Studies on Biologically Active Principles of Huangqi,Root of Astragalus membranaceous,Isolation and Detection of Constituents Scavenging Superoxide Anion

本文使用黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶—鲁米诺化学发光体系和化学发光检测法研究了黄芪中各成分的清除超氧阴离子自由基的能力,以药物抑制发光强度50%的浓度(IC_(50))为指标。经研究证明,黄芪总皂甙部分(N)具有较强的活性,IC_(50)为185μg/ml,再经进一步导向分离并鉴定证明,黄芪甙Ⅲ,Ⅳ和Ⅵ的 IC)_(50)分别为80、50和11μg/ml,从而证明黄芪的抗心力衰竭的有效成分可能为黄芪总皂甙部分。

基于均匀试验设计的3种浆果花色苷体外协同抗氧化研究

本研究旨在探究3种浆果花色苷的协同抗氧化活性,以DPPH自由基清除率为评价指标,采用均匀试验设计法优化3种浆果花色苷协同抗氧化组合。经过统计分析和数学回归模型拟合得到最优组合:笃斯越橘花色苷(DP)、黑加仑花色苷(HP)、蓝靛果花色苷(LP)最佳浓度分别为0.08 mg/mL、0.14 mg/mL和0.18 mg/mL,对DPPH自由基的实际清除率为(97.67±0.51)%,接近理论期望值100%,说明模型优选的组合具有可行性。通过协同效应分析,优选组合清除DPPH自由基和羟自由基的协同效应指数CI值分别为0.297和0.651,进一步说明DP、HP、LP3种浆果花色苷具有显著协同抗氧化效果。研究成果可为天然抗氧剂及小浆果功能产品研发提供依据。

武夷山地方茶树种质生化特性和茶多糖清除超氧阴离子自由基活性分析

为探明武夷山地方茶树种质主要生化成分特性和茶多糖清除超氧阴离子自由基活性差异,测定了31份武夷山地方茶树种质主要生化成分含量,采用水提醇沉淀法提取茶多糖,并采用黄嘌呤氧化酶法比较了茶多糖SOD活力。结果表明,武夷山地方茶树种质主要生化成分存在较强的变异和遗传多样性,具有较大的遗传改良潜力。平均变异系数为21.84%,平均遗传多样性指数为2.08,平均改良潜力为50.92%;茶多酚、游离氨基酸、黄酮类化合物、可溶性糖含量和酚氨比均呈正态分布;茶多酚含量与黄酮类化合物含量呈极显著正相关,与可溶性糖含量呈极显著负相关,游离氨基酸含量与可溶性糖含量呈极显著负相关;提取的前2个主成分包含了5个生化指标81.08%的信息,游离氨基酸和茶多酚含量是5个生化性状的特征指标,主成分综合得分排名前5位的茶树种质为‘白牡丹’‘红海棠’‘向天梅’‘半天妖’和‘香石角’,可作为武夷山茶区优质乌龙茶品种选育和推广栽培的良好材料;基于生化成分的聚类分析将31份茶树种质分为3类,第Ⅰ类群13份种质茶多酚和黄酮类化合物含量高,可溶性糖含量低,第Ⅱ类群8份种质游离氨基酸含量较低,可溶性糖含量较高,第Ⅲ类群10份种质酚氨比较高,可溶性糖含量中等;基于茶多糖SOD活力的聚类分析,可将31份茶树种质分为3类,第Ⅰ类群8份种质茶多糖SOD活力低,第Ⅱ类群19份种质茶多糖SOD活力居中,第Ⅲ类群4份种质茶多糖SOD活力高;茶多糖SOD活力存在丰富的变异,变异系数达40.62%,遗传多样性指数为2.07;‘白鸡冠’‘大红袍’‘大红梅’和‘灵芽’4份种质茶多糖SOD活力高,清除超氧阴离子自由基能力强。研究结果可为武夷山地方茶树种质的改良和开发利用提供科学依据。

水液相下依达拉奉与超氧阴离子自由基反应的密度泛函理论

采用密度泛函理论(DFT)的M06-2X和MN15方法,结合自洽反应场理论的SMD(solvationmodeldensity)模型方法,研究水液相下依达拉奉(Eda)消除超氧阴离子自由基(O_(2)^(·-))的反应机理.结果表明:Eda消除O_(2)^(·-)的反应有3个通道,分别是O_(2)^(·-)抽H原子、O_(2)^(·-)加成到不饱和C和单电子从Eda向O_(2)^(·-)转移;O_(2)^(·-)抽H反应的最低能垒为12.2kJ/mol,O_(2)^(·-)加成反应的最低能垒为110.2kJ/mol,单电子从Eda向O_(2)^(·-)转移的能垒为408.5kJ/mol,抽H反应最具优势.水液相下Eda消除O_(2)^(·-)的反应主要在抽H通道实现,因此Eda可作为O_(2)^(·-)自由基清除剂.

太白七药珠子参的体外抗氧化活性研究

目的:考察太白七药珠子参的体外抗氧化活性。方法:采用铁还原力,清除二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和超氧阴离子(·O^(2-))自由基能力,对Cu^(2+)/H_(2)O_(2)损伤牛血清白蛋白(BSA)的保护及对H_(2)O_(2)损伤小鼠巨噬细胞RAW264.7的保护能力的评价方法,对珠子参水提物、珠子参皂苷和珠子参多糖的抗氧化活性进行考察。结果:不同浓度的珠子参水提物、珠子参皂苷和珠子参多糖均有一定的铁还原能力,清除DPPH自由基和·O^(2-)自由基能力,且呈浓度依赖性,其中珠子参皂苷的铁还原力、清除自由基能力均最强;不同浓度的珠子参水提物、珠子参皂苷和珠子参多糖对Cu^(2+)/H_(2)O_(2)诱导的蛋白氧化损伤具有保护作用,且珠子参水提物的保护能力最强;不同浓度(6.25~100μg/mL)珠子参水提物、珠子参皂苷和珠子参多糖对H_(2)O_(2)诱导损伤的RAW264.7细胞具有保护作用,且呈浓度依赖性,其中浓度为100μg/mL的珠子参皂苷保护能力最强。结论:珠子参水提物、珠子参皂苷和珠子参多糖均具有一定的体外抗氧化能力,但它们在不同方面中的抗氧化能力存在一定的差异。

喀斯特地区蓝莓主栽品种花青素的抗氧化活性分析

为探究喀斯特地区主栽蓝莓品种的花青素含量及其抗氧化活性间的相关性,鉴选喀斯特地区高花青素蓝莓品种,本研究以贵州省的5个主栽蓝莓品种(“夏普蓝”“灿烂”“巴尔德温”“粉蓝”“莱克西”)为研究对象,跟踪检测各品种果实5个发育时期(幼果期、白果期、转色期、紫果期和成熟期)的花青素、Vc含量及抗氧化活性指标的变化情况,采用隶属函数分析法进行综合评价。结果表明,5个主栽蓝莓品种果实的花青素含量、总还原能力、总抗氧化活性及自由基(DPPH·自由基、·OH自由基、O_(2)^(·-)自由基、ABTS·自由基)清除率均随果实发育期的增长呈逐渐增长的变化趋势;其中,成熟期“夏普蓝”花青素的含量最高,为3.67 mg/g;成熟期“灿烂”的花青素含量仅次于“夏普蓝”,其总还原力、总抗氧化活性及对DPPH·自由基和·OH自由基的清除率最高,分别为0.70μg/mL、75.94μg/mL、98%、96%;此外,成熟期“夏普蓝”和“灿烂”果实中花青素对ABTS·自由基清除率最强,均为91%;“莱克西”成熟期花青素的O_(2)^(·-)自由基清除率最高,为85%。各蓝莓品种间Vc含量差异较大,整体随果实发育进程呈“N”字型变化,成熟期“夏普蓝”Vc含量最高,为17.25mg/100 g,“粉蓝”最低,为11.86 mg/100 g。5个蓝莓品种抗氧化活性的隶属函数分析结果表明,“灿烂”花青素的抗氧化活性排第一。综上,“夏普蓝”成熟期花青素和Vc含量最高,“灿烂”花青素的抗氧化活性最优,因此“夏普蓝”和“灿烂”都较适合作为喀斯特地区精深加工推广种植品种。

用清除超氧阴离子自由基法评价竹叶提取物抗氧化能力

通过对邻苯三酚反应体系的吸收光谱,对自氧化速率及邻苯三酚浓度和缓冲液pH值对反应体系产生的超氧阴离子自由基清除率的影响进行了研究。分光光度法测定邻苯三酚反应体系的检测波长为319.5nm,反应体系体积10mL,反应时间为9min,3mmol·L-1邻苯三酚加入量为0.3mL,Tris-HCl缓冲液pH值为8.2,自氧化速率为0.035;用上述方法研究合成抗氧化剂叔丁基对苯二酚(TBHQ)和竹叶提取物样品浓度和清除率的关系,以IC50值(清除率为50%时的浓度值)作为评价指标,测得TBHQ和效果最好样品的IC50值分别为TBHQ(95.01mg·L-1)和M40(298.69 mg·L-1),M40等竹叶提取物可以作为天然抗氧化剂进行开发。

芦荟大黄素、芦荟素清除氧自由基作用的研究

目的:研究芦荟大黄素和芦荟素对超氧阴离子自由基(O2-.)、羟自由基(.OH)的清除作用。方法:采用邻苯三酚自氧化体系产生(O2-.),研究芦荟大黄素、芦荟素对O2-.的清除作用;利用Fenton反应产生.OH,研究芦荟大黄素、芦荟素对.OH的清除作用;计算表观清除率及IC50,并与特异性清除剂维生素C做比较。结果:芦荟大黄素、芦荟素、维生素C对O2-.的IC50分别为6.8,8.5,11mg.L-1,对.OH的IC50分别为0.24,0.25,9.1mg.L-1,其清除能力芦荟大黄素>芦荟素>维生素C。结论:芦荟大黄素、芦荟素对O2-.、.OH均有较强清除能力,且清除能力与浓度呈明显的量效关系。

玉郎伞提取物对超氧阴离子自由基和羟自由基的抑制和清除作用

目的 :探讨玉郎伞提取物 (YL S)对氧自由基的抑制和清除作用。方法 :采用分光光度法检测 YL S对超氧阴离子自由基(O2 · - )和羟自由基 (· OH )的清除及抑制作用。结果 :YL S浓度为 0 .15、0 .30、0 .6 0 g/ ml在体外对· OH的清除率分别为7.1%、2 9.1%、6 8.5 % ,对 O2 · -的清除率分别为 4 0 .5 %、4 9.9%和 6 4 .5 % ,对 O2 · -生成的抑制率分别为 4 8.0 %、6 0 .3%和6 8.8%。结论 :YL S对 O2 · - 具有明显的抑制及清除作用 ,对· OH也有一定的清除作用。

菜籽多酚和Vc在化学模拟体系中清除超氧阴离子和羟自由基的能力

研究菜籽多酚、Vc、菜籽多酚与Vc混合物在化学模拟体系中清除超氧阴离子自由基OH.O2.与羟自由基.OH自由基的能力。用邻苯三酚自氧化法测定抗氧化剂清除OH.O2.的能力,用铁氧化邻二氮菲-Fe2+法测定抗氧化剂清除.OH的能力。结果表明:菜籽多酚、Vc、菜籽多酚与Vc的混合物清除OH.O2.、.OH都不呈剂量-效应关系。菜籽多酚在0.25mg/ml浓度时对OH.O2.与.OH的清除率均最高,分别达51.40%和84.82%。Vc在0.80mg/ml时对OH.O2.的清除率最高,达80.39%;在0.40mg/ml时对.OH的清除率最高,达91.35%。当总浓度为0.25mg/ml时,菜籽多酚与Vc的混合物没有协同增加清除OH.O2.的作用;菜籽多酚与Vc按7∶3、8∶2两种比例混合,在清除.OH时有协同增效作用,协同增效的最佳比例为7∶3,最大清除率达78.78%。

儿茶素抗氧化作用的协同增效效应

用电子自旋共振(ESR)和化学发光技术,研究了(-)-EGCG、(-)-ECG、(-)-EC、(-)-EGC 4种儿茶素及其不同组合,对超氧阴离子自由基(O(?))的清除作用。结果表明,单一儿茶素以(-)-EGCG 的清除能力最强,其纳摩尔清除率为316.3,其次为(-)-ECG,纳摩尔清除率为262.9;两两不同组合对O(?)的清除率以(-)-EGCG+(-)-ECG 效果最佳,比各自单独存在时要增效,三三组合时以(-)-EGCG+(-)-ECG+(-)-EC 组合效果最佳,增效效果明显,且强于两两组合。这些组合的增效效果与体系中存在的儿茶素的摩尔浓度呈高度的线性正相关。4种儿茶素组成不同的比例,以茶叶天然组成增效效果最明显。用伏安法测得的各儿茶素第一还原电位由高到低的次序为:(-)-EGCG>(-)-ECG>(-)-EGC≈(-)-EC,这一电位次序是儿茶素构成抗氧化循环的根本所在。

鱿鱼墨黑色素的自由基清除活性研究

目的比较鱿鱼墨黑色素和黑色素铁的自由基清除活性。方法采用高速离心法从北太平洋鱿鱼(Ommastrephes bartrami)墨中提取黑色素,并通过黑色素与FeCl3螯合制备了Fe(Ⅲ)含量为5.6%(W/W)的黑色素铁。采用鲁米诺发光系统测定了黑色素和黑色素铁对羟自由基(.OH)与超氧阴离子自由基(O2.-)清除活性。结果鱿鱼墨黑色素清除超氧阴离子自由基和羟自由基的IC50值分别为0.2 mg.mL-1和0.015mg.mL-1,远低于肌肽的0.53mg.mL-1和0.1 mg.mL-1,而黑色素铁清除超氧阴离子自由基和羟自由基的IC50值分别为0.58mg.mL-1和0.83mg.mL-1。结论鱿鱼墨黑色素是一种活性较高的天然自由基清除剂,而黑色素铁的自由基清除活性较黑色素低。

有机锗Ge-132对氧自由基和由羟自由基诱导的脂质过氧化的影响

有机锗Ｇｅ－１３２对邻苯二酚自氧化过程中产生的超氧阴离子自由基具有清除作用，但比抗坏血酸弱；Ｇｅ－１３２对由Ｆｅｎｔｏｎ反应产生的羟自由基具有清除作用，对羟自由基诱导的大鼠肝匀浆脂质过氧化具有抑制作用。在清除羟自由基抗脂质过氧化方面，Ｇｅ－１３２的作用强于甘露醇。

分光光度法研究芦丁-铜配合物及其自由基清除活性

芦丁是天然多羟基黄酮苷 ,具有广泛的药理作用。分光光度法研究了芦丁与金属铜离子的配位性能 ,在 KH2 PO4- Na OH(p H=7.38)缓冲溶液中 ,芦丁与 Cu( Ⅱ )能形成 1∶ 1的配合物 ,并具有良好清除自由基活性。

仙茅苷对自由基的清除作用

目的研究仙茅(Curculigo orchioidesGaertn.)主要成分仙茅苷(curcu ligoside)对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除作用。方法分别采用比色法及电子顺磁共振技术(ESR)测定仙茅苷对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除效果。结果仙茅苷对羟自由基和超氧阴离子自由基均有良好的清除作用,其清除率略低于茶多酚。结论仙茅苷对自由基具有明显的清除作用,是一种有效的天然抗氧化剂。

六月霜提取物清除和OH·自由基的体外实验研究

用氮蓝四唑（NBT）光还原法，对六月霜中提取物清除超氧离子自由基O-·2的效果进行了测定。结果显示，六月霜提取物对超氧离子自由基有较强的清除效果，清除效果与提取物中黄酮浓度有关，当黄酮浓度达到一定值时，对O-·2的清除效果可高达88．41％。提取物与抗坏血酸（VC）进行了对照实验，结果显示其对O-·2的清除能力比VC高。六月霜提取物在VC－CU2+－H2O2体系中，对OH·自由基的清除效果的研究显示，最高清除率为84．02％。

芍药花活性成分分析及体外清除自由基活性研究

为评价芍药花提取物体外抗氧化作用,对芍药花的活性成分进行分析,并对DPPH自由基、超氧化阴离子、羟自由基的清除能力进行研究。结果表明:芍药花中含有糖类、苷类、有机酸类、黄酮类、香豆素类、酚类、甾体类或三萜类和蒽醌类化合物。芍药花甲醇提取物的总酚类含量最高(44.35 mg·g-1),而70%甲醇提取物的总酚类含量最低(30.00mg·g-1)。芍药花水提取物和甲醇提取物对DPPH自由基的清除能力比槲皮素(0.1mg·mL-1)强。各提取物对羟自由基的清除能力均比槲皮素(0.1mg·mL-1)强。芍药花甲醇提取物对超氧化阴离子的清除能力最强,比槲皮素(0.1mg·mL-1)还强。芍药花各提取物均显示出很强的清除自由基活性。

肿节风浸膏对氧自由基作用的研究

目的研究肿节风浸膏对羟自由基(HO.)和超氧阴离子自由基(O2.-)的作用。方法采用邻二氮菲-Fe2+氧化法检测不同浓度肿节风浸膏水溶液对H202/Fe2+体系产生的HO.的清除作用;邻苯三酚自氧化法测定肿节风浸膏溶液对O2.-的作用。结果肿节风浸膏溶液浓度分别为0.2,0.4,0.6,1.2 mg.ml-1时的HO.清除率分别为0.89%,17.52%,49.35%,89.89%,组间有量效关系;肿节风浸膏溶液浓度为0.01 mg.ml-1时对O2.-抑制率为-76.84%。结论肿节风浸膏溶液在体外有显著清除HO.的作用,促进O2.-生成。

叶酸的提取及抗氧化性研究

研究果蔬中叶酸的最佳提取条件及叶酸的抗氧化活性。以油菜,香菇,香蕉为原料,以提取温度、提取剂的浓度、提取时间为因素进行正交试验,确定最佳提取条件,用荧光光度法测定叶酸含量。采用Fenton体系、邻苯三酚自氧化体系,分别研究不同浓度的叶酸对羟自由基(.OH)和超氧自由基(O2-.)的清除效果。结果表明果蔬中叶酸的最佳提取条件为:提取温度100℃、提取时间45 min、提取剂浓度40%。在所选浓度范围内叶酸对羟基自由基、超氧阴离子均有较强的清除效果,且清除效果与叶酸浓度呈一定的量效关系,相同浓度的叶酸对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除能力有所不同,叶酸浓度在0.062 mg/mL时对羟基自由基的清除率为90.73%,而此时对超氧阴离子自由基的清除率为66.54%,而且随着反应时间的延长,清除率下降。结论为不同果蔬中叶酸含量有较大差异,叶酸对羟自由基和超氧阴离子都有较强的清除作用。

醇提板栗壳色素对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除作用

以30%乙醇溶液从板栗壳中提取得到板栗壳色素CSPⅠ,并以Fenton反应产生.OH模型、邻苯三酚自氧化反应产生O2-.模型,用紫外和可见分光光度法试验了CSPⅠ对模型中产生的.OH和O2-.的清除作用。结果表明,CSPⅠ具有良好的清除.OH作用,且清除作用与色素浓度呈正相关性,EC50为75.65 mg/L;而CSPⅠ对O2-.没有明显的清除作用。