不同淫羊藿羊脂油烘制品的HPLC指纹图谱建立、多元统计分析及烘制工艺优化

目的:建立不同淫羊藿羊脂油烘制品的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并筛选最优烘制工艺。方法:采用HPLC法。以淫羊藿苷为参照,绘制22批样品的HPLC指纹图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》进行相似度评价,确定共有峰。采用SIMCA 14.1统计软件进行聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),以变量投影重要性值大于1为标准,筛选影响淫羊藿羊脂油烘制品质量的差异标志物,并以其为指标经烘制动力学研究筛选烘制工艺。结果:22批样品共有18个共有峰,相似度为0.831~0.991;共指认朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、箭藿苷A、箭藿苷B、宝藿苷Ⅰ等7个共有峰。22批样品可聚为两类,S19~S22为Ⅰ类,S1~S18为Ⅱ类;其中Ⅱ类又可聚为Ⅱa(S15~S18)、Ⅱb(S10~S14)、Ⅱc(S1~S9)等3类;PCA结果与上述结果一致。OPLS-DA结果显示,淫羊藿苷、箭藿苷B、宝藿苷Ⅰ为影响淫羊藿羊脂油烘制质量的差异标志物。动力学研究结果显示,淫羊藿苷在180℃烘制25 min或190℃烘制20 min,宝藿苷Ⅰ在180℃烘制30 min或190℃烘制15 min,箭藿苷B在210℃烘制18 min时含量达到最高,根据上述结果最终确定最优烘制工艺为180℃烘制25~30min或190℃烘制15~20 min。结论:所建指纹图谱方法稳定、可靠,重复性好,多元统计分析可用于反映淫羊藿在不同烘制条件下化学成分的变化情况及初步筛选烘制工艺。

蒸鸡油、鸡板油营养价值及稳定性研究

油脂是人体所需重要的供能成分,同时油脂也能为人体提供不饱和脂肪酸等营养物质。鸡油作为人体动物脂肪重要的摄取来源,对其营养价值及稳定性的研究具有十分重要意义。鸡油按照其来源可分为蒸鸡油和鸡板油,本文对这2种鸡油均进行了深入研究。测定这2种鸡油的脂肪酸含量及组成,以及这2种鸡油的氧化诱导期以分析蒸鸡油和鸡板油在营养价值及稳定性上的差异。结果发现,蒸鸡油比鸡板油具有更高的营养价值及稳定性。可为高品质鸡油的制造提供理论依据与技术指导。

基于黄酮成分吸收代谢的炙淫羊藿炮制机制研究

淫羊藿为传统补益类中药,经羊脂油炙后可增强温肾助阳的作用。以往文献对淫羊藿的炮制研究主要集中在化学成分变化和药理药效变化2个方面,本课题组创新性从黄酮成分吸收代谢角度,并基于活性成分转化-肠吸收屏障网络耦联作用研究炙淫羊藿的炮制机制。炙淫羊藿炮制作用分为炮制过程"热"和炮制辅料"羊脂油"的作用2个关键环节,课题组通过连续承担3项国家自然科学基金项目,从ADME角度着重阐明了炙淫羊藿炮制过程中"热"的作用与科学内涵,并首次提出基于"自组装胶束"体内形成机制阐述炮制辅料"羊脂油"的作用与增效机制。该文就课题组多年来对炙淫羊藿炮制机制的研究思路和成果进行总结,并对后续的研究方向和内容进行展望,以期为现代中药炮制机制研究提供新思路与新方法。

羊脂油对淫羊藿活性黄酮自组装胶束模拟形成的影响

该文通过模拟人体内环境,研究羊脂油作用下淫羊藿活性黄酮自组装胶束的模拟形成,同时研究了不同产地(青海、江苏、安徽)、不同来源(山羊和绵羊)、不同部位(肚子油和尾巴油)的12批羊脂油以及羊脂油中主要脂肪酸类成分(硬脂酸、棕榈酸、油酸)对淫羊藿活性黄酮自组装胶束形成的影响。结果表明在羊脂油作用下,模拟形成的胶束呈分散状态,类球形且表面光滑。以粒径、电位、包封率、载药量等为指标对制得的胶束进行考察,发现产地为青海的绵羊制得的胶束较稳定,包封率较高。羊脂油中3种主要脂肪酸类成分能促进淫羊藿活性黄酮自组装胶束的形成,但羊脂油整体作用效果更好。以上研究证实羊脂油促进了淫羊藿活性黄酮自组装胶束的模拟形成,为进一步研究其作为淫羊藿炮制辅料的增效作用,促进淫羊藿活性黄酮的吸收奠定了基础。

羊脂油对淫羊藿炮制品提取物中宝藿苷Ⅰ在大鼠体内药动学特征的影响

目的研究炮制辅料羊脂油对淫羊藿炮制品提取物中主要活性成分宝藿苷I在大鼠体内药动学特征的影响。方法大鼠分别ig给予相同剂量(15 g/kg)的淫羊藿生品提取液、加热品提取液、羊脂油炙品提取液,HPLC-ESI-MS法测定大鼠宝藿苷I血药浓度,经DAS 2.0程序处理数据,比较宝藿苷I药动学参数。结果 3种淫羊藿炮制品提取物在血液中的达峰浓度(Cmax)、药时曲线下面积(AUC)等药动学参数大小为油炙品>加热品>生品,均具有统计学差异。结论羊脂油能促进淫羊藿提取物中宝藿苷I的口服吸收,提高其生物利用度。

基于体内自组装胶束形成机制的羊脂油炙淫羊藿增效机制研究思路与探讨

应用辅料炮制中药,是我国传统制药技术的一大特色。如何采用现代科学技术揭示辅料炮制的科学内涵,是中药炮制研究的核心。淫羊藿为传统补益类中药,经羊脂油制后可增强温肾助阳的作用。然而目前文献研究从化学成分和药理作用2个方面尚不能全面解释辅料羊脂油的炮制机制。该文结合羊脂油所含脂肪酸类成分具有脂肪长链和表面活性的特点,并基于自组装药物传递系统的理论基础,以及淫羊藿黄酮自组装胶束模拟形成和促吸收的实验基础,创新性提出基于"自组装胶束"体内形成机制研究羊脂油炙淫羊藿的作用机制假说,同时详细阐述了自组装胶束对淫羊藿黄酮促吸收作用和增效机制的研究思路和方法,对揭示中药"油炙"的科学内涵具有重要的理论意义和应用价值。

中药炮制辅料羊脂油的研究思路探析

羊脂油是常用的液体炮制辅料之一,用于中药炮制的油炙法,以达到增强炮制药物疗效的目的。目前,羊脂油主要应用于淫羊藿的炮制,来增强淫羊藿补肾壮阳的作用。现阶段,关于羊脂油的化学成分、药用质量标准、油炙工艺、炮制作用等的研究较少,严重影响了羊脂油的临床使用。作者从羊脂油的历史沿革、现代研究、存在问题以及研究思路等方面进行阐述,以期为其临床更广泛的应用奠定基础。

基于体内自组装胶束形成机制探究羊脂油炙淫羊藿对大鼠温肾助阳的增效作用

淫羊藿传统炮制方法为羊脂油炙,具有增强淫羊藿温肾助阳的作用。该文采用腹腔注射氢化可的松法建立大鼠肾阳虚模型,以大鼠体征,血清睾酮、皮质酮含量,组织病理学检查等为评价指标,研究在辅料羊脂油的作用下,淫羊藿总黄酮在体内自组装形成胶束后对肾阳虚大鼠的增效作用。肾阳虚大鼠灌胃淫羊藿总黄酮和总黄酮胶束后,2组大鼠与模型组相比,体征及各项生化指标趋于正常,下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴功能紊乱得到有效改善。实验结果表明,淫羊藿总黄酮及其自组装胶束都具有温肾壮阳的作用,其中以炙淫羊藿增强效果为佳。证明在羊脂油作用下,淫羊藿总黄酮可在体内自组装形成胶束,改善下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴及主要性腺组织睾丸的病理状况,发挥增强淫羊藿温肾助阳的功效,进一步揭示了淫羊藿炮制辅料羊脂油的增效机制。

基于UPLC-Q-TOF-MS代谢组学研究炙淫羊藿温肾助阳的炮制机制

采用代谢组学方法探究炙淫羊藿温肾助阳和炮制增效机制。建立氢化可的松诱导的大鼠肾阳虚证模型,基于UPLC-Q-TOF-MS(ultra-performance liquid chromatography with quadrupole time-of-flight tandem mass spectrometry)代谢组学方法,联合多元统计分析和单变量统计分析,筛选并鉴定血浆、尿液样品中与肾阳虚相关的潜在生物标志物,分析羊脂油组、淫羊藿生品组、淫羊藿加热品组、淫羊藿炙品组改善肾阳虚证的代谢调控机制。结果显示,氢化可的松诱导的肾阳虚大鼠血浆、尿液代谢呈现明显的轨迹变化,在血浆和尿液中鉴定出15种与肾阳虚相关的生物标志物,涉及5条代谢通路,分别为甘油磷脂代谢、鞘脂代谢、硫代谢、乙醛酸和二羧酸代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢。炙淫羊藿温肾助阳的代谢通路涉及甘油磷脂代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢,而炙淫羊藿两个炮制因素“加热”“羊脂油”分别通过调节甘油磷脂代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢来增强其温肾助阳的作用,进而阐明了炙淫羊藿的炮制增效机制。本文涉及的动物实验符合伦理学标准,并且已获得江苏省中医药研究院动物伦理委员会批准(批准号:AEWC-20200702-119)。

羊脂油促进淫羊蕾总黄酮吸收转运的研究

目的研究炮制辅料羊脂油促进淫羊藿总黄酮肠吸收转运机制。方法釆用大鼠在体单向肠灌流模型和Caco-2细胞单层模型研究炮制辅料羊脂油对淫羊藿总黄酮自组装形成胶束后肠吸收的影响。结果大鼠在体单向肠灌流模型中,淫羊藿总黄酮中淫羊藿苷成分在4个肠段的吸收具有差异性,其中在空肠段最高。加入羊脂油自组装形成胶束后,在十二指肠和空肠段的渗透系数显著增加。Caco-2细胞单层模型中,淫羊藿总黄酮中的淫羊藿苷成分吸收渗透系数较小,加入羊脂油自组装形成胶束后吸收渗透系数显著增加,外排比率从4.72下降到了2.31。结论淫羊藿总黄酮肠吸收较差,加入羊脂油后可自组装形成胶束,其在肠道的吸收增加。

以羊脂油制备淫羊藿黄酮自组装胶束对其生物利用度的增效作用研究

目的研究淫羊藿经羊脂油炮制后对黄酮类成分生物利用度的影响。方法采用药理效应法与血药浓度法分别测定淫羊藿总黄酮与淫羊藿苷、宝藿苷Ⅰ的生物利用度。结果淫羊藿黄酮在羊脂油的作用下自组装形成胶束后,淫羊藿总黄酮、淫羊藿苷和宝藿苷Ⅰ与原形药物相比,ρ_(max)分别提高了77.94%、38.99%和49.90%,AUC_(0-t)分别提高了95.19%、37.76%和43.49%,AUC_(0-∞)分别提高了119.35%、35.37%和46.26%。各药动学参数显示在炮制辅料羊脂油的作用下,淫羊藿活性黄酮自组装形成胶束后,生物利用度显著提高。结论炮制辅料羊脂油提高了淫羊藿黄酮生物利用度,促进了其在体内的吸收。

炮制辅料羊脂油对宝藿苷Ⅰ-胆酸盐自组装胶束形成与吸收的影响

淫羊藿传统炮制方法为羊脂油炙,具有增强淫羊藿温肾助阳的功效。该文创新性从药剂学角度,基于淫羊藿黄酮自组装胶束体内形成机制,探讨炙淫羊藿炮制辅料羊脂油的增效机制。选取炙淫羊藿代表性黄酮成分宝藿苷Ⅰ,通过测定胶束粒径、电位及透射电镜观察胶束形态,并采用Caco-2细胞模型、大鼠在体肠灌流模型以及体内血药浓度法,研究羊脂油对宝藿苷Ⅰ-胆酸盐自组装胶束形成与吸收的影响。淫羊藿活性黄酮宝藿苷Ⅰ能够在脱氧胆酸钠的作用下自组装形成胶束,加入炮制辅料羊脂油后,胶束粒径降低、电位绝对值升高、多分散系数PDI降低、包封率及载药量均有显著提高,显示羊脂油能明显改善胶束在体内的形成。加入羊脂油后,宝藿苷Ⅰ在Caco-2单层细胞模型中的转运及大鼠在体肠灌流模型中4段肠道(十二指肠、空肠、回肠、结肠)的渗透系数较宝藿苷Ⅰ-胆酸盐胶束组提高,而体内药动学研究表明加入羊脂油形成胶束后宝藿苷Ⅰ在大鼠体内的生物利用度明显改善,进一步证明炮制辅料羊脂油能够促进宝藿苷Ⅰ自组装胶束的形成与吸收,从而发挥其增效作用。

基于GC指纹图谱和多成分定量分析的不同产地炮制辅料羊脂油的质量评价研究

目的建立中药炮制辅料羊脂油的GC指纹图谱及多成分含量测定方法。方法采用GC法建立羊脂油指纹图谱,并进行聚类分析(HCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)和主成分分析(PCA);对羊脂油所含6个主要脂肪酸进行多成分同时定量分析。结果18批羊脂油样品的指纹图谱相似度大于0.94,共匹配出15个共有峰,指认出肉豆蔻酸甲酯、棕榈酸甲酯、十七碳酸甲酯、硬脂酸甲酯、油酸甲酯、亚油酸甲酯六个化合物。GC多成分含量测定结果显示肉豆蔻酸、棕榈酸、十七碳酸、硬脂酸、油酸、亚油酸在羊脂油中的质量分数分别为1.76%~3.08%、15.83%~22.88%、0.92%~1.96%、8.02%~29.21%、16.84%~34.93%、1.12%~10.21%。PCA分析提取出5个主成分,累计方差贡献率为83.58%,含括了定量的6个主要脂肪酸成分,较好地反应了羊脂油中主要脂肪酸的信息。结论所建立的GC指纹图谱及多成分含量测定方法可为炮制辅料羊脂油的质量控制提供参考。