黄芩不同炮制品黄酮类成分的整合药动学研究

目的:比较黄芩炮制品中8种黄酮类成分在大鼠体内含量的差异,探明黄芩不同炮制品的药动学行为的差异,为其炮制原理的阐明提供科学依据。方法:选取20只SD大鼠随机分为空白组、生黄芩、酒黄芩和黄芩炭4组,每组5只,灌胃给药。以山柰素为内标,采用超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法(UPLC-QQQ-MS/MS)测定不同时间点大鼠血清中黄芩苷、5,7,2′,5′-四羟基-8,6′-二甲氧基黄酮(HQ-6)、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、白杨素、5,6-二羟基-7,8,2′,6′-四甲氧基黄酮(HQ-2)、千层纸素-A等的浓度,利用各成分药-时曲线下面积(AUC_(0→∞))百分比作为自定义权重系数,计算在大鼠体内的综合血药浓度并建立整合药物代谢动力学(药动学)模型,比较黄芩炮制品中黄酮类成分的整合药动学参数的差异。结果:单成分的AUC_(0→∞)差异较大;多成分整合药动力学结果显示,黄芩酒炙后,8种黄酮类成分的滞留时间(MRT_(0→∞))由17.22 h缩短为13.13 h。首次达峰时间(T_(max))由0.50 h缩短为0.25 h,2次(T_(max))由4 h延长为8 h。黄芩炒炭后,黄芩炭的多成分整体的MRT_(0→∞)为10.07 h,与酒黄芩比较,差异无统计学意义(P>0.05)。黄芩炭存在0.25、1、2 h,3次达峰。结论:该方法专属性强、灵敏度高,可作为大鼠血清中8种黄酮类成分的同步检测及其药动学研究的方法,进一步诠释了黄芩“酒炙增效,炒炭存性”的科学内涵。

黄芩酒炙工艺及酒黄芩HPLC指纹图谱研究

目的:对黄芩的酒炙工艺及其指纹图谱进行了研究,为酒黄芩质量控制模式的建立奠定了基础。方法:正交试验及HPLC-UV指纹图谱。色谱条件:Hypersil C18柱(200 mm×5.0 mm,5μm),流动相:甲醇-0.4%磷酸水溶液-乙腈线性梯度洗脱;流速:1.0 mL/m in;检测波长277 nm。结果:不同产地正品黄芩通过规范炮制加工后得到的酒黄芩指纹图谱无明显差异。结论:通过正交试验确定的黄芩酒炙工艺切实可行,指纹图谱测定方法重现性好,可为酒黄芩的规范化炮制及质量控制提供可靠的科学依据。

酒的类别对黄芩炮制的影响

以黄芩甙(Baicalin)和黄芩甙元(Baicalein)为指标,用反相高效液相色谱法,考察酒的类别及浓度对黄芩炮制品主要活性成分黄芩甙和黄芩甙元含量的影响,结果表明:酒炙黄芩的黄芩甙和黄芩甙元的含量仅与酒的类别有关,用白酒炙的含量明显高于用黄酒炙(P<0.05)。

酒黄芩HPLC指纹图谱研究

目的:对酒黄芩进行HPLC指纹图谱研究,为酒黄芩质量控制模式的建立奠定了基础。方法:选择HPLC-UV指纹图谱。色谱条件:Hypersil C18柱(200 mm×5.0 mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液-乙腈线性梯度洗脱;流速:1.0 m l/min;柱温28℃;检测波长277 nm。结果:对不同产地正品黄芩进行规范炮制加工后得到的酒黄芩指纹图谱无明显差异。结论:该方法重现性好,可为酒黄芩的质量控制提供可靠的科学依据。

HPLC法测定13个不同产地酒炙黄芩中4种化学成分

目的:采用HPLC法同时测定市售酒炙黄芩中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素4种化学成分的含量,并对其炮制工艺提出建议。方法:采用Diamonsil^(TM)C_(18)(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 ml·min^(-1);柱温为30℃;检测波长为278 nm;进样5μl。结果:酒炙黄芩中4种黄酮类化学成分在该色谱条件下有良好的分离度,在相应的线性范围内呈现良好的线性关系,方法重复性良好。各化学成分的平均回收率在97.71%~98.34%范围内,RSD<2.0%。13个不同产地的酒炙黄芩中黄芩苷含量均符合中国药典黄芩炮制饮片的含量要求。结论:酒炙黄芩能最大程度的保存黄酮苷类成分,破坏黄芩酶的自身降解作用,既保证了酒炙黄芩饮片的临床效果,又有利于黄芩饮片的贮存,但酒炙黄芩能不同程度的降低黄芩中黄酮苷类成分的含量,其炮制工艺有待进一步规范化。

黄芩酒炙时间与成分的关系考察

采用高效液相色谱法以甲醇—水—冰醋酸为流动相,在YWG—C_(18)反相柱上,用外标两点法,测定酒炙黄芩不同时间其主要活性成分黄芩甙和黄芩甙元的含量。结果表明,黄芩甙随酒炙黄芩时间的延长,含量呈上升趋势,以润闷5—7h含量最高,7h后含量不再有增加倾向;而黄芩甙元在润闷7h前含量几乎无变化。7h后稍有增加。建议酒炙黄芩用黄酒润闷约6h左右为宜。

基于一测多评法研究黄芩酒炙前后12个黄酮类成分的含量变化

目的:建立一测多评法比较生黄芩、酒黄芩中12个黄酮类成分的含量。方法:采用高效液相色谱法(HPLC),以黄芩苷为内参物,分别计算其与野黄芩苷、黄芩苷、汉黄芩苷、3,5,7,2′,6′-五羟基黄酮(HQ-1)、5,7,2′,5′-四羟基-8,6′-二甲氧基黄酮(HQ-2)、黄芩苷元-7-O-β-D-葡萄糖苷(HQ-3)、5,7,2′,3′-四羟基黄酮(HQ-4)、5,6-二羟基-7,8,2′,6′-四甲氧基黄酮(HQ-5)、黄芩素、汉黄芩素、白杨素、千层纸素-A、、等12个成分的相对校正因子(RCF),通过RCF计算生、酒黄芩饮片中12个成分的含量(计算值),采用外标法同时测定12个成分的含量(实测值),比较计算值与实测值的差异。色谱柱为Phenomenex C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.5%甲酸,梯度洗脱,流速1 mL/min,检测波长280 nm,柱温为35℃。结果:12个黄酮类成分线性关系良好(r^(2)>0.999),平均加样回收率97.78%~104.13%,相对标准偏差(RSD)0.12%~0.75%,精密度、重复性和稳定性的RSD<0.3%,其计算值和实测值比较差异无统计学意义(P>0.05)。测定结果显示黄芩酒炙后黄芩苷、汉黄芩苷、野黄芩苷和HQ-3含量分别降低了7.54%、5.3%、4.14%和16.1%;黄芩素、汉黄芩素、白杨素、千层纸素A、HQ-2、HQ-4和HQ-5成分分别增加了30.38%、35.92%、28.04%、48.41%、20.54%、43.88%、8.66%。结论:该方法简单、有效、结果准确,可用于黄芩酒炙前后12个活性成分的含量测定。

HPCE法测定生黄芩、酒黄芩中黄芩苷含量

目的 :建立中药饮片生黄芩、酒黄芩中黄芩苷含量测定的毛细管电泳法。方法 :毛细管电泳法紫外检测生黄芩和酒黄芩中黄芩苷的含量 ,以 4 0mmol/L硼砂缓冲液 (pH 8.5 )为电泳介质 ,未涂层融硅毛细管 (5 0 μm× 4 7cm) ,有效分离长度 4 0cm ,压力进样 17kPa·s ,2 5kV恒压电泳 ,检测波长为 2 80nm。结果 :黄芩苷的线性范围在 0 .0 5～ 0 .80mg/ml,回归方程Y =2 .1335X - 0 .0 5 77,r=0 .9991,平均回收率 98.96 % ,n =5 ,RSD =1.0 2 %。结论 :本方法快速、简便、结果准确 ,重现性好 ,可用于生黄芩、酒黄芩中黄芩苷的含量测定。

正交试验筛选酒黄芩最佳炮制工艺

目的探讨不同炮制方法对酒黄芩中黄芩苷含量的影响,优化酒黄芩炮制的工艺条件。方法采用HPLC法测定黄芩苷含量,并通过正交试验对酒炙黄芩的加酒量、炒炙温度、炒炙时间三因素进行炮制黄芩的工艺考察,按L9(34)进行实验研究。结果酒制黄芩的最佳工艺是加酒量为10%,炒炙温度为170℃,时间为5m in。结论正交设计中的炒炙温度与炒炙时间两因素对工艺影响显著。

UPLC法比较黄芩不同炮制品中5种黄酮类成分

目的建立UPLC法比较生黄芩、酒黄芩、黄芩炭中5种黄酮类成分的含量。方法各样品溶液的分析采用Acquity UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相乙腈-0.5%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;检测波长280 nm。结果5种黄酮类成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9999),平均加样回收率100.17%~106.00%,RSD 2.00%~3.37%。黄芩酒炙后,野黄芩苷、黄芩苷和汉黄芩苷3种黄酮苷含量均有所下降,而黄芩素和汉黄芩素2种黄酮苷元含量有所增加;黄芩炒炭后,3种黄酮苷的含量下降更为明显,而2种黄酮苷元的含量明显增加。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于黄芩的质量控制。

不同产地黄芩片、酒黄芩质量评价研究

目的:建立不同产地黄芩片、酒黄芩的HPLC指纹图谱,并对其进行主成分分析和聚类分析,为不同产地黄芩饮片的质量分析与标准化控制奠定基础。方法:运用HPLC法建立黄芩片和酒黄芩的指纹图谱,并采用主成分分析和聚类分析法对测定结果进行相关特征分析。结果:建立了16个厂家19批黄芩片的HPLC指纹图谱,确定了19个共有峰,得到5个主成分峰,聚成3类;并建立了8个厂家10批酒黄芩的HPLC指纹图谱,确定了19个共有峰,得到3个主成分峰,聚成3类。结论:结合主成分分析和聚类分析法建立的黄芩片、酒黄芩HPLC指纹图谱稳定可靠,可为黄芩片、酒黄芩的质量评价提供参考。

黄芩不同炮制品物性参数与化学成分相关性研究

目的探究黄芩不同炙法炮制后物性参数与化学成分的相关性及黄芩特殊炮制方法对黄芩质量的影响。方法黄芩饮片经酒炙、醋炙、盐炙后,德尔菲评价选出最优炮制品进行物性参数测定(相对密度、吸水膨胀度、pH值、氧化值)、显微鉴别及化学成分含量测定(黄芩苷、总黄酮、多糖),运用SPASS 20.0进行相关性分析,并建立回归模型,找出物性参数与化学成分的相关性。结果不同炙法炮制不但改变了黄芩的外观,其内部结构也发生了改变,即物性参数发生了改变。黄芩物性参数与化学成分之间具有显著相关性,pH值与总黄酮、多糖含量的回归模型R^(2)>0.9,氧化值与黄芩苷含量的回归模型R^(2)>0.9,线性关系较好,模型拟合度高。黄芩酒醋盐炙法炮制后黄芩苷含量呈下降趋势,且与生品相比差异有统计学意义,酒黄芩总黄酮含量高于生黄芩,差异无统计学意义,盐黄芩多糖含量高于生黄芩,差异有统计学意义。结论可用物性参数指征黄芩内在质量优劣,指征性最强的为pH值与氧化值。不同炙法炮制对黄芩化学成分的影响较为明显,可发展黄芩不同炮制方法,满足临床精准用药需求。

基于热分析技术、指纹图谱及含量测定的不同产地酒黄芩质量评价

目的:利用热分析技术探讨黄芩和酒黄芩饮片的热解温度范围,采用指纹图谱和指标成分含量测定比较不同产地酒黄芩的质量差异,为酒黄芩生产工艺及质量评价提供依据。方法:采用热分析技术,对生黄芩饮片、酒黄芩饮片、黄芩浸出物,以及主要成分黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素的热解特性进行分析,确定酒黄芩最佳炮制温度范围,并结合层次分析法(AHP)、指标相关性的指标权重确定法(CRITIC)及加权评价法优选最佳炮制时间。按优选条件对山西、河北及甘肃3个产地的黄芩饮片进行炮制,采用超高效液相色谱法(UPLC)建立酒黄芩指纹图谱,并对指纹图谱进行相似度分析及共有峰指认;同时,对黄芩苷、白杨素-7-O-葡萄糖醛酸苷、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A的含量进行检测,比较不同产地生黄芩、酒黄芩的质量差异。基于7种指标成分含量进行聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),以变量重要性投影(VIP)值>1筛选酒黄芩组间差异性成分。结果:酒黄芩的最佳炮制温度为190~200℃,优选酒炙工艺为190℃炒制8 min。不同产地生黄芩指纹图谱与对照图谱的相似度均≥0.97,酒黄芩指纹图谱与对照图谱的相似度均≥0.98,提示炮制可在一定程度上使饮片质量趋于一致。含量测定结果显示,甘肃产黄芩中苷类成分含量相对另外2个产地样品较低,而苷元类成分含量较高;各产地黄芩经酒炙后7种指标成分含量整体略呈降低趋势,以甘肃产地样品的含量降低幅度较大;多元统计分析及判别分析结果表明,汉黄芩苷是区分不同产地酒黄芩的关键成分。结论:该研究确定了酒黄芩炮制的最佳工艺,并筛选出产地间差异性成分汉黄芩苷,可为酒黄芩质量评价提供参考依据。

酒黄芩炮制研究进展

研究酒黄芩历史炮制情况和现代炮制工艺研究情况。通过查阅、整理有关酒黄芩的历史文献资料,对其炮制研究情况进行归纳总结。整理了酒黄芩的炮制历史沿革、酒黄芩炮制规范收载情况、酒黄芩临床功效及复方应用、黄芩酒制的现代研究以及酒黄芩化学及质量、药理学等方面内容。黄芩酒制早在唐代就有记载,在全国大部分省市的中药饮片炮制规范中也有收载,但目前对其化学成分,药理作用的系统研究较少,有必要对黄芩酒制历史沿革加以考证,同时对其进行系统的现代化学和药理学研究,为揭示其炮制原理和科学内涵提供一定的理论依据。

基于HPLC和HSGC结合的黄芩酒制前后饮片特征图谱表征

目的：建立黄芩片和酒黄芩的特征图谱，分析黄芩酒制前后饮片特征图谱的变化规律。方法：分别采用高效液相色谱法（HPLC）和顶空气相色谱法（HSGC）分析黄芩片和酒黄芩的特征图谱。色谱条件为流动相甲醇（A）-含10mmol·L^-1甲酸铵的0．1％甲酸水溶液（B）梯度洗脱（0～10min，20％-40％A；10-20min，40％-46％A；20～30min，46％～52％A；30～50min，52％～70％A），检测波长260nm。结果：黄芩片和酒黄芩的HPLC特征图谱中均可标示13个特征峰，并归属了其中黄芩苷、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A共6个色谱峰，黄芩片酒制前后HPLC特征图谱无显著差异。黄芩生品、炮制品的HSGC特征图谱差异显著，酒黄芩饮片中可以检测到炮制辅料乙醇的特征峰，可有效地区别生品和酒制品。结论：将HPLC和HSGC建立的特征图谱综合运用于黄芩片、酒黄芩的质量评价和鉴别，弥补了HPLC特征图谱在生品和酒制品属性识别方面的局限性，为酒制类中药饮片的质量评价和真伪鉴别提供了新思路。

基于电子舌技术评价黄芩酒炙前后滋味变化及其在黄芩饮片鉴别中的应用研究

黄芩是临床常用的清热药,生用苦寒,酒炙可缓和苦寒之性。研究黄芩酒炙前后滋味变化对鉴别黄芩、酒黄芩及阐明传统酒炙理论具有重要意义。该实验制备黄芩片、酒黄芩各10批,采用HPLC测定5种黄酮类成分含量,以5种黄酮类成分含量为变量做PCA分析,结果不同批次黄芩饮片之间含量有一定的差异,但无法将黄芩片、酒黄芩区分开。通过人工口尝评价2种饮片的酸、咸、鲜、甜、苦5种感官属性,再利用电子舌检测代表饮片滋味的7根传感器(AHS,PKS,CTS,NMS,CPS,ANS,SCS)响应值。分析感官评价与电子舌响应值的相关性,结果显示感官评价的酸,咸,鲜,甜,苦与AHS,CTS,NMS,ANS,SCS 5根传感器具有不同程度的相关关系,表明电子舌技术可作为一种代替人工口尝并且量化检测味觉的手段,应用于中药饮片的滋味评价。采用味觉法对电子舌响应值进行分析,发现酒黄芩苦味降低,咸味增加;PCA分析黄芩酒炙前后滋味变化,结果显示2种饮片的滋味差异将其分成2类,PCA载荷图表明咸味和苦味的响应值是影响黄芩与酒黄芩整体味道的主要因素。基于电子舌响应值建立黄芩片、酒黄芩的Fisher判别模型,可对黄芩酒炙前后能进行有效的判别,判别识别率为100%。实验结果表明,电子舌检测结合多元统计分析可用于评价中药滋味,同时为鉴别不同炮制品提供一种快速、简便的技术手段。

酒制对“寒性”中药影响的研究进展

“寒性”是中药特有的药性之一,酒制可缓和中药的“寒性”。需酒制的“寒性”中药大多具清热解毒、活血、泻下等功效,此外,部分“寒性”中药因“寒性”过偏,表现出泄泻、腹痛等不良反应。酒制可引药上行、增强疗效,降低其毒副作用,使“寒性”中药安全、有效地满足临床需求。通过对酒制改变“寒性”中药的主要功效、物质基础、不良反应等方面进行综述,并提出可行性研究思路,为“寒性”中药的临床应用提供科学依据,亦可为酒制“寒性”中药的进一步研究提供方法借鉴。

黄芩酒炙过程中化学成分含量变化及其与药效的相关性分析

目的：分析黄芩酒炙过程中主要指标性成分含量的动态变化规律,探讨含量变化与其药效活性间的相关性,优选黄芩酒炙的最佳炒制时间。方法：采用HPLC测定黄芩酒炙过程中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素4种主要化学成分的含量变化,流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,检测波长278 nm;以脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞为炎症模型,检测黄芩酒炙过程中抗炎活性的变化情况,结合醇溶性浸出物含量、含水率等指标,采用聚类分析和线性回归对指标成分含量-药效活性数据进行相关性分析。结果：黄芩苷为黄芩中主要指标性成分,在酒炙过程中,黄芩苷质量分数、醇溶性浸出物含量及其抗炎活性均呈先上升再下降的趋势。在炒制18 min时,黄芩苷质量分数达到峰值14.33%,醇溶性浸出物质量分数达到最高点63.00%,此时抗炎活性达到最高值92.96%。结论：在黄芩酒炙过程中,炒制时间对其黄芩苷含量及药效活性均产生了显著性影响,黄酒闷润后最佳炒制时间为18 min。

基于HPLC特征图谱、UPLC-Q-TOF/MS定性及多成分定量的黄芩酒炙前后化学成分变化研究

目的比较黄芩酒炙前后化学成分变化,为建立全面的黄芩饮片质量评价方法提供参考。方法HPLC法建立黄芩片、酒黄芩的特征图谱,并生成对照特征图谱,标定共有峰并进行相似度评价。采用UPLC-Q-TOF/MS定性分析黄芩酒炙前后化学成分,利用UPLC-TQMS对2种饮片中11种黄酮类成分(黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、千层纸素A、千层纸苷、野黄芩苷、芹菜素、高车前素、木犀草苷、白杨素)进行定量分析,并以含量为变量进行多元统计分析。结果建立了黄芩片、酒黄芩的特征图谱,标定9个共有峰,2种饮片相似度均在0.947以上。在黄芩饮片中,共发现50种成分,通过多级质谱数据分析,保留时间匹配,并结合对照品及数据库检索,鉴定了其中44种成分。UPLC-TQMS定量结果显示酒炙后黄芩中黄芩苷、汉黄芩苷等黄酮苷类成分含量略有下降,黄芩素、汉黄芩素等黄酮苷元类成分含量稍有增加。经多元统计学分析,2种饮片有明显的分离趋势,载荷图结果表明黄芩苷、汉黄芩苷、千层纸苷的含量差异可能是引起黄芩酒炙前后化学成分变化的主要因素。结论黄芩酒炙后没有新增或消失成分,但成分含量有所变化。所建立黄芩饮片的定性、定量方法重现性好,分析快速、准确,可用于黄芩饮片酒炙前后的质量评价。

多指标综合评价结合层次分析法优化黄芩的微波酒蜜炮制工艺

目的优选黄芩的微波酒蜜制工艺。方法采用单因素试验优选酒蜜比、闷润时间、微波功率、微波时间。以微波工艺中的酒蜜比、闷润时间、微波功率、微波时间为因素,以黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素质量分数为指标,采用层次分析法确定各指标权重系数,综合加权评分为评价指标,采用正交试验优选黄芩的微波酒蜜制工艺。结果最佳微波酒蜜制工艺为取生黄芩饮片适量,加入25%的酒蜜混合辅料(酒蜜比为10∶15),置密闭容器内闷润60 min,在300 W功率下微波3 min。结论方法重复性和稳定性良好,可用于微波酒蜜炮制黄芩。