肝癌中Tenascin-C表达及其对肝癌Hep3B、SMMC-7721细胞侵袭转移影响的实验研究

目的探讨Tenascin-C在人肝细胞癌中的表达,分析其表达水平与肝癌细胞侵袭转移的关系。方法体外培养人永生化肝细胞L-02、HL-7702和不同转移潜能人肝癌细胞Hep3B、HepG2、SMMC-7721、Bel-7402、HHCC、MHCC-97H、MHCC-97L,实时荧光定量PCR(qPCR)和免疫印迹法检测Tenascin-C的表达,Transwell检测人肝癌细胞的迁移和侵袭能力。构建Tenascin-C小干扰RNA,Transwell检测肝癌Hep3B、SMMC-7721细胞迁移和侵袭能力的变化。分析Tenascin-C表达与肝癌细胞侵袭转移的关系。结果与永生化肝细胞比较,人肝癌细胞中Tenascin-C mRNA和蛋白表达量均增高,差异均具有统计学意义(P=0.001);不同人肝癌细胞转移能力具有差异,以Hep3B最高,其次为SMMC-7721、Bel-7402,HepG2,MHCC97-L最低。沉默Tenascin-C后,与阴性对照组比较,肝癌Hep3B、SMMC-7721细胞迁移和侵袭能力均降低,差异具有统计学意义(P=0.001)。相关性分析显示,Tenascin-C表达与肝癌细胞迁移、侵袭数目均呈正相关(P=0.001)。结论Tenascin-C在人肝癌中的高表达可能参与促进癌细胞的侵袭转移,沉默Tenascin-C能够有效抑制肝癌Hep3B、SMMC-7721细胞转移能力,有望作为肝癌进展的重要生物学指标。

急性脑出血患者血清tenascin-C水平与病情严重程度、预后的相关性分析

目的分析急性脑出血(ACH)患者血清腱糖蛋白C(tenascin-C)水平与病情严重程度、预后的相关性。方法将2020年8月至2022年8月郑州大学第一附属医院收治的186例ACH患者作为观察组,同期186例体检健康人为对照组。采用酶联免疫吸附法检测对照组和观察组入院1、3、7 d血清tenascin-C水平。评估患者神经功能缺损程度,并根据脑出血量、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分进行分组,比较各组患者各时间点血清tenascin-C水平;出院后3个月采用改良Rankin量表评估患者预后状况并分为预后良好组和预后不良组,运用logistic回归分析方法系统评估ACH患者预后的相关危险因素。结果观察组血清tenascin-C水平高于对照组(P<0.05);入院后1、3、7 d,大量脑出血组患者的tenascin-C水平均较中、少量出血组高,中量脑出血组较少量出血组高(P<0.05);重度组患者的tenascin-C水平高于中度组和轻度组,中度组高于轻度组(P<0.05)。预后不良组患者NIHSS评分、脑出血体积、tenascin-C水平均高于预后良好组(P<0.05)。经ROC曲线分析显示,血清tenascin-C截断值为81.50μg·L^(-1),曲线下面积为0.854,敏感度为90.88%,特异度为72.60%。logistic回归分析显示,NIHSS评分、脑出血体积以及tenascin-C水平均为ACH患者预后不良的危险因素(P<0.05)。结论ACH患者血清中tenascin-C的水平显著升高,且与脑出血量及神经功能缺损成正比,tenascin-C不仅可作为评估ACH损伤严重程度的一个关键生物学标志物,还可以预测患者的治疗效果和生存率。

Tenascin基因在斑马鱼胚胎发育中时空表达规律

目的观察tenascin-c（tnc）和tenascin-w（tnw）在斑马鱼不同发育时期的时空表达规律,进而揭示tenascin基因与胚胎发育的关系及tnc与tnw在胚胎发育过程中的联系。方法选择2 hpf（受精后2h）、4hpf、8hpf、10hpf、24hpf、48hpf、72hpf、7dpf（受精后7d）的斑马鱼胚胎,分别提取各组RNA行反转录聚合酶链反应（RT-PCR）,并固定各时期胚胎作原位杂交,观察不同时期tnc和tnw在斑马鱼胚胎中时间和空间的表达规律。结果tnc和tnw在斑马鱼2~10hpf时均未检测到表达,在24hpf、48hpf、72hpf、7dpf有表达。tnc在胚胎24hpf表达于其咽弓、脊索、体节中;在胚胎48hpf,tnc在其躯干部表达减弱,逐渐局限于尾端,而在胸鳍、听囊、咽弓、后脑有高表达;72hpf在其体节、胸鳍表达消失,在后脑、咽弓、脊索仍有表达。tnw在24hpf开始表达于其中脑、后脑和听囊中;48hpf表达在其体节、脊索,在后脑、听囊中仍有表达,并表达于咽弓;72hpf在其躯干部的表达开始减弱,在脊索中仍有表达。结论tnc和tnw在斑马鱼胚胎发育时期具有严格的特异性时空表达规律,二者在斑马鱼胚胎发育过程中有密切联系。

参芪扶正注射液对人胃癌MGC-803细胞侵袭能力及Tenascin-C表达的影响

目的:研究中药制剂参芪扶正注射液含药血清对胃癌MGC-803细胞侵袭能力及Tenascin-C(Tn-C,腱糖蛋白-C或韧粘素-C)mRNA表达的影响。方法:分别将高浓度(0.16g/ml)、中浓度(0.8g/ml)、低浓度(0.4g/ml)不同剂量的中药制剂参芪扶正注射液注射于小鼠制备含药血清及对照血清。设立空白组,对照血清组,低、中、高浓度参芪扶正注射液组,对胃癌MGC-803细胞株培养48小时,采用MatrigelTM方法观察各组细胞株的侵袭情况。然后分别用不同剂量含药血清培养胃癌细胞,采用RT-PCR法检测各组胃癌细胞中Tn-C表达的影响。结果:与空白对照组比较,参芪扶正注射液能明显抑制胃癌细胞侵袭能力,且浓度越高抑制作用越强,高浓度含药血清使细胞的侵袭能力下降34.7%。中药制剂参芪扶正注射液高、中、低剂量组均能明显降低Tn-C值,且降低程度与含药血清浓度正相关。结论:中药制剂参芪扶正注射液能明显抑制胃癌MGC-803细胞株体外侵袭能力,并且下调胃癌细胞中Tn-C的表达,这可能是其抑制肿瘤侵袭的分子机制。

Tenascin-C在人原发性肝细胞癌浸润、转移和血管生成中的作用

目的研究Tenascin-C在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达,探讨Tenascin-C与HCC浸润、转移和血管生成的关系。方法采用免疫组织化学方法检测54例HCC、32例肝硬化、17例正常肝组织中Tenascin-C的表达情况以及微血管密度(MVD);采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Tenascin-C mRNA,并结合临床病理指标进行分析。结果 Tenascin-C在HCC、肝硬化和正常肝脏组织中的阳性例数分别为34、6和0,其差异具有统计学意义(χ2=14.06,P<0.01);Tenascin-C在HCC组织内的表达强度明显高于肝硬化组织[(162.15±9.77)vs.(149.24±8.25),t=2.192,P<0.05]。HCC组织Tenascin-C mRNA的表达强度明显高于肝硬化组织[(0.593±0.110)vs.(0.138±0.089),t=2.894,P<0.05]。有包膜浸润的HCC组织中Tenascin-C表达量明显高于无浸润者(t=2.248,P<0.05),Edmondson-Steiner病理分级中HCC属Ⅲ～Ⅳ级的Tenascin-C含量明显高于Ⅰ～Ⅱ级者(t=2.698,P<0.05),HCC有转移的Te-nascin-C含量明显高于无转移者(t=2.785,P<0.01)。HCC组织中Tenascin-C表达与微血管密度(MVD)呈正相关(r=0.68,P<0.05)。获随访的46例(85.2%)HCC患者在随访期间(3～30个月,平均11.5个月),Tenascin-C阴性表达的患者中位生存时间长于Tenascin-C阳性表达的患者[(22.01±6.95)月vs.(15.08±7.06)月,P<0.05,log-rank test]。结论 Tenascin-C对HCC的浸润、转移和血管生成起着重要作用。Tenascin-C和MVD可以作为预测HCC浸润、转移的生物学指标。

肝细胞癌Tenascin蛋白和微血管密度检测及临床意义

目的:研究细胞外基质Tenascin(TN)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达,探讨TN对HCC肿瘤微血管生成、浸润、转移及预后的影响。方法:采用免疫组织化学方法检测63例HCC癌组织、癌旁组织及15例肝炎后肝硬化组织、10例正常肝组织中TN表达,同时检测HCC组织微血管密度(CD105-MVD),分析TN表达与HCC病理学特点及肿瘤微血管生成的关系。结果:HCC组织TN阳性率65.1%,癌旁组织69.8%,肝硬化组织20.0%,正常肝组织无阳性表达;HCC组织及癌旁组织TN表达阳性率及表达强度评分显著高于肝硬化组织及正常肝组织(χ2=27.67,P<0.01;F=12.82,P<0.01);HCC组织TN表达阳性率与癌旁组织比较差异无统计学意义(χ2=0.325,P>0.05);TN表达与HCC的组织学分级,病灶数量,有否包膜浸润、肿瘤转移及肿瘤微血管生成密切相关。结论:HCC组织TN的表达上调促进了肿瘤的新生血管形成,导致术后肿瘤的早期复发和转移;HCC组织TN检测可有效反映其恶性程度、浸润、转移及预后。

Tenascin、CD34在胆管癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Tenascin、CD34在胆管癌的发生、发展中的作用和意义。方法收集我院1995年-2003年期间切除的胆管癌标本33例和正常胆管组织4例,采用免疫组织化学S-P方法,检测其Tenascin、CD34的表达情况。结果Tenascin在胆管癌组织中的阳性表达率为81.8%(27/33),其中病理分级Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级的阳性率分别为71.4%、82.4%和88.9%,但无显著性统计学差异(P>0.05);在正常胆管组织中未检测到Tenascin表达。CD34在胆管癌组织中广泛表达,在正常胆管组织中仅有少量表达,两者相比具有显著统计学差异(P<0.05)。结论Tena-scin可以作为胆管癌的肿瘤标志应用于临床诊断,CD34可作为预测肿瘤转移的一项重要指标。

Tenascin-C在乳腺导管原位癌的表达及其意义

目的:探讨Tenascin-C(Tn-C)在乳腺导管原位癌中的表达及其意义。方法:应用免疫组化S-P方法检测52例乳腺导管原位癌Tn-C的表达,及其与ER、PR和HER-2等表达的相关性。结果:Tn-C表达阳性率为60%,其中Van-Nuys1组的阳性率为38%,Van-Nuys2组的阳性率为70%,Van-Nuys3组的阳性率为88%,组间阳性表达差异有统计学意义(P<0.01)。Tenascin-C的阳性表达和ER、PR阴性表达及HER-2阳性表达呈正相关(P<0.05)。结论:Tn-C可以作为判断乳腺导管原位癌恶性程度、预后的一个指标。

致动脉粥样硬化不同因素对大鼠腹腔巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞分泌表达Tenascin-C的影响

目的 观察一些致动脉粥样硬化因素对培养的大鼠腹腔巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞分泌表达Tenascin C的影响。方法 体外分离培养大鼠腹腔巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞 ,同步后分别加入不同刺激因子采用Westernbolt及逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)的方法检测Tenascin C蛋白和mRNA水平表达。结果 Tenascin C在两种细胞的对照组中均不表达 ,低密度脂蛋白刺激组只有少量表达 ,其余各刺激组均呈高水平表达。加入氧化修饰低密度脂蛋白 (oxLDL) 2h后即有Tenascin C的表达 ,6h时达高峰 ,可持续到 2 4h。oxLDL与Tenascin C蛋白的表达呈明显的浓度依赖性。结论 oxLDL等致动脉粥样硬化刺激因子可在转录水平上调Tenascin C基因的表达 ,从而促进血管平滑肌细胞和巨噬细胞分泌表达高水平的Tenascin C ,这可能是动脉粥样硬化中Tenascin

人脑胶质瘤Tenascin基因表达与侵袭相关性

目的 探讨 Tenascin和 Ki- 6 7在不同级别人脑胶质瘤细胞表达情况 ,分析它与胶质瘤细胞的侵袭相关性 .方法 采用原位杂交和免疫组织化学方法 ,检测不同级别人脑胶质瘤组织5 0例中 Tenascin和 Ki- 6 7表达 ,以细胞核增殖抗原 Ki- 6 7阳性细胞数分析胶质瘤细胞的增殖情况 .结果 胶质瘤与其增生血管内皮细胞均表达 Tenascin,Tenascin基因表达与肿瘤细胞增殖指数呈显著正相关 ,随胶质瘤恶性程度提高 ,Tenascin和 Ki-6 7表达均增强 .结论 Tenascin在人脑胶质瘤组织有异常表达 ,它可能是刺激肿瘤细胞恶性增殖和血管新生的重要因素 ,在人脑胶质瘤侵袭性生长中起重要作用 。

Tenascin-C基因在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的:研究Tenascin-C在子宫内膜正常组织、子宫内膜增生组织及子宫内膜癌组织中的表达,探讨Tenascin-C基因与子宫内膜癌发生、发展及预后的关系。方法:采用免疫组化SP法,分别检测14例正常子宫内膜组织、18例子宫内膜增生组织和78例子宫内膜癌组织中Tenascin-C的表达情况,并分析子宫内膜癌组织中Tenascin-C的表达和临床病理特征之间的关系。结果:Tenascin-C在子宫内膜癌组织阳性率明显高于正常子宫内膜组织、子宫内膜增生组织,差异有统计学意义(P<0.05)。Tenascin-C在子宫内膜癌中的表达与浸润肌层深度、分化程度、FIGO分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论:Tenascin-C基因的表达与子宫内膜癌的发生、发展和转移密切相关,因此对Tenascin-C基因的检测可用于判断子宫内膜癌恶性程度及评估其预后的生物学指标。

乙醇对斑马鱼胚胎发育中tenascin-c基因表达的影响

目的探讨tenascin-c(tnc)基因在斑马鱼胚胎异常发育过程中表达的变化,从而揭示该基因在斑马鱼胚胎发育中可能存在的作用。方法不同水平乙醇(100、200、300、400、500mmol/L)持续处理斑马鱼胚胎,制备斑马鱼异常发育模型,收集受精后24、48h斑马鱼胚胎并固定,用原位杂交和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法观察tnc在斑马鱼异常发育时表达的变化。组间比较采用SPSS11.5软件进行统计学处理。结果200mmol/L乙醇处理的斑马鱼胚胎在受精72h其他系统未发现发育异常,而心脏已出现畸形。100、200mmol/L乙醇处理后,RT-PCR结果示tnc在斑马鱼胚胎发育中的表达上调,而原位杂交信号变化不明显;300mmol/L及以上乙醇处理的胚胎,原位杂交结果示tnc在体节处表达下降;100～400mmol/L乙醇处理的胚胎,在受精48htnc在斑马鱼心脏部位均有表达。结论tnc在低水平乙醇处理时表达即上调,对胚胎正常发育有保护作用;在心脏异常发育时表达,促进心脏的正常发育;tnc在病理状态下的表达模式不仅在脊椎动物中具有保守性,而且在胚胎和成体时期也具有保守性。

乳腺不典型增生及乳腺癌中Tenascin的表达

为观察 Ｔｅｎａｓｃｉｎ（ Ｔ Ｎ）在乳腺不典型增生癌变过程中的表达变化，采用 Ｓ Ｐ免疫组化染色法检测了 ５０ 例不同乳腺组织中 Ｔ Ｎ 的表达情况。结果显示： 正常及Ⅰ级增生的乳腺组织中无 Ｔ Ｎ 表达，２ 例Ⅱ级不典型增生的乳腺组织中有 Ｔ Ｎ 表达，Ⅲ级不典型增生及浸润性导管癌中 Ｔ Ｎ 表达阳性率分别为 ８０％ 和 ９０％ ，与Ⅱ级不典型增生相比明显增高（ Ｐ＜ ０．０１）。部分癌细胞胞浆中也有 Ｔ Ｎ 表达。本实验结果提示，重度不典型增生的乳腺组织间质中 Ｔ Ｎ 的表达可能起限制不典型增生细胞向外生长的作用。

Tenascin-C在椎间盘退行性病变中的作用及机制研究

目的通过观察Tenascin-C(TNC)在椎间盘退行性病变(DDD)中的表达变化,探讨TNC在椎间盘退行性病变中的作用及机制。方法实时PCR和Western blotting检测人髓核细胞和小鼠椎间盘细胞在炎性条件下TNC、胶原蛋白Ⅱ和蛋白聚糖的变化,酶谱法及基质金属蛋白酶(MMP)活性检测MMP活性的变化。加入外源性TNC,研究TNC对DDD是否起到保护作用。体内实验验证TNC的表达情况及位置。结果在椎间盘发生退行性病变时,TNC表达增高,胶原蛋白Ⅱ和蛋白聚糖表达降低,MMP活性增高。加入外源性TNC后,胶原蛋白Ⅱ和蛋白聚糖表达增高,MMP活性降低。结论TNC能够调节MMP活性,对椎间盘细胞起保护作用。

膀胱移行细胞癌中Tenascin-C表达的研究

目的初步探讨膀胱移行细胞癌(BTCC)中Tenascin-C蛋白m RNA的表达,明确Tenascin-C在肿瘤及瘤旁组织中的表达情况,并对Tenascin-C在BTCC中早期浸润、术后随访及复发的检测等方面的价值作进一步的讨论。方法三组标本共50例,分别来源于肿瘤组织、肿瘤旁组织、正常膀胱组织。采集标本于膀胱开放手术、膀胱镜活检术或经尿道膀胱肿瘤切除术(TURBT)。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测所取标本,观测Tenascin-C蛋白mRNA水平在膀胱不同组织中的表达情况,对Tenascin-C的表达作半定量测算,并与传统的膀胱肿瘤的病理学分级作相关的统计学分析。结果膀胱移行细胞癌及癌旁组织Tenascin-C的表达显著上调(P>0.05),两者没有统计学上的差异,而正常的膀胱粘膜几乎是不表达或仅有少量表达。TN-C的表达与膀胱癌的病理分级(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)密切相关(r=0.848,P=0.00<0.01)。随着级别的增高,TN-C的表达显著上调。结论在膀胱移行细胞癌早期诊断中,Tenascin-C是一个极有临床意义的指标,尤其是随着经尿道膀胱肿瘤切除(TURBT)术的广泛使用,Tenascin-C在该肿瘤复发的早期诊断中非常敏感,一定程度上反映细胞分化,帮助我们判断预后,同时也是选择最佳的治疗方案的一个重要参数。

Tenascin在胶质瘤侵袭中的表达及与预后的关系

目的探讨胶质瘤侵袭性生长Tenascin的表达,评估Tenascin及微血管形成密度(microvesseldensity)MVD与胶质瘤预后的相关性。方法应用免疫组织化学方法对35例不同病理级别人脑胶质瘤组织中tenascin及CD34表达进行观察,并对患者进行术后随访观察。结果不同病理级别的胶质瘤胞浆内Tenascin表达程度和MVD差异明显,Tenascin表达和MVD有相关性(P<0.01)。Kaplan-Meier生存曲线表明,Tenascin表达及MVD与胶质瘤的预后有关。结论Tenascin在胶质瘤侵袭性生长、转移等方面是至关重要的,Tenascin和MVD促进胶质瘤侵袭性生长并对判断患者预后有重要参考价值。

Tenascin与肾脏疾病

Tenascin(TN)是重要的细胞外基质(ECM)成分之一。在胚胎上皮器官的发生发育、肿瘤发生以及伤口愈合中发挥着非常重要的作用。本文就TN命名、分类、分子结构、功能以及其在肾脏发生发育和肾脏疾病时的表达和分布进行综述。

小鼠皮肤切创后不同时间的Tenascin免疫组化染色变化

目的 探讨小鼠皮肤切创愈合过程中Tenascin表达变化及其与损伤时间的关系。方法制作小鼠背部全层皮肤切创模型，于伤后1、3、6、12h，1、3、6、9、12d分别观察切创周围皮肤、创缘皮肤及创腔肉芽组织的Tenascin免疫组化染色反应，并用图像分析技术检测Tenascin阳性染色的平均光密度，所得数据用SPSSforWindows10．0软件包进行统计学分析。对照用无切创皮肤。结果对照组仅见真皮乳头、毛囊免疫组化染色弱阳性反应；伤后3h在切创周围的真皮乳头及毛囊Tenascin阳性染色增加；伤后12h明显增强，1～3d达最大值（0．336±0．061；0．282±0．017）；伤后6d染色强度开始减弱，9～12d基本恢复正常。创缘皮肤及创腔肉芽组织伤后3～6h开始出现Tenascin阳性着色，12h明显增强，6d达最大值（0．410±0．051；0．460±0．027）；伤后9d阳性着色开始减弱，12d基本恢复正常。结论小鼠皮肤切创愈合过程中产生的Tenascin随损伤时间呈现一定的规律性变化。

Tenascin-r基因在斑马鱼胚胎发育中时空表达规律

Tenascin-r(TNR)是一种脊椎动物细胞外基质糖蛋白,在不同的物种间具有高度保守性,主要表达于神经系统,通过调节基质粘附状态和基质间相互作用而促进细胞的迁移、增殖和分化。在小鼠等动物模型中,TNR在中枢神经系统的发育中起重要作用,能控制大脑活动、调节适应性行为。而在斑马鱼研究中,TNR仅在视神经的发育和修复中起作用,通过对TNR在斑马鱼胚胎发育时期时空表达规律的研究,可以为利用斑马鱼进一步研究TNR的功能建立一个平台。

Tenascin在人原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的研究Tenascin(TN)在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达,探讨TN与HCC浸润和转移的关系。方法分别采用免疫组织化学SP法和逆转录聚合酶链反应(RTPCR)方法检测42例HCC、10例肝硬化和7例正常肝组织内TN的表达情况,并结合临床病理指标进行分析。结果TN在HCC、肝硬化和正常肝脏组织中的阳性例数分别为26、2和0例,其差异具有显著性意义(P<0.05);HCC组织内TNmRNA的表达强度明显高于肝硬化组织(t=2.793,P<0.05);TN在有包膜侵犯组、病理分级Ⅲ～Ⅳ组及有转移HCC中的阳性表达率及强度明显高于无包膜侵犯组(P<0.05)、病理分级Ⅰ～Ⅱ级组(P<0.05)以及无转移组(P<0.01)。结论TN在HCC组织中的表达上调与HCC的浸润和转移有关,检测其表达有助于判断肝癌的恶性程度和转移性。