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5-Aza-C对人鼻咽癌细胞hTERT基因表达及端粒酶活性的影响 被引量:1
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作者 王燕 张自雄 +3 位作者 戴梦源 陶泽璋 肖伯奎 陈始明 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期6-10,共5页
目的研究去甲基化药物5-氮杂胞嘧啶核苷(5-Azacytidine,5-Aza-C)对鼻咽癌细胞亚端粒区D4Z4甲基化状态、h TERT基因表达及端粒酶活性的影响。方法常规培养鼻咽癌CNE,CNE1,CNE2及5-8F细胞系。5-Aza-C处理鼻咽癌细胞后,甲基化测序聚合酶链... 目的研究去甲基化药物5-氮杂胞嘧啶核苷(5-Azacytidine,5-Aza-C)对鼻咽癌细胞亚端粒区D4Z4甲基化状态、h TERT基因表达及端粒酶活性的影响。方法常规培养鼻咽癌CNE,CNE1,CNE2及5-8F细胞系。5-Aza-C处理鼻咽癌细胞后,甲基化测序聚合酶链反应(MSP)法检测亚端粒区D4Z4甲基化;RT-PCR检测h TERT m RNA水平;端粒重复序列扩增法(telomeric repeat amplifi cation protocol,TRAP)法检测端粒酶活性。结果 5-Aza-C处理后,四种鼻咽癌细胞系的亚端粒区D4Z4序列的甲基化水平较处理前明显下降。2.5μmol/L 5-Aza-C处理后,四种鼻咽癌细胞h TERT m RNA的表达明显下调,端粒酶活性显著抑制。结论在鼻咽癌的发生中,亚端粒区的DNA甲基化水平紊乱起了一定的作用,去甲基化药物5-Aza-C能下调h TERT表达,抑制端粒酶活性。探讨鼻咽癌细胞中h TERT表达与亚端粒区Cp G岛甲基化状态之间的关系,可能为亚端粒区染色体结构异常在鼻咽癌发生中的作用提供深刻见解。 展开更多
关键词 鼻咽癌 5-Aza-C 人端粒酶反转录酶 端粒酶活性
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端粒酶催化亚单位TERT在实验性外伤性PVR视网膜前膜的动态表达(英文) 被引量:2
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作者 康凤英 薛黎平 《国际眼科杂志》 CAS 2004年第2期211-214,共4页
目的:探讨端粒酶催化亚单位(TERT)是否参与了实验性外伤性增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)视网膜前膜的细胞增殖调控及其随病程的动态变化。方法:对外伤性PVR大鼠模型视网膜前膜做S-P法TERT免疫组织化学染色和HE染色,染色结果行计算机图像... 目的:探讨端粒酶催化亚单位(TERT)是否参与了实验性外伤性增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)视网膜前膜的细胞增殖调控及其随病程的动态变化。方法:对外伤性PVR大鼠模型视网膜前膜做S-P法TERT免疫组织化学染色和HE染色,染色结果行计算机图像分析。结果:术后7,14,21,28d视网膜前膜阳性细胞率出现先升高后略降,分别为(4.5±2.7)%,(14.2±4.6)%,(13.0±4.8)%,(9.2±2.3)%,平均A分别为0.0690±0.0213,0.0912±0.0125,0.0825±0.0278,0.0744±0.0159,7d组与14d组和21d组比较有显著性差异,28d组较前2组阳性率下降,差别有显著性意义。结论:端粒酶的激活可能是启动PVR视网膜前膜细胞增殖的机制之一,TERT的表达随病程而出现波动。 展开更多
关键词 端粒酶催化亚单位 外伤性PVR 视网膜前膜 动物模型 免疫组织化学 细胞增殖
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Expression of telomerase hTERT in human non-small cell lung cancer and its correlation with c-myc gene 被引量:11
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作者 耿志华 张敦华 刘银坤 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2003年第10期1467-1470,共4页
Objective To investigate the expression of human telomerase catalytic subunit,hTERT, in human non-small cell lung cancer (NSCLC) and its correlations to c-myc gene.Methods hTERT and c-myc mRNA expressions were detecte... Objective To investigate the expression of human telomerase catalytic subunit,hTERT, in human non-small cell lung cancer (NSCLC) and its correlations to c-myc gene.Methods hTERT and c-myc mRNA expressions were detected by semiquantitative reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Statistical correlation analysis was made to estimate whether there was interrelation between them.Results Positive rate of hTERT expression in 51 surgically resected lung cancer specimens was 86.3%,significantly higher than that in adjacent non-neoplastic lung tissues and benign lesions,which were 14.3% and 27.3% respectively. No statistical significance was observed between the frequency of hTERT expression and histologic types,degree of differentiation,TNM stages,tumor size or lymph nodes metastases. Correlation analysis revealed that the expression of c-myc gene was significantly related to that of hTERT (correlation coefficient,r =0.633,P <0.001).Conclusions hTERT may be a useful tumor marker in diagnosing lung cancer. Significant correlation between the expression of hTERT and c-myc mRNA indicates that the activation and up-regulation of hTERT might be conferred by over-expression of c-myc gene. 展开更多
关键词 non-small-cell lung cancer · telomerase catalytic sub-unit · c-myc gene · correlation analysis
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肿瘤特异性结核抗原Ag85A基因慢病毒表达载体构建 被引量:1
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作者 王小勇 廖斌 +4 位作者 于海清 刘高华 李多 肖琳琳 唐小军 《中国胸心血管外科临床杂志》 CAS CSCD 2015年第11期1050-1055,共6页
目的构建小鼠端粒酶催化亚单位启动子(murine telomerase catalytic subunit promoter,PmTERT)调控的结核杆菌抗原基因Ag85A肿瘤特异性慢病毒表达载体,为肿瘤靶向性免疫基因治疗的研究奠定基础。方法用聚合酶链式反应(polymerase chain ... 目的构建小鼠端粒酶催化亚单位启动子(murine telomerase catalytic subunit promoter,PmTERT)调控的结核杆菌抗原基因Ag85A肿瘤特异性慢病毒表达载体,为肿瘤靶向性免疫基因治疗的研究奠定基础。方法用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法克隆PmTERT用荧光素酶(luciferase)活性检测方法研究PmTERT在小鼠和人肿瘤细胞及正常细胞中的转录活性。通过核酸分子克隆方法分别构建巨细胞病毒(cytomegalo virus,CMV)启动子和PmTERT调控的Ag85A基因慢病毒表达载体并用基因测序和Western blot方法对重组载体进行鉴定。结果本研究克隆的331 bp大小的PmTERT在小鼠Lewis肺癌细胞、人A549肺癌细胞、EC-109食管癌细胞中均有转录活性在小鼠NIH3T3胚胎成纤维细胞和人MRC-5胚肾成纤维细胞中无转录活性;成功构建分别由CMV启动子和PmTERT调控的Ag85A基因慢病毒表达载体pLVX-Ag85A-CMV和pLVXAg85A-PmTERT;感染pLVX-Ag85A-CMV的Lewis细胞和NIH3T3细胞均有Ag85A蛋白表达感染pLVX-Ag85APmTERT的Lewis细胞有Ag85A表达感染pLVX-Ag85A-PmTERT的NIH3T3细胞无g85A表达。结论PmTERT具有肿瘤特异性转录活性,其驱动的结核杆菌抗原基因可以在肿瘤细胞中靶向性表达。 展开更多
关键词 肿瘤 免疫基因治疗 端粒酶催化亚单位启动子 靶向性表达 结核杆菌抗原Ag85A
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