多重耐药革兰阴性杆菌耐消毒剂基因qacE△1-sul1监测

目的了解某院临床常见革兰阴性(G^-)杆菌多重耐药株耐消毒剂基因qacE△1-sul1的产生情况。方法收集临床分离的G^-杆菌235株,包括155株多重耐药株和80株敏感株,采用聚合酶链反应(PCR)法检测qacE△1-sul1基因,并进行DNA测序。结果在50株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌、27株产ESBLs肺炎克雷伯菌、50株多重耐药的铜绿假单胞菌和28株多重耐药的鲍曼不动杆菌中,检出qacE△1-sul1株分别为37、24、46、28株,检出率分别为74.00%、88.89%、92.00%和100.00%,总的检出率为87.10%;在非产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌以及铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的敏感株(各20株)中,分别检出qacE△1-sul1株16、7、5、13株,检出率分别为80.00%、35.00%、25.00%和65.00%,总的检出率为51.25%。结论该院G^-杆菌多重耐药株耐消毒剂基因qacE△1-sul1的携带率较高,加强多重耐药菌对消毒剂耐药性的监测,对临床合理使用消毒剂具有重要意义。

嗜麦芽窄食单胞菌sul1、sul2基因与复方新诺明耐药关系

目的检测sul1与sul2基因在嗜麦芽窄食单胞菌中分布情况,并探讨其分布与耐复方新诺明的关系。方法利用K-B纸片法筛选嗜麦芽窄食单胞菌对复方新诺明的耐药菌株,同时,用微量肉汤稀释法测定复方新诺明对耐药菌株最低抑菌浓度(MIC)、PCR法扩增全部菌株的sul1与sul2。结果102株嗜麦窄食单胞菌有8株表现为耐复方新诺明,耐药率7.8%,8株中有4株sul1阳性,1株合并sul2阳性,并表现为复方新诺明高MIC。结论嗜麦芽窄食单胞菌对复方新诺明的高度耐药性可能与sul1与sul2的存在有关。

革兰阴性杆菌耐季铵盐消毒剂-磺胺复合物基因qacE-sul1的检测

目的:检测革兰阴性菌中耐季铵盐消毒剂-磺胺复合物的qacE-sul1基因,为临床提供细菌对消毒剂的耐药信息。方法:使用稀释计数法测定60株革兰阴性杆菌对季胺盐复合物(QACs)的最低有效杀菌浓度,使用改良的表型筛选试验检测耐QACs的表型,使用聚合酶链反应(PCR)试验检测耐季铵盐消毒剂-磺胺复合物基因qacE-sul1。结果:部分革兰阴性杆菌临床分离株对QACs的最低有效杀菌浓度超过其推荐消毒浓度的8倍;60株革兰阴性杆菌中表型筛选试验14株阳性;11株qacE-sul1基因阳性,其中部分菌株进行全长基因测序并登陆美国核酸数据库(Genebank),注册号:AY769739;结论:在临床常见革兰阴性杆菌中已出现由遗传物质介导的高耐QACs的细菌;本研究所采用的改良表型筛选试验能有效地检测高耐QACs的细菌表型。

鲍曼不动杆菌中耐消毒剂基因qacEΔ1-sul1和Ⅰ类整合酶的携带情况调查

目的调查分析我院临床分离的鲍曼不动杆菌菌株中耐药基因的分布情况及部分多重耐药株的流行病学特点。方法收集2016年1~6月我院院内分离的150株鲍曼不动杆菌,MIC法测定其对抗生素的敏感性;将对三类以上抗生素耐药的菌株定义为多重耐药菌,运用PCR法检测qac EΔ1-sul1和int I 1基因在所分离菌株中的分布,并用PFGE法对其中多重耐药鲍曼不动杆菌进行分子分型。结果鲍曼不动杆菌敏感率排行前三的药物为妥布霉素(50.0%)、庆大霉素(44.2%)和亚胺培南(42.4%);84株多重耐药鲍曼不动杆菌中排行前三的药物为美罗培南(33.3%)、头孢哌酮(33.3%)和左氧氟沙星(13.1%);qac EΔ1-sul1和int I 1在鲍曼不动杆菌中的携带率为46.2%(85/150)和58.0%(88/150);在多重耐药鲍曼不动杆菌中的携带率为59.5%(49/84)和83.4%(70/84)。多重耐药鲍曼不动杆菌经PFGE分型可分为14个克隆,其中A克隆最多见,在ICU、呼吸科和急诊病房均存在集中流行,神经内科和老年科以C克隆多见,其余均为散在流行。结论 qac EΔ1-sul1和int I 1在鲍曼不动杆菌中的携带率很高,在多重耐药株中更高,说明I类整合子是鲍曼不动杆菌产生耐药的原因之一,研发新的消毒剂以消除鲍曼不动杆菌在院内的流行迫在眉睫,此外同一克隆株在同一病区的集中流行和在病区间的交叉流行提示应采取进一步的感染控制和隔离措施。

嗜麦芽寡养单胞菌sul1、sul2基因与复方新诺明耐药关系

目的检测sul1与sul2基因在嗜麦芽寡养单胞菌中的分布,并探讨其分布与耐复方新诺明的关系。方法利用K-B纸片法筛选嗜麦芽寡养单胞菌对复方新诺明的耐药菌株,同时耐药菌株用微量肉汤稀释法测定复方新诺明最低抑菌浓度(MIC),PCR法扩增全部细菌的sul1与sul2基因。结果102株嗜麦芽寡养单胞菌有8株表现为耐复方新诺明,耐药率7.8%,8株中有4株sul1阳性,1株合并sul2阳性,并表现为对复方新诺明高MIC。结论嗜麦芽寡养单胞菌对复方新诺明的高度耐药性可能与sul1与sul2的存在有关。

不同来源大肠埃希菌中Ⅰ类整合子和耐消毒剂基因qacE△1-sul1的研究

目的研究健康大学生及住院患者肠道内大肠埃希菌Ⅰ类整合子及qacE△1-sull基因的携带情况,并与临床分离株比较,初步探讨其影响因素。方法常规方法分离并鉴定健康大学生粪便分离大肠埃希菌79株,住院患者粪便分离出40株及住院患者其他类型标本分离出29株,PCR方法检测Ⅰ类整合酶及qacE△1-sul1基因,K-B法检测药物敏感性,标准纸片扩散确证法检测ESBLs。结果Ⅰ类整合酶基因总检出率为26.35%,qacE△1-sul1基因总检出率为68.92%;临床分离株组Ⅰ类整合酶及qacE△1-sull基因携带率均高于两组粪便,差异有统计学意义(P<0.01),但两组粪便组携带率差异无统计学意义(P>0.05);Ⅰ类整合酶阳性组菌株对阿莫西林、左氧氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、阿米卡星与头孢噻肟的耐药率均明显高于阴性组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);ESBLs阳性组Ⅰ类整合酶的阳性率为43.24%,明显高于阴性组20.72%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论肠道内大肠埃希菌Ⅰ类整合子的携带率与多种药物耐药有关,与ESBLs及qacE△1-sul1基因的携带有关,肠道内大肠埃希菌中耐消毒剂基因qacE△1-sul1的携带高,医疗部门应及时监测并在选用消毒剂种类上做出调整。

肺炎克雷伯菌中Ⅰ类整合子与qacE△1-sul1基因的研究

目的了解医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌Ⅰ类整合子和qacE△1-sul1耐消毒剂基因的携带情况。方法收集临床住院患者分离出的产ESBLs肺炎克雷伯菌108株;采用K-B法测定抗菌药物的敏感性;聚合酶链反应(PCR)检测Ⅰ类整合子和qacE△1-sul1基因。结果Ⅰ类整合子基因总检出率为53.70%,qacE△1-sul1基因总检出率为63.89%;产ESBLs肺炎克雷伯株Ⅰ类整合子阳性株除对氨苄西林和哌拉西林的耐药率与Ⅰ类整合子阴性株差异无统计学意义以外,对其他抗菌药物的耐药率均明显高于整合子阴性株,差异有统计学意义(P<0.05)。结论医院产ESBLs肺炎克雷伯菌Ⅰ类整合子和qacE△1-sulⅠ耐消毒剂基因携带率均较高,应进一步加强Ⅰ类整合子和耐消毒剂基因菌株的流行病学监测,并根据耐消毒剂状况,在消毒剂的使用上作出相应的调整。

铜绿假单胞菌烧伤患者分离株qacE△1-sul1基因检测及临床意义

目的了解分离自烧伤病房患者的铜绿假单胞菌中消毒剂-磺胺耐药qacE△1-sul1基因的存在状况。方法采用GNS-448药敏卡及K-B法测定抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)测定qacE△1-sul1基因并进行序列分析。结果32株铜绿假单胞菌对氨苄西林、头孢呋辛、头孢西丁、复方新诺明完全耐药,对阿米卡星的敏感率最高为68.0%,对庆大霉素的敏感率为46.9%,而对亚胺培南、美罗培南的耐药率分别达到68.8%、59.4%;16株(50.0%)qacE△1-sul1基因阳性。结论分离自烧伤患者的铜绿假单胞菌耐药严重,qacE△1-sul1基因携带率较高。

新疆地区鲍氏不动杆菌qacE△1-sul1基因检测及临床意义

目的研究乌鲁木齐地区住院患者中分离的鲍氏不动杆菌qacE△1-sul1耐药基因,以了解此基因在新疆地区的分布及差异性。方法采用API系统鉴定分离菌株,根据CLSI的标准采用K-B法和微量稀释法测定抗菌药物的敏感性;最后采用聚合酶链反应检测qacE△1-sul1基因并在基因库上比对。结果耐药表型显示鲍氏不动杆菌对三代的头孢噻肟和四环素耐药率最高,均达到100.0%,头孢派酮/舒巴坦等加酶抑制剂耐药率最低;鲍氏不动杆菌携带qacE△1-sul1耐药基因高达52.5%。结论新疆地区鲍氏不动杆菌耐药产生率较高;qacE△1-sul1耐药基因携带率高;应进一步加强由整合子携带耐药基因进行耐药传播的菌株的流行病学监测。

鲍氏不动杆菌儿童分离株qacE△1-sul1及IntⅠ1基因与抗菌药物多药耐药性关系研究

目的鲍氏不动杆菌(ABA)在儿科临床分离株的耐消毒剂-磺胺基因(qacE△1-sul1)、整合酶基因(IntⅠ1)以及与该基因阳性细菌多药耐药的关系。方法28株ABA收集自2006年分离的儿科住院肺炎患儿的深部痰培养标本,均采用VITEK-32全自动微生物鉴定仪GNI和GNS卡进行细菌鉴定和药敏试验;qacE△1-sul1与IntⅠ1基因检测用聚合酶链反应(PCR)方法。结果检测的28株ABA中3株呈多药耐药性,阳性率10.71%,复方新诺明(SXT)检出4株耐药菌株,耐药率14.29%,qacE△1-sul1基因检出11株,阳性率为39.29%,IntⅠ1基因检出4株,阳性率14.29%;4株复方新诺明耐药菌株(包括3株多药耐药株)均检出qacE△1-sul1和IntⅠ1基因,其余7株qacE△1-sul1基因阳性菌株对复方新诺明表型敏感。结论ABA儿童分离株对SXT耐药的主要原因是获得了qacE△1-sul1基因;对于复方新诺明表型敏感,但qacE△1-sul1基因阳性菌株也应引起重视,防止在抗菌药物的压力下,出现耐药;因qacE△1-sul1、IntⅠ1基因两者之一为阳性即可表明该菌株携带Ⅰ类整合子,即可能含有多药耐药基因,其对抗菌药物表现多药耐药性,应引起儿科医生的高度重视。

临床分离大肠杆菌磺胺敏感性及磺胺抗性相关基因的检测

对分离自中国东北牛(n=181)、猪(n=182)、鸡(n=146)和鹌鹑(n=55)的粪便及病变器官的564株大肠杆菌菌株进行磺胺敏感性与磺胺抗性基因检测。分别用肉汤微量稀释法和聚合酶链式反应检测磺胺敏感性和磺胺抗性基因。结果表明:在564株菌株中,235(41.7%)株对磺胺试剂敏感,329(58.3%)株对磺胺甲恶唑有抗性,190(33.7%)株对甲氧苄啶-磺胺甲恶唑有抗性;不同动物分离株的磺胺抗性比例不同,从牛、猪、鸡和鹌鹑中分离到的菌株int1基因的比例分别是12.2%、44.5%、40.4%、18.2%,sul1基因比例分别是5.5%、37.4%、28.1%、3.6%,sul2基因比例分别是39.2%、25.3%、29.5%、10.9%,但在牛、鸡、鹌鹑源菌株中未检测到sul3基因,在182株猪源大肠杆菌中检测到13株(7.1%)sul3基因阳性菌株。菌株的磺胺抗性与其包含的抗性基因之间不完全吻合。

猪源粪肠球菌耐药性及其Ⅰ类整合子遗传标记研究

为查明猪源粪肠球菌Ⅰ类整合子遗传标记及其相关耐药性,本研究对新疆某集约化猪场环境和粪便中分离的16株粪肠球菌进行磺胺类药物的敏感性测定和季胺类消毒液抑菌效果观察,同时以PCR法测定分离株中Ⅰ类整合子遗传标记,结果发现16株粪肠球菌中I类整合酶基因阳性率为75%(12/16),qacE△1-sul1基因阳性率为62.5%(10/16),对磺胺嘧啶的耐药率为81.25%(13/16),苯扎溴铵对分离株的抑菌率为31.25%(5/16)。表明分离株中I类整合酶基因和qacE△1-sul1基因携带率高;鉴于整合子对耐药基因水平传播的可能性,磺胺类药物作为预防猪场细菌性疾病的感染以及季胺类(苯扎溴铵)消毒剂作为猪场常规消毒剂需要科学的验证方可使用;同时警示应加强动物性食品源性细菌耐药性的监测,以阻断耐药基因给人的传播。

耐复方新诺明嗜麦芽窄食单胞菌耐药基因检测及同源性分析

目的探讨嗜麦芽窄食单胞菌临床分离株耐复方新诺明的耐药机制及同源性。方法 2013年1月至2013年12月共分离获得126株嗜麦芽窄食单胞菌,药敏试验采用K-B法。PCR法检测sul1、sul2、ISCR2、I类整合子。并对I类整合子PCR扩增阳性产物进行测序分析,确定基因型,ERIC-PCR对其同源性进行分析。结果嗜麦芽窄食单胞菌对复方新诺明的耐药率为17.4%。22株耐药菌有16株sul1阳性,15株I类整合子阳性;未发现sul2、ISCR2阳性株。22株耐药株分为21个基因型。结论本院嗜麦芽窄食单胞菌耐复方新诺明与sul1和I类整合子高度相关,与sul2、ISCR2无关,耐药菌株之间无遗传相关性。

常见医院感染多重耐药革兰阴性杆菌Ⅰ类整合子标志物检测

目的了解浙江省湖州解放军第98医院从临床分离的常见医院感染多重耐药革兰阴性杆菌Ⅰ类整合子存在状况。方法从临床分离鲍曼不动杆菌60株、铜绿假单胞菌30株、阴沟肠杆菌20株、嗜麦芽窄食单胞菌19株和黄杆菌属15株(脑膜败血性黄杆菌12株、产吲哚金黄杆菌3株),采用聚合酶链反应及序列分析的方法检测Ⅰ类整合子标志物 int Ⅰ 1及qacE△1 基因。结果鲍曼不动杆菌、铜绿似单胞菌、阴沟肠杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌和黄杆菌属中 int Ⅰ 1基因阳性率分别为58.3%、0、95.0%、0和0,qacE△1基因阳性率分别为83.3%、83.3%、85.0%、10.5%和0。合计144株中 int Ⅰ 1和 qacE△1阳性株数(%)分别为54株(37.5%)、94株(65.3%),Ⅰ类整合子标志物总阳性率为68.1%(98/144)。结论解放军第98医院从临床分离的常见医院感染多重耐药革兰阴性杆菌Ⅰ类整合子携带率相当高。

嗜麦芽窄食单胞菌对复方新诺明耐药的机制研究

目的：检测 I类整合酶基因（intI 1）及 qacE△1-sul1和 sul2基因在耐复方新诺明的嗜麦芽窄食单胞菌中的分布情况，并探讨基因分布与细菌耐药性的关系。方法收集临床分离的嗜麦芽窄食单胞菌，煮沸法提取总 DNA，采用 PCR法检测 intI 1，qacE△1-sul1和 sul2基因在复方新诺明敏感菌株和耐药菌株中的分布情况。结果28株耐复方新诺明嗜麦芽窄食单胞菌中有25株检出 I类整合酶基因，检出率为89.29％；21株检出 qacE△1-sul1基因，检出率为75％；15株检出sul2基因，检出率为53.57％；18株复方新诺明敏感的嗜麦芽窄食单胞菌中有5株检出 I 类整合酶基因，检出率为27.78％，4株检出 qacE△1-sul1基因，检出率为22.22％，均未检出 sul2基因。结论耐复方新诺明嗜麦芽窄食单胞菌大部分携带有 intI 1，qacE△1-sul1和 sul2基因，嗜麦芽窄食单胞菌对复方新诺明的耐药性与 intI 1，qacE△1-sul1和 sul2的存在有关。

鸭源多杀性巴氏杆菌对磺胺类药物的耐药性检测及耐药基因分析

为明确鸭源多杀性巴氏杆菌对磺胺类药物的耐药性及耐药基因的分布特征,试验采用琼脂二倍稀释法对分离自福建、广东和江西等地的89株鸭源多杀性巴氏杆菌进行甲氧苄啶/磺胺甲噁唑的耐受性检测,用PCR法检测各耐药菌株的磺胺类耐药基因(sul1、sul2和sul3),并利用多位点序列分型(MLST)分析耐药菌株间的亲缘关系。结果显示,33株鸭源多杀性巴氏杆菌对甲氧苄啶/磺胺甲噁唑耐受,耐药率为37.1%(33/89);在耐药菌株中,sul1、sul2和sul3基因检出率分别为100%(33/33)、97.0%(32/33)和21.2%(7/33),其中sul1和sul2基因同时检出率为97.0%(32/33),sul1、sul2和sul3基因同时检出率为21.2%(7/33);所有耐药菌株均属于ST129型。以上结果表明,鸭源多杀性巴氏杆菌对磺胺类药物具有一定的耐药性,其中的耐药菌株都属于同一序列型ST129,均携带有sul1耐药基因,且绝大多数耐药菌株同时携带sul1与sul2两种耐药基因,提示在福建、广东和江西等地需慎用磺胺类药物来防治该细菌的感染。

铜绿假单胞菌消毒剂-磺胺耐药基因检测及对消毒剂的抗性研究

目的了解铜绿假单胞菌Ⅰ类整合子消毒剂-磺胺耐药基因(qacE△1-sull)的携带情况以及阳性菌株对碘伏、戊二醛、氯己定、"84"消毒液的抗性。方法对某院2007年12月-2008年1月连续分离的20株铜绿假单胞菌以聚合酶链反应(PCR)法检测qacE△l-sull基因,测定其阳性菌株对上述4种消毒剂的最低抑菌浓度(MIC)。结果 20株铜绿假单胞菌中检出qacE△1-sull阳性株10株(50.00%)。碘伏、戊二醛、氯己定、"84"消毒液对qacE△1-sull阳性菌株的MIC范围分别为:8.0～128.0μg/mL、16.0～256.0μg/mL、1.0～16.0μg/mL、4.0～64.0μg/mL。结论 qacE△1-sul1基因普遍存在于临床分离的铜绿假单胞菌中,阳性菌株对碘伏、戊二醛、氯己定、"84"消毒液存在抗性差异,应合理使用消毒剂并增加作用时间,以有效控制铜绿假单胞菌的播散。

医院感染患者临床分离细菌耐消毒剂基因的检测分析

目的检测医院感染后临床分离的细菌耐消毒剂基因qacE-sul1存在情况。方法采用聚合酶链反应(PCR)技术检测qacE-sul1基因。结果222株细菌qacE-sul1基因的检出率为54.5%,其中肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、变形菌属、铜绿假单胞菌、肠球菌属、鲍氏不动杆菌阳性率分别为47.6%、58.3%、57.6%、54.2%、53.6%、53.3%、55.0%。结论医院感染患者临床分离耐消毒剂基因qacE-sul1携带率较高,细菌携带qacE-sul1基因可能是引起医院感染的重要原因,应引起我国医院消毒界的重视。

医院感染多重耐药革兰阴性杆菌耐消毒剂基因的检测分析

目的研究医院感染多重耐药革兰阴性杆菌耐消毒剂基因qac E△1-sul1存在情况。方法采用聚合酶链反应(PCR)技术检测qac E△1-sul1基因。结果 201株多重耐药革兰阴性杆菌对阿莫西林和头孢类等抗菌药物多数耐药率均达到50%以上,但对碳青霉烯类仍高度敏感。qac E△1-sul1基因的总检出率为40.80%,其中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌、产ESBLs肺炎克雷伯菌、多重耐药鲍曼不动杆菌、多重耐药的铜绿假单胞菌qac E△1-sul1检出率分别为34.78%、44.23%、58.91%和31.25%。结论医院感染患者临床分离多重耐药革兰阴性杆菌耐消毒剂基因qac E△1-sul1携带率较高,加强多重耐药革兰阴性杆菌对消毒剂耐药性的监测,对临床合理使用消毒剂具有重要意义。

鲍氏不动杆菌新型整合子、Ⅰ类整合子遗传标记研究

目的了解医院ICU临床分离鲍氏不动杆菌(ABA)的新型整合子、Ⅰ类整合子遗传标记存在状况,探讨ABA多药耐药机制。方法收集20株分离自2007年10月-2008年7月ICU患者临床标本的ABA,采用纸片扩散法测定32种抗菌药物的敏感性;采用PCR法检测新型整合子遗传标记(tnpU基因)、Ⅰ类整合子遗传标记(qacE△1-sul1基因);PCR阳性产物为PCR直接全自动荧光法测序。结果tnpU基因检测到11株,阳性率55.0%;qacE△1-sul1基因检测到15株,阳性率75.0%。结论ABA存在严重的对β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类、四环素和复方新诺明等抗菌药物多药耐药状况,与细菌转座子和整合子携带率高有关;氯己定预防术后医院感染需要重新评估。