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巨魾线粒体ND3,tRNA-Arg和ND4L基因克隆及多态性分析 被引量:2
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作者 杜民 叶德来 +5 位作者 牛宝珍 段加明 岳冉 宋桃稳 王文涛 刘艳红 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期32-37,共6页
为了解巨魾鱼的种质资源情况,采用PCR技术扩增克隆并测序,得到巨魾NADH dehydrogenase subunit-3(ND3),精氨酸的转运RNA(tRNA-Arg)和NADH dehydrogenase subunit-4L(ND4L)基因全序列各12条.通过DNAMAN 5.2.2软件进行序列比对,采用MEGA 5... 为了解巨魾鱼的种质资源情况,采用PCR技术扩增克隆并测序,得到巨魾NADH dehydrogenase subunit-3(ND3),精氨酸的转运RNA(tRNA-Arg)和NADH dehydrogenase subunit-4L(ND4L)基因全序列各12条.通过DNAMAN 5.2.2软件进行序列比对,采用MEGA 5.02软件进行碱基质量分数分析,计算遗传距离,并构建系统发育树.结果表明:巨魾鱼ND3基因序列全长为346bp,碱基质量分数A为26.2%,T为29.6%,C为28.8%,G为15.4%,其中A+T质量分数(55.8%)高于G+C质量分数(44.2%),12个ND3基因序列存在5种单倍型,发生了5次转换,1次颠换,5种单倍型之间平均相对遗传距离为0.007;tRNA-Arg基因序列全长为71bp,碱基质量分数A为23.9%,T为23.9%,C为29.6%,G为22.6%,其中A+T质量分数(47.8%)低于G+C质量分数(52.2%),12个基因序列完全一致;ND4L基因序列全长为297bp,起始密码子为ATG,终止密码子为TAA,碱基质量分数A为24.6%,T为26.3%,C为33.3%,G为15.8%,其中A+T质量分数(50.9%)高于G+C质量分数(49.1%),12个基因序列完全一致;将巨魾鱼与鮡科的其他10种鱼类的ND3,tRNA-Arg和ND4 L基因用Minimum Evolution法(ME)构建系统发育树,发现12尾巨魾鱼单独聚为一支,这一结果与传统的形态学分类相似. 展开更多
关键词 巨魾 ND3 trna-arg ND4L 序列分析 系统发育
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dna Y基因产物提高人尿激酶原cDNA在大肠杆菌中的表达
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作者 马忠 邱奇峰 +1 位作者 华子春 朱德煦 《南京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1997年第1期55-61,共7页
对提高人尿激酶原cDNA在大肠杆菌中的表达水平进行了研究。通过PCR方法在其结构基因5端添加起密码子ATG,用人工合成的不依赖于ρ因子的终止序列替换3端非翻译区,得到完整的人尿激酶原结构基因。将其克隆在表达质粒p... 对提高人尿激酶原cDNA在大肠杆菌中的表达水平进行了研究。通过PCR方法在其结构基因5端添加起密码子ATG,用人工合成的不依赖于ρ因子的终止序列替换3端非翻译区,得到完整的人尿激酶原结构基因。将其克隆在表达质粒pKK233-2中,转化大肠杆菌E.coliJA221,人尿激酶原得到初步表达。但表达水平很低,原因可能是人尿激酶原cDNA富含真核细胞偏爱的密码子,而大肠杆菌中识别这些密码子的tRNA是稀有tRNA。通过相容性质粒pUBS520引进dnaY基因,增加大肠杆菌中tRNAArgAGA/AGG的含量,以改善大肠杆菌对人尿激酶原cDNA中稀有Arg密码子的识别,人尿激酶原的表达水平提高约5倍。 展开更多
关键词 尿激酶原 CDNA dnaY基因 血栓性疾病 药物疗法
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