一种简便、灵敏的纳米金“Turn-on”型荧光生物传感方法检测牛奶中金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxins B,SEB)的方法。方法以AuNPs作为荧光体的能量受体(猝灭剂),荧光素-单链DNA(fluorescein-ssDNA,FAM-ssDNA)作为荧光能量供体,冷冻法制备AuNPs-SEB适配体复合物,基于AuNPsSEB适配体复合物/SEB/FAM-ssDNA的竞争性结合,构建纳米金“Turn-on”型荧光生物传感检测方法。对缓冲体系pH和反应时间等条件进行优化,以牛奶为代表对方法检测性能进行验证。结果在优化好的实验条件(pH 7.5、反应时间15 min和反应温度25℃)下,在10^(-1)~10^(4)ng/mL范围内,荧光强度与SEB质量浓度之间呈现良好的线性关系,其相关系数为0.995,检出限为0.062 ng/mL。应用于牛奶样品中SEB的测定,方法回收率为91.2%~108.0%,相对标准偏差在2.6%~5.2%范围之间。结论该纳米金“Turn-on”型荧光生物传感检测技术具有简便、灵敏和准确等优点,可为食品中污染物的检测提供一种可行的新方法。 展开更多
关键词 纳米金粒子 核酸适配体 荧光生物传感 金黄色葡萄球菌肠毒素B 牛奶
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超抗原SEA的基因克隆、原核表达与鉴定 被引量:7
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作者 叶菁 隋延仿 +3 位作者 李增山 陈广生 张秀敏 曹云新 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期418-420,共3页
目的 构建pRSET SEA重组表达载体 ,转化大肠杆菌BL2 1 (DE3)pLysS ,诱导表达超抗原葡萄球菌肠毒素A(staphylococcalenterotoxinA ,SEA) ,进行分离、纯化及westernblot鉴定。方法 采用PCR技术 ,从产SEA的葡萄球菌标准菌株FRI1 0 0基因... 目的 构建pRSET SEA重组表达载体 ,转化大肠杆菌BL2 1 (DE3)pLysS ,诱导表达超抗原葡萄球菌肠毒素A(staphylococcalenterotoxinA ,SEA) ,进行分离、纯化及westernblot鉴定。方法 采用PCR技术 ,从产SEA的葡萄球菌标准菌株FRI1 0 0基因组DNA中获得SEA全长序列 ,克隆入pUC1 9中 ,进行测序 ,构建pRSET SEA表达质粒 ,转化大肠杆菌BL2 1 (DE3)pLysS ,通过异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (isopropyl beta D thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达 ,分离、纯化及westernblot鉴定。结果 PCR获得超抗原SEA基因片段 ,DNA测序结果与文献报道一致 ;构建了pRSET SEA表达质粒 ,并成功地诱导表达出32 0 0 0u的蛋白 ;Westernblot鉴定所得蛋白能够与SEA单克隆抗体特异性结合。结论 本研究成功地克隆了SEA全长 ,并进行了原核表达和分离、纯化 ,获得了SEA蛋白。 展开更多
关键词 葡萄球菌肠毒素A 超抗原 原核表达 PCR 鉴定
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人CD80-Linker-SEA重组毒素的设计及生物学特性预测 被引量:5
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作者 李增山 隋延仿 +2 位作者 姜永强 雷祚荣 尚继栋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期10-12,共3页
目的 :构建人重组CD80 Linker SEA毒素的真核表达载体并预测Linker的合理性和可行性。方法 :应用核酸和蛋白质序列分析软件GolgKey对融合基因及Linker部位翻译后在二级结构水平上的一些生物学特性 ,诸如柔性、抗原性、亲水性及表位等... 目的 :构建人重组CD80 Linker SEA毒素的真核表达载体并预测Linker的合理性和可行性。方法 :应用核酸和蛋白质序列分析软件GolgKey对融合基因及Linker部位翻译后在二级结构水平上的一些生物学特性 ,诸如柔性、抗原性、亲水性及表位等加以预测。结果 :CD80 Linker SEA融合基因的氨基酸序列经软件分析 ,并分别与CD80和SEA单独的分析结果相比较 ,发现在二级结构的水平未出现新的抗原性 ,同时在Linker部位具有很低的抗原性 ,亲水性没有改变 ,Linker部位呈中性 ,CD80和SEA具有原来各自的表位特征 ,无新的表位出现。结论 :本研究通过计算机软件对CD80 Linker SEA融合蛋白的预测 ,并与CD80、SEA各加以对比分析和比较 ,以利于在重组过程中有一个合理的设计 。 展开更多
关键词 CD80-Linker-sea重组毒素 生物学特性 计算机模
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超抗原SEA联合PML-RARα对外周血T细胞TCR Vβ亚家族基因表达的影响 被引量:6
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作者 林晨 高珂 +3 位作者 白雪 陈少华 杨力建 李扬秋 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期530-533,共4页
目的探讨超抗原SEA联合PML-RARα多肽对外周血T细胞TCR Vβ亚家族基因表达的影响。方法分别将SEA、PML-RARα多肽以及SEA联合PML-RARα多肽与正常人外周血单个核细胞共同培养,20d后收集增殖细胞,利用RT-PCR及基因扫描技术分析诱导后增殖... 目的探讨超抗原SEA联合PML-RARα多肽对外周血T细胞TCR Vβ亚家族基因表达的影响。方法分别将SEA、PML-RARα多肽以及SEA联合PML-RARα多肽与正常人外周血单个核细胞共同培养,20d后收集增殖细胞,利用RT-PCR及基因扫描技术分析诱导后增殖T细胞TCRVβ亚家族的利用和克隆性增殖的特点。结果单纯SEA诱导后,T细胞表达了11个TCR Vβ亚家族,且仍为多克隆增殖。单纯PML-RARα多肽诱导后,T细胞限制性表达8个Vβ亚家族,其中Vβ13、Vβ14表现出寡克隆或寡克隆趋势。PML-RARα多肽联合SEA共同诱导,其T细胞表达TCR Vβ亚家族依然呈明显的限制性,且Vβ13、Vβ14亚家族呈寡克隆、双克隆及寡克隆趋势。结论SEA能协同PML-RARα多肽诱导的T细胞克隆性活化与增殖。 展开更多
关键词 超抗原sea PML-RARΑ 细胞受体 克隆性
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BCR/ABL和SEA双基因重组载体的构建和表达 被引量:2
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作者 田红霞 林晨 +4 位作者 查显丰 周羽竝 黄欣 高永鹏 李扬秋 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期336-340,共5页
目的:构建和表达含BCR/ABL融合基因和葡萄球菌肠毒素A(SEA)的真核双表达质粒。方法:利用RT-PCR技术从K562细胞中扩增出含BCR/ABL融合位点基因片段,提取金黄色葡萄球菌基因组DNA扩增出SEA基因,分别将两基因片段连在pIRES载体的多克隆位点... 目的:构建和表达含BCR/ABL融合基因和葡萄球菌肠毒素A(SEA)的真核双表达质粒。方法:利用RT-PCR技术从K562细胞中扩增出含BCR/ABL融合位点基因片段,提取金黄色葡萄球菌基因组DNA扩增出SEA基因,分别将两基因片段连在pIRES载体的多克隆位点A和B上,构建BCR/ABL-pIRES-SEA、SEA-pIRES-BCR/ABL重组质粒。将重组质粒转染K293细胞,RT-PCR鉴定重组质粒在真核细胞的转录情况,SDS-PAGE电泳鉴定目的蛋白在真核细胞的表达。结果:成功扩增出BCR/ABL和SEA基因片段;双酶切鉴定BCR/ABL-pIRES-SEA、SEA-pIRES-BCR/ABL重组质粒中含有BCR/ABL和SEA基因,测序证实完全正确;将重组质粒转染K293细胞后,经RT-PCR扩增鉴定,插入到重组质粒的BCR/ABL和SEA基因能在真核细胞正常转录,经SDS-PAGE电泳鉴定重组质粒能够在真核细胞中表达BCR/ABL和SEA蛋白。结论:成功构建BCR/ABL-pIRES-SEA、SEA-pIRES-BCR/ABL真核双表达质粒,可在真核细胞中正常转录并表达BCR/ABL和SEA蛋白。 展开更多
关键词 BCR/ABL融合基因 金黄色葡萄球菌肠毒素A 慢性粒细胞白血病 DNA疫苗
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超抗原SEA对K562细胞诱导脐带血单个核细胞上CD3ε链表达的影响 被引量:2
12
作者 田红霞 高永鹏 +3 位作者 林晨 陈少华 杨力建 李扬秋 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1175-1177,1181,共4页
目的:探讨金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)对K562细胞诱导正常人脐带血单个核细胞(MNCs)中CD3ε链基因表达的影响。方法:常规分离4例脐带血单个核细胞,分别与抗CD3单克隆抗体(mAb)、单纯K562细胞、单纯SEA以及SEA联合K562细胞共培养,诱导MNC... 目的:探讨金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)对K562细胞诱导正常人脐带血单个核细胞(MNCs)中CD3ε链基因表达的影响。方法:常规分离4例脐带血单个核细胞,分别与抗CD3单克隆抗体(mAb)、单纯K562细胞、单纯SEA以及SEA联合K562细胞共培养,诱导MNCs活化增殖,并设空白对照组。刺激培养48 h后,收集各组细胞提取mRNA并合成cDNA,以β2微球蛋白基因作为内参照,采用实时荧光定量PCR检测在各组MNCs中CD3ε链基因的表达,并根据公式2-△△C t对CD3ε链表达的差异倍数进行相对定量分析。结果:K562细胞组MNCs中CD3ε链基因表达的水平略有降低,抗CD3 mAb组、SEA组、SEA联合K562细胞组的诱导活化的MNCs中CD3ε链基因的表达均有增强,而SEA联合K562细胞组MNCs中CD3ε链基因的表达明显高于单纯SEA组(P<0.01)。结论:超抗原SEA可以增加K562细胞在体外诱导脐带血MNCs中CD3ε链基因的表达。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌肠毒素A(sea) CD3ε链 K562细胞 脐带血单个核细胞 实时定量PCR
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小鼠TERT启动子调控的CD80-SEA基因重组腺病毒载体的构建及在肝癌细胞中的表达鉴定 被引量:1
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作者 司少艳 宋淑军 +5 位作者 徐冰心 赵刚 谭小青 刘俊丽 张建中 刘志国 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期717-720,共4页
目的:构建小鼠端粒酶反转录酶(mTERT)启动子调控的葡萄球菌肠毒素A(SEA)和CD80基因共表达重组腺病毒载体,并观察其介导的SEA和CD80在小鼠肝癌细胞Hepa1-6中的表达情况。方法:采用AdEasy腺病毒体系,亚克隆mTERT核心启动子区至穿梭质粒pSh... 目的:构建小鼠端粒酶反转录酶(mTERT)启动子调控的葡萄球菌肠毒素A(SEA)和CD80基因共表达重组腺病毒载体,并观察其介导的SEA和CD80在小鼠肝癌细胞Hepa1-6中的表达情况。方法:采用AdEasy腺病毒体系,亚克隆mTERT核心启动子区至穿梭质粒pShuttle2,并在其上游插入myc-Max反应元件MMRE,用来调控SEA及CD80基因的表达,构建SEA和CD80基因共表达重组腺病毒载体Ad-MMRE-mTERT-BIS,制备病毒并纯化,然后将病毒以感染复数为100的浓度分别感染肝癌细胞系Hepa1-6和成纤维细胞系NIH3T3。采用免疫荧光染色法检测SEA和CD80在细胞膜表面的表达情况。结果:重组腺病毒载体Ad-MMRE-mTERT-BIS感染的Hepa1-6肝癌细胞膜上能够共表达SEA和CD80;而病毒感染的NIH3T3细胞不能表达SEA和CD80。结论:成功地构建了mTERT启动子调控的SEA和CD80基因共表达重组腺病毒载体,能够调控SEA和CD80基因在肝癌细胞中的靶向表达,为进一步研究肝癌的靶向基因治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 葡萄球菌肠毒素A CD80 端粒酶反转录酶启动子 腺病毒
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BCR-ABL-SEA DNA疫苗诱导BALB/c小鼠的免疫应答 被引量:2
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作者 高永鹏 林晨 +4 位作者 田红霞 陈琛 秦雅楠 周羽竝 李扬秋 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期361-366,共6页
目的:了解BCR-ABL-SEA双表达DNA疫苗诱导BALB/c小鼠特异性细胞和体液免疫应答效应。方法:用已成功构建的重组双表达BCR-ABL多肽和SEA多肽的质粒BCR-ABL-pIRES-SEA(B-P-S)免疫小鼠,间隔14 d共3次。相同方法用单表达BCR-ABL多肽或SEA多肽... 目的:了解BCR-ABL-SEA双表达DNA疫苗诱导BALB/c小鼠特异性细胞和体液免疫应答效应。方法:用已成功构建的重组双表达BCR-ABL多肽和SEA多肽的质粒BCR-ABL-pIRES-SEA(B-P-S)免疫小鼠,间隔14 d共3次。相同方法用单表达BCR-ABL多肽或SEA多肽的质粒BCR-ABL-pIRES和SEA-pIRES免疫小鼠作对照。利用CCK-8比色法检测小鼠脾脏T细胞对K562细胞株的杀伤活性;流式细胞术测定小鼠脾脏CD4+与CD8+T细胞表达情况;ELISA法检测小鼠血清中干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)生成情况;间接免疫荧光法检测血清中抗BCR-ABL抗体。结果:免疫后第7周时,双表达重组质粒B-P-S组小鼠脾脏CTL细胞针对K562杀伤率、血清中INF-γ含量均明显高于单表达BCR-ABL-pIRES组和SEA-pIRES组(P<0.05);CD4+/CD8+T细胞比值、血清中IL-4含量各组之间无明显差异(P>0.05);荧光显微镜检测到血清中有抗BCR-ABL抗体。结论:所构建的BCR-ABL-SEA重组双表达质粒可诱导小鼠产生特异性细胞和体液免疫应答效应。 展开更多
关键词 白血病 基因 BCR—ABL融合 葡萄球菌肠毒素A 疫苗 DNA
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双调控溶瘤腺病毒携带SEA基因靶向鼠膀胱癌的表达 被引量:2
15
作者 陈猛 郝林 +3 位作者 史振铎 张辉 董洋 韩从辉 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2012年第2期166-169,共4页
目的:研究hTERT和HIF启动子双调控的溶瘤腺病毒能否感染鼠膀胱癌细胞并表达治疗基因,为动物实验提供依据。方法:以不同浓度溶瘤腺病毒感染鼠膀胱癌细胞,生物倒置显微镜下动态观察细胞形态变化,RT-PCR检测SEA在细胞内mRNA表达,Western b... 目的:研究hTERT和HIF启动子双调控的溶瘤腺病毒能否感染鼠膀胱癌细胞并表达治疗基因,为动物实验提供依据。方法:以不同浓度溶瘤腺病毒感染鼠膀胱癌细胞,生物倒置显微镜下动态观察细胞形态变化,RT-PCR检测SEA在细胞内mRNA表达,Western blot检测SEA蛋白表达。结果:镜下可见细胞感染腺病毒并最终裂解,RT-PCR和Western blot分别检测到实验组mRNA和蛋白的表达。结论:携带SEA基因的hTERT/HIF双调控溶瘤腺病毒可在鼠膀胱癌细胞内复制增殖并表达SEA基因,可用于治疗鼠膀胱癌的动物实验研究。 展开更多
关键词 溶瘤腺病毒 膀胱癌 金黄色葡萄球菌肠毒素A 人端粒酶逆转录酶 缺氧诱导因子
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肿瘤特异的sea基因真核表达质粒的构建及在肺癌细胞中的功能研究 被引量:1
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作者 朱大冕 陈全 +1 位作者 李奕璇 朱道银 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期109-112,121,共5页
构建Survivin启动子调控的葡萄球菌肠毒素A(SEA)的真核表达质粒,检测其在人肺腺癌A549细胞中的特异性表达以及表达产物的超抗原活性。以PCR法扩增sea基因,以含有Survivin启动子为调控序列的pGL-S-RED质粒为基础,构建pGL-S-SEA真核表达... 构建Survivin启动子调控的葡萄球菌肠毒素A(SEA)的真核表达质粒,检测其在人肺腺癌A549细胞中的特异性表达以及表达产物的超抗原活性。以PCR法扩增sea基因,以含有Survivin启动子为调控序列的pGL-S-RED质粒为基础,构建pGL-S-SEA真核表达质粒。用脂质体转染A549细胞,以RT-PCR法检测sea基因表达水平。制备健康献血者PBMC,用pGL-S-SEA质粒转染A549细胞的上清液和细胞裂解液进行PBMC刺激试验,以MTT法检测其促细胞增殖效应。结果显示,成功构建Survivin启动子调控的真核表达质粒pGL-S-SEA。重组质粒在A549细胞中启动了sea基因的表达,其转录强度为内参(GADPH基因)的65.96%,在对照MRC-5细胞中无明显表达。该质粒转化A549细胞的裂解液具有促进人PBMC增殖活性、上清液无明显促PBMC增殖作用,裂解液组、上清液组和PHA阳性对照组的刺激指数分别为1.29、0.95和1.58。结论成功构建pGL-S-SEA质粒,其在A549细胞的表达产物具有诱导人PBMC增殖的超抗原活性,为下一步将其作为基因疫苗治疗肺癌奠定了基础。 展开更多
关键词 葡萄球菌肠毒素A 肺癌 基因治疗
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SEA为载体蛋白的A/C群脑膜炎奈瑟菌结合物初步免疫效果评价 被引量:1
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作者 王丽婵 谭亚军 +4 位作者 卫辰 张华捷 骆鹏 张庶民 马霄 《微生物学免疫学进展》 2017年第2期29-35,共7页
目的对以金黄色葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)为载体蛋白的A/C群脑膜炎奈瑟菌结合物的免疫效果进行初步评价。方法采用1-氰基-4-二甲氨基-砒啶四氟硼酸(1-cyano-dimethylamino pyridiniumtetrafluoroborate,CDAP)... 目的对以金黄色葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)为载体蛋白的A/C群脑膜炎奈瑟菌结合物的免疫效果进行初步评价。方法采用1-氰基-4-二甲氨基-砒啶四氟硼酸(1-cyano-dimethylamino pyridiniumtetrafluoroborate,CDAP)活化法,将SEA、破伤风类毒素(tetanus toxin,TT)分别与A群脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖(group A N.meningitidis capsular polysaccharide,GAMP)、C群脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖(group C N.meningitidis cap-sular polysaccharide,GCMP)结合制备结合物;将结合物分别免疫BALB/c小鼠,腹部皮下免疫3次,于第1针免后第9天、第19天、第27天眼眶采血,分离血清备用;检测体液免疫及细胞免疫反应水平。结果 SEA与GAMP结合后能增强抗-GAMP Ig G抗体水平,第3次免后GAMP-SEA组多糖抗体水平达到1∶12 800,高于GAMP组1∶400,但GCMP-SEA组结果不理想。SEA与GAMP结合后均能激发细胞免疫反应,IFN-γ和IL-4的SFC与GAMP组比较均升高,且IFN-γ高于IL-4。SEA与GAMP、GCMP结合后Th1/Th2细胞亚群比值分别达到23.48和22.19,高于GAMP组(14.09)和GCMP组(16.73),差异有统计学意义(P<0.05),提示SEA与GAMP、GCMP结合后可激发细胞免疫。结论 SEA与GAMP、GCMP结合后既能增强GAMP、GCMP的免疫原性,提高体液免疫反应,又能激发细胞免疫反应,提示SEA具备作为A/C群脑膜炎奈瑟菌结合疫苗载体蛋白的可行性。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌肠毒素A 破伤风类毒素 载体蛋白 A/C群脑膜炎奈瑟菌 结合物 免疫效果
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SEA对PML-RARα多肽体外诱导外周血单个核细胞TCRζ链表达的作用 被引量:1
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作者 高珂 林晨 +5 位作者 白雪 陈少华 杨力建 陈思 B.N.Selvakumar 李扬秋 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期347-350,共4页
目的:了解金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)联合PML-RARα融合多肽体外诱导正常人外周血T细胞活化TCRζ链基因表达情况。方法:利用T细胞液体培养法分别与正常人外周血淋巴细胞加入PML-RARα融合多肽、SEA和SEA联合PML-RARα多肽诱导培养T细胞... 目的:了解金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)联合PML-RARα融合多肽体外诱导正常人外周血T细胞活化TCRζ链基因表达情况。方法:利用T细胞液体培养法分别与正常人外周血淋巴细胞加入PML-RARα融合多肽、SEA和SEA联合PML-RARα多肽诱导培养T细胞,其中SEA刺激包括培养初始或培养第5天加入SEA两组(PS、PSI),并设空白对照组(不加多肽及SEA)。分别收集各组培养20 d后细胞提取mRNA并合成cDNA,采用SYBR G reenⅠ荧光定量PCR和相对定量检测TCRζ链在不同组别T淋巴细胞中的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,根据相对定量公式:2-△△C t分析TCRζ链表达差异。结果:与空白组相比,联合诱导组在培养初始加入SEA及第5天加入SEA的培养T细胞中TCRζ链表达上升,而单独SEA诱导组的TCRζ链表达下降。结论:超抗原SEA联合PML-RARα多肽体外诱导T细胞可使TCRζ链基因表达水平升高,有望为研制急性早幼粒细胞白血病疫苗提供新的切入点。 展开更多
关键词 T细胞受体ζ链 实时定量PCR 金黄色葡萄球菌肠毒素A T细胞受体 PML-RARα融合多肽
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SEA联合K562细胞体外诱导正常人脐带血单核细胞TCRζ链表达的作用 被引量:1
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作者 高永鹏 林晨 +6 位作者 田红霞 高珂 郜世隽 江振友 陈少华 沈琦 李扬秋 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期154-157,共4页
目的:研究金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)对K562细胞体外诱导脐血T细胞活化TCRζ链基因表达情况。方法:常规分离4例脐带血单核细胞,分别与抗CD3单克隆抗体、单纯K562细胞、SEA以及SEA联合K562细胞共培养,诱导T细胞活化增殖,并设空白对照组... 目的:研究金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)对K562细胞体外诱导脐血T细胞活化TCRζ链基因表达情况。方法:常规分离4例脐带血单核细胞,分别与抗CD3单克隆抗体、单纯K562细胞、SEA以及SEA联合K562细胞共培养,诱导T细胞活化增殖,并设空白对照组。刺激培养48 h后收集各组细胞提取mRNA并合成cD-NA,采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量检测TCRζ链在不同组别T淋巴细胞中的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,根据相对定量公式:2-ΔΔCt计算TCRζ链表达差异倍数。结果:抗CD3单抗组、K562细胞组、SEA组、SEA联合K562细胞组诱导培养T细胞中TCRζ链表达差异倍数分别是(4.52±0.96)、(1.65±0.26)、(1.43±0.44)、(3.41±0.30),表明各组均有活化T细胞的作用,但各组TCRζ链表达水平有差异,其中SEA联合k562细胞组的T细胞ζ链基因表达均明显高于单纯k562组及单纯SEA组(P<0.01)。结论:超抗原SEA有助于增强K562细胞体外诱导T细胞活化作用。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌肠毒素A(sea) 脐带血 T细胞受体ζ链 实时定量PCR BCR-ABL融合蛋白 慢性粒细胞白血病
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单抗靶向超抗原SEA体内抗膀胱肿瘤实验研究
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作者 徐寒子 贡震 +4 位作者 吴王飞 叶劲军 陆谔梅 孙志华 韩从辉 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期32-35,共4页
背景与目的:超抗原葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)在体内、外以及临床的膀胱灌注治疗试验中对膀胱癌均具有明显的抑瘤效应,本研究旨在探讨单抗靶向的超抗原SEA体内对人膀胱癌的抑瘤作用。方法:以腹腔注射人外周血... 背景与目的:超抗原葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)在体内、外以及临床的膀胱灌注治疗试验中对膀胱癌均具有明显的抑瘤效应,本研究旨在探讨单抗靶向的超抗原SEA体内对人膀胱癌的抑瘤作用。方法:以腹腔注射人外周血单个核细胞、皮下注射人膀胱癌BIU87细胞建立人免疫重建荷人膀胱癌SCID小鼠复合模型,再将模型小鼠随机分为对照组、SEA组及单抗靶向SEA实验组,分别予以PBS、SEA及单抗靶向SEA瘤周注射,以SonoSite彩超在建模后6周内检测小鼠皮下移植瘤体积、瘤体血流。结果:单抗靶向SEA组瘤体体积、瘤体血流均小于对照组及SEA组,在建模后4、5、6周差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:单抗靶向的超抗原SEA对膀胱癌皮下移植瘤生长的抑制作用更强,可能与其进一步减少瘤体血流有关。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 超抗原 葡萄球菌类毒素 抗体 单克隆 免疫治疗
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