非洲山毛豆种子的物理特征、成分分析与油脂组成的研究

以非洲山毛豆Tephrosia vogeliiHook f.种子为材料,分析其部分物理特征和常量化学成分,并通过气相色谱-质谱(GC-MS)和液相色谱-电喷雾离子源-离子阱质谱技术(LC-MSD-Trap-XCT)测定其油脂的脂肪酸与甘油酯组成,并对油脂进行营养评价。实验结果:种子的长、宽、厚分别为4.63、4.01、1.92 mm,千粒质量为21.52 g,密度为659.8 g/L,自流角为25.89°,静止角为23.15°。各组成的质量分数为:水分及挥发物9.89%,粗脂肪13.33%,粗蛋白38.73%,碳水化合物33.21%(可溶性糖10.54%,淀粉10.76%,粗纤维11.91%),灰分4.84%。山毛豆种子油脂的酸价为2.7 mg/g,过氧化值为1.17 mmol/kg,皂化价为188 mg/g,碘价为每100 g样品吸收I2量为118 g,密度为859.9 g/L,折光系数为1.464 8。油脂各组成的体积分数为:十四酸0.15%,十五酸0.031%,十六酸(棕榈酸)18.68%,十六碳一烯酸0.023%,十七酸0.12%,十八酸(硬脂酸)6.46%,油酸19.26%,亚油酸38.76%,亚麻酸8.38%,二十酸1.90%,二十碳一烯酸0.52%,二十一酸0.12%,二十二酸4.09%,二十三酸0.16%,二十四酸1.35%。不饱和脂肪酸含量66.94%。干燥后的油脂含有各组成的质量分数为:脂肪酸单甘油酯0.132%,脂肪酸双甘油酯0.180%,脂肪酸三甘油酯99.687%。山毛豆种子的脂肪和蛋白质的质量分数较高,其油脂的各项指标均符合中国和其他国家食用大豆油标准(GB/T1535-2003;Codex-Stan 210),且富含人体必需的亚油酸和亚麻酸。

山毛豆油磷酸辅助脱胶工艺条件优化

目的:研究酸种类、酸添加量、加水量、脱胶温度、搅拌时间对山毛豆毛油脱胶率的影响。方法:在单因素试验基础上,利用响应面分析法对山毛豆毛油脱胶工艺进行优化。结果:得到山毛豆酸辅助脱胶最佳工艺条件为磷酸添加量2.47g/kg、加水量4.1%、脱胶温度62℃、搅拌时间45min。该条件下山毛豆毛油脱胶率为92.48%,与模型预测值91.5256%接近,脱胶山毛豆油中磷脂含量为0.095%。结论:磷酸辅助脱胶技术可对山毛豆毛油中的磷脂进行有效脱除。

紫外分光光度法测定非洲山毛豆总黄酮含量及方法评价

非洲山毛豆种子乙醇提取物与Mg-HCl、AlCl3的显色反应,以及提取物的紫外吸收光谱特征,证实非洲山毛豆种子中存在黄酮类化合物。根据提取物在λmax273nm的吸光度,利用紫外分光光度法测定样品的黄酮含量。结果表明：该方法测定出非洲山毛豆种子的黄酮质量比为7.777 mg/g,山毛豆油脂的黄酮质量浓度为17.172 mg/mL,山毛豆提取油脂后残余物的黄酮质量比为6.426 mg/g,加标回收率为99.7%-100.1%,相对标准偏差为0.31%-1.24%。此法简单、快捷、线性范围宽、准确,可以用于测定山毛豆总黄酮的含量。

非洲山毛豆种子蛋白质组分分析

以山毛豆种子为原料,对其蛋白质进行分级分离,测定了各组分蛋白含量、等电点和溶解度。结果表明,脱脂山毛豆粉的总蛋白含量为47.11%(m/m)。其中,清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白的相对百分含量分别为64.04%、8.83%、11.06%和14.50%,另外含有1.57%难溶的复合蛋白。清蛋白、球蛋白和醇溶蛋白的等电点为pH4.3、pH5.1和pH4.7,谷蛋白的等电点为3.5～3.8。它们在等电点附近溶解度较小,偏离等电点之后即pH>5或pH<4清蛋白和球蛋白的溶解度增大,而醇溶蛋白和谷蛋白的溶解度增加较小。SDS-PAGE电泳表明,非洲山毛豆种子总蛋白的相对分子量差异较大,在20.1～97.2kDa及小于20.1kDa的均有分布,但其谱带分布不明显。清蛋白谱带变化范围为主要有6条,变化区域集中在20.1～66.4kDa及小于20.1kDa的范围。球蛋白在20.1～66.4kDa大约出现了10条谱带。醇溶蛋白在20.1、29.0、44.3kDa分别有3条明显的谱带。谷蛋白在20.1～97.2kDa大约有10条以上的谱带,说明非洲山毛豆种子总蛋白及各组分蛋白均有不同的分子组成。

非洲山毛豆蛋白质组成及其功能特性研究

以山毛豆种子为原料,研究其蛋白质组成及其功能特性。结果表明,脱脂山毛豆粉的总蛋白质量分数为47.11%,其中清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白的质量分数分别为64.04%、8.83%、11.06%和14.50%,另有1.57%的难溶复合蛋白。清蛋白和谷蛋白在pH4和球蛋白和醇溶蛋白在pH5溶解性、起泡性、乳化性均差,而泡沫稳定性和乳化稳定性较好。各蛋白组分的持水持油性均较好。在>pH5或<pH4的条件下,清蛋白和球蛋白的溶解性、起泡性和乳化性较好,其余蛋白组分相对较差。与大豆蛋白相比,山毛豆主要蛋白清蛋白有较好的溶解度、持水持油性、起泡性、泡沫稳定性、乳化性及乳化稳定性。

非洲山毛豆油酸法与酶法脱胶工艺优化

以非洲山毛豆毛油为试验材料,研究了酸法脱胶与酶法脱胶工艺参数对其脱胶效果的影响。在单因素试验基础上,通过正交试验得出柠檬酸辅助脱胶的最佳条件为:柠檬酸添加量3.0 g/kg,脱胶温度70℃,加水量4.5%,脱胶时间30 m in。该条件下磷脂脱除率达93.95%,脱胶油的磷含量为28.91 mg/kg。利用均匀设计法确定了磷脂酶脱胶的最佳工艺参数为:脱胶时间5.5 h,酶添加量0.60 IU/g,脱胶温度57℃,加水量3.7%,pH 4.7。在此条件下脱胶油的磷含量为9.853 6mg/kg。试验证明,采用酶法可有效去除非水化磷脂,达到更好的脱胶效果。

响应面优化超声波提取山毛豆抑菌物质条件研究

考察料液比、提取时间、提取溶剂对超声波法提取山毛豆种子中抑菌物质的影响。在单因素试验基础上,利用响应面分析法对山毛豆抑菌物质的提取工艺进行优化。结果得到山毛豆抑菌活性物质的最佳提取工艺条件为液料比12:1(mL/g)、乙醇体积分数55%、超声波提取52min。该条件下质量分数为20%的山毛豆提取液对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为20.24mm,与理论最优值20.70mm接近。

响应面法优化山毛豆抑菌物质提取条件的研究

以山毛豆种子为试验材料,对水浴浸提法提取山毛豆种子中抑菌物质的工艺进行研究,研究温度、提取时间、提取溶剂、提取pH对山毛豆种子中抑菌物质提取效果的影响。在单因素试验基础上,利用响应面分析法(RSM)优化山毛豆抑菌物质的提取条件。得到山毛豆抑菌活性物质的最佳提取工艺条件为:温度64℃,提取时间11 h、体积分数52%乙醇为溶剂,溶剂pH 6。该条件下体积分数为20%的山毛豆提取液对3种供试菌的抑菌圈直径均值为18.34 mm,与理论最优值18.42 mm接近。

非洲山毛豆种子提取物对病原菌的抑制作用研究

以非洲山毛豆种子为研究对象,分别以水、乙醇水溶液为溶剂,从山毛豆中提取活性成分,用管碟法探讨了其对六种供试菌的抑菌作用。实验结果表明,山毛豆水提物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌的MIC均为50%;当提取剂为30%乙醇,山毛豆提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的MIC为25%,对沙门氏菌的MIC为50%。其水提物、醇/水提取物对黑曲霉、荔枝炭疽、尖孢镰刀菌的抑制作用不明显,对供试细菌在高浓度下呈现较好的抑菌效果。另外,山毛豆抑菌活性成分抑菌pH范围广而且热稳定性强。

植物离体培养物中鱼藤酮的分离与HPLC测定

毛鱼藤（Ｄｅｒｒｉｓ ｅｌｌｉｐｔｉｃａ（Ｒｏｘｂ．） Ｂｅｎｔｈ．）和西非灰毛豆（Ｔｅｐｈｒｏｓｉａ ｖｏｇｅｌｉｉ Ｈｏｏｋ．ｆ．）离体培养物经９：１ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ溶剂提取，Ｃ－１８柱层析分离后，在室温条件下以６６：３４ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ或４２：５８ ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ为流动相，对样品进行反相柱ＨＰＬＣ分析。结果表明，毛鱼藤和西非灰毛豆的愈伤组织均能合成鱼藤酮，但含量相当低，分别为 １７．４ ｕｇ／ｇ，１．８ ｕｇ／ｇ干重。经诱导生根分化的毛鱼藤愈伤组织鱼藤酮含量达１３６．２ ｕｇ／ｇ干重，为愈伤组织含量的７．８倍。西非灰毛豆悬浮培养物的鱼藤酮含量虽比愈伤组织有很大提高，但还不及毛鱼藤愈伤组织含量。结果表明，植物的基因类型在次生代谢上起重要作用，同时离体组织或细胞的分化有助于鱼藤酮的生物合成。

非洲山毛豆种子提取物清除自由基活性的研究

应用DPPH法、结晶紫法、邻苯三酚自氧化法,分别测定以无水乙醇和无水乙醚为溶剂的山毛豆种子提取物清除1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)、羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O2-·)的能力,及抑制脂质过氧化反应的能力。结果表明:在试验条件下,山毛豆乙醇提取物对DPPH·、·OH、O2-·、脂质过氧化体系清除活性最高分别为94.73%、96.43%、5.17%、60.28%;乙醚提取物(油脂)的清除率分别为88.54%、82.04%、19.63%、37.19%。因此,山毛豆的乙醇和乙醚提取物具有比较好的清除自由基能力,两者相比较,乙醇提取物清除自由基的能力强于乙醚提取物。

非洲山毛豆种子物理特征与常量化学成分分析

以野生非洲山毛豆种子为材料,对其种子的部分物理特征和常量化学成分进行了研究.结果表明,种子的长、宽、厚分别为4.63 mm、4.01 mm、1.92 mm,千粒重21.52 g,容重659.8 g/L,自流角25.89°,静止角23.15°.常量化学成分:ω(水分及挥发物)=9.89%,ω(粗脂肪)=13.47%,ω(粗蛋白)=38.73%,ω(总糖)=21.35%,ω(灰分)=4.84%,ω(淀粉)=10.76%,ω(粗纤维)=11.91%.山毛豆种子油脂油脂酸价2.7 mg/g,过氧化值1.17 mmol/kg,皂化价188 mg/g,碘价118 g/100 g,密度0.859 9 g/mL,折光系数1.464 8.山毛豆种子是一种脂肪和蛋白质含量较高的豆类种子.

非洲山毛豆中鱼藤酮含量的季节变化与分析

用索氏提取法和高效液相色谱仪测定了从菲律宾和坦桑尼亚引种的非洲山毛豆紫花和白花品种叶片中的鱼藤酮含量在不同生长季节的变化情况。结果表明,非洲山毛豆中鱼藤酮的含量随着季节的变化而变化。其中,紫花品种叶片干粉中鱼藤酮含量在8月份和11月份最高,为0.46%;5月份最低,为0.14%。白花品种叶片干粉中鱼藤酮含量在10月份最高,为0.31%;6月份的含量很低,只有0.08%,而在4月份和5月份,白花品种叶片提取物中检测不到鱼藤酮。另外,比较了不同地区种植的非洲山毛豆品种中的鱼藤酮含量。

非洲山毛豆中鱼藤酮CO2超临界流体的萃取效果

在不同压力（22MPa、24MPa、26MPa、28MPa）和不同温度（30℃、45℃、60℃）条件下，用CO2超临界流体对非洲山毛豆进行萃取。结果表明：提取物中鱼藤酮的含量最高是在30℃和24MPa的条件下为7.41％；每克干粉中提取出来的鱼藤酮质量最高的是在60℃和22MPa的条件下，为4．49mg。加入夹带剂后，提取物中鱼藤酮含量和每克干粉中提取出来的鱼藤酮质量最高的均在60℃和22MPa时，加入10％（V／M）乙酸乙酯作夹带剂，结果分别为7．96％和5．99mg。

非洲山毛豆叶片蛋白组双向电泳样品制备方法的建立

以非洲山毛豆叶片为材料,对非洲山毛豆总蛋白质3种提取方法（TCA/丙酮沉淀法、尿素/硫脲法和酚-甲醇/醋酸铵沉淀法）以及3种蛋白裂解液进行比较分析。结果表明,采用酚-甲醇/醋酸铵沉淀法提取非洲山毛豆叶片总蛋白,用蛋白裂解液（7mol/L尿素,2mol/L硫脲,4%CHAPS,40mmol/LTris-base,1%Bio-LytepH3.5-10,65mmol/LDTT）裂解蛋白1h,2-DE图谱分离到的蛋白点效果最好。此方法适合于色素、多酚及黄酮类次生代谢物含量较多的非洲山毛豆叶片总蛋白制备方法。

非洲山毛豆种子中鱼藤酮类化合物的含量测定

分别采用高效液相法和紫外分光光度法测定山毛豆种子中鱼藤酮及其类似物的含量。两种试验方法均以鱼藤酮为对照品。用紫外分光光度法在其最大吸收波长294nm处进行测定。高效液相色谱法以zorbax eclipse plus C18 (4.6mm×250mm,5μm)为色谱柱,流动相为V(甲醇):V(水)=69:31,柱温25℃,流速0.8mL/min,进样量10μL,检测波长294nm。试验结果表明,紫外分光光度法测定鱼藤酮类物质含量为24.29mg/g,高效液相色谱法测定鱼藤酮含量为1.49mg/g。方法学考察显示,UV法具有方法简便、快速、准确、经济等特点,是一种检测非洲山毛豆种子鱼藤酮类物质含量的较好手段。HPLC法操作相对复杂,但专属性强,重现性好,回收率高,是一种测定鱼藤酮有效含量的方法。

非洲山毛豆油抗氧化稳定性研究

采用Schaal烘箱法,以过氧化值(POV)为指标,研究不同抗氧化剂种类以及质量对山毛豆油抗氧化稳定性的影响。结果表明,TBHQ对山毛豆油具有良好的抗氧化效果,柠檬酸、抗坏血酸、植酸对TBHQ和BHT复合而成的抗氧化剂表现出较强的抗氧化协同增效作用,协同作用强弱依次为Vc>植酸>柠檬酸;添加0.0150%TBHQ+0.005%BHT+0.01%Vc复配而成的抗氧化剂,可使山毛豆油在20℃条件下的预期贮藏时间从不到4个月延长至13个月。