加味补阳还五汤对急性脑梗死患者(气虚血瘀型)t-PA、PAI-1、Cys-C、MMP-9及脑侧支循环建立的影响

目的 探讨加味补阳还五汤在急性脑梗死(气虚血瘀型)治疗中的应用价值,观察其对炎性因子、神经功能、脑侧支循环建立的影响。方法 将2018年2月至2020年3月因气虚血瘀型急性脑梗死于重庆两江新区人民医院就诊的98例患者纳入研究,均采用随机数字表法分组。对照组49例采用西医常规治疗,观察组49例联合加味补阳还五汤治疗,治疗2 w后比较临床疗效。结果 治疗后观察组血清组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、血清中胱抑素(Cys)-C、基质金属蛋白酶(MMP)-9、血清基质细胞衍生因子(SDF)-1高于对照组,t-PA抑制物(PAI)、白细胞介素(IL)-1β、S-100蛋白(S100B)、血小板源性生长因子(PDGF)低于对照组,差异具统计学意义(P<0.05);观察组治疗后1、2 w时美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)神经功能评分显著低于对照组(P<0.05);观察组总有效率显著高于对照组(P<0.05);观察组不良反应总发生率与对照组无明显差异(P>0.05)。结论 对于急性脑梗死(气虚血瘀型)而言联合加味补阳还五汤有重要意义,可抑制炎性渗出,减轻缺血再灌注伤,促进侧支循环形成,促进神经修复,不良反应小。

补肾调经汤对PCOS模型大鼠卵巢t-PA、PAI-1表达的影响

目的:观察补肾调经汤对PCOS模型大鼠卵巢t-PA、PAI-1表达的影响。方法:用来曲唑造模法建立雌性大鼠PCOS模型,设置正常对照组、模型组、西药组、中药组。通过阴道涂片观察大鼠动情周期,ELISA法检测大鼠血清T水平,电镜观察卵巢形态,Western blot检测测定大鼠卵巢t-PA、PAI-1蛋白的表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠血清T水平升高,窦卵泡数增多,颗粒细胞层数减少,卵巢组织t-PA表达降低、PAI-1表达升高(P<0.01);与模型组比较,中药组和西药组血清T水平下降,窦卵泡数减少,颗粒细胞层数增多,卵巢组织t-PA表达升高、PAI-1表达降低(P<0.01)。结论:PCOS的发病可能与卵巢t-PA、PAI-1的异常表达有关,补肾调经汤可能能够通过调节t-PA、PAI-1的表达恢复卵巢正常生殖功能,维持生殖内分泌稳态,达到治疗PCOS的作用。

纳米铜/聚合物复合材料宫内节育器对猕猴宫腔液t-PA、PAF、PGE_2水平的影响

目的:探讨纳米铜/聚合物复合材料宫内节育器(IUD)对置器后子宫出血、疼痛的影响。方法:选择具规律月经周期且有生育史的育龄猕猴30只,分为空白对照组、裸铜组、生物材料组、低剂量纳米铜组(10μg/220mm2)、高剂量纳米铜组(20μg/220mm2),每组6只。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组置器后子宫宫腔冲洗液中t-PA、PAF、PGE2水平。结果:①与空白组相比,裸铜组宫腔冲洗液中t-PA及PGE2水平显著升高;②与裸铜组相比,纳米铜组t-PA及PGE2水平均显著降低;③除裸铜组PAF显著高于空白组外,其他各组间PAF水平无明显差异。结论:纳米铜IUD可减少对子宫t-PA和PGE2水平的影响,因而可能减轻置入IUD引起的子宫异常出血、疼痛副反应。

补阳还五汤及拆方对血栓形成大鼠梗塞灶、血管损伤半暗区、血浆t-PA、PAI活性及ET含量的影响

利用已建立的冷光源光化学诱导血栓形成大鼠动物模型 ,观察补阳还五汤总方、补气药及活血药对模型大鼠梗塞面积、血管损伤半暗带面积及程度、局部脑组织血流、血浆t PA、PAI活性及血浆ET含量的影响。结果 :补阳还五汤总方对上述指标均有显著性影响 ,补气药及活血药均可缩小梗塞面积 ,减轻血管损伤程度 ,改善梗塞区上游供血区脑组织血流 ,抑制血浆PAI活性。活血药可显著降低血浆ET含量 ;补气药可显著地提高血浆t PA活性 。

经天幕裂孔切开术联合标准大骨瓣减压术对重型颅脑损伤患者免疫功能及血清t-PA、PAI-1的影响

目的:探究天幕裂孔切开术联合标准大骨瓣减压术对重型颅脑损伤患者免疫功能及血清组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)的影响。方法:选取我院收治的重型颅脑损伤患者80例,随机分为治疗组及对照组各40例;对照组采用标准大骨瓣减压术治疗,治疗组采用天幕裂孔切开术联合标准大骨瓣减压术治疗,观察两组术后颅内压变化,并对比治疗前后两组免疫功能及血清t-PA、PAI-1的变化及并发症发生情况。结果:治疗组术后治的颅内压和应激性溃疡、脑动脉梗死及脑积水等并发症发生率较对照组显著降低(P<0.05);两组术后1~7d血清和脑脊液t-PA、PAI-1水平均呈逐渐降低趋势,治疗组术后3d、7d时务低格及脑脊液t-PA、PAI-1水平均明显低于对照组(P<0.05);两组术后IgG、IgA、IgM水平和CD3^+、CD4^+、CD8^+T淋巴细胞比例明显高于术前,CD4^+/CD8^+值较术前明显下降(P<0.05)。结论:天幕裂孔切开术联合标准大骨瓣减压术治疗重型颅脑损伤患者疗效确切,对患者免疫功能及t-PA、PAI-1影响小,术后并发症发生率低,疗效确切。

t-PA cDNA的克隆及其在毕赤酵母中的表达

应用ＰＣＲ方法，在ｔＰＡｃＤＮＡ５′端引入合适的限制酶位点和酵母分泌信号肽，与酵母表达载体ｐＰＩＣ９重组，构建表达质粒ｐＳＴＥＹ，利用ＬｉＣｌ转化法转化酵母菌ＹＳ１０８，在ＭＭ和ＭＤ平板上筛选表型，ＰＣＲ筛选ｔＰＡｃＤＮＡ与酵母染色体整合而形成的阳性克隆，阳性克隆经甲醇诱导表达后，用ＳＤＳＰＡＧＥ证明表达产物的分子量为６ｋＤａ左右，用酪蛋白板溶圈法测定ｔＰＡ的活性。Ｍｕｔｓ表型菌表达产物活性最高为２５００ＩＵ／ｍｌ，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实表达产物具有天然ｔＰＡ分子的免疫原性。

采用定点整合表达技术构建t-PA表达CHO工程细胞株

运用Flp InTM 定点整合表达系统构建表达组织型纤溶酶原激活剂 (tissue type plasminogenactivator ,t PA)的CHO工程细胞株。将pcDNA5 /FRT载体和携带t PA基因的 pJOD S载体用Hind/KpnI双酶切 ,再将回收的 2 .0kbt PAcDNA片段和pcDNA5 /FRT载体连接 ,构建 pcDNA5 /FRT/t PA质粒 ;应用Flp InTM定点整合表达系统 ,将t PAcDNA定点插入Flp lnTM CHO细胞基因组中的 1个单拷贝位点上 ,以潮霉素B筛选定点整合t PAcDNA的细胞克隆。经筛选和体外纤维蛋白溶解活性检测 ,获得了t PA表达水平为 15 0 0～ 2 0 0 0IU/ (10 6cells·day)的CHO工程细胞株。

贺氏三通法对急性脑梗死患者血浆t-PA和PAI-1的影响

目的 :探讨贺氏针法防治急性缺血性中风机理及其临床意义。方法 :将 50例急性脑梗死患者分为贺氏针法组 (观察组)和局部取穴组(常规组 )各 2 5例 ,分别观察针刺 2天、7天和 2 1天血浆组织型纤溶酶原激活物 (t PA)及快速抑制物 (PAI 1 )的活性 ,并与 2 0例脑梗死后遗症期住院患者(对照组 )进行对照。结果 :治疗后两组患者t PA活性降低又升高 (P <0 0 5)。观察组PAI 1活性升高又降低 ,与对照组比较差异无显著性意义 (P >0 0 5) ;常规组PAI 1活性降低又升高 ,且均明显高于对照组(P <0 0 5 ,P <0 0 1 )。结论 :贺氏针法对急性脑梗死患者血浆纤溶活性下降有一定的影响 。

老年急性脑血栓形成患者 血浆t-PA和PAI活性研究

采用发色底物法分别测定了47例老年急性脑血栓形成患者和45例健康者血浆组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及其抑制物(PAI)活性。结果发现脑血栓组血浆 t-PA 活性明显低于对照组(P<0.01)。而 PAI 活性显著高于对照组(P<0.001)。提示老年脑血栓形成急性期体内纤溶系统功能调节失衡,可能为老年脑血栓形成的一个重要原因之一。

高脂血症对血浆t-PA和PAI-1活性的影响

目的 探讨高脂血症患者的纤溶系统的变化。方法 选取正常人及高脂血症者,测定其血脂、血浆t-PA和PAI-1活性。结果 高脂血症组比正常人血浆t-PA活性下降,而PAI-1的活性有升高;在TG及LDL-C升高者,其血浆t-PA活性比正常人血浆t-PA活性降低,而血浆PAI-1活性比正常人升高;单纯TC升高者血浆PAI-1活性接近正常人组,而血浆t-PA活性比正常人组明显降低。结论 高脂血症对纤溶系统有一定的影响,其中甘油三酯和LDL-C对纤溶系统的影响更明显,而胆固醇对纤溶系统也有一定的影响。

预处理对大鼠缺血冠脉等组织t-PA、PAI-1基因表达的影响

采用Northern印迹杂交、斑点杂交、原位杂交技术和发包庇物显色测定方法研究急性心肌缺血大鼠冠脉等组织t－PA、PAI－1基因表达和t－PA活性变化、缺血预处理对这些改变的影响。结果表明：（1）缺血组冠脉等组织t－PA活性明显低于对照组，预处理组高于缺血组，3组组间比较均P＜0．01。（2）Northern和斑点杂交显示急性心肌梗塞时t－PA、PAI－1mRNA表达均增高，分别为对照大鼠的1．2和4．6倍，预处理组PAI－1mRNA表达明显降低，t－PAmRNA表达与缺血组近似。（3）心肌组织原位杂交检测到t－PA、PAI－1mRNA主要分布在冠脉血管，尤其集中于内皮细胞。上述结果提示，心肌缺血损伤时t－PA、PAI－1mRNA均异常表达，其中PAI－1的高表达是心肌缺血时纤溶活性降低的主要原因，预处理恢复组织中t－PA活性与PAI－1mRNA表达减少密切相关。以上结果为预处理保护机制研究提供了新的资料。

脑梗塞急性期血浆t-PA、PAI-1、VWF活性及早晚动态变化研究

用发色底物法及酶联免疫法测定脑梗塞急性期患者和健康人血浆中ｔ－ＰＡ、ＰＡＩ－１和ＶＷＦ三者活性，目的为研究这３种物质的活性水平及早晚变化规律在两组间的差异，并探讨其与脑梗塞发病间的关系。结果显示两组中ｔ－ＰＡ活性早晨低，下午高；ＰＡＩ－１活性早晨高，下午低，两者活性呈负相关。观察组早晨ｔ－ＰＡ活性明显低于对照组；ＰＡＩ－１和ＶＷＦ活性则明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。上述变化与脑梗塞清晨发病率高同步。

海带多糖L01对人脐静脉内皮细胞表达和分泌t-PA的影响

目的:利用人脐静脉内皮细胞体外培养模型,探讨肾上腺素刺激状态下海带多糖L01对内皮细胞的保护作用,以及其对其分泌的组织型纤溶酶原激活物(t-PA)的影响,从内皮细胞抗血栓功能方面探讨海带多糖L01对心血管系统的保护作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞系ECV-304,用肾上腺素刺激24h、48h、72h采样,ELISA法测定HUVECs培养上清液中的t-PA含量,逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测HUVEC细胞内t-PA mRNA的表达,其扩增产物经电泳后密度扫描及半定量分析。结果:肾上腺素模型组HUVECs培养液中t-PA(24h、48h)含量明显增加,;单给海带多糖对HUVECs t-PA分泌无影响。海带多糖L01在肾上腺素刺激下给药24h,48h后t-PA抗原分泌明显降低(P<0.01),且具有一定的量效关系,但HUVECst-PAmRNA表达各组均无明显差异。结论:肾上腺素可刺激内皮细胞分泌t-PA抗原,海带多糖L01对血管内皮具有一定的保护作用,减少肾上腺素刺激下HUVECs分泌t-PA,而对t-PAmRNA表达无明显影响。

灯盏细辛注射液对急性脑梗死患者血浆中t-PA和PAI-1水平的影响

目的探讨灯盏细辛注射液对急性脑梗死患者血浆中t-PA、PAI-1水平的影响。方法将100例急性脑梗死患者,随机分为观察组50例,对照组50例。对照组和观察组分别给予血栓通注射液、灯盏细辛注射液治疗,共15 d。治疗结束后对比两组t-PA以及PAI-1活性的变化及脑卒中临床神经功能缺损评分。结果两组治疗前后血浆中t-PA及PAI-1活性的变化差异均有统计学意义(P<0.05),观察组PAI-1水平与对照组比较差异亦有统计学意义(P<0.05);两组NFD评分均有不同程度改善,观察组较对照组更为显著(P<0.05)。结论灯盏细辛注射液能改善神经功能缺损,调节血浆纤溶系统功能,值得进一步研究和应用。

玉屏风联合低分子肝素对小儿原发性肾病综合征t-PA和PAI-1的影响

考察玉屏风联合低分子肝素(Low Molecular Weight Heparin,LMWH)对小儿原发性肾病综合征(Primary Nephrotic Syndrome,PNS)组织纤溶酶原激活物(Tissue-Type Plasminogen Activator,t-PA)和组织纤溶酶原激活物抑制物(Plasminogen Activator Inhibitor,PAl)的影响。方法:收集2010年5月至2013年2月在我院住院治疗的确诊为PNS病患82例,按随机数字表法分为2组,LMWH治疗组44例,玉屏风联合LMWH组38例,收集治疗前后t-PA、PAI-1和疗效并进行组间比较。结果:与治疗前比较,2组患儿t-PA升高,PAI-1水平降低(P<0.05)。与LMWH治疗组比较,玉屏风联合LMWH组的t-PA显著升高,PAI-1水平显著降低(P<0.01),玉屏风联合LMWH组的总缓解较高(P<0.05)。结论:玉屏风通过改善PNS患儿的凝血亢进、纤溶抑制现象保护肾功能,从而提高疗效。

清开灵注射液合中风Ⅱ号冲剂治疗脑梗塞及其对t-PA、PAI、GMP-140活性影响的研究

目的观察清开灵注射液合中风Ⅱ号冲剂治疗脑梗塞的临床疗效及其对血管内皮细胞功能和血小板活化状态的影响。方法将60例脑梗塞患者随机分为两组,治疗组30例用清开灵注射液、中风Ⅱ号冲剂、低分子右旋糖酐治疗;对照组30例用低分子右旋糖酐、尼莫地平、脑复康治疗;另设健康组15例作正常对照。结果治疗前,治疗组和对照组t-PA、PAI、GMP-140水平与健康组差异均有显著性(P均<0.01)。治疗后,治疗组愈显率高于对照组(P<0.05),其t-PA水平升高较对照组明显(P<0.05),而PAI水平降低比对照组明显(P<0.05),两组GMP-140水平均显著下降(P均<0.01)。以上3项指标,治疗组治疗后均已接近健康组水平(P均>0.05),而对照组仅GMP-140水平接近健康组(P>0.05)。结论纤溶系统t-PA、PAI平衡失调和GMP-140的增高与脑血栓形成有密切关系。清开灵注射液合中风Ⅱ号冲剂能有效促进血管内皮细胞分泌t-PA,抑制PAI的合成并抑制血小板释放GMP-140,有利于恢复t-PA、PAI的平衡及血小板的功能,从而对提高临床疗效、防止血栓形成和脑梗塞再发具有积极意义。

血液t-PA和PAI-1水平及活性与血液流变学指标的相关性分析

目的 探讨血液t PA和PAI 1的水平及活性与血流变指标间的相关性。方法 随机选择 30例 4 0～ 6 0岁无心、脑血管意外病史健康体检者 ,进行血液t PA和PAI 1浓度、活性、血流变指标常规测定。结果 t PA浓度与PAI 1浓度高度相关 (P<0 .0 0 1 ) ,t PA浓度与血液黏度呈高度的正相关 (P <0 .0 0 1 ) ,t PA活性与血液黏度无相关关系 (P >0 .0 5 ) ;PAI 1浓度、活性与血液黏度无相关关系 (P >0 .0 5 ) ,PAI 1活性与血压呈正相关关系 (P <0 .0 5 )。在不同性别之间外周血t PA ,OAI 1活性、浓度没有显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,不同性别间全血黏度、血还原黏度、血沉、红细胞压积、红细胞聚集指数具有非常显著的差异 (P <0 .0 1 ) ,数值男性大于女性 (血沉除外 )。 4 0～ 4 9岁体检者与 5 0～ 6 0岁年龄组间只有血压、红细胞压积、红细胞变形指数、红细胞电泳指数具有显著的差异 (P <0 .0 1 ) ,除红细胞变形指数、红细胞电泳指数外 ,数值以年龄≥ 5 0岁组为高 ;其他无差异。结论 血液t PA浓度与PAl 1浓度高度相关 (P <0 .0 0 1 ) ,t