Kanglaite combined Gemcitabine inhibits growth of nude mouse subcutaneous transplantation tumor of human PC-3 pancreatic cancer cell

Objective:To study the mechanisms of pancreatic cancer treatment with Kanglaite combined Gemcitabine by investigating the relationship between the apoptosis and the expression of bcl-2, Bax and VEGF in pancreatic cancer cells.Methods:Nude mouse subcutaneous transplantation tumor model of Human PC-3 pancreatic cancer was established; the expressions of bcl-2, Bax and VEGF of transplantation tumor cell were determined; the earlier apoptosis rate of pancreatic cancer cell and the gross tumor volume were determined. Results:Kanglaite combined Gemcitabine remarkably decreased the protein expression of bcl-2,raised the expression of Bax,increased the apoptosis rate of the pancreatic cancer and contract the gross tumor volume. Kanglaite greatly decreased the protein expression of VEGF of the tumor cell. Conclusion:Therapeutic efficacy of Kanglaite combined Gemcitabine is far better than separate use of the two medicines in the pancreatic cancer transplantation tumor treatment.

中药复方WCAP及拆方对人胰腺癌皮下移植瘤裸小鼠模型及IL⁃6/STAT3信号通路的影响

目的观察中药复方WCAP及其拆方对人胰腺癌BxPC-3细胞裸小鼠皮下移植瘤生长及对白介素-6/信号转导和转录激活因子3(IL-6/STAT3)信号通路的影响。方法建立人胰腺癌BxPC-3细胞裸小鼠皮下移植瘤模型,将30只SPF级裸小鼠随机分为6组,即空白对照组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组、复方组、健脾组、清热解毒组和软坚散结组,每组5只,观察各组裸小鼠皮下移植瘤瘤质量及抑瘤率,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)和Western blot法分别检测瘤组织中IL-6/STAT3通路及其下游靶基因c-myc癌基因(c-myc)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的mRNA和蛋白表达水平。结果①与空白对照组比较,各干预组瘤质量均轻于空白对照组,5-FU组、复方组及各拆方组均可抑制裸小鼠皮下移植瘤的生长(P<0.05),复方组抑瘤率高于各拆方组(P<0.05)。②与空白对照组比较,5-FU组、复方组和软坚散结组IL-6/STAT3通路及其下游靶基因c-myc、cyclin D1、VEGF、MMP-2的mRNA表达均降低(P<0.05)。③与空白对照组比较,5-FU组、复方组IL-6/STAT3通路及其下游靶基因涉及的c-myc、cyclin D1、VEGF、MMP-2蛋白表达均降低(P<0.05),软坚散结组c-myc、MMP-2和IL-6蛋白表达均降低(P<0.05)。结论WCAP复方可抑制人胰腺癌BxPC-3细胞裸小鼠皮下移植瘤的生长,其机制与抑制IL-6/STAT3通路并调节其下游靶基因c-myc、cyclin D1、VEGF、MMP-2的表达水平有关;与各拆方相比,WCAP复方在抑瘤率、小鼠体质量及IL-6/STAT3通路及其下游靶基因调控方面作用更好。

MicroRNA-133b调节FGFR1-ERK1/2-SOX2信号通路对裸鼠肺癌NCI-H1975细胞移植瘤生长的影响

目的探讨microRNA-133b(miR-133b)对裸鼠肺癌NCI-H1975细胞移植瘤生长的抑制作用以及对成纤维细胞生长因子受体1-细胞外信号调节激酶1/2-性别决定区Y-box蛋白2信号通路(FGFR1-ERK1/2-SOX2)的影响。方法q RT-PCR检测人肺成纤维细胞、肺癌细胞株miR-133b表达。miR-133b过表达NCIH1975细胞。将NCI-H1975细胞分为对照组、mimic NC组、miR-133b mimic组、miR-133b mimic+pcDNA3.1组、miR-133b mimic+pcDNA3.1 FGFR1组。CCK-8法检测NCI-H1975细胞增殖抑制率,Transwell实验观察NCI-H1975细胞侵袭、迁移情况。复制裸鼠移植瘤模型并分组,将裸鼠分为对照组、mimic NC组、miR-133b mimic组、miR-133b mimic+AZD4547组,观察各组裸鼠肿瘤体积与重量,HE染色观察各组裸鼠肿瘤组织变化,TUNEL检测肿瘤组织细胞凋亡情况,免疫组织化学法观察裸鼠肿瘤组织Ki-67、Cyclin D1、VEGF-A的表达,Western blotting检测各组肿瘤组织FGFR1、p-ERK1/2/ERK1/2、SOX2蛋白相对表达量。结果与人肺成纤维细胞HLF-α比较,肺癌细胞株NCI-H1975、A427、NGE-1、A549中miR-133b mRNA相对表达量降低(P<0.05),其中以NCI-H1975细胞中miR-133b mRNA相对表达量最低。miR-133b mimic组miR-133b mRNA相对表达量较对照组和mimic NC组升高(P<0.05)。miR-133b可通过负调控FGFR1抑制肺癌NCIH1975细胞增殖和迁移。miR-133b mimic组移植瘤重量较对照组降低、体积缩小,miR-133b mimic+AZD4547组移植瘤重量较miR-133b mimic组降低、体积缩小(P<0.05)。miR-133b mimic组空泡样变性程度较对照组、mimic NC组减轻(P<0.05),miR-133b mimic+AZD4547组空泡样变性程度较miR-133b mimic组减轻(P<0.05)。miR-133b mimic组肿瘤组织细胞凋亡率较对照组升高(P<0.05),miR-133b mimic+AZD4547组肿瘤组织细胞凋亡率较miR-133b mimic组升高(P<0.05)。miR-133b mimic组VEGF-A、Cyclin D、Ki-67阳性细胞比例较对照组降低(P<0.05),miR-133b mimic+AZD4547组VEGF-A、Cyclin D、Ki-67阳性细胞比例较miR-133b mimic组降低(P<0.05)。miR-133b mimic组FGFR1、p-ERK1/2/ERK1/2、SOX2蛋白相对表达量较对照组降低(P<0.05),miR-133b mimic+AZD4547组FGFR1、p-ERK1/2/ERK1/2、SOX2蛋白相对表达量较miR-133b mimic组降低(P<0.05)。结论miR-133b过表达可能通过抑制FGFR1-ERK1/2-SOX2轴,抑制裸鼠肺癌NCI-H1975细胞移植瘤生长。

纳秒脉冲处理A375细胞裸鼠皮下移植瘤的疗效评估

ns脉冲电场可以诱发肿瘤细胞的结构和功能发生一系列变化,使其在临床肿瘤治疗中展现出巨大的应用前景。目前,受限于检测评估手段,相关动物实验研究尚不充分。将ns脉冲(电场强度20kV/cm、脉宽200ns、重复频率5Hz、2 000个脉冲)作用于A375裸鼠皮下移植瘤,采用荧光活体成像方法定量研究ns脉冲的抑瘤效果,同时用相机随访观察局部疤痕的转归情况。与对照组荧光增加相比,处理组荧光强度逐渐减弱(检验水准P<0.05),且在第2次处理后14d荧光完全消失;随着时间的推移,治疗区域局部疤痕逐渐变浅,并在第2次处理后22d完全消失。实验结果表明,ns脉冲可以实现局部肿瘤组织的完全切除,且能实现皮肤疤痕的有效转归。

双歧杆菌诱发实验性大肠癌凋亡的电镜观察

本文以大肠癌裸鼠移植瘤为动物模型，用透射电镜观察了青春型双歧杆菌对移植瘤超微结构的影响。结果表明：双歧杆菌经荷瘤鼠腹腔注射后能诱导多量大肠癌细胞凋亡，凋亡早期的细胞主要表现为核染色质浓缩边聚；中期为核膜破裂，胞核崩解，凋亡小体形成；晚期主要为邻近活细胞吞噬凋亡小体。提示双歧杆菌诱导大肠癌细胞程序化死亡可能是其抑瘤机制之一。

三氧化二砷抗裸鼠人结肠癌移植瘤作用及其机制的研究

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)抗人结肠腺癌裸鼠移植瘤作用、作用机制以及药物毒性。方法:建立人结肠癌裸鼠移植瘤模型,随机分为4组,即生理盐水组、5-氟脲嘧啶(5-FU)组、低剂量As2O3组和高剂量As2O3组,比较各组的抑瘤作用和裸鼠一般状态的变化,并对标本分别行光镜和电镜观察、原位末端标记(TUNEL)、免疫组化和血常规检测。结果:As2O3能够明显抑制结肠癌裸鼠移植瘤的增长,并能诱导癌细胞凋亡,调控相关基因表达;未见As2O3引起明显肝、肾和造血系统损害。结论:As2O3对人结肠腺癌细胞裸鼠移植瘤具有显著的抗癌作用,此作用可能与诱导癌细胞凋亡密切相关,且受到多种有关基因的调控;但是对裸鼠的肝、肾和造血系统无明显的毒性。

莪术醇联合氟尿嘧啶对裸鼠胃癌移植瘤生长、增殖细胞核抗原和P27表达的影响

目的观察莪术醇联合氟尿嘧啶对胃癌裸鼠皮下移植瘤的影响。方法将人胃癌细胞株BGC823接种于裸鼠皮下建立荷瘤裸鼠模型。将荷瘤裸鼠随机分为对照组、莪术醇组、氟尿嘧啶组、联合用药组(莪术醇联合氟尿嘧啶),记录各组的肿瘤体积和瘤重。应用荧光定量聚合酶链反应(q PCR)和免疫组织化学法检测各组肿瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、P27的表达。结果对照组肿瘤体积和重量比其他3组升高(P<0.05);联合用药组肿瘤体积和重量低于莪术醇组(P<0.05);联合用药组肿瘤体积和重量与氟尿嘧啶组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。各实验组肿瘤组织中PCNA的表达均低于对照组(P<0.05);与莪术醇组和氟尿嘧啶组比较,联合用药组PCNA的表达降低(P<0.05)。各实验组移植瘤组织中P27的表达均高于对照组(P<0.05);与莪术醇组比较,联合用药组P27的表达增强(P<0.05);与氟尿嘧啶组比较,联合用药组P27 m RNA的相对表达有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。与莪术醇组和氟尿嘧啶组比较,联合用药组P27蛋白阳性率升高(P<0.05)。结论莪术醇联合氟尿嘧啶能抑制胃癌裸鼠皮下移植瘤的生长,其机制可能与调节PCNA、P27基因有关。

斑蝥素酸镁对人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠皮下移植瘤凋亡的影响

建立人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠皮下移植瘤模型,实验组每只裸鼠瘤周注射斑蝥素酸镁6.26×10-5mmol,对照组给予相同容积的无菌生理盐水瘤周注射。给药22 d后,观察斑蝥素酸镁对皮下移植瘤增殖的影响,并在此基础上,利用HE染色观察药物对人肝癌裸鼠皮下移植瘤组织形态学特征的影响。实验发现斑蝥素酸镁组移植瘤细胞体积变小、胞浆固缩、嗜酸性变,细胞核固缩、碎裂。透射电镜观察人肝癌裸鼠皮下移植瘤组织超微结构的改变,镜下见斑蝥素酸镁组移植瘤细胞核膜基本消失、核染色质聚集成团等改变。免疫组化二步法检测人肝癌裸鼠皮下移植瘤组织中bcl-2、bax的表达水平,结果显示斑蝥素酸镁组瘤组织中bcl-2的表达低于生理盐水组,而bax的表达高于生理盐水组(P<0.05)。本实验提示斑蝥素酸镁能明显抑制人肝癌裸鼠皮下移植瘤的增殖,并能诱导移植瘤细胞发生凋亡,其机制可能与上调bax和下调bcl-2表达有关。

康莱特联合5-Fu治疗人胰腺癌PC-3裸鼠皮下移植瘤的实验研究

目的通过研究胰腺癌Bcl-2、Bax和血管内皮生长因子((VEGF)的变化情况与细胞凋亡的关系,探讨康莱特和5-Fu治疗胰腺癌的机制。方法建立人胰腺癌PC-3细胞裸鼠皮下移植瘤模型,采用免疫组织化学方法检测Bcl-2、Bax和VEGF在胰腺癌移植瘤中的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡比率,测量肿瘤体积。结果康莱特和5-Fu都可明显提高胰腺癌细胞凋亡率,降低细胞Bcl-2在蛋白水平上的表达,两者对Bax在蛋白水平上的表达无影响;康莱特明显降低移植瘤VEGF蛋白的表达;康莱特和5-Fu联合组,胰腺癌细胞凋亡比率显著高于单药组,而Bcl-2蛋白表达率显著低于单药组;康莱特和联合用药组VEGF蛋白表达率低于5-Fu组;联合用药组肿瘤体积小于单药组。结论康莱特联合5-Fu治疗胰腺癌的效果明显优于两药单独使用的效果。

靶向人乳头瘤病毒16型-E6的siRNA对宫颈癌肿瘤生长的影响

目的研究靶向HPV16-E6的小分子干扰RNA抑制宫颈癌裸鼠移植瘤的生长。方法建立裸鼠宫颈癌模型,HPV16-E6siRNA瘤体内多点注射观察肿瘤的生长情况,使用HE染色方法观察肿瘤组织细胞在pSiRNA或pCON治疗后的病理学改变;免疫组化采用SP法。结果靶向HPV16-E6的小分子干扰RNA能显著抑制宫颈癌裸鼠移植瘤的生长。结论利用宫颈癌裸鼠移植瘤模型,证明靶向HPV16-E6的siRNA能够显著抑制宫颈癌裸鼠移植瘤的生长。

Bcl-2反义寡核苷酸对人肺癌裸鼠移植瘤的抑制作用

背景与目的:研究表明,靶向bcl-2mRNA的反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)在体内外可产生抗肿瘤效应。我们已经在bcl-2mRNA蛋白编码区发现了一个新的有效反义作用靶点,同时证实这个靶点的ASODN能增强白血病及肺癌细胞对化疗药物、放射线的敏感性。本研究进一步探讨bcl-2ASODN对裸鼠非小细胞肺癌NCI-H460细胞移植瘤的成瘤能力和移植瘤的抑制作用。方法:将经硫代修饰的bcl-2ASODN直接加入到培养的NCI-H460细胞内,MTT法检测细胞生长抑制率,然后将这种细胞接种于裸鼠皮下,观察肿瘤出现的时间和肿瘤体积的变化,并计算抑瘤率。同时取未经处理的NCI-H460细胞接种于裸鼠背部皮下建立裸鼠人肺癌移植瘤模型,待瘤结节直径≥5mm后,分为bcl-2ASODN实验组、生理盐水对照组和无义寡核苷酸对照组。实验组用15mg/kgASODN两天一次直接瘤内注射,连用3周,测肿瘤大小和组织形态学改变。结果:bcl-2ASODN显著抑制NCI-H460细胞的生长,并呈时间依赖性,与无义寡核苷酸组相比,有显著性差异(P<0.05)。bcl-2ASODN作用后的NCI-H460细胞在裸鼠皮下成瘤能力降低。平均成瘤时间延长为12.6天(P<0.01),最大抑瘤率达87.5%(P<0.01)。在处理NCI-H460细胞裸鼠移植瘤过程中,生理盐水对照组和无义寡核苷酸对照组的瘤体进行性增大,而bcl-2ASODN组的瘤块生长缓慢,ASODN处理组与两个对照组相比均有显著性差异(P<0.05)。处理后第30天剥离瘤块,ASODN处理组分别与两个对照组瘤重相比均有显著性差异(P<0.01)。bcl-2ASODN处理组裸鼠NCI-H460细胞移植瘤的生长受到明显抑制,抑瘤率为71.0%。病理学检查可见,bcl-2ASODN处理组瘤块内有大片的变性坏死灶,结缔组织增生,炎性细胞浸润;而两个对照组瘤体内癌细胞呈弥漫性密集分布。结论:bcl-2ASODN能降低NCI-H460细胞的成瘤能力,抑制移植瘤生长。

扶正活血抗癌方合并化疗治疗胃癌（术后）的临床与实验研究

扶正活血抗癌方治疗中晚期胃癌（术后）患者３５例，与对照组３４例比较，有较好的临床疗效，胃癌患者Ｔ淋巴细胞的免疫功能显著好转，高凝状态明显改善，ＯＫＴ４／ＯＫＴ８比值、抗凝血酶Ⅲ（ＡＴ－Ⅲ）、纤溶总活力（Ｆａ）等指标与正常值无显著差异，提高了胃癌患者１年、３年、５年的生存率（Ｐ＜０．０５）。扶正活血抗癌方对移植性人体胃癌裸鼠有明显抑制癌肿生长作用，与对照组比较，Ｐ＜０．００１；无明显毒性，与化疗药物５－氟脲嘧啶（５－Ｆｕ）比较，不影响裸鼠体重的正常增长。提示：该方不仅能扶助正气、改善血运、增强机体免疫功能，延长生存期，可能对胃癌细胞也有直接抑制、杀灭作用，这有待进一步研究。

胡桃醌不同给药途径对人肝癌细胞BEL-7402裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的采用裸鼠皮下移植瘤模型,通过不同给药途径对胡桃醌抗肿瘤活性和毒性进行评价。方法建立人肝癌BEL-7402细胞裸鼠皮下移植瘤模型,通过腹腔注射和局部注射两个给药途径观察胡桃醌抑制肿瘤生长的效果。结果①以600、300和150μg/kg胡桃醌腹腔注射于人肝癌BEL-7402细胞裸鼠皮下移植瘤模型,发现该剂量胡桃醌对肿瘤生长没有明显的影响;NK细胞活性检测发现,600、300μg/kg胡桃醌对裸鼠免疫功能有影响(P均<0.01),150μg/kg胡桃醌则没有影响(P>0.05);与阳性对照组(5-Fu)相比,600μg/kg胡桃醌组NK细胞活性差异无显著性(P>0.05),300和150μg/kg胡桃醌组NK细胞活性差异有显著性(P<0.05,P<0.01),结果提示胡桃醌对小鼠免疫系统有一定的损伤作用。②以4.5、3和1.5 mg/kg胡桃醌腹腔注射于人肝癌BEL-7402细胞裸鼠皮下移植瘤模型,抑瘤率分别为为78.24%、66.57%、48.94%;4.5、3 mg/kg胡桃醌的抑瘤作用可与阳性对照组比拟(P均>0.05)。但4.5 mg/kg胡桃醌组裸鼠出现明显的皮下脂肪减少、消瘦,并有死亡现象。③以pH 7.4和pH 4.0的600、300和150μg/kg胡桃醌人肝癌BEL-7402细胞裸鼠皮下移植瘤模型局部给药,结果发现不同pH(pH 7.4或4.0)600、300μg/kg的胡桃醌局部注射抑瘤作用与阳性对照组(5-Fu)组差异无显著性(P>0.05),而不同pH的150μg/kg胡桃醌抑瘤作用不明显。同一浓度不同pH药物的抑瘤作用差异无显著性(P均>0.05),但pH 4.0的胡桃醌组肿瘤细胞肝转移较少。结论胡桃醌不同给药途径均可抑制人肝癌BEL-7402细胞裸鼠皮下移植瘤的生长,但有一定的毒副作用,药物安全范围较小。

视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞裸鼠皮下移植瘤的建立

目的建立视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察不同浓度HXO-RB44细胞的致瘤效果。方法将90只试验动物随机分成A、B、C3个组,每组裸鼠分别皮下注射浓度为1.0×108/mL、2.0×108/mL和3.0×108/mL的HXO-RB44细胞悬液各0.2mL。观察HXO-RB44细胞的成瘤时间、肿瘤生长情况、肿瘤大小及裸鼠摄食和活动状况。结果观察4周后,A组裸鼠无一成瘤。B组裸鼠仅5只成瘤。C组裸鼠有27只造模成功,成瘤率达90.00%。B组裸鼠的平均成瘤时间为21、34、5d,C组裸鼠的平均成瘤时间为18、32、3d,B、C两组时间之间进行比较,P<0.05,差异有显著性。小鼠成瘤后,出现消瘦、体重减轻、食欲精神不佳等症状。结论HXO-RB44细胞裸鼠皮下移植瘤的致瘤效果与细胞浓度密切相关。

阿司匹林对宫颈癌裸鼠移植瘤生长的影响及Bax与VEGF的表达变化

目的探讨阿司匹林对宫颈癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用及可能机制。方法选取裸鼠40只,随机分为空白对照组、阿司匹林组、顺铂(DDP)组及阿司匹林联合DDP组。各组裸鼠均在其背部皮下注射HeLa细胞,18d后处死,期间观察各组出瘤时间,分别检测移植瘤质量及体积并计算抑瘤率,免疫组化法检测移植瘤组织中Bax及血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果阿司匹林组与对照组比较,裸鼠出瘤时间延长,肿瘤体积及质量均减少(P<0.05);阿司匹林联合DDP组裸鼠肿瘤生长最慢,经两因素析因分析,P<0.05,两药联合应用具有交互效应;阿司匹林组Bax蛋白表达上调,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05),阿司匹林联合DDP组对Bax上调的作用最强,与单用DDP组相比较,差异具有统计学意义(P<0.025);阿司匹林组VEGF表达量减少,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05),阿司匹林联合DDP组VEGF下调最明显,与DDP单药干预组相比差异具有统计学意义(P<0.025)。结论阿司匹林可能通过上调Bax的表达,下调VEGF的表达,达到与DDP协同抗肿瘤的作用。

IL-12转染对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响及其机制

背景与目的:卵巢恶性肿瘤发病率、复发率、转移率均较高,有研究表明IL-12具有明显的抗肿瘤作用。本研究探讨白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)对人卵巢癌SKOV3细胞生长抑制作用机制及其对裸鼠皮下种植瘤成瘤能力的影响。方法:应用脂质体转染技术将含有小鼠IL-12全长基因的质粒转染到SKOV3细胞(SKOV3/IL-12组),同时以空白质粒载体转染SKOV3细胞(SKOV3/neo组)和未转染SKOV3细胞作为对照。ELISA法检测3组细胞上清中IL-12表达。MTT法检测3组SKOV3细胞的抑制率和细胞倍增时间。建立裸鼠皮下卵巢癌种植模型,分别接种SKOV3/IL-12、SKOV3/neo、SKOV3细胞,观察肿瘤生长情况。ELISA法检测裸鼠血清中IL-12及γ-干扰素(gamma interferon,IFN-γ)的表达,免疫组化法检测裸鼠种植瘤中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、微血管密度(microvessel density,MVD)及干扰素诱生蛋白-10(IFN-gamma-inducible protein10,IP-10)的表达。结果:转染48、60h后细胞上清中IL-12蛋白表达量,SKOV3/IL-12组[(473.0±38.0)pg/ml、(522.0±32.0)pg/ml]高于SKOV3/neo组[(16.0±1.3)pg/ml、(18.0±1.6)pg/ml]及SKOV3组[(16.0±1.2)pg/ml、(17.0±1.4)pg/ml](P<0.01)。SKOV3/IL-12组细胞增殖抑制率为63.7%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),SKVO3/IL-12组细胞倍增时间(45.8±2.7)h明显长于SKOV3/neo细胞组(27.6±2.2)h和SKOV3组(28.2±2.1)h(P<0.01)。裸鼠皮下卵巢癌种植模型中,SKOV3/IL-12组裸鼠成瘤率(5/8)低于对照组(8/8)(P<0.01);平均成瘤时间[(15.0±5.0)天]长于SKOV3/neo组[(7.9±3.2)天]和SKOV3组[(7.8±2.4)天](P<0.01);SKOV3/IL-12组种植瘤体积、重量和裸鼠体重低于SKOV3/neo组和SKOV3组(P<0.01),种植瘤生长速度缓慢,抑瘤率达61.3%。SKOV3/IL-12组裸鼠血清中IL-12、IFN-γ表达量高于SKOV3/neo组和SKOV3组(P<0.01)。SKOV3/IL-12组裸鼠种植瘤中IP-10阳性率(100%)高于对照组(P<0.01),VEGF阳性率(62.5%)及MVD低于对照组(P<0.01)。结论:转染IL-12能有效地抑制SKOV3细胞生长;转染IL-12的SKOV3/IL-12细胞在裸鼠皮下的成瘤能力降低;IL-12可通过诱导IFN-γ诱生IP-10抑制肿瘤血管形成而实现其抗卵巢癌的作用。

人鼻咽癌裸鼠移植瘤SUNT─1及其体外培养上皮细胞株SUNE─1细胞遗传学研究

对我所建成的鼻咽低分化癌的ＥＢ病毒核抗原阳性（ＥＢＮＡ）的裸鼠移植瘤ＳＵＮＴ－１及其体外培养上皮细胞株ＳＵＮＥ－１，分别于各代进行细胞遗传学分析，结果显示ＳＵＮＴ－１和ＳＵＮＥ－１癌细胞染色体的数目和结构均有相似的变化；染色体数呈非整倍体改变，并以亚四倍体为主，染色体畸变则以易位、重排、缺乏和等臂染色体为多见并形成较恒定的标记染色体Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３、Ｍ５和Ｍ６，涉及３号染色体改变较多。提示进一步研究克隆ＳＵＮＦ－１和ＳＵＮＴ－１亚株的细胞遗传学和ＥＢ病毒基因存在变化，将为深入探讨鼻咽癌病因提供更多启示。

三氧化二砷联合丹参酮对肝癌的作用效果与机制研究

[目的]考察三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)联合丹参酮对肝癌裸鼠移植瘤的作用效果并初步探讨其可能的分子机制。[方法]建立裸鼠人肝癌移植瘤模型,待瘤体生长到体积100mm3左右,将裸鼠随机分为5组,分别为模型对照组、As2O3单用组(As2O3低剂量组,2.5mg/kg)、阳性对照组(As2O3高剂量组,5.0mg/kg)、丹参酮单用组(500mg/kg)、As2O3-丹参酮组(As2O32.5mg/kg+丹参酮500mg/kg),每组8只,每天腹腔注射给药,共19d。比较各组肿瘤生长曲线和瘤体质量;采集血液进行血常规和生化常规分析;以原位末端转移酶标记(TdT-mediated dUTP nick end labeling, TUNEL)法检测瘤体组织细胞凋亡情况;免疫组化和Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。[结果]随着给药时间的延长,与模型对照组比较,As2O3单用组、丹参酮单用组、As2O3-丹参酮组以及阳性对照组均表现出一定的抑瘤效果(P<0.01)。与阳性对照组比较,As2O3-丹参酮组的抑瘤效果更显著(P<0.05)。与模型对照组比较,As2O3单用组、阳性对照组、As2O3-丹参酮组白细胞(white blood cell,WBC)计数均上调,其中As2O3单用组差异具有统计学意义(P<0.05);As2O3单用组、阳性对照组红细胞(red blood cell,RBC)计数显著下调(P<0.05,P<0.01);各治疗组血红蛋白(hemoglobin,HGB)水平均下调,其中阳性对照组差异有统计学意义(P<0.01);As2O3单用组、阳性对照组、As2O3-丹参酮组血小板(platelet,PLT)计数均上调,其中As2O3单用组和阳性对照组差异具有统计学意义(P<0.01);与阳性对照组比较,As2O3-丹参酮组WBC、RBC计数和HGB水平均上调,但差异无统计学意义(P>0.05)。与模型对照组比较,As2O3单用组、阳性对照组与As2O3-丹参酮组丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)水平上调,但差异无统计学意义(P>0.05);各治疗组中天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平下调,其中丹参酮单用组差异有统计学意义(P<0.01);各治疗组中尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平下调,其中丹参酮单用组差异有统计学意义(P<0.05);阳性对照组、丹参酮单用组和As2O3-丹参酮组肌酐(creatinine,CREA)水平均下调(P<0.05,P<0.01)。与模型对照组比较,各治疗组凋亡率均明显上调(P<0.01);与阳性对照组比较,As2O3-丹参酮组凋亡率上调显著(P<0.01)。与模型对照组比较,各治疗组中促凋亡蛋白Bax表达上调,其中阳性对照组、丹参酮单用组和As2O3-丹参酮组差异有统计学意义(P<0.01);丹参酮单用组和As2O3-丹参酮组靶向聚ADP核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)表达明显上调(P<0.01);阳性对照组、丹参酮单用组和As2O3-丹参酮组抗凋亡蛋白X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)表达明显下调(P<0.01)。[结论]As2O3与丹参酮联用抗肝癌具有协同增效、减毒的作用,丹参酮可以减轻As2O3造成的血常规改变和肝肾功能损伤。

薯蓣皂苷元体内外抑制胃癌增殖的机制

目的:研究薯蓣皂苷元抑制胃癌增殖及转移的主要途径及其机制。方法:分别使用1,10,100μg/mL浓度薯蓣皂苷元处理人血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)和胃癌BGC-823细胞,制作细胞生长曲线,观察薯蓣皂苷元对细胞增殖能力的影响;选取一定浓度的薯蓣皂苷元处理HUVEC和BGC-823细胞,体外成管实验和划线法分别检测药物处理对血管内皮细胞成管能力及肿瘤细胞迁移能力的影响。将BGC-823细胞接种到裸鼠制作皮下肿瘤模型,连续静脉注射薯蓣皂苷元,分析比较其对皮下肿瘤的抑制效果。结果:与对照组比较,薯蓣皂苷元可明显抑制内皮细胞增殖活性(P<0.05),且具有浓度依赖性;而相同处理方式对BGC-823细胞的增殖活性基本无影响;10μg/mL的薯蓣皂苷元对BGC-823细胞的迁移能力具有明显的抑制作用,能够明显抑制HUVEC细胞体外成管能力;与模型组比较,薯蓣皂苷元给药组肿瘤抑制率明显增高(达38.2%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:薯蓣皂苷元可以通过抑制内皮细胞增殖活性影响肿瘤血供,并最终抑制皮下肿瘤模型的增殖,同时,其可通过直接的作用抑制胃癌的迁移。

酪酪肽对荷人肝癌裸鼠皮下移植瘤的影响

目的研究酪酪肽(PYY)对荷人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响并初步探讨其作用机制。方法用含1×107/ml的HepG2人肝癌细胞悬液0.2ml打入裸鼠皮下,待其长出的肿瘤直径约1cm时将瘤块取出,在无菌PBS液中剪成大小1mm×1mm×1mm的小块,用组织插块法制作裸鼠皮下肝癌模型。选取成瘤的32只裸鼠平均分为4组:PYY大、小剂量组,阳性对照组给与腹腔注射氟尿苷,阴性对照组给与皮下注射生理盐水。实验过程中观察裸鼠的一般情况。结果PYY大、小剂量组在肿瘤体积、血清AFP、瘤重及瘤组织cAMP中均低于阴性对照组(P<0.05)。结论PYY可以抑制裸鼠肝癌皮下移植瘤的生长,其机制可能与抑制肝癌细胞内cAMP的含量有关。