抑制lncRNA TUG1下调核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白1炎症小体在延缓阿尔茨海默病进展的作用

目的探讨敲低长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)抑制核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白1(NLRP1)炎症小体在缓解阿尔茨海默病进展中的作用。方法选取9~10周龄遗传背景为C57/BL6的野生型小鼠(WT组,10只)或淀粉样前体蛋白(APP)/早老素1(PS1)转基因小鼠(30只)。APP/PS1转基因小鼠随机分为模型(model)组,模型+敲低lncRNA TUG1组[model+lncRNA TUG1短发夹RNA(shRNA)组]和model+shRNA非靶标(NT)组,每组10只。分别采集12周龄第1天(3月龄)和32周龄第1天(8月龄)小鼠外周血和脑皮质组织,并分离皮质中的原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞,每个时间点每组5只小鼠。Real-time PCR分别测定3月龄和8月龄上述4个分组小鼠脑皮质组织和原代小胶质细胞中lncRNA TUG1和巨噬细胞移动抑制因子(MIF)mRNA的水平,以及原代星形胶质细胞中补体蛋白C1r和C1s mRNA的水平。ELISA法测定其外周血浆中MIF含量。对3月龄和8月龄小鼠脑皮质原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞共培养。CCK-8法测定上述2种细胞的增殖能力。Western blotting分别测定3月龄和8月龄上述4个分组小鼠脑皮质组织中MIF、白细胞介素1β前体(pro-IL-1β)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、Caspase-1(p20)、Caspase-1(full)、NLRP1及NLRP3蛋白的表达水平。采用免疫荧光染色法测定8月龄各分组小鼠脑皮质组织中β淀粉样蛋白(Aβ)表达。结果3月龄和8月龄时,与WT组小鼠相比,model组小鼠脑皮质组织和原代小胶质细胞中lncRNA TUG1和MIF相对表达水平显著上调,原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞增殖能力增强(P<0.05)。与model组相比,model+lncRNA TUG1 shRNA组小鼠脑皮质组织和原代小胶质细胞中lncRNA TUG1和MIF的相对表达水平显著降低,原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞增殖能力降低(P<0.05)。与WT组相比,model组小鼠外周血浆中MIF含量显著升高;小鼠脑皮质组织中pro-IL-1β、ASC、Caspase-1(p20)、Caspase-1(full)、NLRP1以及NLRP3的蛋白表达水平显著升高;Aβ免疫荧光强度明显增强(P<0.05)。与model组相比,model+lncRNA TUG1 shRNA组小鼠外周血浆中MIF含量显著降低;小鼠脑皮质组织中pro-IL-1β、ASC、Caspase-1(p20)、Caspase-1(full)和NLRP1的蛋白表达水平显著降低,Aβ免疫荧光强度明显降低(P<0.05),而NLRP3蛋白质的表达水平无明显变化(P>0.05)。与model组相比,model+shRNA NT组小鼠上述所有检测指标差异均无显著性(P>0.05)。结论APP/PS1转基因小鼠脑皮质组织和原代小胶质细胞中lncRNA TUG1和MIF因子表达上调与脑皮质内NLRP1炎症小体激活成正相关,敲低lncRNA TUG1可缓解阿尔茨海默病的进展。

lncRNA TUG1靶向调节miR-31-5p对急性胰腺炎小鼠炎症反应的影响

目的:探讨长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(lncRNA TUG1)在急性胰腺炎(AP)中的作用机制。方法:体外培养小鼠胰腺腺泡细胞系(MPC-83),用脂多糖(LPS,10μg/ml)和雨蛙素(Caerulein,100 nmol/L)处理3 h,建立AP模型。实验分为对照组(control组)、AP组、AP+sh-NC组、AP+sh-TUG1组、AP+sh-TUG1+inhibitor-NC组、AP+sh-TUG1+miR-31-5p inhibitor组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中lncRNA TUG1和miR-31-5p表达水平;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测细胞上清液中IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA TUG1和miR-31-5p之间的靶向关系。构建AP小鼠模型,给予相应的干预后,qRT-PCR检测胰腺组织中lncRNA TUG1和miR-31-5p表达水平;试剂盒检测血清中炎症因子IL-1β、TNF-α含量和淀粉酶(AMY)和脂肪酶(Lipase)活性;HE染色观察胰腺组织病理学变化;TUNEL检测胰腺组织中细胞凋亡。结果:在Caerulein和LPS共同处理的MPC-83细胞中lncRNA TUG1水平、细胞凋亡率、IL-1β和TNF-α水平升高,miR-31-5p水平、细胞活力降低(均P<0.05);敲低lncRNA TUG1可上调miR-31-5p,增加细胞活力,降低IL-1β和TNF-α水平,抑制细胞凋亡(均P<0.05);下调miR-31-5p表达可减弱敲低lncRNA TUG1对细胞炎症反应的抑制作用。miR-31-5p是lncRNA TUG1的直接靶标。在体内敲低lncRNA TUG1表达可上调AP小鼠胰腺组织中miR-31-5p表达,降低IL-1β、TNF-α水平,减少细胞凋亡,改善胰腺组织损伤。结论:敲低lncRNA TUG1可能通过上调miR-31-5p表达水平,抑制炎症反应,改善AP。

LncRNA TUG1靶向AKT/mTOR信号通路促进卵巢癌细胞增殖和转移的研究

目的探究长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(lncRNA TUG1)通过介导蛋白激酶B/磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(AKT/mTOR)信号通路对卵巢癌细胞增殖和转移的影响及可能机制。方法收集112例行卵巢癌根治术患者的卵巢癌组织及癌旁组织,采用RT-PCR检测两组织、卵巢癌细胞(OC3,SKOV3,A2780,HO-8910)及人正常卵巢上皮细胞IOSE80中TUG1表达。选择SKOV3细胞并分为si-TUG1组(转染TUG1 shRNA)和NC组(转染空载体质粒),采用CCK8、流式细胞术、划痕实验检测2组细胞增殖水平、细胞周期及细胞转移能力,Western blot检测2组蛋白激酶B(AKT)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-AKT、p-mTOR、细胞周期相关蛋白(Cyclin D1,Cyclin B1,CDK6)、转移相关蛋白(MMP-2,Snail)的相对表达量。结果RT-PCR检测结果显示,卵巢癌组织中TUG1表达高于癌旁组织(P<0.05),卵巢癌细胞OC3,SKOV3,A2780,HO-8910中TUG1表达均高于IOSE80细胞,且SKOV3中TUG1表达最高(P<0.05)。si-TUG1组细胞增殖水平、G_(2)/M期比例、细胞迁移距离均低于NC组,细胞G_(0)/G_(1)期比例高于NC组(P<0.05);si-TUG1组p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR、Cyclin D1、Cyclin B1、CDK6、MMP-2,Snail蛋白表达低于NC组(P<0.05)。结论下调lncRNA TUG1表达能降低卵巢癌细胞增殖、转移能力,这可能与其能抑制AKT/mTOR信号通路有关。

lncRNA-TUG1作为竞争性内源RNA在心血管疾病中的研究进展

长链非编码RNA(long no-coding RNA,lncRNA)是指长度超过200个核苷酸的RNA分子,虽然本身并不具备直接编码蛋白质的作用,却可通过参与多种生物过程,包括细胞增殖、分化、凋亡等介导疾病的发生[1]。lncRNA-牛磺酸上调基因1(taurine up-regulated gene 1,TUG1)被认为与人类疾病进展密切[2]。此外,过表达lncRNA-TUG1是心血管疾病后心脏预后不良的生物标志物[3]。

长链非编码RNA-TUG1在胃癌发生和发展中的作用及其机制

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)TUG1在胃癌发生和发展中的作用及其机制。方法收集2018年10月—2020年9月于上海健康医学院附属嘉定区中心医院普外科行胃癌根治术的60例胃癌患者的肿瘤组织和癌旁组织标本。选取其中3例存在淋巴结转移的患者组织样本进行lncRNA芯片检测,筛查胃癌和癌旁组织样本中的差异表达lncRNA。采用qRT-PCR技术检测TUG1基因在胃癌组织和细胞中的表达水平,分析其表达水平与临床及病理因素之间的关系。采用慢病毒Lenti-TUG1、Lenti-TUG1-shRNA转染胃癌细胞NCI-N87和MGC-803。根据慢病毒转染分为Lenti-TUG1处理组与Lenti-TUG1-shRNA处理组,设计不加慢病毒的细胞为对照组。采用细胞增殖实验和动物模型实验检测TUG1基因在体外和体内对NCI-N87和MGC-803生长的影响;采用细胞迁移和侵袭实验检测TUG1基因对NCI-N87和MGC-803细胞迁移和侵袭的影响;采用细胞凋亡实验检测TUG1基因对NCI-N87和MGC-803细胞凋亡的影响;采用蛋白质印迹法检测TUG1基因对凋亡及上皮间质转化(EMT)相关蛋白质表达的影响。结果lncRNA芯片检测结果显示,与癌旁组织比较,胃癌组织中有11种lncRNAs表达上调,有7种lncRNAs表达下调。根据患者胃癌组织中TUG1的中位相对表达量,将胃癌患者分为高表达组(30例)和低表达组(30例)。TUG1高表达组肿瘤体积≥5 cm^(3)、有淋巴结转移、有远处转移、TNM分期为Ⅲ期的患者构成均显著高于TUG1低表达组(P值均<0.05)。细胞增殖实验结果显示,与对照组比较,Lenti-TUG1处理组NCI-N87细胞和MGC-803细胞的光密度(A)值均显著增高,Lenti-TUG1-shRNA处理组NCI-N87细胞和MGC-803细胞的A值均显著降低(P值均<0.01)。细胞迁移和侵袭实验结果显示,与对照组相比,Lenti-TUG1处理组NCI-N87细胞与MGC-803细胞的迁移数量和侵袭数量均显著增多,Lenti-TUG1-shRNA处理组NCI-N87细胞与MGC-803细胞的迁移数量和侵袭数量均显著减少(P值均<0.01)。细胞凋亡实验结果显示,与对照组相比,Lenti-TUG1处理组NCI-N87细胞和MGC-803细胞的凋亡比例均显著降低,Lenti-TUG1-shRNA处理组NCI-N87细胞和MGC-803细胞的凋亡比例均显著增高(P值均<0.01)。小动物活体成像仪检测结果显示,与对照组相比,Lenti-TUG1处理组的NCI-N87细胞和MGC-803细胞的相对荧光强度均显著增高(P值均<0.01),Lenti-TUG1-shRNA处理组NCI-N87细胞和MGC-803细胞相对荧光强度均显著降低(P值均<0.01)。蛋白质印迹法检测结果显示,与对照组相比,Lenti-TUG1处理组NCI-N87细胞和MGC-803细胞中Bax、caspase-3和E-cadherin的蛋白质相对表达量均显著降低,RAB2A、MMP-14和Bcl-2的蛋白质相对表达量均显著增高;Lenti-TUG1-shRNA处理组NCI-N87细胞和MGC-803细胞中Bax、caspase-3和E-cadherin蛋白质相对表达量均显著增高,RAB2A、MMP-14和Bcl-2蛋白质相对表达量均显著降低(P值均<0.01)。在229例胃癌组织中,TUG1与RAB2A相对表达量呈正相关(r=0.180,P=0.006);miR-186与RAB2A相对表达量呈负相关(r=-0.147,P=0.026)。结论TUG1可能通过调控凋亡、EMT相关信号通路参与胃癌的发生、发展,针对TUG1的靶向治疗设计可能为胃癌治疗提供新的思路。

血清LncRNA Dlx6os1、LncRNA TUG1水平与老年糖尿病肾病患者肾脏损伤及预后的相关性

目的探讨血清长链非编码RNA(LncRNA)无远端同源框6反义RNA 1(Dlx6os1)、LncRNA牛磺酸上调基因1(TUG1)水平与老年糖尿病肾病(DN)患者肾脏损伤及预后的相关性。方法选取2019年1月—2021年1月西安交通大学第一附属医院榆林医院肾病学科收治的老年DN患者201例作为DN组,同期单纯T2DM患者112例作为单纯T2DM组,同期体检健康的老年人105例作为健康对照组,随访3年根据预后将老年DN患者分为不良预后亚组(61例)和良好预后亚组(140例)。检测血清LncRNA Dlx6os1、LncRNA TUG1和肾脏损伤指标[计算肾小球滤过率(eGFR)、尿白蛋白肌酐比(UACR)]水平;采用Spearman相关系数分析血清LncRNA Dlx6os1、LncRNA TUG1水平与老年DN患者肾损伤的相关性;以老年DN患者预后为因变量,建立多因素非条件Logistic回归模型分析其影响因素,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价血清LncRNA Dlx6os1、LncRNA TUG1水平对其的预测价值。结果健康对照组、单纯T2DM组、DN组血清LncRNA Dlx6os1和UACR水平依次升高,血清LncRNA TUG1和eGFR依次降低(F/P=870.484/<0.001、566.671/<0.001、271.117/<0.001、196.722/<0.001);Spearman相关性显示,老年DN患者血清LncRNA Dlx6os1水平与eGFR呈负相关、与UACR呈正相关(r/P=-0.816/<0.001、0.809/<0.001),血清LncRNA TUG1水平与eGFR呈正相关、与UACR呈负相关(r/P=0.832/<0.001、-0.806/<0.001);随访截至2024年1月,老年DN患者201例不良预后发生率为30.35%(61/201);多因素非条件Logistic回归显示,慢性肾脏病≥4期、UACR升高、LncRNA Dlx6os1升高为老年DN患者不良预后的独立危险因素[OR(95%CI)=5.758(1.480~22.401)、1.013(1.005~1.022)、1.426(1.201~1.693)],eGFR升高、LncRNA TUG1升高为保护因素[OR(95%CI)=0.958(0.939~0.978)、0.418(0.254~0.689)];ROC曲线显示,血清LncRNA Dlx6os1、LncRNA TUG1及二者联合预测老年DN患者不良预后的AUC分别为0.774、0.777、0.852,二者联合预测的AUC最大(Z/P=2.930/0.003、3.335/0.001)。结论老年DN患者血清LncRNA Dlx6os1水平升高、LncRNA TUG1水平降低,与肾脏损伤加重和不良预后风险增加有关,血清LncRNA Dlx6os1联合LncRNA TUG1水平预测老年DN患者不良预后的效能较高。

外周血lncRNA TUG1、miR-34b-5p水平与非小细胞肺癌患者术后发生肺部感染的关系研究

目的探讨外周血长链非编码核糖核酸(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)、微小核糖核酸(miRNA)-34b-5p表达与非小细胞肺癌(NSCLC)患者术后发生肺部感染的关系。方法选择2017年4月至2023年4月于该院接受手术治疗的951例NSCLC患者,根据术后是否发生肺部感染将患者分为感染组(106例)和非感染组(845例)。检测所有研究对象外周血中lncRNA TUG1、miR-34b-5p水平,采用Pearson相关分析lncRNA TUG1与miR-34b-5p之间的相关性;采用多因素Logistic回归分析NSCLC患者术后发生肺部感染的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析lncRNA TUG1、miR-34b-5p诊断NSCLC患者术后发生肺部感染的价值。结果感染组外周血lncRNA TUG1水平低于非感染组(P<0.05),miR-34b-5p水平高于非感染组(P<0.05)。感染组外周血lncRNA TUG1水平与miR-34b-5p水平呈负相关(r=-0.516,P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,手术时间过长、miR-34b-5p水平升高是NSCLC患者术后发生肺部感染的危险因素(P<0.05),lncRNA TUG1水平升高是NSCLC患者术后发生肺部感染的保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,lncRNA TUG1、miR-34b-5p单项及联合检测诊断NSCLC患者术后发生肺部感染的曲线下面积分别为0.821(95%CI:0.771~0.866)、0.775(95%CI:0.720~0.820)、0.913(95%CI:0.877~0.946),2项指标联合检测诊断的AUC大于lncRNA TUG1、miR-34b-5p单项诊断(Z=3.220、2.895,P<0.05)。结论NSCLC患者外周血lncRNA TUG1水平下调、miR-34b-5p水平上调,均与患者术后发生肺部感染有关,2项指标可能是判断NSCLC患者术后发生肺部感染的潜在标志物。

肝硬化病人血清lncRNA TUG1表达水平与肝功能、肝纤维化程度的相关性研究

目的 探讨肝硬化病人血清长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(lncRNA TUG1)表达情况及其与肝功能、肝纤维化程度的相关性。方法 选取2020年2月~2022年6月本院收治的乙型肝炎肝硬化病人92例为肝硬化组,均为Child-Pugh分级C级,根据肝纤维化程度分为轻中度组和重度组;同期88例本院健康体检者为对照组。采用荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定血清lncRNA TUG1水平,采用全自动生化分析仪测定肝功能指标血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)水平,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定肝纤维化指标层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)、Ⅳ型胶原(CⅣ)水平;采用Pearson相关分析肝硬化病人血清lncRNA TUG1与肝功能指标、肝纤维化指标的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA TUG1水平对肝硬化病人肝纤维化程度的评估效能;采用多元Logistic回归分析影响肝硬化病人肝纤维化程度的因素。结果 肝硬化组血清lncRNA TUG1、ALT、AST、TBIL、LN、PⅢP、CⅣ水平均显著高于对照组(P<0.001)。重度组肝硬化病程、HBV DNA、lncRNA TUG1、ALT、AST、TBIL、LN、PⅢP、CⅣ均显著高于轻中度组,差异有统计学意义(P<0.05)。肝硬化病人血清lncRNA TUG1与HBV DNA、ALT、AST、TBIL、LN、PⅢP、CⅣ均呈正相关(r:0.54、0.50、0.49、0.50、0.51、0.52、0.52,P<0.05)。lncRNA TUG1评估肝硬化病人肝纤维化程度发展为重度的曲线下面积(AUC)为0.91,截断点为2.61。lncRNA TUG1、LN与肝硬化病人肝纤维化程度发展为重度有关(P<0.05)。结论 血清lncRNA TUG1水平与肝硬化病人肝功能、肝纤维化程度均相关,检测血清lncRNA TUG1水平有利于评估病人肝纤维化的发展趋势。

轻度认知障碍和阿尔茨海默病患者血清lncRNA TUG1、NLRP1的差异及诊断价值

目的研究轻度认知障碍(MCI)和阿尔茨海默病(AD)患者血清长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)、Nod样受体蛋白3(NLRP1)的差异及诊断价值。方法选择河北省第三荣军优抚医院一般资料匹配的56例AD患者(AD组)、56例MCI患者(MCI组)和56名健康志愿者(对照组),采用简易精神状态量表(MMSE)和蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评估认知功能。比较三组血清中lncRNA TUG1、NLRP1、甘油三酯、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、同型半胱氨酸、尿酸水平的差异。结果三组血清lncRNA TUG1、NLRP1、TC水平:AD组>MCI组>对照组,差异有统计学意义(F=136.423、147.519、31.392,P<0.05);三组MMSE评分、MoCA评分、HDLC水平:AD组<MCI组<对照组,差异有统计学意义(F=136.481、119.571、22.572,P<0.05);血清lncRNA TUG1、NLRP1、TC与MMSE评分、MoCA评分呈负性相关(r=-0.341、-0.440、-0.229、-0.408、-0.374、-0.236,P<0.05),血清HDLC与MMSE评分、MoCA评分呈正性相关(r=0.283、0.273,P<0.05);血清lncRNA TUG1、NLRP1单独诊断MCI的曲线下面积(AUC)为0.841、0.841,联合诊断MCI的AUC为0.913,联合诊断的AUC高于单独诊断(P<0.05);血清lncRNA TUG1、NLRP1单独鉴别MCI和AD的AUC为0.767、0.827,联合鉴别MCI和AD的AUC为0.911,联合鉴别MCI和AD的AUC高于单独鉴别(P<0.05)。结论MCI和AD患者血清lncRNA TUG1、NLRP1水平增加且与认知功能下降相关,血清lncRNA TUG1、NLRP1对诊断MCI、鉴别AD具有一定临床价值。

LncRNA TUG1通过调节miR-181b-5p/PDCD4轴对高糖诱导的心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)通过调节miR-181b-5p/程序性细胞死亡蛋白4(PDCD4)轴对高糖诱导的心肌细胞凋亡的影响。方法 采用高糖(25 mmol/L葡萄糖)在体外构建糖尿病心肌病(DCM)细胞模型。AC16细胞分为NG组、HG组、HG+sh-NC组、HG+sh-TUG1组、HG+miR-NC组、HG+miR-181b-5p组、HG+sh-TUG1+anti-miR-NC组、HG+sh-TUG1+anti-miR-181b-5p组、HG+miR-181b-5p+pcDNA组、HG+miR-181b-5p+pc-PDCD4组。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞活力;乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒检测LDH释放总量;采用实时定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测TUG1、miR-181b-5p和PDCD4 mRNA表达;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测B细胞淋巴瘤2-相关X(Bax)、活化的胱天蛋白酶3(cleaved caspase 3)和PDCD4蛋白表达;caspase-Glo3检测试剂盒评估caspase 3活性;双萤光素酶报告基因实验验证TUG1或PDCD4与miR-181b-5p的靶向关系。结果 与NG组比较,HG组细胞活性降低,LDH释放总量、凋亡率、Bax、cleaved caspase 3表达及caspase 3活性升高(P<0.05),敲低TUG1或上调miR-181b-5p表达可拮抗上述变化(P<0.05)。抑制miR-181b-5p可减轻TUG1沉默对高糖处理下心肌细胞活力和凋亡的影响(P<0.05)。PDCD4过表达可减弱miR-181b-5p上调对高糖处理的心肌细胞活力的促进作用和对凋亡的抑制作用。TUG1可通过吸附miR-181b-5p上调PDCD4表达(P<0.05)。结论TUG1通过下调miR-181b-5p、上调PDCD4表达促进高糖诱导的心肌细胞凋亡。

狼疮肾炎患者血清lncRNA TUG1、miR-144的表达及其意义

目的分析血清长链非编码核糖核酸牛磺酸上调基因1(lncRNA TUG1)、微小核糖核酸-144(miR-144)表达与狼疮肾炎(LN)患者预后的关系。方法选取2020年1月—2021年6月遂宁市中心医院风湿免疫科收治的LN患者104例为LN组,根据随访期间是否发生终末期肾病(ESRD)分为预后不良亚组36例和预后良好亚组68例,另选取同期体检健康者40例为健康对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应试剂盒检测血清lncRNA TUG1、miR-144表达。经TargetScan网站预测lncRNA TUG1与miR-144的结合位点,采用Pearson相关性分析LN患者血清lncRNA TUG1与miR-144表达的相关性。多因素Logistic回归分析LN患者预后不良的危险因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA TUG1、miR-144表达对LN患者预后不良的预测价值。结果与健康对照组比较,LN组血清lncRNA TUG1表达降低,miR-144表达升高(t/P=15.885/<0.001、15.808/<0.001)。经TargetScan网站预测,lncRNA TUG1与miR-144存在结合位点;Pearson相关性分析显示,LN患者血清lncRNA TUG1与miR-144表达呈负相关(r=-0.797,P<0.001)。随访2年,104例LN患者ESRD发生率为34.62%(36/104)。多因素Logistic回归分析显示,慢性肾脏病分期4期和miR-144升高为LN患者肾脏预后不良的独立危险因素[OR(95%CI)=1.197(1.062~1.349)、1.108(1.047~1.172)],诱导治疗后完全缓解和估算肾小球滤过率、lncRNA TUG1升高为独立保护因素[OR(95%CI)=0.305(0.101~0.923)、0.979(0.960~0.998)、0.841(0.750~0.943)];ROC曲线分析显示,血清lncRNA TUG1、miR-144表达及二项联合预测LN患者肾脏预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.772、0.773、0.911,二者联合预测的AUC最大(Z/P=3.239/0.001、3.247/0.001)。结论LN患者血清lncRNA TUG1低表达和miR-144高表达与肾脏预后不良有关,二者联合预测LN肾脏预后不良价值较高。

长链非编码RNA牛磺酸上调基因1对胃癌细胞增殖、迁移和血管生成的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)对胃癌细胞增殖、迁移和血管生成的影响。方法基于公共数据库分析LncRNA TUG1在胃癌组织和癌旁组织中的表达水平。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测lncRNA TUG1在胃癌细胞系中的表达;采用si-TUG1、si-NC转染胃癌细胞SGC-7901,分别采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法、克隆形成实验、Transwell实验和基质胶成管实验分析敲低lncRNA TUG1对胃癌细胞增殖、集落形成、迁移和血管生成的影响。基于公共数据库分析烷基化修复蛋白B同源物5(ALKBH5)基因与lncRNA TUG1的相关性。采用放线菌素D实验验证ALKBH5与lncRNA TUG1的调控关系。通过细胞功能实验分析敲低ALKBH5对胃癌细胞增殖、集落形成、迁移和血管生成的影响。结果lncRNA TUG1在胃癌组织和胃癌细胞系中均表达上调;敲低lncRNA TUG1后,SGC-7901细胞增殖、集落形成、迁移、血管生成能力均较对照细胞下降,差异有统计学意义(P<0.05)。数据库分析结果显示,在胃癌中,ALKBH5与lncRNA TUG1表达呈正相关(r=0.37,P<0.05)。与对照细胞相比,敲低ALKBH5的SGC-7901细胞lncRNA TUG1的RNA稳定性下降,且细胞增殖、集落形成、迁移、血管生成能力均下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论ALKBH5通过诱导lncRNA TUG1表达,促进胃癌细胞的增殖、集落形成、迁移和血管生成。

TUG1在急性心肌梗死患者血清中的表达及其对心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(TUG1)在急性心肌梗死(AMI)患者血清中的表达及其对心肌细胞凋亡的影响。方法 采用实时荧光定量PCR检测86例AMI患者(观察组)和86例健康受试者(对照组)血清TUG1的表达,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析TUG1诊断AMI的价值,采用Pearson检验分析TUG1与心肌肌钙蛋白(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)的关系,采用双荧光素酶报告基因检测试剂盒检测TUG1与转录因子SRY相关高迁移率族盒蛋白9(SOX9)的靶向调控关系,采用Annexin-V-FITC/PI流式细胞术测定TUG1过表达的人心肌细胞(AC16)的凋亡。结果 观察组血清TUG1 mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.001)。血清TUG1诊断AMI的ROC曲线下面积为0.805,灵敏度和特异度分别为93.10%和82.14%。血清TUG1分别与cTnI(r=0.723,P=0.012)和CK-MB(r=0.603,P=0.031)呈正相关。双荧光素酶报告基因检测结果证实SOX9是TUG1的靶基因。H_(2)O_(2)诱导心肌细胞后,转染TUG1-mimic的心肌细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。结论 AMI患者TUG1表达水平上升,并靶向抑制SOX9而促进心肌细胞凋亡。

重型颅脑损伤病人血清微小RNA-542-3p、长链非编码RNA牛磺酸上调基因1表达及其与预后的关系

目的探讨微小RNA-542-3p(miR-542-3p)、长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(lncRNA TUG1)在重型颅脑损伤(STBI)病人血清中的表达及与病人预后的关系。方法2020年1月~2022年7月收治的128例STBI病人为重型组,130例轻、中型TBI病人为对照组,检测病人血清miR-542-3p、lncRNA TUG1表达量,采用Pearson法分析二者相关性。Logistic回归分析血清miR-542-3p、lncRNA TUG1对STBI病人预后不良的影响,并以受试者工作特征(ROC)曲线分析二者对STBI病人预后的预测效能。结果重型组病人血清miR-542-3p与lncRNA TUG1表达量分别低于和高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。STBI病人血清miR-542-3p与lncRNA TUG1表达量呈负相关(r=-0.595,P<0.001)。预后不良组血清lncRNA TUG1与miR-542-3p水平分别高于和低于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。高lncRNA TUG1水平是STBI病人预后不良的危险因素(P<0.05),高miR-542-3p水平是保护因素(P<0.05)。血清miR-542-3p、lncRNA TUG1联合预测STBI病人预后的曲线下面积(AUC)(0.939)高于单独预测的AUC(Z=2.410,P=0.016;Z=3.339,P<0.001)。结论STBI病人血清miR-542-3p表达下调,lncRNA TUG1表达上调,二者均可用于STBI病人预后预测,且二者联合的预测价值更高。

溃疡性结肠炎患者血清Lnc RNA TUG1和mi R-142-5p表达与疾病活动度及预后的关系

目的分析溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者血清长链非编码核糖核酸牛磺酸上调基因1(long noncoding RNA taurine upregulated gene 1,LncRNA TUG1)、微小核糖核酸(microRNA,miR)-142-5p表达水平与UC疾病活动度及预后的关系。方法选取2017年1月~2020年5月期间海南省第三人民医院收治的UC患者108例为UC组,根据改良Mayo评分将UC患者分为缓解期组(Mayo评分在2分及以下而且无单个分项评分在1分,n=42)、轻度活动组(3分≤Mayo评分≤5分,n=21)、中度活动组(6分≤Mayo评分≤10分,n=24)和重度活动组(11分≤Mayo评分≤12分,n=21)。对UC患者随访2年,记录其复发情况。另选取同期体检健康者108例为健康组。实时荧光定量PCR法测定血清LncRNA TUG1和miR-142-5p表达水平;比较UC组和健康组、不同疾病活动度UC患者、不同预后UC患者血清LncRNA TUG1和miR-142-5p表达水平;分析UC患者血清LncRNA TUG1表达水平与miR-142-5p的相关性及影响UC患者预后的因素。结果与健康组相比,UC组患者血清LncRNA TUG1表达水平(0.45±0.15 vs 1.04±0.35)降低,miR-142-5p表达水平(1.76±0.32 vs 1.01±0.18)升高,差异均有统计学意义(t=16.102,21.229,均P<0.05)。UC患者血清LncRNA TUG1表达水平与miR-142-5p呈负相关(r=-0.558,P<0.05);缓解期组、轻度活动组、中度活动组和重度活动组血清LncRNA TUG1表达水平依次降低(0.68±0.23,0.48±0.16,0.29±0.09,0.13±0.05),miR-142-5p表达水平依次升高(1.48±0.27,1.55±0.28,1.97±0.36,2.30±0.42),差异有统计学意义(F=59.475,35.716,均P<0.05)。108例UC患者随访2年,复发51例(复发组),未复发57例(未复发组),与未复发组相比,复发组UC患者血清LncRNA TUG1表达水平(0.38±0.13 vs 0.51±0.17)降低,miR-142-5p表达水平(1.93±0.35 vs 1.61±0.29)和有肠外表现患者占比(21/30 vs 9/48)升高,差异均有统计学意义(t=4.424~8.647,均P<0.05);肠外表现(OR=2.366,95%CI=1.558~3.592,P<0.001)和miR-142-5p(OR=2.563,95%CI=1.649~3.984,P<0.001)是影响UC患者预后的危险因素,而LncRNA TUG1(OR=0.680,95%CI=0.557~0.830,P<0.001)是影响UC患者预后的保护因素。结论UC患者血清LncRNA TUG1呈低表达而miR-142-5p呈高表达,均与UC疾病活动度、预后密切相关,测定二者水平有助于临床评估UC患者病情及预后。

类风湿关节炎患者血清lncRNA TUG1、miR-199a-3p表达水平及其与疾病严重程度的相关性

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者血清长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)和miR-199a-3p表达水平,以及两者与疾病严重程度的关系。方法选取102例RA患者为RA组,另选取102例健康者作为健康组。比较RA组与健康组之间血清lncRNA TUG1、miR-199a-3p表达水平,以及不同疾病活动度RA患者之间血清lncRNA TUG1和miR-199a-3p表达水平、基于C反应蛋白的28个关节疾病活动度评分(DAS28-CRP)、血清类风湿因子水平、血沉。分析RA患者血清lncRNA TUG1表达水平与血清miR-199a-3p表达水平的相关性,以及两者与DAS28-CRP、血清类风湿因子水平、血沉的相关性。结果RA组患者血清lncRNA TUG1表达水平高于健康组,血清miR-199a-3p表达水平低于健康组(均P<0.05)。随RA疾病活动度增加,RA患者血清lncRNA TUG1表达水平、血清类风湿因子水平、DAS28-CRP及血沉均呈升高趋势,而血清miR-199a-3p表达水平呈降低趋势(均P<0.05)。RA患者的血清lncRNA TUG1表达水平与DAS28-CRP、血清类风湿因子水平、血沉均呈正相关,而血清miR-199a-3p表达水平与血清lncRNA TUG1表达水平及上述指标均呈负相关(均P<0.05)。结论RA患者血清lncRNA TUG1表达水平上调,血清miR-199a-3p表达水平下调,二者均与疾病严重程度相关,两者有助于临床评估RA患者的病情。

lnc RNA TUG1在缺血性脑卒中发生发展中的作用机制研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是指碱基组长度超过200 nt的RNA分子,发现初期被认为是转录噪音,随着基因组学的发展及对RNA认识的增加,发现其可参与多个生物学过程,包括调节转录、翻译、修饰、剪接等过程,可通过与DNA、RNA、蛋白质的相互作用,调控基因的表达。牛磺酸上调基因1(taurine up-regulated gene 1,TUG1)最初是在体外视网膜细胞中发现的lncRNA,人们通过高通量测序发现其在缺血性脑卒中(IS)中表达异常,且有研究发现TUG1的异常表达与脑卒中预后相关,提示TUG1有可能成为IS潜在的生物标志物及潜在治疗靶点。但TUG1在IS中的具体作用机制尚不明确,本文就TUG1在IS发生发展中的作用机制的最新研究进展进行综述。

LncRNA TUG1调节miR-140-3p对胆管癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(LncRNA TUG1)对胆管癌细胞生物学行为的影响及作用机制。方法:q RT-PCR检测人胆管癌细胞系LncRNA TUG1与mi R-140-3p表达,筛选最佳干预细胞。在胆管癌细胞QBC939中抑制LncRNA TUG1表达或同时抑制LncRNA TUG1与mi R-140-3p表达,分别检测QBC939细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及相关蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA TUG1与mi R-140-3p的靶向关系。结果:LncRNA TUG1在胆管癌细胞表达水平升高,选择QBC939细胞进行后续实验;抑制LncRNA TUG1表达可显著抑制QBC939细胞增殖、迁移与侵袭,促进细胞凋亡,并显著降低PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平,升高Caspase-3蛋白表达水平(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验结果证实LncRNA TUG1可靶向调控mi R-140-3p表达;抑制mi R-140-3p表达可逆转抑制LncRNA TUG1表达对QBC939细胞的作用。结论:LncRNA TUG1在胆管癌细胞上调表达,抑制LncRNA TUG1表达可靶向上调mi R-140-3p表达,抑制胆管癌细胞增殖、迁移及侵袭,促进细胞凋亡。

lncRNA TUG1和miR-26a在子痫前期胎盘组织中的表达水平及其临床意义

目的探讨子痫前期(PE)患者胎盘组织中长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(lncRNA TUG1)和微小RNA-26a(miR-26a)的表达水平,并分析两者在PE发生、发展中的作用。方法选择2019年5月至2021年5月株洲市中心医院产科收治的新发PE患者100例(PE组),其中轻度PE 49例(轻度PE组),重度PE 51例(重度PE组)。以年龄、胎龄为匹配条件,纳入同期健康孕妇100名作为对照组。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测研究对象胎盘组织中lncRNA TUG1和miR-26a的表达水平。通过Pearson相关分析探讨lncRNA TUG1、miR-26a表达水平与PE患者临床指标的相关性。结果轻度PE组、重度PE组胎盘组织的lncRNA TUG1表达水平低于对照组,miR-26a表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与轻度PE组比较,重度PE组胎盘组织lncRNA TUG1表达水平更低,miR-26a表达水平更高,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,PE患者胎盘组织中lncRNA TUG1表达水平与收缩压、舒张压和尿蛋白水平呈负相关(P<0.05);miR-26a表达水平与收缩压、舒张压和尿蛋白水平呈正相关(P<0.05);lncRNA TUG1表达水平与miR-26a表达水平呈负相关(P<0.05)。结论lncRNA TUG1在PE胎盘组织中呈低表达,而miR-26a呈高表达,其与PE严重程度具有关联性。lncRNA TUG1可能通过靶向结合miR-26a参与PE的发生、发展。

lncRNA TUG1吸附microRNA-144对狼疮肾炎小鼠肾小球系膜细胞炎症因子分泌与凋亡的影响及其机制研究

目的探讨长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(lncRNA TUG1)吸附microRNA-144(miR-144)对狼疮肾炎小鼠肾小球系膜细胞炎症因子分泌与凋亡的影响机制。方法 B6.MRL-FaslprNju系统性红斑狼疮模型小鼠20只和C57BL/6健康小鼠5只在适应性条件下喂养5 d。每天收集B6.MRL-FaslprNju系统性红斑狼疮模型小鼠24 h尿量,尿蛋白浓度> 1 mg/L表明狼疮肾炎发病,为狼疮肾炎组。C57BL/6小鼠为正常组。分离纯化两组小鼠肾小球系膜细胞。对lncRNA TUG1实施亚细胞定位,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测狼疮肾炎组和正常组小鼠肾组织中lncRNA TUG1和miR-144 mRNA相对表达量。狼疮肾炎组小鼠肾小球系膜细胞转染并分为NC组(肾小球系膜细胞转染阴性对照序列)、TUG1过表达组(肾小球系膜细胞转染TUG1)、shTUG1组(肾小球系膜细胞转染sh-TUG1)、miR-144 mimic组(肾小球系膜细胞转染miR-144 mimic)、TUG1过表达+miR-144 mimic组(肾小球系膜细胞转染TUG1和miR-144 mimic)。双荧光素酶报告实验验证lncRNA TUG1和miR-144的靶向关系,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的水平。Western blotting法检测纤维化标记因子Ⅳ型胶原(ColⅣ)、纤连蛋白(FN)的蛋白相对表达量。MTT法检测各组细胞增殖活力,Transwell实验检测各组细胞侵袭数,流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果与正常组小鼠比较,狼疮肾炎组小鼠肾组织中的miR-144 mRNA相对表达量升高,lncRNA TUG1 mRNA相对表达量降低(P <0.05)。lncRNA TUG1与miR-144存在靶向结合关系。NC组、TUG1过表达组、sh-TUG1组、miR-144 mimic组、TUG1过表达+miR-144 mimic组细胞TNF-α、IL-1β、IL-6水平比较,差异有统计学意义(P <0.05);与NC组比较,TUG1过表达组TNF-α、IL-1β和IL-6水平降低,miR-144 mimic组TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高(P <0.05)。各组的ColⅣ、FN蛋白相对表达量比较,差异有统计学意义(P <0.05);与NC组比较,TUG1过表达组ColⅣ和FN蛋白相对表达量降低,miR-144 mimic组ColⅣ、FN蛋白相对表达量升高(P <0.05)。各组不同时间点的肾小球系膜细胞增殖活力比较,采用重复测量设计的方差分析,结果:(1)不同时间点的肾小球系膜细胞活力有差异(P <0.05);(2)各组肾小球系膜细胞活力有差异(P <0.05);(3)各组的细胞活力变化趋势有差异(P <0.05);与NC组48 h和72 h比较,TUG1过表达组48 h和72 h细胞增殖活力降低(P <0.05),sh-TUG1组48 h和72 h细胞增殖活力增强(P <0.05),miR-144 mimic组48 h和72 h细胞增殖活力增强(P <0.05)。各组肾小球系膜细胞侵袭数和细胞凋亡率比较,差异有统计学意义(P <0.05);与NC组比较,TUG1过表达组的细胞侵袭数减少(P <0.05),细胞凋亡率升高(P <0.05);sh-TUG1组细胞侵袭数增多(P <0.05),细胞凋亡率降低(P <0.05);miR-144 mimic组细胞侵袭数增多(P <0.05)、细胞凋亡率降低(P <0.05)。结论 lncRNA TUG1吸附miR-144进而抑制狼疮肾炎小鼠肾小球系膜细胞炎症因子分泌,减少细胞增殖并促进凋亡。