Screening of Extraction Methods for Glycoproteins from Jellyfish (Rhopilema esculentum) Oral-Arms by High Performance Liquid Chromatography

In order to select an optimum extraction method for the target glycoprotein (TGP) from jellyfish (Rhopilema esculentum) oralarms, a high performance liquid chromatography (HPLC)–assay for the determination of the TGP was developed. Purified target glycoprotein was taken as a standard glycoprotein. The results showed that the calibration curves for peak area plotted against concentration for TGP were linear (r = 0.9984, y = 4.5895x+47.601) over concentrations ranging from 50 to 400 mgL-1. The mean extraction recovery was 97.84% (CV2.60%). The fractions containing TGP were isolated from jellyfish (R. esculentum) oral-arms by four extraction methods: 1) water extraction (WE), 2) phosphate buffer solution (PBS) extraction (PE), 3) ultrasound-assisted water extraction (UA-WE), 4) ultrasound-assisted PBS extraction (UA-PE). The lyophilized extract was dissolved in Milli-Q water and analyzed directly on a short TSK-GEL G4000PWXL (7.8 mm×300 mm) column. Our results indicated that the UA-PE method was the optimum extraction method selected by HPLC.

酶-超声波辅助提取海蜇胶原蛋白及其组成分析

为确定酶-超声波辅助提取海蜇胶原蛋白的最佳工艺,采用单因素实验和响应面实验对工艺进行优化,考察胃蛋白酶添加量、提取时间、超声时间、超声功率对海蜇胶原蛋白得率的影响,并对胶原蛋白的氨基酸组成和结构进行分析。结果表明,酶-超声波辅助提取海蜇胶原蛋白的最佳条件为胃蛋白酶添加量1%、提取时间48 h、超声时间32 min、超声功率318 W,此时海蜇胶原蛋白得率为38.03%。甘氨酸是海蜇胶原蛋白中的主要氨基酸,为24.96%,海蜇胶原蛋白的紫外吸收峰位于235 nm处。在酰胺A、B带以及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ带中,有海蜇胶原蛋白的典型红外光谱特征吸收峰。该研究为海蜇深加工提供了理论基础。

水母胶原蛋白促进创伤修复的研究进展

胶原蛋白具有良好的组织相容、生物降解安全、凝血性等生物学活性,且低毒、抗原性弱,能诱导细胞生长、促进创伤修复。目前,应用最广的胶原蛋白敷料主要来自陆生哺乳动物,但存在动物传染病传播的风险,宗教信仰和地方习俗的限制。水母体内有丰富的胶原蛋白,且来源充足、产量高,与传统哺乳动物Ⅰ型胶原蛋白有着相似的生物学性能,可作为良好的胶原蛋白敷料来源。本文介绍了水母胶原蛋白的提取、交联改性,以及其在创伤修复方面的研究进展,包括其止血性能、皮肤修复、骨软骨修复、口服促愈合作用及其抵御微生物感染等功能,为其以后在创伤修复领域的研究提供参考。

超声提取-电感耦合等离子体质谱法快速测定海蜇制品中铝的残留量

提出了超声提取-电感耦合等离子体质谱法快速测定海蜇制品中铝残留量的方法。取约0.5 g粉碎后的样品,加入1.0%(体积分数)硝酸溶液50.0 mL,涡旋振荡1 min,于25℃超声10 min(超声功率为400 W),离心5 min,取上清液待测。结果表明:以45Sc为内标,27Al质量浓度在0.1~10.0 mg·L^(-1)内与响应强度比值呈线性关系,检出限为0.1 mg·kg^(-1);海蜇样品中铝测定值的相对标准偏差(n=6)为2.9%,5个加标浓度水平下铝的回收率为95.3%~99.9%;与标准方法进行比较,各类海蜇制品中铝的测定值无显著性差异(P>0.05)。

不同方法提取沙海蜇皮胶原蛋白的对比分析

以沙海蜇皮为实验原料,分别用胃蛋白酶提取法、热水提取法和酸提取法进行了胶原蛋白的提取,得到酶溶性胶原蛋白(PSC)、热水抽提胶原蛋白(HEG)和酸溶性胶原蛋白(ASC),并分析了三种胶原蛋白的理化性质及功能特性。结果表明:PSC、HEG和ASC中羟脯氨酸含量分别为5.77%,5.53%和9.20%;平均分子量分别为34、52、38ku。紫外图谱扫描和红外扫描光谱表明,三种方法提取的胶原蛋白结构相似,但略有差别。PSC、HEG、ASC乳化指数依次为:5.07、25.90、3.26m2/g;稳定性依次为:24.68、21.89、88.5min。吸湿性和保湿性最好的样品均为PSC。

海蜇头糖蛋白超声辅助提取工艺研究

为提高海蜇头糖蛋白提取效果,采用超声辅助提取工艺,在单因素试验的基础上,采用超声处理时间、超声功率和提取时间三因素三水平响应面分析试验以优化此工艺条件。结果表明:海蜇头目标糖蛋白超声辅助提取的最佳工艺条件为超声处理时间15 min,超声功率300 W,提取时间60 min;在此工艺条件下,糖蛋白实际得率为9.14%,与模型预测值之间具有较好的拟合性。在3个因素中,超声处理时间,超声功率对糖蛋白得率的影响极显著,提取时间影响不显著,且相互之间无交互效应。

高压辅助提取海蜇胶原蛋白的工艺

研究了高压辅助提取海蜇胶原蛋白的工艺条件。以胶原蛋白得率为指标,优化的工艺条件为:料液比(g∶mL)1∶4,高压功率250MPa,高压处理时间10min,热水处理温度70℃,热水提取时间1.5h。此条件下,海蜇胶原蛋白的得率为68.2%。此生产工艺操作简单,生产周期短,产品质量好和生产环保等优点。

发形霞水母毒素分离产物溶血活性的比较及其影响因素分析

目的:分离发形霞水母刺丝囊毒素(nematocyst venom,NV)与无刺丝囊触手提取物(tentacle-only extract,TOE),比较二者的溶血活性,分析其影响因素。方法:采用自溶、离心方法分离发形霞水母NV和TOE,比较二者的溶血活性,观察提取物浓度、温度和pH值等因素对二者溶血活性的影响。结果:成功分离到NV与TOE;二者浓度相关溶血活性曲线均呈"S"形,溶血分数50%时所对应的质量浓度(HU50)分别为8μg/ml和67μg/ml,前者溶血活性强度约为后者的8.4倍;温度对二者溶血活性影响较大,最大溶血活性都出现在40℃;pH值对二者溶血活性也有影响,在pH8处二者都具有最大的溶血活性,但后者较前者更为敏感。结论:发形霞水母毒素分离产物NV和TOE均具有溶血活性,且前者强于后者;二者溶血活性受浓度、温度和pH值的影响。

水母毒素的分离提取及溶血活性研究

目的研究水母毒素的提取及其溶血活性的影响因素。方法通过缓冲溶液浸取、超声波细胞破碎等操作从水母触手的刺丝囊中提取毒素,采用分光光度法对水母毒素的溶血活性进行测定,并研究了温度、浓度和二价金属离子等因素对毒素溶血活性的影响。结果水母毒素的溶血活性对温度敏感,随着浓度的提高而增大,并且依赖于Ca2+,Mg2+等二价金属离子的存在。结论水母毒素具有较强的溶血活性,但不稳定。

发形霞水母触手提取物活性的初步研究

目的初步分离发形霞水母触手提取物并探讨其生物学活性。方法采用自溶、离心的方法去除发形霞水母触手刺丝囊并获取触手提取物,通过阶段梯度阳离子交换色谱,应用0%,20%,40%,100%B液4种比例洗脱液将触手提取物分成4个组分,分别观察分离各组分的溶血、心血管等活性,并与触手提取物平行对比分析。结果成功分离到具有溶血、心血管活性的发形霞水母触手提取物,4个洗脱组分中,0%B液组分无上述3种活性,20%B液组分具有溶血活性、40%B液组分具有心血管活性,而100%B液组分则含有色素。结论通过阳离子交换色谱,初步将发形霞水母触手提取物中具有溶血活性、心血管活性以及色素等组分分离开来,为后续进一步纯化其单一活性组分打下基础。

水母毒素的提取工艺分析

通过缓冲溶液浸取、超声波细胞破碎等操作从水母触手的刺丝囊中提取毒素,研究了浸取剂、破碎功率和破碎时间等因素对收率的影响。在使用新型酶抑制剂1-[二(3-氨基丙基)氨基]-乙醇、超声波破碎功率200 W、总工作时间2 min、工作/间隙时间为15/30 s的实验条件下,提取收率最高。

不同阳离子对Cyanea capillata水母触手提取物溶血活性的影响(英文)

目的探讨血浆对Cyanea capillata水母触手提取物(TOE)溶血活性的影响和孔道形成在其溶血机制中的作用。方法在具有相同红细胞浓度的1%稀释的全血和0.5%红细胞悬液中,检测不同浓度(100、200、400μg/ml)的TOE产生的溶血效应,并在两套体系中分别加入20、50或100 mmol/L的K+、Ca2+、Mg2+、Mn2+、Zn2+、Cu2+、Fe2+、La3+、NH4+等阳离子和离子螯合剂EDTA,观察其对TOE溶血活性的影响。结果在两套溶血检测体系中,TOE均呈现出剂量依赖性的溶血效应,TOE为200μg/ml时在红细胞悬液产生的溶血强度高于稀释的全血;Mn2+、Zn2+、La3+、Cu2+、Fe2+和EDTA均明显降低TOE溶血活性(P<0.05),其中以Zn2+的抑制作用最强,而K+、Ca2+、Mg2+、NH4+可不同程度地增强其溶血活性(P<0.05)。结论血浆对TOE的溶血作用有一定的保护作用,而孔道形成可能在TOE的溶血机制中具有重要作用。

海蜇胶原蛋白优化提取条件的研究

分别采用酸法和酶法从海蜇提取胶原蛋白,考察了酸的种类、酶浓度、料液比和提取时间等因素对胶原蛋白提取率的影响,获得了相应的优化提取条件。研究结果表明:酸法提取的优化条件是用盐酸提取、料液比1:2.0、提取时间84h;酶法提取的优化条件为酶含量3.0%、料液比1:2.0、提取时间48h;酶法提取相对于酸法提取可获得较高含量的胶原蛋白。

海蜇胶原蛋白的提取及纯化(英文)

通过胃蛋白酶的限制性酶切、选择性盐析及阳离子交换柱的层析作用,低温从海蜇中胶层提取可得到胃蛋白酶促溶且去除端肽(telopeptide)的胶原蛋白(PSC)。紫外-可见扫描测得PSC的最大吸收峰位于235nm。凝胶电泳及氨基酸分析显示这些都符合Ⅰ型胶原的特征,同水母S.nomurai和Rhopilema asamushi来源的胶原蛋白基本一致,作为一个低等动物,其氨基酸分析显示了脊椎动物和非脊椎动物的微小差异。

水母胶原蛋白的提取及性能研究

目的优化越前水母(Nemopilema nomurai)胶原蛋白提取工艺,并探究其性能。方法利用乙酸和胃蛋白酶提取胶原蛋白,通过盐析和超滤纯化水母胶原蛋白粗提物,并对水母胶原蛋白进行表征和性能分析。结果水母胶原蛋白纯度97%,得率33%(干重);X射线衍射、紫外光谱和傅里叶变换红外光谱检测结果表明,水母胶原蛋白在提取和纯化过程中保持了胶原蛋白三螺旋结构;氨基酸组成和凝胶电泳分析提示,水母胶原蛋白符合Ⅰ型胶原蛋白特征。溶解度实验表明,水母胶原蛋白在pH 3~5,NaCl浓度小于0.9 mol/L的条件下都具有良好的溶解性。结论所得水母胶原蛋白与牛Ⅰ型胶原蛋白特征相似,有望成为新的胶原蛋白资源。

水母生物毒素提取纯化及其生物活性研究进展

从生物毒素的提取制备、分离纯化和生物活性等方面,对国内外水母生物毒素的研究进展进行了综述,并对今后的研究重点进行了总结与展望。