胶体金法和化学发光法在艾滋病、梅毒、丙型肝炎检测中的应用效果

目的分析胶体金法和化学发光法在艾滋病、梅毒、丙型肝炎检测中的应用效果。方法采用随机原则选择2023年1—12月在本院接受治疗患者100例,均接受艾滋病、梅毒、丙型肝炎联检胶体金法及化学发光法检测,分析血清人类免疫缺陷病毒抗体(抗HIV)、梅毒螺旋体抗体(抗TP)、丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)检测结果。结果100例患者经临床综合诊断抗HIV阳性2例、抗TP阳性13例、抗HCV阳性8例;经胶体金法检出抗HIV阳性6例、抗TP阳性15例、抗HCV阳性9例,经化学发光法检出抗HIV阳性2例、抗TP阳性14例、抗HCV阳性9例。两种方法对不同抗体诊断的灵敏度对比差异无统计学意义(P>0.05)。化学发光法对抗HIV阳性、抗TP阳性结果检出准确率高于胶体金法(P<0.05),对抗HCV阳性结果检出准确率与胶体金法差异无统计学意义(P>0.05)。结论胶体金法与化学发光法在艾滋病、梅毒、丙型肝炎检测中均获得一定诊断价值。

电化学发光法和胶体金免疫层析法检测梅毒抗体的价值分析

目的:分析电化学发光法和胶体金免疫层析法检测梅毒抗体的价值。方法:选取2021年4月—2022年5月于常州市德安医院行梅毒抗体检测的检查者100例作为研究对象。所有检查者行电化学发光法、胶体金免疫层析法检测以及梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验。将梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验结果作为“金标准”,比较电化学发光法、胶体金免疫层析法的诊断准确性、敏感度、特异度。结果:100例检测者中有77例梅毒抗体阳性。电化学发光法检测梅毒抗体的准确性、敏感度、特异度高于胶体金免疫层析法,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:电化学发光法检测梅毒抗体的价值更高,适合应用于临床。

柞蚕微孢子虫胶体金免疫层析检测法

利用柞蚕微孢子虫孢子液直接免疫家兔获得柞蚕微孢子虫多克隆抗体后,分别采用双抗夹心法和竞争法制作胶体金免疫层析试纸条,建立能简便、快捷、准确诊断柞蚕微粒子病的柞蚕微孢子虫胶体金免疫层析检测法。双抗夹心法和竞争法分别是将柞蚕微孢子虫多克隆抗体与25 nm和17 nm的胶体金颗粒结合并固定在金标垫上,然后均将羊抗兔二抗包被在硝酸纤维素膜上作为质控点(C),但是2种方法制作的胶体金免疫层析试纸条的反应模式不同:前者是以柞蚕微孢子虫多克隆抗体作为检测点(T),而后者以柞蚕微孢子虫孢壁蛋白作为检测点(T)。2种方法制作的胶体金免疫层析试纸条的检测时间均为10 min,检测灵敏度为0.8×107个/mL,与柞蚕血淋巴无交叉反应,特异性强,操作简单,其中,以双抗夹心法制作的试纸条显色更清晰,结果更可靠,更具实用价值。

胶体金标法快速检测鼠疫F1抗体的现场应用

目的了解胶体金标快速检测试剂盒检测鼠疫FI抗体的现场应用。方法按鼠疫快速诊断盒(胶体金标法)的使用说明进行,并与间接血凝微量法(IHA)进行比较。结果检测了来自云南家鼠鼠疫流行区和非流行区血清共335份,检出腺鼠疫病人血清阳性32份,与IHA法结果一致。结论胶体金标鼠疫FI抗体快诊盒诊断鼠疫简便、快速、特异、敏感,便于现场鼠疫监测应用。

梅毒螺旋体明胶凝集试验对酶联免疫吸附试验法和金标法梅毒抗体检测的结果评价

目的应用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)法对ELISA法和胶体金法梅毒血清学检测试剂的临床适用性进行评价。方法收集6 291例临床手术前或输血前住院患者的血清标本,采用ELISA法(试剂A、试剂B)和金标法分别进行初筛检测,初筛阳性或弱阳性标本用TPPA法做确证试验。结果血清标本6 291份中,试剂A、试剂B、金标法检测阳性分别为66、64、56份,金标法阳性检出率与试剂A、B比较,差异无统计学意义(P>0.05)。阳性标本经TPPA确证为66份,其中试剂A、试剂B阳性均为61份,金标法为56份。试剂A检测为阳性的5份标本及试剂B检测为阳性的3份标本,经TPPA确证为阳性的分别为3、2份,金标法灵敏度与试剂A、B比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ELISA法灵敏度高,易实现自动化酶联免疫分析,适合临床手术前或输血前患者标本的筛查,金标法灵敏度低,但特异度高,方法简捷,适用于大规模健康体检及急诊手术前的初筛试验。为避免医疗纠纷,对ELISA法和金标法阳性的标本应用TPPA法来确诊。

结核感染T细胞斑点试验在手、腕部腱鞘结核诊断中的应用评价

目的探讨结核感染T细胞斑点试验(T-cell spot of Tuberculosis,T-SPOT.TB)在手、腕部腱鞘结核诊断中的临床应用价值。方法通过对2012年1月至2018年1月我院收集64例怀疑手、腕部腱鞘结核临床资料进行回顾性分析,根据病理诊断及临床表现判断有无结核分枝杆菌感染;全部病例均经过T-SPOT.TB和胶体金标法分别进行体外γ-干扰素释放试验和血清结核抗体检测,采用Kappa、χ^(2)检验进行统计学分析。结果共收集分析相关病例64例,其中诊断为手、腕部腱鞘结核(结核病例)21例,非手、腕部腱鞘结核(非结核病例)43例。经T-SPOT.TB检测,结核病例阳性者20例,非结核病例阴性者40例,灵敏度为95.2%,特异度为93.0%,阳性预测值为87.6%,阴性预测值为97.6%。经胶体金标法检测血清结核抗体,结核病例阳性者5例,非结核病例阴性者37例,灵敏度为23.8%,特异度为86.0%,阳性预测值为45.4%,阴性预测值为69.8%。与临床诊断比较,T-SPOT.TB和胶体金标法的Kappa值分别为0.862和0.112,T-SPOT.TB比胶体金标法具有更好的一致性,且灵敏度、阳性预测值和阴性预测值均明显更高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论T-SPOT.TB在手、腕部腱鞘结核诊断中具有良好的辅助诊断价值。

猪瘟病毒3种检测方法的比较

本研究旨在比较3种检测猪瘟病毒方法的优缺点。应用反转录—复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)、荧光抗体法、胶体金免疫层析试纸条3种方法,分别对30份疑似猪瘟病料中的猪瘟病毒进行检测。试验结果显示,RT-nPCR方法检出阳性样品数为11份,荧光抗体法为13份,胶体金免疫层析试纸条为8份;3种方法检测全为阳性8份,全为阴性17份。试验结果表明,荧光抗体检测法所需时间较短,但需要经验比较丰富人员来判定结果,且存在假阳性结果,敏感性比较差;胶体金免疫层析试纸条诊断方法最大的优点就是简便快速,且适合基层的应用,该方法的不足之处就是敏感性较低;RT-nPCR检测法具有快速、敏感等优点,但需一定仪器设备及成熟的技术方法。RT-nPCR还能区分待检样品为疫苗毒株(弱毒)还是野毒株感染(强毒),这是其他2种方法所不可比拟的。

不同免疫检验在抗HIV检测中的结果对比

目的比较分析抗HIV检测中进行不同免疫检验的结果.方法临床选择本中心2016年5月至2017年3月126例艾滋病患者,均经免疫印迹确诊,其中HIV抗体阴性者50例,HIV阳性者76例,均进行酶联免疫吸附实验法（ELISA）及胶体金快速试验法,比较两种检验方式的准确性.结果ELISA检测HIV抗体阳性114例（90.5%）,HIV抗体阴性12例,胶体金快速法试验检测HIV抗体阳性109例（86.5%）,HIV抗体阴性17例,两种检测方法准确性比较差异无统计学意义（P〉0.05）,但ELISA试验法的检测阳性情况高于胶体金快速法试验.结论ELISA法、胶体金快速法检测艾滋病患者血清中的HIV抗体的准确性均较高,操作简便,值得临床推广.

三聚氰胺单克隆抗体制备与鉴定

目的制备高度特异的三聚氰胺单克隆抗体,经酶联免疫吸附试验鉴定并制备胶体金试剂盒。方法以牛血清白蛋白交联的三聚氰胺为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过传统杂交瘤融合和筛选技术制备抗三聚氰胺单克隆抗体,经纯化制备腹水,采用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immune sorbent assay, ELISA)对抗体进行效价测定、亚类测定、交叉鉴定和蛋白质免疫印迹试验(westernblot)特异性鉴定后制备胶体金试剂盒。结果筛选出1株抗三聚氰胺单抗,制备的三聚氰胺胶体金试剂盒敏感值能达到30μg/L。结论获得了高度特异的且能稳定分泌三聚氰胺抗体的细胞株。

化学发光法和胶体金法检测HIV抗体与免疫印迹法确诊结果分析

目的通过调查医院就诊患者HIV抗体阳性情况,为医院院内感染与医护人员防护工作提供重要依据。方法采用化学发光法(CLIA)与胶体金法对2013~2015年入院患者输血前HIV抗体筛查检测,筛查阳性标本送陕西省疾病控制中心用重组免疫印迹法(WB法)进行确诊。结果化学发光法HIV筛查阳性标本85例,胶体金法筛查阳性标本47例,经重组免疫印迹法最终确证59例,CLIA法阳性符合率69.4%(59/85),胶体金法的阳性符合率79.6%(47/59),用CLIA法,样本测定值/临界值(S/CO)在1.0~5.0 13例,经WB法确证1例,不确定5例,S/CO在5.0~10.0 23例,确证9例,不确定4例,S/CO值在10.0~29.5的49例,则经过WB法确证49例随着S/CO值的升高,胶体金法的阳性率随之升高反之阳性率越低。结论 CLIA法抗HIV抗体筛查检测灵敏度高、特异性强、自动化程度高,可用于临床批量检测HIV抗体筛查。胶体金法操作简单,检测时间快、保存携带方便,可于急诊等快速检测中。

南昌地区无偿献血者梅毒抗体血清学检测结果及感染状况分析

目的探究南昌地区献血者梅毒螺旋体(TP)感染状况,评估酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂、金标试剂检测性能。方法采用ELISA方法对南昌地区97554人份无偿献血标本进行抗-TP双试剂检测,收集其中184例抗-TP筛查阳性血浆标本开展梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)确证,并进行乙肝表面抗原(HBsAg)/TP抗体金标联检。结果南昌地区献血人群抗-TP ELISA筛查阳性率0.19%,TPPA确证阳性率0.13%,TPPA确证阳性符合率70.65%;抗-TP ELISA筛查阳性标本中,双试剂阳性72.83%,试剂A单阳9.24%,试剂B单阳17.93%;ELISA双阳标本中TPPA阳性93.28%,单阳标本中TPPA阴性82%、TPPA阳性10%;ELISA双阳标本中抗-TP金标阳性90.30%;抗-TP金标阳性标本中TPPA阳性97.58%;试剂A、试剂B真阳性率为83.44%、77.25%(P>0.05)。结论南昌地区献血者梅毒感染率处于较低水平;抗-TP ELISA双试剂阳性标本的TPPA确证阳性符合率较高;不同厂家ELISA双试剂筛查形成互补,防止漏检;ELISA筛查存在一定比例假阳性;献血前检测项目可增加抗-TP胶体金法初筛;南昌地区梅毒感染献血人群以36~55岁年龄段、农民、工人、自由职业者、低学历人员为主。

不同血清学检测法诊断儿童梅毒的应用研究

目的探讨三种血清学检测方法在临床诊断儿童梅毒中的应用情况。方法选择沈阳市儿童医院2014年12月至2016年2月门诊及住院患者4 230例,分别进行了以下检测:甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒螺旋体抗体检测胶体金法(SYP)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA),并对检测结果进行分析。结果用三种方法对血液标本进行检测,经任意一项检测为阳性即视为阳性患者共28例。其中三项检测均为阳性4例(14.3%),有两项检测为阳性11例(39.3%),只有一项检测为阳性13例(46.4%)。确诊阳性患者15例。在检测中TRUST特异度(92.3%)高,但敏感度(40.0%)低;SYP敏感度(86.7%)高,但特异度(7.7%)低,均不适宜单独作为初筛检测试验。应用TRUST和SYP联合检测作为初筛试验,其中任意一种为阳性结果,灵敏度为100.0%。结论用TRUST、SYP联合作为梅毒初筛检测试验;TPPA可以用作梅毒确诊实验;TRUST适宜疗效观察。

儿童梅毒4种检测方法的灵敏度及特异性比较

目的比较快速血浆反应素试验(rapid plasma reagin,RPR)、胶体金试验(colloidal gold test for syphilis,SYP)、酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)、凝集法(treponema pallidum particle assay,TPPA)诊断儿童梅毒的灵敏度及特异性。方法选择本院120例确诊为梅毒的患儿及60例非梅毒患儿进行RPR、SYP、ELISA、TPPA实验,统计4种方法检测梅毒的阳性率、灵敏度、特异性及阳性预测值。结果 ELISA阳性率为94.2%、阳性预测值为95.8%、特异性为95.0%,RPR阳性率为43.3%,SYP灵敏度为66.7%。TPPA灵敏度、特异性及阳性预测率均不高。结论 ELISA的阳性预测值及特异性较高,适合住院、门诊儿童的梅毒筛查,SYP可作为阳性标本的确认试验,必要时可采用联合试验进行检测。建议对儿童梅毒检测,不采用TPPA。

粪便转铁蛋白检测在提高消化道出血检出率中的作用

目的比较几种粪便隐血实验方法的灵敏性、特异性和抗干扰性,评价转铁蛋白(Tf)在粪便转铁蛋白检测在提高消化道出血检出率中的作用。方法对600例临床怀疑消化道出血病人的粪便标本分别用化学法(匹拉米洞半定量检测法)、检测血红蛋白(Hb)、单克隆抗体胶体金法检测Hb和Tf。结果血红蛋白化学法(以下简称化学法)检测上消化道出血的阳性率为57.3%,下消化道出血的阳性率为44.8%;血红蛋白单克隆抗体胶体金法(以下简称胶体金法)检测上消化道出血的阳性率为60.4%,下化道出血的阳性率77.6%;转铁蛋白单克隆抗体胶体金法(以下简称转铁蛋白法)检测上消化道出血的阳性率为82.3%,下消化道出血的阳性率66.4%;联合检测法(血红蛋白与转铁蛋白两次同时检测,有一项阳性即为阳性)检测上消化道出血的阳性率为90.8%,下消化道出血的阳性率为97.6%。结论粪便转铁蛋白检测在上消化道出血中有较高的检出率;Hb与Tf联合检测可显著提高消化道出血性疾病的阳性检出率。

化学发光法与胶体金法检测SARS-CoV-2抗体阳性率比较

目的探讨化学发光法和胶体金法检测SARS-CoV-2抗体在2019冠状病毒病(coronavirus disease 2019,COVID-19)诊断中的应用价值。方法收集51例COVID-19确诊患者和41例非COVID-19患者的血清,用化学发光法检测非COVID-19组血清中SARS-CoV-2抗体IgM、IgG及联合检测(IgM或IgG)的阳性率;用化学发光法和胶体金法检测COVID-19组血清中SARS-CoV-2抗体IgM、IgG及联合检测(IgM或IgG)的阳性率,比较2种方法的一致性。结果COVID-19组平均发病时间为(16.9±5.4)d。其中22例IgM阳性,阳性率为43.1%;47例IgG阳性,阳性率为92.2%;49例联合检测(IgM或IgG)阳性,阳性率为96.1%。非COVID-19组中,1例IgM阳性,阳性率为2.4%;0例IgG阳性,阳性率为0;1例联合检测(IgM或IgG)阳性,阳性率为2.4%。在COVID-19组中,化学发光法与胶体金法检测SARS-CoV-2抗体联合检测(IgM或IgG)的阳性率分别为96.1%和68.6%,化学发光法优于胶体金法(P<0.05)。结论SARS-CoV-2抗体的检测对COVID-19诊断有重要的意义,且化学发光法检出率优于胶体金法。

ELISA方法和胶体金方法对MP-IgM抗体检测的效果比较

目的:比较ELISA方法和胶体金方法对肺炎支原体IgM抗体的检测效果。方法:采用ELISA方法和胶体金方法对1 100例疑似肺炎支原体感染患儿血清肺炎支原体IgM抗体进行平行测定,并计算阳性率、漏检率。结果:(1)ELISA方法检测的阳性率为9.82%(108/1 100),胶体金方法检测的阳性率为8.10%(89/1 100),两方法差异无统计学意义(χ~2=1.80,P>0.05),两方法检测结果的符合率为98.3%。(2)胶体金方法的漏检率为17.6%;在反应5 min、10 min、20 min时,漏检率分别为44.4%、20.4%和17.6%。结论:胶体金方法检测肺炎支原体IgM抗体存在一定的漏检率,反应时间越短,漏检率越高,不能完全取代ELISA方法,但与ELISA方法相比,其操作简便、快速,在急诊检验方面应用价值更大。

HBsAg/TP抗体联合检测试剂(胶体金法)用于街头无偿献血筛查的价值探讨

目的通过对HBsAg/TP抗体联合检测试剂(胶体金法)用于街头无偿献血筛查前后TP抗体ELISA检测不合格情况的比较,说明HBsAg/TP抗体联合检测试剂(胶体金法)用于街头无偿献血筛查是可行的、必要的。方法溧阳血站街头各个采血点于2018年2月10日起对无偿献血的筛查由HBsAg检测试剂(胶体金法),改为HBsAg/TP抗体联合检测试剂(胶体金法),其他筛查项目不变。结果HBsAg/TP抗体联合检测试剂(胶体金法)用于街头无偿献血筛查前TP抗体ELISA检测不合格率为0.82%;HBsAg/TP抗体联合检测试剂(胶体金法)用于无偿献血筛查后TP抗体ELISA检测不合格率为0.22%,二者差异有统计学意义。(χ^2=4.77,P<0.05)。而同期站内仅使用HBsA检测试剂(胶体金法)进行无偿献血筛查,2017年同期站内TP抗体ELISA检测不合格率为0.41%,2018年同期站内TP抗体ELISA检测不合格率为0.46%。结论HBsAg/TP抗体联合检测试剂(胶体金法)用于街头无偿献血筛查具有一定的社会和经济效益。

核酸阳性新型冠状病毒肺炎中SARS-CoV-2特异性IgM/IgG抗体的临床表达

目的:探讨SARS-CoV-2特异性IgM/IgG抗体在核酸阳性的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者中的表达特点及规律。方法:纳入176例核酸阳性的确诊COVID-19患者,以发病病程<2、3、4周、>5周为时间点抽取患者外周血样本,应用胶体金法检测其SARS-CoV-2特异性IgM/IgG抗体表达,分析其表达情况与性别、年龄、临床分型、就医间隔、发病病程、核酸复测结果等之间的关系,并监测19例患者SARS-CoV-2特异性IgM/IgG抗体的动态变化。结果:不同病程和年龄的患者SARS-CoV-2特异性Ig G的表达之间比较,差异有统计学意义(均P<0.05),而不同性别、临床分型、就医间隔、核酸复测结果的患者IgM、IgG的表达之间比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。发病病程在2周内、3周、4周、5周及以上的患者,IgM的阳性率分别为55.6%、47.4%、60.5%、52.7%(均P>0.05);IgM抗体的阳性率在第4周左右达到最高值;Ig G的阳性率分别为77.8%、84.2%、97.4%、100%,不同时间点的抗体水平之间的差异有统计学意义(均P<0.05)。接受动态抗体监测的19例患者中,8例患者在病情稳定或明显改善的情况下,其IgM表达转阴或减弱。结论:SARS-CoV-2特异性IgM/IgG抗体在COVID-19患者体内的变化规律具有明显的个体差异,与年龄、发病病程相关。

基于临床资料的两种肺炎支原体检测方法对比分析

目的结合临床资料及阳性率,比较被动凝集法(PA法)与免疫胶体金技术(GICT)检测儿童肺炎支原体(MP)感染的结果,探讨2种方法在快速诊断MP感染中的价值。方法选取2019年3—4月昆明市儿童医院急诊就诊的疑似MP感染的357例患儿为观察对象,采其血清,分别使用PA法与GICT法(A、B 2种试剂)进行MP抗体的检测,同时收集患儿就诊体征、相关检查数据、临床诊断、治疗措施和转归情况等信息。结果临床样本中不同方法的阳性率依次为:PA法(抗体滴度≥1∶160):21.4%(63/295);GICT-A试剂MP-免疫球蛋白(Ig)M:10.2%(30/295);GICT-B试剂MP-IgM:23.1%(68/295)。以PA法(抗体滴度≥1∶160)为阳性预判值,GICT-A试剂MP-IgM的敏感度33.3%,特异度96.1%,阳性预测值70.0%,阴性预测值84.2%,阳性似然比8.54,阴性似然比0.69;GICT-B试剂MP-IgM的敏感度74.6%,特异度93.1%,阳性预测值69.1%,阴性预测值93.0%,阳性似然比10.66,阴性似然比0.27。2种方法的敏感度差距主要来自于低滴度阳性标本。作为非特异性的检测指标,临床常用的白细胞计数和C反应蛋白对于区分是否MP感染,不具备协助作用。结论在MP感染血清学检测中,GICT快速检测方法的实际可行性,应该建立在对拟引进检测系统的性能评价和持续改进基础之上。半定量全滴度的PA试验是目前此类方法评价的重要参考。不同GICT法检测试剂之间检测效能的差距集中表现在PA法的低滴度样本上。

血清结核抗体对肺结核病的诊断价值初步评价

目的对血清结核抗体检测(胶体金法)在结核诊断中的价值进行评估。方法用胶体金标记结核快速诊断试剂盒对85例结核患者、59例肺部其他疾病患者进行血清中的结核抗体的检测,并同时进行对照,统计资料分析。结果 85例结核患者血清结核抗体的总阳性率为56.5%,非肺结核病组中肺炎组结核抗体阳性率0%,肺癌组中阳性率为24.4%,采用χ2检验,差异具有统计学意义(P<0.05);灵敏度为56.4%,特异性为83.0%,约登指数为39.4%,ROC曲线下面积为0.710。结论血清结核抗体对结核病诊断和鉴别诊断具有一定的临床价值。